林艳芬；刘荣静；林梅双；朱锦宏；吴晓蔓
目的 采用德尔菲专家咨询法,确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,为下一步防控工作提供参考依据.方法 通过Delphi专家访谈法、小组讨论等方法对人感染H7N9禽流感监测预警指标体系进行筛选,终确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结果 本研究共进行两轮德尔菲问卷调查,第1轮专家咨询共发放问卷36份,有效回收33份,专家积极性系数为91.67％.第2轮共发放问卷33份,专家积极性系数为87.88％.专家对一级指标的判断依据基本在0.7以上,熟悉程度全部在0.7以上,权威程度较高.经过两轮咨询,肯德尔和谐系数的显著水平均小于0.05,提示专家对指标意见协调程度尚可.终建立39个三级指标的人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结论 人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,可以作为人感染H7N9禽流感监测预警的基本指标,评分靠前的指标需要在今后的防控工作中进一步强化和调整.
作者：王金龙；黄静；巫小佳；凌文华 刊期： 2014年第08期
目的 了解部队老年住院患者的营养状况及营养支持现状.方法 选择部队老年住院患者203例,采用简易营养评价精法(MNA-SF)对其进行营养状况评价及营养风险筛查,并调查其营养支持情况.结果 203例老年住院患者中,营养不良总发生率较低为29.56％(60/203),营养风险的发生率为39.90％(81/203),高年龄组营养不良的发生率高于低年龄组,差异有统计学意义(P＜0.05).总营养支持率为38.92％,营养状况良好组的营养支持率为19.36％.结论 MNA-SF适合老年住院患者的营养状况评价,营养不良及营养风险的发生随着年龄的增加而增加,部队老年住院患者存在营养支持不合理.
作者：张艳；陈怡；黄蕾；时皎皎 刊期： 2014年第08期
目的 利用ROC曲线评价血清半乳甘露聚糖(GM)抗原检测试验对侵袭性曲霉菌病(IA)早期感染的诊断价值,并提供合理的阳性界值.方法 根据诊断标准回顾性地将576例患者分为IA非感染组和IA感染组,其中IA感染组又分为确诊、临床诊断、拟诊、确诊+临床诊断、确诊+临床诊断+拟诊5组,分别作ROC曲线,分析各组的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、ROC曲线下面积,确定阳性界值.结果 576例患者中IA非感染组336例,IA感染组240例,包括确诊4例、临床诊断30例、拟诊206例.确诊组、临床诊断组、拟诊组、确诊+临床诊断组、确诊+临床诊断+拟诊组ROC曲线下面积分别为0.966、0.797、0.757、0.817、0.765,阳性界值分别为0.9、0.5、0.6、0.5、0.6,NPV分别为100.0％、98.6％、79.3％、98.6％、77.5％,PPV分别为9.3％、18.0％、60.1％、20.1％、64.2％.结论 血清GM抗原检测试验对IA具有早期诊断价值,合理运用不同的GM阳性界值有助于临床IA分型诊断.
作者：张凤川；黎结霞；王露霞；石凌波；成德 刊期： 2014年第08期
肿瘤坏死因子α(TNF-α)是一个重要的抗感染和免疫调节因子,通过与其受体TNFR1和TNFR2结合激活下游信号通路,发挥调节免疫,促进凋亡和诱导坏死等效应.寄生虫感染中,促炎因子TNF-α参与了宿主对寄生虫免疫应答的重要调节作用:一方面发挥抗虫杀虫效应,另一方面介导宿主的病理进程.本文就TNF-α在利什曼原虫、锥虫、弓形虫、疟原虫、血吸虫等寄生性原虫和蠕虫感染中的作用进行综述.
作者：杨帆；龙尔平；姬鹏宇 刊期： 2014年第08期
目的 克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础.方法 利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测.从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测.结果 华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1～17位氨基酸为其信号肽序列,第51～74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶.重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中.酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性.抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性.结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性.
作者：李婷；杨梅；陈金桃；宋天章；余新炳；陈红武；胡旭初 刊期： 2014年第08期
目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利对新方法诱导小鼠心肌梗死4周后Th1/Th2、Treg/Th17的平衡影响.方法 37只雄性C57BL/6小鼠用新方法结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型(n=32),假手术组(n=5)不进行后的冠状动脉结扎.术后将模型组存活小鼠(n=25)随机分为依那普利干预组(n=12)和心肌梗死组(n=13),依那普利干预组每日给予依那普利7.5 mg/kg灌胃,心肌梗死组和假手术组给予生理盐水灌胃.给药28 d后检查各组小鼠心脏彩超,称量小鼠心脏重量和体重,心脏采血并提取外周血淋巴细胞,采用流式细胞术检测外周血Th1和Th2、Treg和Th17细胞比率.结果 依那普利干预组小鼠心脏质量/体质量比、左室舒张末内径(LVEDd)、左室收缩末内径(LVESd)均小于心肌梗死组,且均大于假手术组(P＜0.05);左室短轴缩短分数(LVFS)、左室射血分数(LVEF)高于心肌梗死组,且小于假手术组(P＜0.05).依那普利干预组小鼠外周血Th1、Th17细胞比率明显低于心肌梗死组,高于假手术组(P＜0.05);而Th2、Treg细胞比率高于心肌梗死组,低于假手术组(P＜0.05).结论 小鼠心肌梗死4周后外周血有Th1/Th2、Treg/Th17的失衡,依那普利可以调节Th1/Th2、Treg/Th17平衡,这可能与其抑制心梗后小鼠心室重构有关.
作者：付珊珊；陈琳琳；傅强；李志樑 刊期： 2014年第08期
目的 探讨原因不明性复发性流产患者给予孕激素治疗、主动免疫治疗及被动免疫治疗等综合治疗后的妊娠结局.方法 回顾性分析102例原因不明性复发性流产病例,其中综合治疗组(观察组)52例,孕激素治疗组(对照组)50例.综合治疗组孕前及孕早期给予丈夫淋巴细胞免疫治疗,孕早期给予孕激素及免疫球蛋白治疗;孕激素治疗组孕早期仅给予孕激素.追踪两组患者的妊娠结局.结果 给予综合治疗患者妊娠成功率达96.2％(50/52),单纯补充孕激素的患者妊娠成功率为40.0％(20/50),两者差异有统计学意义(x2=6.37,P=0.012).观察组妊娠期糖尿病的发生率为16.0％(8/50),对照组为25.0％(5/20),差异无统计学意义(P=0.518).观察组分娩后新生儿Apgar评分＞7分的发生率为98.0％(49/50),对照组为95.0％(19/20),差异无统计学意义(P=0.915).新生儿男女比例观察组为1.27∶1,对照组为1.22∶1,差异无统计学意义(P=0.857).结论 给予孕激素、主动免疫治疗及被动免疫治疗等综合治疗方法对于URSA患者是安全、有效的.
作者：董涛威；肖青；钟卓慧 刊期： 2014年第08期
目的 建立一种快速、简便的检测弓形虫感染的环介导等温扩增方法(LAMP).方法 根据弓形虫RH株SAGI基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化扩增体系与参数.通过与常规PCR方法的比较,评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性.利用建立的LAMP初步检测人工感染弓形虫4d后白兔与大鼠的肌肉组织.结果 LAMP法检测弓形虫基因组DNA的灵敏度是传统PCR方法的100倍.LAMP法检测与其他常见寄生原虫、寄生虫无非特异性阳性结果.LAMP法检测人工接种动物的肌肉组织,阳性率达到100％,对照组为0,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 LAMP法检测弓形虫感染快速简便、敏感性高、设备要求低,具有较好的应用前景.
作者：赖植发；黄慧萍；顾金保；司徒潮满；陈润莉；钟剑明；陈晓光；曾胜波 刊期： 2014年第08期
目的 探讨一种基于免疫层析法和荧光PCR DNA定性检测技术的肺结核多重诊断模式.方法 以208例疑似结核患者为研究对象,采用免疫层析法检测其血清特异性抗结核抗体,同时采用荧光PCR方法检测其痰液中结核分枝杆菌DNA,并将两种方法的检测结果进行比较.结果 免疫层析法检测结果显示,16份血清标本呈阳性,阳性率为7.7％;荧光PCR方法检测结果显示,14份痰液标本呈阳性,阳性率为6.7％.两种检测方法协同诊断率为100.0％.结论 结核分枝杆菌免疫层析法和荧光PCR法相结合的实验室诊断模式有助于肺结核的快速诊断和传染风险性评估.
作者：王佃鹏；董瑞玲；武学成；朱玉兰；张艳芳；李智民；惠长野；杨祥丽 刊期： 2014年第08期
目的 观察黄芩苷联合顺铂是否能诱导HepG2.0细胞凋亡及探讨其对凋亡相关蛋白表达的影响.方法 采用体外细胞培养方法,分别用黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂干预HepG2.0细胞.用CCK-8法检测细胞活性;光学显微镜观察HepG2.0细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测HepG2.0细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc表达的影响.结果 光学显微镜下可观察到药物组细胞凋亡的形态改变;各药物组细胞早期凋亡率显著升高;各药物组细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、c-myc和Caspase-3表达升高.结论 黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂均能诱导HepG2.0细胞凋亡,其机制可能通过调控Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc蛋白的表达有关.
作者：林艳芬；刘荣静；林梅双；朱锦宏；吴晓蔓 刊期： 2014年第08期
目的 建立人附睾蛋白4(HE4)杂交瘤细胞株,并对其分泌的HE4单克隆抗体进行鉴定和初步应用,为HE4的功能研究和人源化抗体的制备奠定基础.方法 使用pcDNA3.0-HE4重组质粒免疫BALB/C小鼠,采用PEG融合技术建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体.通过免疫荧光法、有限稀释法及金标斑点法测定单克隆抗体的交叉反应性及免疫球蛋白的类型和亚类.结果 获得2株可稳定分泌HE4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1C5和1C8,均为IgMK类.2株单抗能够与表达HE4蛋白的卵巢癌细胞发生反应,而不与Sp2/0细胞、CHO细胞等发生交叉反应.杂交瘤细胞株1C5培养上清效价为1∶160,腹水效价为1∶1 280,而杂交瘤细胞株1C8培养上清效价为1∶128,腹水效价为1∶1 024.结论 成功地制备出两株抗HE4单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步建立免疫分析方法,进行HE4相关研究奠定了良好的基础.
作者：张娟；唐林国；叶倩；张文茜；徐霖 刊期： 2014年第08期
目的 观察吡格列酮(Pio)对胰岛素抵抗状态KKAy小鼠胰岛素敏感性的影响,并探讨其可能的机制.方法 将16只8周龄的雄性KKAy小鼠随机分成2组:胰岛素抵抗模型组和Pio干预组,每组8只,另以8只同周龄的雄性C57BL/6J小鼠为模型对照组,3组小鼠均饲喂AIN93G饲料,Pio组在饲料中添加Pio,干预12周,测定Pio对小鼠血糖、血清胰岛素水平、葡萄糖耐量、胰岛素耐量等方面的影响,通过ELISA实验测定Pio对小鼠血清脂联素和瘦素水平的影响,通过Real time PCR实验测定Pio对小鼠附睾脂肪组织的脂联素和瘦素mRNA水平的影响,通过Western blot实验测定Pio对小鼠肝脏和附睾脂肪组织中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白、胰岛素受体底物1(IRS1)及蛋白激酶B(PKB/AKT)的磷酸化水平的影响.结果 Pio干预可降低KKAy小鼠血糖、血清胰岛素水平,改善胰岛素耐量和葡萄糖耐量,升高血清脂联素水平,降低瘦素水平,同时增加附睾脂肪组织脂联素的mRNA表达水平.Pio干预可使KKAy小鼠肝脏和附睾脂肪组织中PPARγ蛋白、IRS1和AKT磷酸化水平均升高.结论 Pio可改善KKAy小鼠胰岛素抵抗,增加小鼠胰岛素敏感性,这些作用可能与Pio增加肝脏及附睾脂肪组织的PPARγ蛋白表达,从而激活胰岛素信号转导通路的蛋白有关.
作者：吴锦银；陈思凡；李文学；陈建玲；朱伟；冯翔 刊期： 2014年第08期
目的 构建含有抗原加工递呈分子基因HSP70C的HTNV嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒.方法 通过PCR扩增获得HSP70C基因,分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7及pShuttle-pCAG-GcS0.7中,进而构建新的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7-HSP70C及pShuttle-pCAG-GcS0.7-HSP70C.进一步通过双酶切将转移载体中的目的嵌合基因再分别克隆入腺病毒载体,得到重组腺病毒载体rAd-pCAG-GnS0.7-HSP70C、rAd-pCAG-GcS0.7-HSP70C,使用PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法检测表达产物.结果 经过酶切、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确.免疫荧光实验检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达.结论 成功制备了含抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒,为进一步研究构建的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础.
作者：张亮；程林峰；于澜；刘梓谕；李璞媛；徐志凯；张芳琳 刊期： 2014年第08期
目的 了解2011-2013年广州市番禺区麻疹流行病学特征,为制定防控麻疹策略提供理论依据.方法 对2011-2013年的麻疹疫情监测资料进行流行病学描述和分析.结果 2011-2013年广州市番禺区共报告麻疹122例,麻疹发病率逐年上升,分别为0.07/10万、1.82/10万和5.34/10万.5-8月为麻疹发病高峰期,占总病例数的54.1％.发病率呈北部高发的态势,大石街、洛浦街、钟村街和南村镇发病率较高.5岁以下散居儿童是发病主体,占病例总数的59.02％.所有麻疹病例中无麻疹疫苗免疫史或免疫史不详的110例,占病例总数的90.16％.结论 番禺区麻疹发病年龄构成以5岁以下儿童为主,应提高常规免疫接种率和及时接种率,降低麻疹发病率.
作者：苏宁；邢启明 刊期： 2014年第08期
目的 比较电化学发光法和酶联免疫法在定量检测乙肝表面抗体(HBsAb)中的应用.方法 用E411化学发光分析仪及原装试剂,对180例患者血清用电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫法(ELISA)检测HBsAb.结果 HBsAb浓度达到100 IU/L以上时ELISA法阳性结果与ECLIA法定量结果基本相符,阳性率达95.8％以上.HBsAb浓度为10.1～100.0 IU/L时ELISA的阳性率为21.2％.结论 低度感染时ELISA法检测HBsAb的灵敏度较低,特异性高.中、高度感染时两种方法检测的敏感性相近.
作者：王方；景尉；石婷婷 刊期： 2014年第08期
目的 研究细胞周期蛋白USP37作为重要的细胞周期调控因子在肿瘤中的表达情况及其临床意义.方法 应用Western blot方法确定USP37在非小细胞肺癌新鲜组织标本中的表达情况,采用免疫组化检测217例非小细胞肺癌蜡块标本USP37的表达并评分.用ROC的方法确定USP37表达的cut-off point;检测USP37表达的情况与病人临床特征之间的相关性.结果 USP37在非小细胞肺癌组织中比其对应的癌旁组织明显高表达.USP37的高表达与非小细胞肺癌的淋巴结分期和Ki67相关.单因素和多因素分析都表明USP37可以作为非小细胞肺癌总生存及无病生存的独立预后因子.结论 USP37在非小细胞肺癌组织中高表达,而且过表达USP37可以作为非小细胞肺癌总生存时间和无疾病进展生存时间的独立预后因子.
作者：陈树鹏；吴少云；李耀英 刊期： 2014年第08期
目的 探讨一氧化氮合酶泛抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖、迁移以及对上皮间充质转化(EMT)标志物的影响.方法 利用L-NAME抑制卵巢癌SKOV3中一氧化氮合酶(NOS)功能,以L-NAME处理组为实验组,二甲基亚砜(DMSO)组为对照组,采用CCK8增殖实验、平板克隆形成试验、划痕试验和Transwell小室迁移实验检测L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移功能的影响;并利用荧光定量PCR和Western blot检测卵巢癌细胞上皮细胞标志物E-cadherin和间充质细胞标志物N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达,观察L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞EMT标志物的调控作用.结果 CCK8增殖实验和平板克隆形成实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞增殖功能(P＜0.05);划痕实验和Transwell小室实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞迁移功能(P＜0.05);荧光定量PCR和Western blot结果显示L-NAME上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达(P＜0.05).结论 L-NAME抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移功能,调节EMT标志物变化.
作者：孙永亮；张千兵；钟灼；朱伶群；邹志伟；刘正军；刘求真 刊期： 2014年第08期
目的 统计分析辽西地区某三甲医院重症监护室(ICU)患者血培养标本的病原菌分布特点及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 回顾性分析2008年1月至2012年12月某三甲医院ICU 974例标本的血培养及药敏试验结果.血培养采用BD-BACTEC9120全自动血培养仪及专用血培养瓶,药敏试验采用Microscan-walkaway 96全自动细菌鉴定仪.结果 974份血培养标本中分离出病原菌167株,阳性率为17.1％.药敏结果显示,革兰阳性菌对万古霉素敏感,革兰阴性菌对复方新诺明和头孢他定较敏感.结论 ICU患者血培养分离的病原菌种类多,耐药性差异大.对血培养分离病原菌和耐药性进行早期监测可为临床合理用药提供参考.
作者：牛继娜 刊期： 2014年第08期
目的 研究妊娠早期妇女碘营养及甲状腺功能,为指导孕期妇女补碘提供依据.方法 选取2013年6月至2014年1月在南方医科大学附属小榄医院产科门诊行常规产前检查的1 851例妊娠早期妇女作为研究对象,收集尿液和采集空腹静脉血,采用砷铈催化分光光度法测定尿标本中碘含量,利用化学发光法测定促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)和过氧化物酶抗体(TPOAb).结果 1 851例妊娠早期孕妇尿碘中位数为129μg/L,其中60.72％的孕妇处于碘缺乏状态,28.09％的孕妇处于碘适量,2.32％的孕妇碘过量.本组孕妇甲状腺异常总患病率为29.39％,其中低甲状腺素血症、甲减、亚临床甲减、甲亢、亚临床甲亢、甲状腺TPOAb阳性的患病率分别为24.37％、0.70％、0.81％、0.92％、2.59％、11.02％.尿碘水平异常与碘足量水平的甲状腺功能异常总患病率分别为30.73％和25.96％,差异有统计学意义(x2=4.095,P=0.043),而二者的甲状腺功能异常个体患病率差异无统计学意义(P＞0.05).尿碘水平异常与尿碘足量水平孕妇的TPOAb阳性率分别为10.74％和11.73％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠早期妇女60％以上存在碘摄入不足,尿碘水平异常孕妇的甲状腺功能异常的总患病率明显高于碘足量水平孕妇.
作者：林清兰；徐灼均 刊期： 2014年第08期
目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染和自发清除后外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的变化及其表型分析.方法 采用流式细胞技术检测HCV慢性感染者、HCV自发清除者及健康对照者各30例外周血Treg细胞的频率及其分化状态,统计学分析HCV慢性感染组分别与健康对照组、自发清除组间的差异.结果 HCV慢性感染组与健康对照组、自发清除组相比,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞频率比CD4+ CD25+ Treg细胞频率差异更明显.CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞更多呈现为中心记忆型,HCV慢性感染组明显少于健康对照组和自发清除组(P=0.044,t=-2.163;P=0.002,t=-3.517).效应Treg细胞表型则呈现HCV慢性感染组明显高于其他两组(P＜0.001,t=7.538; P＜0.001,t=9.696).其他表型在三组间频率无明显差异.结论 CD4+ CD25+Foxp3+ Treg细胞抑制免疫反应的强弱与HCV的自然转归相关,这种关联有可能与Foxp3+ Treg细胞由中心记忆型向效应型转化程度有关.
作者：熊华平；陈秋宇；王敏；廖峭；黄杰庭；黄珂；许茹；戎霞；付涌水 刊期： 2014年第08期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
