学术投稿

LAMP技术检测弓形虫感染方法的建立

赖植发;黄慧萍;顾金保;司徒潮满;陈润莉;钟剑明;陈晓光;曾胜波

关键词:环介导等温扩增技术, 弓形虫, PCR
摘要:目的 建立一种快速、简便的检测弓形虫感染的环介导等温扩增方法(LAMP).方法 根据弓形虫RH株SAGI基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化扩增体系与参数.通过与常规PCR方法的比较,评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性.利用建立的LAMP初步检测人工感染弓形虫4d后白兔与大鼠的肌肉组织.结果 LAMP法检测弓形虫基因组DNA的灵敏度是传统PCR方法的100倍.LAMP法检测与其他常见寄生原虫、寄生虫无非特异性阳性结果.LAMP法检测人工接种动物的肌肉组织,阳性率达到100%,对照组为0,差异有统计学意义(P<0.01).结论 LAMP法检测弓形虫感染快速简便、敏感性高、设备要求低,具有较好的应用前景.
热带医学杂志相关文献
  • 晚期血吸虫病住院患者焦虑抑郁与生活质量状况及影响因素研究

    目的 调查晚期血吸虫病住院患者焦虑、抑郁与生活质量状况,并探讨焦虑、抑郁发生的影响因素.方法 应用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)和世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)对206例晚期血吸虫病患者焦虑、抑郁情绪和生活质量情况进行问卷调查.采用SPSS17.0建立数据库,进行统计描述并采用逐步回归法分析影响患者焦虑、抑郁发生的因素.结果 206例晚期血吸虫病患者焦虑发生率为70.4%、抑郁发生率为69.4%、焦虑合并抑郁发生率为58.3%.晚期血吸虫病患者焦虑、抑郁得分显著高于国内常模(P<0.005),生活质量各领域得分低于常模(P<0.05),焦虑、抑郁与生活质量各维度呈负相关(P<0.005).多元逐步回归分析显示,晚期血吸虫病分型、文化程度是影响焦虑情绪的主要因素.文化程度、住院次数、晚期血吸虫病手术史是影响抑郁情绪的主要因素,其中文化程度高、有晚期血吸虫病手术史为焦虑、抑郁情绪的保护因素.结论 晚期血吸虫病住院患者普遍存在焦虑、抑郁负性情绪,且生活质量低,受多方面因素的影响,临床应予以重视,并及时采取有效的干预措施.

    作者:潘洁;周瑞红;刘科丰;肖水源;邵志伟;来如意;余慧琼;罗志红 刊期: 2014年第08期

  • 三种典型形态涎石唾液流场仿真模型研究

    目的 研究唾液流场对涎石形态的影响,为腮腺导管内涎石形成机制以及手术方式的选择提供理论依据.方法 利用正常腮腺造影计算机断层扫描进行腮腺导管系统三维重建,分别构建圆形、卵圆形、流线型三种典型形态的涎石唾液流场仿真模型,应用计算流体动力学分析不同形态涎石与唾液流场变化关系,并通过病例和文献回顾进行模型验证.结果 静息状态与刺激状态下阻塞区域三种不同形态涎石的唾液流速均不同,差异有统计学意义(P<0.05).静息状态下卵圆形涎石的低流速区域(流速<0.1 mm/s)大于其他两种涎石,差异有统计学意义(P<0.05).刺激状态下圆形与卵圆形涎石涡流区域面积分别为0.092 mm2跟0.087 mm2,差异无统计学意义(P>0.05),流线型涎石无涡流区域.结论 导管内涎石的形态会导致病变周围区域唾液流速的不同,而唾液流体力学特性的改变同样会影响矿物质的沉积而影响涎石终的形态.

    作者:阎梦蝶;蔡斌;朱双林;卢新华;林仪;许跃 刊期: 2014年第08期

  • 2005-2012年新疆疏附县黑热病监测结果分析

    目的 分析新疆疏附县黑热病监测结果,为制定黑热病防控策略提供参考.方法 对2005-2012年疏附县黑热病网络报告发病资料和主动监测结果进行描述性流行病学分析.结果 2005-2012年疏附县共报告黑热病84例,年平均发病率为3.27/10万.发病地区集中在东部3乡,高发月份为2-7月.发病人群集中在<15岁儿童,职业以学生和农民为主.8年共普查33 375名学生和农民,确诊并治疗黑热病病例32例.结论 疏附县黑热病疾病负担较重,建议持续采取综合防控措施.

    作者:吴德平;王玉忠;魏艳;阿布都艾尼;薛振香;卡伊尔 刊期: 2014年第08期

  • 部队老年住院患者营养状况评价及营养支持现状分析

    目的 了解部队老年住院患者的营养状况及营养支持现状.方法 选择部队老年住院患者203例,采用简易营养评价精法(MNA-SF)对其进行营养状况评价及营养风险筛查,并调查其营养支持情况.结果 203例老年住院患者中,营养不良总发生率较低为29.56%(60/203),营养风险的发生率为39.90%(81/203),高年龄组营养不良的发生率高于低年龄组,差异有统计学意义(P<0.05).总营养支持率为38.92%,营养状况良好组的营养支持率为19.36%.结论 MNA-SF适合老年住院患者的营养状况评价,营养不良及营养风险的发生随着年龄的增加而增加,部队老年住院患者存在营养支持不合理.

    作者:张艳;陈怡;黄蕾;时皎皎 刊期: 2014年第08期

  • 妊娠妇女尿碘与甲状腺功能异常的初步研究

    目的 研究妊娠早期妇女碘营养及甲状腺功能,为指导孕期妇女补碘提供依据.方法 选取2013年6月至2014年1月在南方医科大学附属小榄医院产科门诊行常规产前检查的1 851例妊娠早期妇女作为研究对象,收集尿液和采集空腹静脉血,采用砷铈催化分光光度法测定尿标本中碘含量,利用化学发光法测定促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)和过氧化物酶抗体(TPOAb).结果 1 851例妊娠早期孕妇尿碘中位数为129μg/L,其中60.72%的孕妇处于碘缺乏状态,28.09%的孕妇处于碘适量,2.32%的孕妇碘过量.本组孕妇甲状腺异常总患病率为29.39%,其中低甲状腺素血症、甲减、亚临床甲减、甲亢、亚临床甲亢、甲状腺TPOAb阳性的患病率分别为24.37%、0.70%、0.81%、0.92%、2.59%、11.02%.尿碘水平异常与碘足量水平的甲状腺功能异常总患病率分别为30.73%和25.96%,差异有统计学意义(x2=4.095,P=0.043),而二者的甲状腺功能异常个体患病率差异无统计学意义(P>0.05).尿碘水平异常与尿碘足量水平孕妇的TPOAb阳性率分别为10.74%和11.73%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 妊娠早期妇女60%以上存在碘摄入不足,尿碘水平异常孕妇的甲状腺功能异常的总患病率明显高于碘足量水平孕妇.

    作者:林清兰;徐灼均 刊期: 2014年第08期

  • 电化学发光法与ELISA测定乙肝表面抗体结果的比较

    目的 比较电化学发光法和酶联免疫法在定量检测乙肝表面抗体(HBsAb)中的应用.方法 用E411化学发光分析仪及原装试剂,对180例患者血清用电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫法(ELISA)检测HBsAb.结果 HBsAb浓度达到100 IU/L以上时ELISA法阳性结果与ECLIA法定量结果基本相符,阳性率达95.8%以上.HBsAb浓度为10.1~100.0 IU/L时ELISA的阳性率为21.2%.结论 低度感染时ELISA法检测HBsAb的灵敏度较低,特异性高.中、高度感染时两种方法检测的敏感性相近.

    作者:王方;景尉;石婷婷 刊期: 2014年第08期

  • 黄芩苷联合顺铂体外诱导人肝癌细胞HepG2.0凋亡的实验研究

    目的 观察黄芩苷联合顺铂是否能诱导HepG2.0细胞凋亡及探讨其对凋亡相关蛋白表达的影响.方法 采用体外细胞培养方法,分别用黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂干预HepG2.0细胞.用CCK-8法检测细胞活性;光学显微镜观察HepG2.0细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测HepG2.0细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc表达的影响.结果 光学显微镜下可观察到药物组细胞凋亡的形态改变;各药物组细胞早期凋亡率显著升高;各药物组细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、c-myc和Caspase-3表达升高.结论 黄芩苷、顺铂及黄芩苷联合顺铂均能诱导HepG2.0细胞凋亡,其机制可能通过调控Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-myc蛋白的表达有关.

    作者:林艳芬;刘荣静;林梅双;朱锦宏;吴晓蔓 刊期: 2014年第08期

  • 2009-2012年清远市清城区石角镇手足口病疫情分析

    目的 了解清远市清城区石角镇手足口病的流行特征,为做好乡镇手足口病的防控提供依据.方法 采用描述性流行病学方法对2009年以来清远市疾病监测信息报告管理系统报告的手足口病疫情进行分析.结果 2009-2012年清城区石角镇共有手足口病1 601例,聚集性疫情2起,发生在本镇的两间幼儿园.2012年出现重症5例,死亡1例.2009-2012年病例数分别为80、458、541和522例.2010年发病率为633.78/10万,较2009年上升了572.50%.5-6月为发病高峰,5岁以下婴幼儿占总病例数的91.88%.病例以散居儿童为主,占总病例数的83.76%.临床诊断病例1 589例(99.25%),实验室诊断12例(0.75%).结论 由于幼托机构传染病管理存在漏洞,导致了聚集性疫情的发生,今后应进一步加强手足口病防控工作,特别是5-6月份,5岁以下婴幼儿的疫情监测工作.

    作者:廖耀荣;何锦军;李楚仁;阳俐虹 刊期: 2014年第08期

  • 基于德尔菲法对人感染H7N9禽流感监测预警指标体系的研究

    目的 采用德尔菲专家咨询法,确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,为下一步防控工作提供参考依据.方法 通过Delphi专家访谈法、小组讨论等方法对人感染H7N9禽流感监测预警指标体系进行筛选,终确立人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结果 本研究共进行两轮德尔菲问卷调查,第1轮专家咨询共发放问卷36份,有效回收33份,专家积极性系数为91.67%.第2轮共发放问卷33份,专家积极性系数为87.88%.专家对一级指标的判断依据基本在0.7以上,熟悉程度全部在0.7以上,权威程度较高.经过两轮咨询,肯德尔和谐系数的显著水平均小于0.05,提示专家对指标意见协调程度尚可.终建立39个三级指标的人感染H7N9禽流感监测预警指标体系.结论 人感染H7N9禽流感监测预警指标体系,可以作为人感染H7N9禽流感监测预警的基本指标,评分靠前的指标需要在今后的防控工作中进一步强化和调整.

    作者:王金龙;黄静;巫小佳;凌文华 刊期: 2014年第08期

  • 广州市荔湾区肝吸虫感染情况检测及分析

    目的 了解广州市荔湾区人群肝吸虫感染状况.方法 采用改良加藤氏厚涂片镜检法对本辖区人群粪标本进行检测,并对检查结果进行分析.结果 共检测1 018份粪标本,阳性率为5.60%(57/1 018),感染人群年龄主要集中在41~60岁.女性阳性率3.30%(16/486)远低于男性阳性率7.71%(41/532),差异有统计学意义(x2=10.129,P<0.05).原芳村区域人群感染肝吸虫明显高于原荔湾区域人群(x2=6.344,P<0.05).经Logistic多因素回归分析显示,肝吸虫感染主要与性别、年龄有关(P<0.05).结论 荔湾区肝吸虫感染较高,食品卫生亟待加强,需政府及多部门联防联控.

    作者:黄嘉盈;谭志熹;蔡明伟;杨翠辉 刊期: 2014年第08期

  • 手足口病患儿血清心肌酶和超敏C反应蛋白的临床应用

    目的 探讨心肌酶和超敏C反应蛋白(hs-CRP)在手足口病患儿血清中的变化规律及其诊疗价值.方法 应用日立7600全自动生化分析仪检测50例手足口病患儿的血清心肌酶和hs-CRP,并与30名健康体检儿童作对照.结果 手足口病患儿乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、α-羟丁酸脱氢酶和hs-CRP在血清中的含量分别为(350.98±82.52)U/L、(177.36±130.29)U/L、(40.74±9.91)U/L、(281.14±68.05)U/L和(23.74±22.65)mg/L,异常率分别为52.0%、14.0%、56.0%、24.0%和76.0%,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 及时检测手足口病患儿血清心肌酶和hs-CRP能尽早发现其心肌损伤情况,指导临床诊疗.

    作者:曾兰兰;顾晓琼;刘非;陈小娟;黄玉开;梁肖云;龙海锋;李娟 刊期: 2014年第08期

  • 2011-2013年广州市番禺区麻疹流行病学特征分析

    目的 了解2011-2013年广州市番禺区麻疹流行病学特征,为制定防控麻疹策略提供理论依据.方法 对2011-2013年的麻疹疫情监测资料进行流行病学描述和分析.结果 2011-2013年广州市番禺区共报告麻疹122例,麻疹发病率逐年上升,分别为0.07/10万、1.82/10万和5.34/10万.5-8月为麻疹发病高峰期,占总病例数的54.1%.发病率呈北部高发的态势,大石街、洛浦街、钟村街和南村镇发病率较高.5岁以下散居儿童是发病主体,占病例总数的59.02%.所有麻疹病例中无麻疹疫苗免疫史或免疫史不详的110例,占病例总数的90.16%.结论 番禺区麻疹发病年龄构成以5岁以下儿童为主,应提高常规免疫接种率和及时接种率,降低麻疹发病率.

    作者:苏宁;邢启明 刊期: 2014年第08期

  • 华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究

    目的 克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础.方法 利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测.从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测.结果 华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51~74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶.重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中.酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性.抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性.结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性.

    作者:李婷;杨梅;陈金桃;宋天章;余新炳;陈红武;胡旭初 刊期: 2014年第08期

  • 广州地区成年女性EB病毒抗体水平相关性及其年龄分布

    目的 调查广州地区成年女性血清免疫球蛋白水平和抗EB病毒VCA/EBNA1IgA和IgG抗体的年龄分布及其相互关系.方法 收集广州市309例常规体检的健康女性血清样本,分别采用比浊法和ELISA检测血清免疫球蛋白水平、抗EB病毒VCA/EBNA1IgA和IgG抗体水平.结果 广州地区成年女性抗EB病毒VCA-IgA、抗VCA-IgG及抗EBNA1-IgA、抗EBNA1-IgG的阳性率分别为14.6%、92.2%、3.2%、99.7%.抗VCA-IgA阳性率与年龄呈正相关(r=0.163,P=0.004);抗EBNA1-IgG OD值与年龄呈负相关(r=-0.178,P=0.020).各抗体水平间的相关性分析显示,抗EBNA1-IgA与血清总IgG水平之间呈负相关(r=-0.154,P=0.008);抗VCA-IgA与抗EBNA1-IgA、抗EBNA1-IgA与抗EBNA1-IgG、血清总IgA与抗VCA-IgA、总IgG与抗VCA-IgG、总IgA与总IgG、总IgM与总IgG水平之间均存在正相关(r分别为0.113、0.241、0.228、0.228、0.433和0.362,P<0.05).结论 广州地区成年女性99.7%存在EB病毒既往感染.随着年龄增长,抗VCA-IgA阳性率逐渐增高,而抗EBNA1-IgG OD值则逐渐下降.抗EB病毒抗体水平间存在一定的相关性,有助于鼻咽癌等疾病筛检时联合指标的选择.

    作者:席静;张薇;任泽舫 刊期: 2014年第08期

  • 安国市孕妇弓形虫感染状况及其对妊娠结局的影响

    目的 了解安国市孕妇弓形虫感染状况及其对妊娠结局的影响.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3 891例孕妇外周血中弓形虫IgM和IgG抗体.根据检测结果分为急性感染组、既往感染组、活动性感染组,随机抽取200名检测结果为阴性的无弓形虫感染的孕妇作为对照组,对4组孕妇进行随访,观察比较其妊娠结局.结果 在3 891例被调查的孕妇中,弓形虫感染353例,其中急性感染51例、既往感染197例、活动性感染105例,总感染率为9.07%(353/3 891);对应各感染组及对照组不良妊娠结局发生率分别为17.65%(9/51)、2.03%(4/197)、6.67%(7/105)和1.50%(3/200).急性感染组和活动性感染组不良妊娠结局发生率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);既往感染组不良妊娠结局发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).郊区孕妇弓形虫阳性率高于市区妇女,农民阳性率高于工人、干部和其他职业者,有动物密切接触史和喜食生食者阳性率较高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 急性感染和活动性感染与孕妇不良妊娠结局密切相关.建议孕妇加强弓形虫筛查工作,以便及早诊治;加强健康教育,改变不良生活习惯;加强水源、粪便等卫生管理.

    作者:赵聪伟 刊期: 2014年第08期

  • 2010-2012年江门市居民慢性非传染性疾病死因分析

    目的 了解江门市居民慢性非传染性疾病(以下简称慢性病)的死亡状况及变化趋势,为制定慢性病防治规划提供依据.方法 应用DeathReg2005软件和Excel对2010-2012年江门市户籍居民死亡资料进行统计分析.结果 2010-2012年江门市居民因慢性病死亡71 466人,占全死因86.53%,慢性病死亡率为604.78/10万,3年间慢性病死亡率呈上升趋势.男性慢性病死亡率(664.00/10万)明显高于女性(544.44/10万),差异有统计学意义(x2=727.71,P<0.01).慢性病死因顺位前5位依次为心血管疾病、脑血管疾病、恶性肿瘤、慢性呼吸系统疾病、消化系统疾病,占慢性病死因的93.40%.男性脑血管疾病、恶性肿瘤、慢性呼吸系统疾病、消化系统疾病、泌尿系统疾病的死亡率明显高于女性,而女性内分泌及代谢疾病、先天异常的死亡率明显高于男性,差异均有统计学意义(P<0.01).不同年龄组慢性病死因顺位不相同.结论 慢性病已成为江门市居民的主要死因,为降低居民死亡率,须加强慢性病的三级预防工作.

    作者:莫兆波;许坚锋;黄艳珍 刊期: 2014年第08期

  • 2011-2012年深圳市重症手足口病的病原学和流行病学分析

    目的 了解深圳市手足口病(HFMD)重症病例的病原学类型和流行病学特征,为本地区手足口病的预防控制提供理论依据.方法 收集2011-2012年深圳市各医院送检的220例手足口病重症病例的粪便样本,应用Real-time RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、肠道病毒通用型(EN).结果 2011-2012年深圳市共发现220例重症手足口病病例,其中,2012年HFMD重症患者数量为2011年的32.53%.220例重症手足口病病例中,EV71型占80.45%,CA16型占5.00%,其他肠道病毒则占13.19%.2011年5、6月为深圳市手足口病重症的高发月份,而2012年5月和7月为高发月份.1岁组重症病例多有82人,占重症病例总数的37.27%.重症病例人群男性多于女性(1.62∶1).结论 EV71是引起深圳市手足口病重症病例的主要原因,其他肠道病毒比CA16更容易引起手足口病重症.

    作者:姚相杰;何雅青;蔡春林;罗敏;杨洪;冼慧霞;张海龙 刊期: 2014年第08期

  • 亚洲带绦虫膜联蛋白B3基因免疫学特性分析及组织定位

    目的 对重组表达的亚洲带绦虫膜联蛋白B3(Annexins B3)基因得到的蛋白进行免疫学初步研究及组织定位.方法 将构建在原核表达质粒pET-28a(+)中的Annexins B3基因在大肠埃希菌BL21/DE3中进行诱导表达,将纯化后的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析,间接荧光免疫组织化学定位,荧光显微镜下曝光观察结果.结果 诱导表达并纯化后的重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫和牛带绦虫感染的病人血清识别.免疫组化显示,该基因的组织定位在亚洲带绦虫成虫的表膜.结论 该重组蛋白具有较好的免疫反应性,组织定位于表膜,说明该基因是维持成虫在宿主消化道厌氧环境中能量代谢平衡的关键分子和介导寄生虫与宿主相互作用的潜在的疫苗候选抗原分子.

    作者:戴佳琳;蓝磊;黄江 刊期: 2014年第08期

  • 细胞周期蛋白USP37作为非小细胞肺癌预后因子的研究

    目的 研究细胞周期蛋白USP37作为重要的细胞周期调控因子在肿瘤中的表达情况及其临床意义.方法 应用Western blot方法确定USP37在非小细胞肺癌新鲜组织标本中的表达情况,采用免疫组化检测217例非小细胞肺癌蜡块标本USP37的表达并评分.用ROC的方法确定USP37表达的cut-off point;检测USP37表达的情况与病人临床特征之间的相关性.结果 USP37在非小细胞肺癌组织中比其对应的癌旁组织明显高表达.USP37的高表达与非小细胞肺癌的淋巴结分期和Ki67相关.单因素和多因素分析都表明USP37可以作为非小细胞肺癌总生存及无病生存的独立预后因子.结论 USP37在非小细胞肺癌组织中高表达,而且过表达USP37可以作为非小细胞肺癌总生存时间和无疾病进展生存时间的独立预后因子.

    作者:陈树鹏;吴少云;李耀英 刊期: 2014年第08期

  • 2009-2013年重庆市开县手足口病流行病学特征分析

    目的 了解2009-2013年开县手足口病流行病学特征,为制定有效的防控措施提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法对2009-2013年开县手足口病疫情资料进行分析.结果 开县2009-2013年共发生手足口病3 753例,年均发病率为61.05/10万,主要集中在4-7月,男女性别比为1.60∶1.5岁以下病例占总报告数的94.33%.实验室诊断病例265例,其中EV71型95例、CoxA16型63例,其他肠道病毒107例.结论 开县手足口病发病率较高,应针对高危人群、重点地区以及疾病的发病高峰期进一步加强手足口病监测及防治工作.

    作者:谭毅;王丹;邱博恒 刊期: 2014年第08期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会