曾颖玲;毛惠南
目的 建立单个人心房肌细胞的急性分离技术,以满足检测人心肌细胞离子通道的需要.方法 两步酶解法消化分离人心房肌细胞,采用膜片钳全细胞技术记录瞬时外向钾电流(Ⅰto).结果 根据患者的性别、年龄及组织块的大小,选择适当的消化时间,分离得到结构清晰,横纹清楚,边缘整齐,少颗粒,舒展伸直,呈长杆状的单个心肌细胞;采用全细胞膜片钳技术能记录到瞬时外向钾电流.结论 该方法能分离到形态和状态均良好的细胞,有利于进行单个人心房肌细胞膜片钳实验的研究.
作者:邝素娟;邓春玉;杨慧;陈怡静;单志新;林秋雄;杨敏;余细勇 刊期: 2013年第01期
目的 利用慢病毒载体携带荧光素酶报告基因并转导人胚胎干细胞,以实现在体观察移植细胞的增殖情况.方法 酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因序列,酶切LTBR-GIP获得载体骨架,经过酶切产物热失活、平末端处理、CIP处理、胶纯化和连接,所构建慢病毒载体命名为ULIP,包括UBC启动子和IRES连接,能同时表达荧光素酶基因和Puromycin抗性基因.以ULIP转导人胚胎干细胞H9,并以Puromycin筛选稳定转导的细胞.随后移植于BALB/c小鼠和RAG-/-γC-/-小鼠,在Xenogen IVIS (r)50成像系统进行荧光信号检测.结果 稳定转导ULIP或LTBR-GIP的H9移植到BALB/c小鼠,ULIP组3d后荧光信号明显减弱,5d后基本上不能检出.而移植到RAG-/-yC-/-小鼠后,ULIP组的荧光信号在第3天稍有下降,随后荧光信号逐渐增强.LTBR-GIP-H9在移植BALB/c小鼠和RAG-/-yC-/-小鼠后均未能检测到荧光信号.结论 荧光素酶报告基因可以用于观察移植细胞在体内的动向,实现实时观察移植细胞的存活情况.
作者:蔡柳洪;张滨;陈世钦;曾敏慧;陶欣 刊期: 2013年第01期
目的 了解抗菌药物致不良反应(ADR)发生的特点、规律及影响因素,为临床合理用药提供参考.方法 对川北医学院附属医院2009-2011年228例抗菌药物ADR报告按年龄、性别分布、给药途径、药品分类、累及器官或系统、常见ADR症状处理方法进行统计分析.结果 228例ADR报告中,60岁以上患者有69例(30.3%),显著高于其他年龄组(P<0.05);引起ADR的抗菌药物有38种,主要为头孢菌素类87例(38.2%)和氟喹诺酮类61例(26.8%).给药途径以静脉输注为主,共209例(90.4%),显著高于其他给药途径(P<0.05);ADR所累及的系统和(或)器官以皮肤及其附件损害为普遍,共122例(47.3%),显著高于其他系统(P<0.05).结论 抗菌药物ADR的发生与多种因素有关;临床上应进一步加强抗菌药物ADR的监测,以达到合理、安全、有效地使用抗菌药物,减少ADR的发生.
作者:杨云;杨春兰;郝伟迤;刘丹 刊期: 2013年第01期
研究显示,蠕虫感染可预防自身免疫性疾病和减轻疾病的损害程度,利用蠕虫的免疫调控机制可望开辟自身免疫性疾病新的防治策略.本文就近年来蠕虫感染或蠕虫抗原免疫以防治自身免疫性疾病的研究进展作一综述.
作者:韦肖霞;祝程诚;冯允;李舒婷;姬鹏宇;吕志跃;吴忠道 刊期: 2013年第01期
目的 研究季节性差分自回归滑动平均模型(SARIMA)拟合季节时间序列的方法,并将其应用于预测香港流行性腮腺炎疫情趋势.方法 利用R软件对2000年1月至2012年8月香港流行性腮腺炎月发病例数资料进行建模,用所构建模型进行预测分析.结果 流行性腮腺炎发病呈上升趋势,SARIMA(2,1,1)×(1,1,1)12模型较好地拟合了香港流行性腮腺炎的月发病例数,模型残差为白噪声序列,回代考核平均相对误差为17.5%;后8个月的数据作为前瞻性预测考核,平均相对误差为16.4%.结论 SARIMA模型较好地模拟腮腺炎的流行特征,并进行中、短期预测.
作者:徐燕;阎玉霞;韩剑锋;陈平雁 刊期: 2013年第01期
目的 探讨腹部彩超与胃镜检查对儿童腹型过敏性紫癜的胃肠道损害的诊断价值.方法 结合临床特点回顾性分析126例腹型过敏性紫癜患儿腹部彩超及胃镜检查结果.结果 126例患儿均有腹痛,有或无伴阵发性加重,腹痛可出现皮肤紫癜前(n=22)、紫癜中(n=54)、紫癜后(n=50).腹痛重而体征较轻微,腹部部位不固定.腹痛较轻者腹部超声多无阳性表现,腹痛持续或伴阵发性加重者腹部超声表现为病变部位肠管壁节段性水肿,血流增加,严重者可发现肠套叠、肠梗阻或肠坏死.胃镜下均有不同程度胃肠粘膜病理改变,包括胃肠粘膜充血、糜烂、点状出血及多发性溃疡.结论 腹部彩超及胃镜检查对儿童腹型过敏性紫癜有早期诊断价值.
作者:梁燕;周惠梅;魏青;梁文青 刊期: 2013年第01期
黑热病(kala-azar)是由杜氏利什曼原虫(Leishmania donovania)引起、以白蛉为传播媒介的地方性疾病,临床表现为长期不规则发热、消瘦、肝脾肿大、全血细胞减少及血浆球蛋白明显增高.在非疫区由于认识不足,常引起误诊.
作者:唐光敏 刊期: 2013年第01期
目的 建立快速、灵敏、特异的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR体系,用于食源性致病菌监测和淡水鱼产品贸易往来的快速检测.方法 根据GenBank公布的香港海鸥形菌16S rRNA基因高保守序列,设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立和优化快速检测体系,评价反应体系的特异性、灵敏度、重复性,并在淡水鱼类、急性胃肠炎腹泻患者标本中临床应用,结合细菌分离方法和序列测定分析进行验证.结果 建立的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR反应体系检测时限短,仅40 min就可出结果,特异性好,与沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血弧菌等非目标菌无交叉反应,灵敏度高,检测下限达10拷贝/反应,稳定性好,同一浓度阳性质粒进行16次重复检测的Ct值变异系数0.183%.92份淡水鱼及211份医院急性胃肠炎腹泻标本实时荧光PCR与常规细菌分离结果完全一致,均检出了12株香港海鸥形菌,16S rRNA测序结果显示与HKU1株同源性在99.5%以上,进一步验证了实时荧光PCR的特异性.结论 本研究建立的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR反应体系快速、特异、灵敏,在防止食源性疾病的传播和加快贸易通关速度方面,具有较强的的应用价值.
作者:谭翰清;谭海芳;林凤;丁丽娜;程洁萍;朱颖梅;苏乐斌;陈华 刊期: 2013年第01期
目的 了解基层医院内骨折患者感染情况,探讨骨科住院患者医院感染的相关因素,从而降低感染率.方法 于2009-2010年共收集骨折患者719例,进行细菌培养鉴定,并对检出的病原菌按照K-B法进行药敏试验,同时收集患者的一般信息.结果 骨折患者719例中发生医院感染56例,感染率为7.79%.其中革兰阳性球菌23株(41.07%),主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌等;革兰阴性杆菌33株(58.93%),主要包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等.药敏结果显示革兰阳性菌和阴性菌均对青霉素类抗生素耐药率较高.万古霉素和亚胺培南分别是革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌敏感性较高的抗菌药物.骨科感染的发生与骨折类型、住院时间、年龄、围手术期抗菌药物使用以及是否有基础疾病有明显关系(P<0.05).结论 骨折患者感染与多种因素相关,应采取积极有效的措施以及合理应用抗生素药物,从而降低骨科患者感染的发生.
作者:王占武 刊期: 2013年第01期
目的 构建携带跨膜信号序列的凋亡蛋白(apoptin)的原核表达载体PET-28a(+)-apoptin,诱导表达并纯化重组apoptin蛋白,制备多克隆抗体.方法 用多重PCR的方法扩增跨膜信号序列(PTD)及apoptin的编码序列,构建原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,转化大肠杆菌BL21 (DE3),低温条件下IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法鉴定蛋白表达,经镍亲和层析方法纯化目的蛋白后,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体.结果 DNA测序鉴定表明成功构建了原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经低温和IPTG诱导后,获得重组apoptin蛋白,制备的多克隆抗体经ELISA方法和免疫印迹法证实能特异性地识别apoptin.结论成功获得了携带跨膜信号序列的重组蛋白apoptin及其多克隆抗体,为进一步研究其特异性诱导肿瘤细胞凋亡功能及相关机制奠定了基础.
作者:杜晶春;吴玉;李雪燕 刊期: 2013年第01期
目的 探讨原发性肝癌患者血行转移与乙肝病毒感染之间的关系.方法 检测原发性肝癌患者HBV感染标志物(HBV-M)和HBV-DNA的结果,比较其与血行转移的关系.结果 125例原发性肝癌患者中HBV感染96例,占76.8%.96例HBV感染阳性的原发性肝癌患者中,发生血管内转移者65例(67.7%),HBV感染阴性的原发性肝癌患者29例,发生血管内转移者8例(27.6%),HBV感染阳性的患者血行转移率明显高于HBV感染阴性患者(P<0.01).结论 乙肝病毒的感染和复制与原发性肝癌的发生和血行转移密切相关.
作者:曾颖玲;毛惠南 刊期: 2013年第01期
目的 观察硒蛋白对手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)在感染动物体内复制的影响情况.方法 将30只雌性ICR小鼠分为常规饲料组、缺硒饲料组和加硒饲料组,各种饲料饲养小鼠6周后,通过电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定小鼠外周血中硒的含量以及荧光定量PCR方法测定动物体内肠道病毒EV71的载量,然后用病毒空斑实验测定病毒滴度并用酶促法来测定主要硒蛋白酶的活性.结果 通过测定外周血中硒的含量发现,缺硒饲料组的ICR小鼠硒含量为0.081μg/g,显著低于常规饲料组0.135 μg/g和加硒饲料组的0.128 μg/g,差异有统计学意义(P<0.01);用荧光定量PCR方法测定EV71载量,加硒饲料组ICR小鼠体内EV71核酸扩增Ct值,明显高于缺硒饲料组(P<0.05);ICR小鼠体内主要硒蛋白酶(GPX1)的活力在缺硒饲料组的动物体内显著低于加硒饲料组;病毒空斑实验结果表明,缺硒饲料组的ICR小鼠体内EV71病毒复制活力显著高于其他两组.结论 缺硒可能导致硒蛋白GPX1合成减少或其活力降低从而加快EV71在宿主内的复制.
作者:黄飞雁;张东晓;许少坚;黄达娜;阳帆;吕星;吴春利;房师松;王昕 刊期: 2013年第01期
目的 建立一个适宜的食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)体外转移研究模型.方法 将ESCC细胞系HK2置于未处理细胞培养皿中培养、传代,筛选出具有非锚定依赖生长能力的细胞株.以体外侵袭实验,软琼脂克隆形成实验比较、验证筛选细胞系与母代细胞的侵袭能力和非锚定依赖生长能力.利用比较蛋白质学的方法分析筛选细胞与母代细胞间的蛋白表达图谱差异.结果 成功筛选出具有较高转移能力并可传代培养的HK2-AD细胞株.HK2和HK2-AD细胞侵袭至小室膜反侧的细胞数分别为(16.7±2.5)和(28.7±7.4),软琼脂集落生成实验表明,HK2和HK2-AD细胞形成的集落数分别为(16.8±3.2)和(25±5.1),差异均有统计学意义(P<0.05).HK2-AD细胞中一些与细胞运动、细胞无氧代谢及抑制凋亡相关的蛋白质分子表达明显上调.结论 利用肿瘤细胞的非锚定依赖生长特性建立了一个高转移能力、呈三维生长的HK2-AD细胞株,为ESCC肿瘤转移机制研究和药物筛选提供了一个有价值且易于操作的食道癌转移体外细胞模型.
作者:蔡贞;周园;温淑娟;谷祯梅;裘宇容 刊期: 2013年第01期
目的 观察早期肠内营养对胃癌术后患者术后恢复和营养指标的影响.方法 选择2007年1月至2011年12月于上海市第一人民医院宝山分院行胃癌根治术的患者86例,随机分为早期肠内营养组(EEN组)和肠外营养组(PN组),每组43例.观察两组手术前后的血清白蛋白(ALB)、转铁蛋白(TF)、前白蛋白(PA)、视黄醇结合蛋白(RBP)、体质量(BW)、肱三头肌皮肤皱褶(TSF)和疲劳指数(Christensen's评分),以及术后肛门排气时间、住院时间、Karnofsky评分和并发症发生率.结果 两组术后第7天的BW、TSF、ALB、TF、PA和RBP均较术前第1天出现明显降低(P<0.01),而PN组的TF、PA和RBP水平较EEN组降低更为明显(P<0.01),两组的BW、TSF和ALB水平差异无统计学意义(P>0.05).而术后第7天的Christensen's评分较术前第1天出现明显提高,而PN组的升高较EEN组更为明显,差异有统计学意义(P<0.01).EEN组的肛门排气时间、住院时间和Karnofsky评分均较PN组明显缩短或者降低(P<0.01),而两组并发症比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 早期肠内营养有助于胃癌术后患者的早期康复,改善患者营养状况,促进胃肠道功能恢复,缩短住院时间.
作者:应伟青;李斌;卢庆华 刊期: 2013年第01期
目的 通过对乳腺癌中与孕激素受体(PR)状态相关的microRNAs差异表达谱进行生物信息学分析,探讨microRNAs在PR表达状态中可能参与的调控机制,为深入研究乳腺癌不同分子亚型的分化提供新思路.方法 利用文献挖掘方法找到与PR状态相关的microRNAs差异表达数据集,然后利用生物信息学方法(Targetscan软件和DAVID数据库)预测microRNAs的靶基因,再对靶基因进行基因本体论(GO)富集和通路分析.结果 通过文献挖掘找到3个差异表达microRNAs数据集,生物信息学分析获得3个相应靶基因集和1个靶基因合集.靶基因的GO分类主要涉及细胞内的信号级联、蛋白氨基酸磷酸化、蛋白质甲基转移酶活性及转录因子活性等生物学过程及分子功能.通路分析发现3条KEGG信号通路和3条BIOCARTA代谢通路可能参与不同PR表达状态的调节.结论 通过生物信息学方法,初步分析了microRNAs在不同PR表达状态中可能参与调控的信号和代谢通路,为进一步探索microRNAs在乳腺癌不同分子亚型分化的调控机制奠定基础.
作者:麦仲伦;姜茂竹;曾融;吴钢;郑燕芳;张积仁 刊期: 2013年第01期
目的 观察中药面膜联合胶原贴辅助治疗面部激素依赖性皮炎的临床疗效.方法 98例患者随机分成两组,治疗组50例,对照组48例.所有患者均口服氯雷他定片,对照组给予胶原贴敷料外敷,每晚1次,连续使用2周,以后1次/2 d;治疗组在上述治疗基础上加用中药面膜,第1周1次/d,第2周后1次/2 d.共4周.结果 治疗后,两组主观指标、客观指标及临床症状总积分均明显下降,治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).且两组患者的症状、体征均有不同程度的好转,治疗组有效率为82.0%,对照组有效率为64.6%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 中药面膜联合胶原贴辅助治疗面部激素依赖性皮炎安全、有效.
作者:邹凌云;宋英;王秀霞;马小鹏 刊期: 2013年第01期
目的 观察湖沼型疫区沟渠反复药物灭钉螺效果,为制定防治对策提供科学依据.方法 选择有感染性钉螺分布的灌渠1条,采用50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂2 g/m2喷洒法反复实施药物灭螺,每次药物灭螺后采用系统抽样方法进行近期(14 d)和远期(30~90 d)效果现场考核,观察钉螺死亡率、螺口密度和感染性钉螺变化情况.结果 4次药物灭螺,近期效果考核钉螺死亡率在87.35%~90.48%之间,校正死亡率分别87.29%、84.69%、88.74%、88.47%,与灭前比较,差异有统计学意义(x2=302.14、430.00、241.83、61.07,P均<0.01);活螺平均密度下降率分别为94.35%、85.48%、91.94%、94.35%;未发现感染性钉螺.3次远期效果考核钉螺死亡率在4.76%~23.33%之间,与灭前比较无差异;活螺平均密度下降率分别为35.48%、29.84%、50.87%;后2次未发现感染性钉螺.结论 反复药物灭螺对控制感染性钉螺作用明显,但对年度钉螺螺口消长作用有限.
作者:苏文;苏尚洋;任晓晴;蒋世福;张道颖;何亮才 刊期: 2013年第01期
目的 研究女性冠心病患者高密度脂蛋白(HDL)亚组分及相对含量的变化并分析其临床意义.方法 采用双相电泳-免疫印迹法分析78例女性冠心病患者(观察组)及82例女性非冠心病组(对照组)血清HDL各亚组分的含量.结果 观察组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、LDL-C/HDL-C的值明显高于对照组,而HDL-C明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);女性冠心病患者血清中Preβ 1-HDL、HDL-3b、HDL-3c水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05),而HDL-2b水平显著低于对照组(P<0.05).结论 女性冠心病患者血清中,HDL颗粒有变小的趋势,HDL-2b预测冠心病的可能性更高.
作者:肖华;陈英;姚振国 刊期: 2013年第01期
目的 通过调查2型糖尿病患者中丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的流行情况,探索HCV感染是否为2型糖尿病发病的危险因素.方法 采用酶联免疫法(ELISA)对710例2型糖尿病患者与696例非糖尿病者(对照组)的血清进行抗-HCV检测,并进行比较.结果 2型糖尿病组的抗-HCV阳性率(3.10%)明显高于对照组的阳性率(1.29%),两者比较差异有统计学意义(x2=5.313,P<0.05).但在所有年龄组中,只有60~69岁年龄组中两者比较差异有统计学意义(x2=6.891,P<0.01).2型糖尿病组与对照组之间比值比(OR)为2.44(95%CI l.14-5.21).结论 HCV感染可能是2型糖尿病发病的危险因素之一.
作者:韦艳妮;梁能秀;苏齐鉴;徐斌;何晓;徐世民;谢志春 刊期: 2013年第01期
目的 掌握深圳市宝安区流行性腮腺炎流行特征,为制定防制措施及评价防制效果提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法分析深圳市宝安区流行性腮腺炎疫情资料.结果 2007-2011年流行性腮腺炎平均报告发病率为25.74/10万,发病高峰在5-7月,占全年总发病数的44.53%;男性年均报告发病率为35.77/10万,女性为17.46/10万,差异有统计学意义(P<0.01);学生和儿童发病分别占全部报告发病数的34.79%、45.34%; 3~15岁年龄组发病占全部报告发病的79.45%,呈典型的儿童和少年发病高峰.结论 宝安区流行性腮腺炎发病呈逐年上升趋势,防控应以中小学校学生和幼托及散居儿童为主.
作者:任海燕;熊田甜;刘洁媛;吴泰顺;马智超 刊期: 2013年第01期