学术投稿

NLRP3、IL-33在LPS诱导的巨噬细胞中的表达及格列本脲对其表达的影响

梁海梅;于化鹏;夏虎;易丽;方泽葵;李忠丽

关键词:NLRP3, IL-33, LPS, 巨噬细胞, 格列本脲
摘要:目的 研究NLRP3、IL-33在脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型中的表达及格列本脲对其表达的影响.方法 培养RAW264.7巨噬细胞,将其分为空白对照(A)组、NLRP3抑制剂格列本脲预处理+LPS(B)组,LPS模型(C)组;B、C组采用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型,B组在LPS刺激前30 min给予格列本脲处理,空白对照组只给予培养基培养.采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测细胞中NLRP3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中1L-33的含量;四氮唑盐(MTT)法测定各组细胞的增殖能力.结果 C组中NLRP3蛋白表达均高于A组、B组(均P<0.05),B组NLRP3蛋白表达高于A组(P<0.05).C组IL-33含量比A、B组高(P<0.05),A组和B组之间差异无统计学意义.MTT试验中C组细胞增殖率高于A组、B组(P<0.05),而A、B组差异无统计学意义.结论 NLRP3、IL-33在LPS诱导RAW264.7的巨噬细胞中表达升高,而格列本脲干预后可抑制NLRP3的表达及IL-33的分泌.
热带医学杂志相关文献
  • 幽门螺杆菌脂蛋白Lpp20的表达纯化及其临床应用的初步研究

    目的 获得重组幽门螺杆菌(H.pylori)脂蛋白(rLpp20),并研究其在血清学诊断中的应用价值.方法 应用重组质粒pGEX-6P-2/Lpp20在大肠杆菌(E.coli)BL21中表达,并进行GST亲和层析纯化,用Western-blot检测纯化产物(rLpp20)的免疫反应性;以rLpp20为包被抗原建立EMSA法对200份患者血清标本进行特异性IgG抗体检测,并与幽门螺杆菌-IgG抗体检测试剂盒法进行比较.结果 成功表达的rLpp20(43 000 Mr),纯化产物可被幽门螺杆菌多克隆抗体及阳性血清识别;成功建立了以rLpp20为包被抗原的间接ELISA法,其灵敏度为91.0%,特异度为100%.与试剂盒法比较,两者的符合率为95.5%.结论 Lpp20具有良好的免疫反应性,能与幽门螺杆菌阳性血清特异性结合,有望应用于幽门螺杆菌血清学诊断.

    作者:靖吉芳;张艳 刊期: 2013年第05期

  • 儿童肠滴虫病9例临床分析

    目的 调查本地区儿童肠滴虫病的临床特点.方法 选择9例住院肠滴虫病患儿,分析其临床表现和血常规、大便常规、病原学检查、生化检查结果及治疗与转归情况.结果 9例患儿大便镜检均见到滴虫(+/HP~+++/HP),8例患儿伴有大便性状的改变.8例经过常规药物处理后好转,1例加用灭滴灵治疗后好转.结论 本地区肠滴虫病的儿童多为5岁以下,临床症状较轻,治疗效果较好.

    作者:伊鹏;古力娜尔喀斯木;艾克热木江;艾孜提艾力;刘虹 刊期: 2013年第05期

  • 氧化应激与非酒精性脂肪肝病的研究进展

    非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率逐年增多,但其发病机制尚未完全阐明.目前较为成熟的阐释是“二次打击”学说,该学说中涉及氧化应激机制.氧化应激在NAFLD发病过程中所起到的作用近年来也日益被关注.本文就氧化应激在NAFLD损伤机制中的作用进行综述,以期能加深对NAFLD发病机制的了解.

    作者:林秋香;周冬生;梁志清 刊期: 2013年第05期

  • 匹多莫德体外抑制弓形虫增殖作用的研究

    目的 评价匹多莫德对体外细胞培养弓形虫的抑制作用.方法 在96孔板中采用Hela细胞培养稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫RH株速殖子,实验设匹多莫德用药组、磺胺甲(噁)唑(SMX)用药组、SMX+匹多莫德联合用药组以及未用药对照组,观察比较绿色荧光弓形虫速殖子给药后48、72、96 h和120 h的增殖情况及活虫数.结果 与未用药组比较,SMX 1 mg/ml (P<0.01)、0.5 mg/ml(P<0.01)和0.25 mg/ml (P<0.01)剂量组在各时间点均可显著抑制弓形虫速殖子的增殖;匹多莫德25 μg/ml (P<0.05)、12.5 μg/ml (P<0.05)和6.25 μg/ml (P<0.05)剂量组均可一定程度地抑制弓形虫速殖子的增殖;SMX (0.25 mg/ml)+匹多莫德(25 μg/ml)活虫数低,与SMX 1 mg/ml单独使用对弓形虫速殖子的抑制作用相近(P=0.311).结论 匹多莫德具有一定的体外抑制弓形虫速殖子增殖的作用;匹多莫德与SMX联合应用既能降低SMX用量又能有效抑虫.

    作者:赵莹;吕芳丽 刊期: 2013年第05期

  • TIP30在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

    目的 探讨TIP30在脑胶质瘤中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测70例脑胶质瘤病人石蜡病理切片中TIP30蛋白表达,并分析其表达与临床病理特征之间的关系;同时,采用RT-PCR方法检测16例脑胶质瘤新鲜组织中TIP30基因的含量.结果 TIP30蛋白在36例(51.4%)脑胶质瘤标本和8例(88.9%)正常脑组织标本中的表达差异有统计学意义(P=0.04).TIP30的表达与患者的年龄、性别无关,与脑胶质瘤的病理类型、分级和肿瘤大小相关(P<0.05).单因素分析结果显示,TIP30阳性表达的脑胶质瘤病人总生存时间长于阴性表达组(P=0.003).RT-PCR结果亦表明,脑胶质瘤中TIP30基因含量低于正常脑组织(P=0.001).结论 TIP30在脑胶质瘤中表达下调,可能充当抑癌基因的角色,同时也可能是脑胶质瘤病人重要的预后指标之一.

    作者:胡莹莹;刘新会;罗荣城 刊期: 2013年第05期

  • 完善临床微生物免疫学检验实习教学的新举措探讨

    目的 临床微生物免疫学检验实习教学改革.方法 编写实习人员培训手册,建立网络虚拟实验室,建设实习人员基本理论和实践能力考试题库,制作操作技能签字式考核表格,对实习人员带教方式和考核方式进行探讨与实践.结果 参与教学改革的实习人员实践操作技能明显高于对照组.结论 采用规范化培训和签字式考核表格等新举措,可以明显提高实习人员实践操作技能.

    作者:裘宇容;王前;芮勇宇 刊期: 2013年第05期

  • 雷帕霉素联用阿托伐他汀减轻大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤

    目的 探讨雷帕霉素与阿托伐他汀联用对大鼠血管平滑肌细胞氧化应激损伤的影响.方法 取大鼠血管平滑肌细胞进行实验,随机分为空白对照组、DMSO组、阿托伐他汀(3μmol/L)组(A3组)、雷帕霉素50 nmol/L组(R50组)、雷帕霉素100 nmol/L组(R100组)、联用组(阿托伐他汀加雷帕霉素100 nmol/L).实验各组细胞给予相应药物干预2h后,加入三丁过氧化氢(t-BHP)刺激诱导氧化应激损伤,24 h后检测各项指标.结果 与空白对照组相比,DMSO组细胞SOD活力、MDA含量及β-Gal染色率差异无统计学意义,而其细胞增殖率降低(P<0.01).各药物干预组细胞SOD活力、MDA含量、β-Gal染色率和细胞增殖率与空白对照组和DMSO组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);而A3组和R50组比较上述指标差异无统计学意义,R100组与A3组和R50组比较上述指标差异有统计学意义(P均<0.05);联用组细胞SOD活力较其余各组明显升高(P<0.01),而MDA含量、β-Gal染色率和细胞增殖率较其余各组则均明显降低(P均<0.05).而内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在大鼠血管平滑肌细胞中无表达.结论 在氧化应激状态下,阿托伐他汀及雷帕霉素均具有抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖、抗氧化损伤的作用,从而维护血管平滑肌细胞的正常功能并能延缓其衰老,两药联用的效果优于两药单独应用.

    作者:傅国华;龚勋;吴赛珠;詹琼;董海德;赖文岩 刊期: 2013年第05期

  • 硝普钠联合小容量高晶体-高胶体混合液对兔心肺复苏血流动力学效果的影响

    目的 观察扩血管药物硝普钠联合小容量高晶体-高胶体混合液(HHS)对电击致室颤兔心肺复苏血流动力学的影响.方法 将18只新西兰大白兔随机分为肾上腺素组(A组)、硝普钠组(B组)和硝普钠联合高晶体-高胶体渗透压混合液组(C组),每组6只.心肺复苏术(CPR)开始后即刻应用上述3种药物,观察复苏中及复苏后动物的生理指标及状态.结果 CPR 30 min 3组的平均动脉压(MAP)、冠脉灌注压(CPP)比较差异有统计学意义(P<0.05).3组血pH值、二氧化碳分压(PCO2)、氧分压(PaO2)在复苏前后各时间点,差异无统计学意义(P>0.05).结论 与传统的收缩血管药物肾上腺素相比,硝普钠联合高晶体-高胶体渗透压混合液能有效改善心肺复苏的平均动脉压、冠脉灌注压等血流动力学效果.

    作者:汤颖;袁衡新 刊期: 2013年第05期

  • JNK通路介导LPS诱导脐静脉内皮细胞PD-L1表达的实验研究

    目的 探讨脂多糖(LPS)刺激脐静脉内皮细胞表达程序性死亡因子配体1 (PD-L1)与C-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路的关系.方法 体外培养脐静脉内皮细胞,按2× 107/ml种植在6孔培养板中,在无血清培养基中静止24h后随机分成阴性对照组、LPS组及SP600125+LPS组,其中阴性对照组不加干预因素;LPS组先用DMSO(0.1%V/V)作用1h,再用LPS(1.0 μg/ml)刺激24 h;SP600125+LPS组先用SP600125(20 μmol/L)作用1h后再用LPS刺激24 h,Western-blot测定各组PD-L1及P-JNK蛋白表达.结果 SP600125 +LPS组PD-L1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);而SP600125+LPS组和对照组PD-L1蛋白表达与LPS组比较均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).SP600125+ LPS组细胞P-JNK蛋白表达与对照组和LPS组比较均减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LPS可能通过JNK信号通路调控脐静脉内皮细胞表达PD-L1.

    作者:龙日;刘映峰;严全能;吕自明;缪绯;梁欣伟 刊期: 2013年第05期

  • 缺血后适应中心肌营养素1对心肌细胞的保护作用研究

    目的 探讨心肌营养素1 (CT-1)在缺血后适应中对心肌细胞的保护作用机制及参与的信号通路.方法 选择H9C2乳鼠心肌细胞株,实验分为对照组、缺氧复氧组、缺氧后适应组、缺氧后适应+CT-1组、缺氧后适应+CT-1+Akt阻断剂组、缺氧后适应+CT-1+二甲基亚砜组,MTS法检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Akt蛋白表达,Q-PCR检测Bad mRNA的表达.结果 缺氧复氧组较对照组细胞凋亡率明显增加,存活率降低,缺氧后适应组细胞比缺氧复氧组凋亡率低,存活率增加,缺氧后适应+CT-1组细胞比缺氧后适应组凋亡率进一步降低,存活率进一步增加,Akt磷酸化蛋白水平明显升高,Bad mRNA表达下调,加入Akt阻滞剂(A6730)后,这种保护作用被抑制.结论 心肌营养素1参与激活Akt信号通路协同缺氧后适应减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞起保护作用.

    作者:赵鑫;缪绯;周贻军;刘映峰 刊期: 2013年第05期

  • 毛萼乙素诱导肝细胞癌细胞凋亡的实验研究

    目的 研究毛萼乙素抑制肝癌肿瘤细胞增殖的机制.方法 利用MTT实验检测毛萼乙素对肝癌肿瘤细胞株增殖的影响,采用Hoechst染色法检测毛萼乙素是否能引起人肝癌细胞株HepG2的凋亡,采用Western-blotting检测凋亡相关蛋白Bax和PARP的表达水平,免疫荧光技术检测Bax的表达水平.结果 毛萼乙素可以明显抑制肝癌细胞的生长,Hoechst染色实验发现毛萼乙素可以诱导肝癌细胞的凋亡,Western-blotting实验检测到实验组Bax高表达,凋亡蛋白PARP的剪切带与对照组相比也明显增强.免疫荧光实验也显示,实验组Bax高表达.结论 毛萼乙素可通过升高促凋亡蛋白Bax的表达,促进肝癌细胞株HepG2的凋亡,从而抑制其增殖.

    作者:白海燕;谢丹;廖奕佶;买世娟;阳桂香;普建新;李朝晖 刊期: 2013年第05期

  • 应用PCR技术研究白纹伊蚊的吸血习性

    目的 应用PCR技术鉴定登革热传播媒介白纹伊蚊胃血来源,研究白纹伊蚊的吸血习性.方法 在实验室条件下,将6种动物(鸡、猫、狗、鸽、野鼠、小鼠)分别放入6个小玻璃房,同时,将6种动物放入一个大玻璃房,然后放入已经饥饿18h的白纹伊蚊雌蚊,3h后采集吸血蚊,应用PCR技术鉴定白纹伊蚊胃血来源.现场调查则通过紫外诱蚊灯和BG-Sentinel Trap采集吸血蚊,利用实验室建立的PCR体系鉴定白纹伊蚊胃血来源.结果 在不同空间内,白纹伊蚊对野鼠的平均吸血率高,为44.45%,其余依次为鸡、猫、小鼠、狗、鸽(38.27%、36.53%、35.70%、34.94%、24.75%).在同一空间内,白纹伊蚊对鸡、小鼠、猫、野鼠、狗、鸽的吸血率依次为12.36%、7.09%、6.41%、4.81%、2.52%、1.60%.在现场收集到的饱血白纹伊蚊共13只,其中吸狗血的有7只,吸人血的白纹伊蚊有2只,多重吸血(小鼠和猫)的白纹伊蚊有1只.结论 PCR技术可鉴定白蚊伊蚊胃血来源,结果稳定可靠;白纹伊蚊不仅嗜吸人血,也可兼吸多种常见的动物血.

    作者:帅淑芬;李奕基;蔡松武;段金花;陈晓光 刊期: 2013年第05期

  • mtDNA缺失细胞抵抗模拟日光照射诱导的凋亡

    目的 探讨线粒体DNA对模拟日光照射诱导凋亡的作用.方法 实验分照射组和假照射组,照射组以3.39J/cm2+ 177 mJ/cm2的剂量照射Rho206细胞和143B细胞,假照射组作同样处理但不照光.6h时检测活性氧簇(ROS)产量;16 h后观察其细胞形态,检测凋亡率.结果 照射组Rho206细胞、143B细胞的凋亡率和ROS的产量与假照射组比较明显上升,差异有统计学意义(P<0.05),照射组Rho206细胞的凋亡率和ROS的产量与143B细胞的凋亡率和ROS的产量比较明显下降(P<0.05),而假照射组两细胞凋亡率和ROS的产量比较差异无统计学意义.结论 线粒体DNA缺失细胞对模拟日光照射诱导的凋亡作用的抵抗可能与ROS生成减少有关.

    作者:陈胡林;刘仲荣;何威;王儒鹏;范秀针;朱英杰;赵敏玲 刊期: 2013年第05期

  • 补中益气丸对小鼠乳腺癌化疗相关性疲劳的影响

    目的 探讨补中益气丸对乳腺癌化疗相关性疲劳的作用及其机制.方法 将小鼠随机分为正常(NC)组和待处理组.将待处理组小鼠建成荷4T1乳腺癌小鼠模型,并将其随机分为肿瘤对照(TC)组、紫杉醇(PTX)组、补中益气丸(BZYQ)组、补中益气丸+紫杉醇(BZYQ+PTX)组.BZYQ 1.5 g/kg灌胃给药,每天1次;PTX 10 mg/kg腹腔注射,每2天1次.给药21 d,观察小鼠体重、肿瘤体积、力竭游泳时间指标的变化,并检测肌肉SOD、MDA水平.结果 与实验开始前比较,给药后第3周时NC组和BZYQ+PTX组小鼠的体重明显增加(P<0.05).与TC组比较,给药第9d开始,BZYQ+PTX组小鼠的肿瘤体积明显变小(P<0.05),给药第18d时,PIX组小鼠的肿瘤体积变小(P<0.05);BZYQ+PTX组和PTX组两组小鼠的瘤重均变小(P<0.05~0.01).与NC组比较,PyTX组小鼠的平均力竭游泳时间则在给药后第1、2、3周均明显下降(P<0.05~0.01),PTX+BZYQ组小鼠的平均力竭游泳时间仅在给药第1周时下降(P<0.01),第2、3周时较PTX组小鼠明显延长(P<0.01).与TC组比较,PTX组SOD值明显降低,而BZYQ+PTX组的SOD值较PTX组明显升高;PTX组MDA浓度明显升高,而BZYQ+PTX组的MDA浓度较PTX组明显降低.结论 补中益气丸可能通过抑制氧化应激损伤发挥抗乳腺癌化疗相关性疲劳的作用.

    作者:欧阳明子;谭为;刘艳艳;黄颖;肖雅;程静茹;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第05期

  • 江门市儿童手足口病危险因素病例对照研究

    目的 了解江门市手足口病(HFMD)发病的危险因素,为制定有效的防控措施提供科学依据.方法 2011年7-8月,选择常住江门且临床诊断为手足口病的非重症患儿62例和未患过手足口病的儿童126名,采用病例对照研究方法,利用自制问卷,调查分析手足口病的影响因素.结果 单因素分析结果显示,大门口10 m范围内可见垃圾、大门口视野可见苍蝇、卫生间使用情况、近两周邻居/玩伴患病以及发病前两周医疗机构暴露情况可能是手足口病发病的危险因素;母亲文化程度可能是发病的保护性因素.多因素分析结果显示,手足口病发病影响因素为发病前两周医疗机构暴露(OR=24.982,P<0.05)、大门口10 m范围内可见垃圾(OR=5.246,P=0.002)、大门口视野可见苍蝇(OR=1.565,P=0.004)和卫生间使用情况(OR=2.373,P=0.006).结论 在江门市预防HFMD重点应加强健康宣教以改善不良卫生环境,同时应采取隔离病例等有效措施减少交叉感染.

    作者:杨玉芳;王立华;陈茂余;洪海波;许坚锋;刘鹰航 刊期: 2013年第05期

  • 慢性丙型肝炎患者对NS3/4A蛋白酶抑制剂预存耐药的研究

    目的 对我国南方184例无抗病毒治疗史的慢性丙型肝炎患者进行NS3/4A蛋白酶抑制剂相关耐药位点检测.方法 NS3/4A蛋白酶抑制剂相关的耐药位点分析采用自行设计型别特异性引物行巢式PCR,PCR产物经纯化后采用直接测序法鉴定.结果 184例样本中有162例扩增成功,其中125例(77.16%)患者共检出266个变异位点.HCV 1b型A156S变异率为18.33%,V170I为16.67%;HCV 2a型V36L、Q80G、V170I变异率为100%,A156S为64.29%;HCV 6a型Q80K变异率为95.45%,V170I为98.86%.结论 未使用抗病毒药的慢性丙型肝炎患者对NS3/4A蛋白酶抑制剂也存在预存耐药,变异率因HCV基因型而不同.1b型发生变异较少,HCV 2a型及6a型普遍发生变异.

    作者:刘莹;麦丽;蔡庆贤;郑玉宝;赵志新 刊期: 2013年第05期

  • 抗HIV-1治疗研究进展

    过去的十几年全球在艾滋病的预防和控制方面取得了巨大成就,但是艾滋病仍然是全球一个严重的公共卫生问题,目前尚无安全、有效的抗HIV疫苗和特效治疗AIDS的药物,未来将可能仍是引起人群严重死亡的疾病之一.本文总结了近年来艾滋病的不同治疗途径,以及新近发现的一种整合素α437在HIV感染过程中的作用.

    作者:王雪雯 刊期: 2013年第05期

  • 三种方法检测轮状病毒感染的比较研究

    目的 比较荧光PCR、ELISA、胶体金法对儿童轮状病毒感染的检测效果,为合理选择实验室检测方法提供依据.方法 采集广州市儿童医院门诊及住院腹泻患儿粪便标本90份,分别采用荧光PCR、ELISA、胶体金3种方法诊断轮状病毒感染,检测结果应用SPSS17.0软件包进行分析.结果 ELISA与荧光PCR法检测轮状病毒感染差异无统计学意义(P>0.05),两种方法具有较好的吻合度(Kappa=0.888,P<0.05);胶体金法与荧光PCR法检测轮状病毒感染差异无统计学意义(P>0.05),两种方法检测吻合度一般(Kappa=0.526,P<0.05);以荧光PCR检测为标准,ELISA法检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、总符合率分别为100%、88.1%、90.6%、100%、90.0%,胶体金法检测分别为100%、66.7%、74.6%、80.0%、76.6%.结论 ELISA法、胶体金法均与荧光PCR法诊断结果较一致,ELISA法诊断效能优于胶体金法,胶体金法敏感、快速,单独标本可随时检测,适合急诊、基层卫生机构.

    作者:郭敏;肖密丝;陈焕辉;赵明奇;朱冰 刊期: 2013年第05期

  • Pin1基因-842位点多态性与阿尔茨海默病发病相关性的Meta分析

    目的 综合评价Pin1基因-842位点多态性与阿尔茨海默病易感性的关系.方法 检索CNKI和Medline数据库,获得有关Pin1基因-842位点多态性与阿尔茨海默病易感性关系的研究结果,并在不同对比模型中进行Meta分析.结果 本次Meta分析共纳入6项研究,累计病例1 750例,对照者1 626名.基因变异在CC VS GG模型中,OR值为1.42 (95%CI:0.71~2.84),P值为0.32;基因变异在GC VS GG模型中,OR值为1.05 (95%CI:0.88~1.26),P值为0.58;在CC+GC VS GG模型中,OR值为1.24(95%CI:0.86~ 1.79),P值为0.25.结论 尚无足够证据证明Pin1基因-842位点多态性与阿尔茨海默病易感性有关.

    作者:邱金华;黄国良;何志巍 刊期: 2013年第05期

  • 黄芪注射液联合ACEI或ARB类药物治疗糖尿病肾病Ⅲ期的Meta分析

    目的 评价黄芪注射液联合ACEI或ARB类药物治疗2型糖尿病肾病Ⅲ期的有效性及安全性.方法 根据Cochrane协作网系统评价方法,检索中文期刊全文数据库(1979-2012)、中国生物医学期刊引文数据库(1994-2012)、万方数据库(1982-2012)、维普中文期刊数据库(1989-2012)等,全面收集符合标准的随机对照试验(RCT),采用Jadad量表评价文献质量,应用RevMan 5.1软件进行Meta分析.结果 共纳入20篇RCT文献,共计1 348例DN Ⅲ期患者.Meta分析结果显示,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联用,在降低DN Ⅲ期患者.24 h尿微量白蛋白排泄率(24 h ALBU)、24 h尿蛋白定量(24 h TPU)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)方面优于单用ACEI或ARB类药物,纳入的文献均未报道黄芪注射液的不良反应.结论 与单用ACEI或ARB类药物相比,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联合应用治疗DN Ⅲ期效果更好,且无明显的不良反应.由于纳入文献质量较低,还有待大样本、高质量、多中心、随机、双盲的对照试验来证实.

    作者:刘玉;周琳;肖雅;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第05期

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