汤颖；袁衡新
目的 观察人脐静脉内皮细胞株ECV-304对金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染的反应.方法 常规方法制备金黄色葡萄球菌悬液,以1∶1、1∶10和1∶100的感染复数感染ECV-304细胞1、3、6、12 h和24 h后,估算细胞吞噬细菌数,采用Hoechst33258染色,DNA ladder及细胞凋亡相关因子RT-PCR检测细菌感染后细胞凋亡情况.结果 金黄色葡萄球菌感染复数越高,细胞内吞噬的活细菌数越多.金黄色葡萄球菌感染导致ECV-304细胞发生凋亡,凋亡具有时间依赖性,随着感染时间的延长,凋亡小体增多,DNA片段也随之增多.抗凋亡细胞因子Bcl2 mRNA表达量随着感染时间的延长下降,而促凋亡细胞因子Bax和Caspase-3表达量增多.结论 金黄色葡萄球菌感染ECV-304细胞后,通过下调抗凋亡细胞因子Bcl2、上调促凋亡细胞因子Bax和Caspase-3诱导细胞凋亡.金黄色葡萄球菌感染内皮细胞的可能致病机制为临床治疗提供了实验依据.
作者：熊传银；罗庆华；胡汉斌；毕爱芬；裴德翠 刊期： 2013年第05期
目的 研究NLRP3、IL-33在脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型中的表达及格列本脲对其表达的影响.方法 培养RAW264.7巨噬细胞,将其分为空白对照(A)组、NLRP3抑制剂格列本脲预处理+LPS(B)组,LPS模型(C)组；B、C组采用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型,B组在LPS刺激前30 min给予格列本脲处理,空白对照组只给予培养基培养.采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测细胞中NLRP3蛋白的表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中1L-33的含量；四氮唑盐(MTT)法测定各组细胞的增殖能力.结果 C组中NLRP3蛋白表达均高于A组、B组(均P＜0.05),B组NLRP3蛋白表达高于A组(P＜0.05).C组IL-33含量比A、B组高(P＜0.05),A组和B组之间差异无统计学意义.MTT试验中C组细胞增殖率高于A组、B组(P＜0.05),而A、B组差异无统计学意义.结论 NLRP3、IL-33在LPS诱导RAW264.7的巨噬细胞中表达升高,而格列本脲干预后可抑制NLRP3的表达及IL-33的分泌.
作者：梁海梅；于化鹏；夏虎；易丽；方泽葵；李忠丽 刊期： 2013年第05期
目的 探讨线粒体DNA对模拟日光照射诱导凋亡的作用.方法 实验分照射组和假照射组,照射组以3.39J/cm2+ 177 mJ/cm2的剂量照射Rho206细胞和143B细胞,假照射组作同样处理但不照光.6h时检测活性氧簇(ROS)产量；16 h后观察其细胞形态,检测凋亡率.结果 照射组Rho206细胞、143B细胞的凋亡率和ROS的产量与假照射组比较明显上升,差异有统计学意义(P＜0.05),照射组Rho206细胞的凋亡率和ROS的产量与143B细胞的凋亡率和ROS的产量比较明显下降(P＜0.05),而假照射组两细胞凋亡率和ROS的产量比较差异无统计学意义.结论 线粒体DNA缺失细胞对模拟日光照射诱导的凋亡作用的抵抗可能与ROS生成减少有关.
作者：陈胡林；刘仲荣；何威；王儒鹏；范秀针；朱英杰；赵敏玲 刊期： 2013年第05期
目的 对2009-2012年中山市流行性感冒(流感)监测结果进行分析,了解流感的流行趋势和病毒型别,为制定流感防控策略提供科学依据.方法 收集中山市流感样病例(ILI)监测、病原学监测以及流感暴发疫情监测资料进行分析,将ILI就诊指数(ILI％=门、急诊ILI就诊人数/门、急诊就诊病例总数×100％)和流感病毒检出阳性率作为分析指标.结果 2009年流感病毒较为活跃,出现2次ILI就诊高峰,第1次高峰由甲(A)型H3N2亚型所致,第2次高峰由新甲(A)型H1N1亚型所致；2009年甲流大流行之后,2010年流感流行的强度迅速降低,处于相对平稳状态,上半年以B型流感病毒为主,下半年以甲(A)型H3N2亚型为主；2011-2012年新甲(A)型H1N1亚型、B型流感病毒和甲(A)型H3N2亚型交替流行,ILI就诊高峰均发生在春夏季；对全市4个监测年度各周的ILI％和病原学监测阳性率进行秩相关检验(r=0.701,P＜0.01),结果呈正相关；全市报告流感暴发疫情11起,报告发病共计580例,平均罹患率为1.25％,主要发生在中小学校.结论 4个监测年度的优势毒株亚型之间呈交替变化的趋势并有一定的规律,ILI流行强度与流感病毒活动趋势一致.
作者：陈秀云；岑永庄；汪涛；舒波；王曼；陈雪琴 刊期： 2013年第05期
目的 筛选子宫内膜不同时期基因表达研究中稳定的内参基因.方法 招募月经周期规律的20～40岁育龄期妇女,分别于黄体期(11人)和增殖期(9人)抽吸入选者的子宫内膜,比较这两个阶段候选内参基因ATP5B、B2M、CYC1、RPL13A、SDHA、TOP1、YWHAZ、18S rRNA、ACTB、GAPDH的稳定性,选择稳定的基因作为合适的内参基因.结果 CYC1和RPL13A是增殖期内膜稳定的内参基因,而YWHAZ和ACTB则是黄体期内膜合适的内参基因.结论 确定不同时期子宫内膜的内参基因为研究其基因表达和相关功能奠定了基础.
作者：黄兴芳；梁晓燕 刊期： 2013年第05期
目的 分析获得性血友病A(AHA)诊治的临床特点,探讨国内外治疗该病的差异.方法 整理分析2007-2012年本院收治的9例AHA患者资料,对比近5年国内AHA相关文献及欧洲获得性血友病登记管理组织(EACH2)的研究结果,分析国内外AHA确诊前病程与完全缓解率(CR)的差异.结果 本组9例及国内文献100例AHA患者确诊前病程均延迟于EACH2的研究报道,CR率也均低于后者,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 我国AHA患者治疗状况与欧洲国家存在差异,加大知识宣传,降低漏诊、误诊率可能有助于缩短差距.
作者：马庆辉；李含；李强；刘阳；秦芳梅；张钰；范志平；孙竞 刊期： 2013年第05期
目的 评价黄芪注射液联合ACEI或ARB类药物治疗2型糖尿病肾病Ⅲ期的有效性及安全性.方法 根据Cochrane协作网系统评价方法,检索中文期刊全文数据库(1979-2012)、中国生物医学期刊引文数据库(1994-2012)、万方数据库(1982-2012)、维普中文期刊数据库(1989-2012)等,全面收集符合标准的随机对照试验(RCT),采用Jadad量表评价文献质量,应用RevMan 5.1软件进行Meta分析.结果 共纳入20篇RCT文献,共计1 348例DN Ⅲ期患者.Meta分析结果显示,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联用,在降低DN Ⅲ期患者.24 h尿微量白蛋白排泄率(24 h ALBU)、24 h尿蛋白定量(24 h TPU)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)方面优于单用ACEI或ARB类药物,纳入的文献均未报道黄芪注射液的不良反应.结论 与单用ACEI或ARB类药物相比,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联合应用治疗DN Ⅲ期效果更好,且无明显的不良反应.由于纳入文献质量较低,还有待大样本、高质量、多中心、随机、双盲的对照试验来证实.
作者：刘玉；周琳；肖雅；罗仁；赵晓山 刊期： 2013年第05期
目的 研究染料木黄酮(genistein,Gen)对油酸(oleic acid,OA)诱导的脂肪变HepG2细胞内HMG-CoA还原酶水平以及糖、脂水平的影响.方法 将HepG2细胞在含有0～50 μmol/L的Gen、0.5 mmol/L的OA的培养基内培养24 h,收集细胞分别用试剂盒测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;同时,收集培养基上清液,用试剂盒测定葡萄糖消耗量.结果 Gen可降低细胞内HMG-CoA还原酶的水平和细胞对葡萄糖的消耗,提高细胞内TC和HDL-C含量.结论 Gen能改善OA诱导的脂肪变HepG2细胞内的糖脂代谢情况.
作者：吴丹；王宇琦；邓颖勋；黎虎；蒋卓勤 刊期： 2013年第05期
目的 获得重组幽门螺杆菌(H.pylori)脂蛋白(rLpp20),并研究其在血清学诊断中的应用价值.方法 应用重组质粒pGEX-6P-2/Lpp20在大肠杆菌(E.coli)BL21中表达,并进行GST亲和层析纯化,用Western-blot检测纯化产物(rLpp20)的免疫反应性；以rLpp20为包被抗原建立EMSA法对200份患者血清标本进行特异性IgG抗体检测,并与幽门螺杆菌-IgG抗体检测试剂盒法进行比较.结果 成功表达的rLpp20(43 000 Mr),纯化产物可被幽门螺杆菌多克隆抗体及阳性血清识别；成功建立了以rLpp20为包被抗原的间接ELISA法,其灵敏度为91.0％,特异度为100％.与试剂盒法比较,两者的符合率为95.5％.结论 Lpp20具有良好的免疫反应性,能与幽门螺杆菌阳性血清特异性结合,有望应用于幽门螺杆菌血清学诊断.
作者：靖吉芳；张艳 刊期： 2013年第05期
目的 探讨原花青素(OPC)对C57BL/6J小鼠血管内皮舒张功能的影响及物质基础.方法 ①将内皮功能紊乱的C57BL/6J小鼠分为对照组、0.1％ w/w原花青素组、抗生素组、抗生素+0.1％ w/w原花青素组,干预4周后观察小鼠胸主动脉舒张功能；②采用高效液相色谱法(HPLC)测定OPC (100 mg/kg)灌胃后小鼠60 min血浆中OPC以及其代谢物原儿茶酸(PCA)含量；③将内皮功能紊乱的C57BL/6J小鼠分为抗生素组、抗生素+0.1％ w/wOPC、抗生素+0.1％ w/w OPC+ 0.003％w/w PCA,干预4周后观察小鼠胸主动脉舒张功能.结果 ①OPC干预可提高小鼠动脉舒张功能,但该效应被抗生素阻断；②OPC灌胃小鼠60 min后,HPLC法测得血浆PCA浓度为(10.6± 1.8) μmol/L,但OPC未检出；③抗生素阻断OPC介导的小鼠动脉舒张功能可被其代谢物PCA部分恢复.结论 原花青素可以改善血管内皮舒张功能,其物质基础可能与其代谢物PCA有关.
作者：高渊；王雅慧；严啸；李丹；凌文华；王冬亮 刊期： 2013年第05期
目的 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD法)建立同时测定广州水果中果糖、葡萄糖和蔗糖的方法.方法 高效液相色谱条件为Kromasil NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,25℃柱温,流动相为乙腈-水(80/20,v/v)溶液,流速为1.5 ml/min；蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为85C,空气流速为2.5 ml/min.结果 果糖、葡萄糖和蔗糖的线性范围分别为0.6～10.0 g/L、1.0～20.O g/L、0.6～20.0 g/L;样品中3种糖的加标回收率分别为95.36％、98.44％、97.76％.结论 首次建立了同时测定水果中果糖、葡萄糖、蔗糖的HPLC-ELSD法,为建立广州水果糖含量数据库提供了一种准确、灵敏、快速的分析方法.
作者：毛钰蘅；杨燕；李丹；凌文华 刊期： 2013年第05期
目的 研究新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后自噬水平的变化规律,通过对Caspase-3的检测探讨自噬水平变化对细胞凋亡的影响.方法 将实验动物分为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组,采用Rice法建立HIBD模型,3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组于造模后0.5 h腹腔注射3-甲基腺嘌呤及雷帕霉素.应用免疫组织荧光化学法检测损伤侧大脑海马及皮层组织自噬相关蛋白Beclin 1的表达,Western-blot法检测Beclin 1表达变化规律,免疫组织化学法检测各组Caspase-3的表达.结果 免疫组织荧光化学检测结果显示,缺氧缺血性脑损伤后能激活自噬现象发生.Western-blot检测结果显示,HIBD后2 h Beclin 1蛋白表达开始增加,24 h达到高峰,持续到168 h.免疫组织化学检测结果显示,3-甲基腺嘌呤组时间点Caspase-3阳性表达显著升高,雷帕霉素组Caspase-3阳性表达显著下降.结论 新生大鼠HIBD模型能激活自噬现象发生,自噬水平增高可抑制细胞凋亡,自噬水平降低可增加细胞凋亡.
作者：梁云凤；李宏；方素珍；周细中；杜江 刊期： 2013年第05期
目的 探讨脂多糖(LPS)刺激脐静脉内皮细胞表达程序性死亡因子配体1 (PD-L1)与C-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路的关系.方法 体外培养脐静脉内皮细胞,按2× 107/ml种植在6孔培养板中,在无血清培养基中静止24h后随机分成阴性对照组、LPS组及SP600125+LPS组,其中阴性对照组不加干预因素；LPS组先用DMSO(0.1％V/V)作用1h,再用LPS(1.0 μg/ml)刺激24 h；SP600125+LPS组先用SP600125(20 μmol/L)作用1h后再用LPS刺激24 h,Western-blot测定各组PD-L1及P-JNK蛋白表达.结果 SP600125 +LPS组PD-L1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；而SP600125+LPS组和对照组PD-L1蛋白表达与LPS组比较均明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).SP600125+ LPS组细胞P-JNK蛋白表达与对照组和LPS组比较均减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 LPS可能通过JNK信号通路调控脐静脉内皮细胞表达PD-L1.
作者：龙日；刘映峰；严全能；吕自明；缪绯；梁欣伟 刊期： 2013年第05期
目的 探讨心肌营养素1 (CT-1)在缺血后适应中对心肌细胞的保护作用机制及参与的信号通路.方法 选择H9C2乳鼠心肌细胞株,实验分为对照组、缺氧复氧组、缺氧后适应组、缺氧后适应+CT-1组、缺氧后适应+CT-1+Akt阻断剂组、缺氧后适应+CT-1+二甲基亚砜组,MTS法检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Akt蛋白表达,Q-PCR检测Bad mRNA的表达.结果 缺氧复氧组较对照组细胞凋亡率明显增加,存活率降低,缺氧后适应组细胞比缺氧复氧组凋亡率低,存活率增加,缺氧后适应+CT-1组细胞比缺氧后适应组凋亡率进一步降低,存活率进一步增加,Akt磷酸化蛋白水平明显升高,Bad mRNA表达下调,加入Akt阻滞剂(A6730)后,这种保护作用被抑制.结论 心肌营养素1参与激活Akt信号通路协同缺氧后适应减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞起保护作用.
作者：赵鑫；缪绯；周贻军；刘映峰 刊期： 2013年第05期
目的 应用PCR技术鉴定登革热传播媒介白纹伊蚊胃血来源,研究白纹伊蚊的吸血习性.方法 在实验室条件下,将6种动物(鸡、猫、狗、鸽、野鼠、小鼠)分别放入6个小玻璃房,同时,将6种动物放入一个大玻璃房,然后放入已经饥饿18h的白纹伊蚊雌蚊,3h后采集吸血蚊,应用PCR技术鉴定白纹伊蚊胃血来源.现场调查则通过紫外诱蚊灯和BG-Sentinel Trap采集吸血蚊,利用实验室建立的PCR体系鉴定白纹伊蚊胃血来源.结果 在不同空间内,白纹伊蚊对野鼠的平均吸血率高,为44.45％,其余依次为鸡、猫、小鼠、狗、鸽(38.27％、36.53％、35.70％、34.94％、24.75％).在同一空间内,白纹伊蚊对鸡、小鼠、猫、野鼠、狗、鸽的吸血率依次为12.36％、7.09％、6.41％、4.81％、2.52％、1.60％.在现场收集到的饱血白纹伊蚊共13只,其中吸狗血的有7只,吸人血的白纹伊蚊有2只,多重吸血(小鼠和猫)的白纹伊蚊有1只.结论 PCR技术可鉴定白蚊伊蚊胃血来源,结果稳定可靠；白纹伊蚊不仅嗜吸人血,也可兼吸多种常见的动物血.
作者：帅淑芬；李奕基；蔡松武；段金花；陈晓光 刊期： 2013年第05期
目的 探讨脂多糖(LPS)诱导人气道上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)的表达情况.方法 体外培养人气道上皮细胞,将其随机分为阴性对照组、LPS组及Caspase-1特异性抑制剂(Ac-YVAD-cmk) +LPS组(简称cmk+LPS组).采用四氮唑盐(MTT)法测定各组细胞的增殖能力；实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞Caspase-1mRNA的表达水平；Western-blot测定各组细胞Caspase-1蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞上清液白介素1β(IL-1β)水平.结果 3组细胞增殖差异无统计学意义(P＞0.05)；LPS组Caspase-1 mRNA的表达水平较cmk+LPS组和对照组增高,3组间差异有统计学意义(P＜0.05); LPS组Caspase-1蛋白的表达明显高于对照组和cmk+LPS组,3组间差异有统计学意义(P＜0.05)；LPS组IL-1β水平高于对照组和cmk+LPS组,3组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NLRP3炎症复合体诱导的Caspase-1活化参与人气道上皮细胞LPS的致敏过程,并促进下游IL-1β的生成.
作者：席云祝；于化鹏；樊慧珍；邓火金；夏虎；龚雨新；蔡绍曦 刊期： 2013年第05期
目的 探讨氧化性低密度脂蛋白(oxLDL)对肝细胞内脂肪积累及SIRT1-LXR信号通路的影响.方法 实验分为对照组、高脂(HF)组、oxLDL组、HF+oxLDL组和能量限制(CR)组.将HepG2细胞培养于DMEM培养基中,培养48 h后用油红O染色法定性观察和测定各组OD值、细胞内脂肪积累,并用RT-PCR法检测各组SIRT1、肝X受体(LXR)及其靶基因ATP结合盒转运蛋白G1 (ABCG1)的表达水平.结果 与对照组比较,HF组、oxLDL组和HF+oxLDL组细胞内脂肪含量均增加(P＜0.05),CR组脂肪含量下降(P＜0.05).oxLDL组与对照组比较,SIRT1、LXRα和ABCG1 mRNA表达均增加,其中SIRT1和LXRα差异有统计学意义；HF组SIRT1和LXRα表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而ABCG1显著降低(P＜0.05)；HF+oxLDL组LXRα和ABCG1表达均显著降低(P＜0.05),而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义；CR组LXRα和ABCG1表达均显著增加(P＜0.05),然而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义.结论 oxLDL可能会促进脂肪肝的形成.
作者：黄正亮；郭貔；周小辉；傅玉才 刊期： 2013年第05期
目的 研究毛萼乙素抑制肝癌肿瘤细胞增殖的机制.方法 利用MTT实验检测毛萼乙素对肝癌肿瘤细胞株增殖的影响,采用Hoechst染色法检测毛萼乙素是否能引起人肝癌细胞株HepG2的凋亡,采用Western-blotting检测凋亡相关蛋白Bax和PARP的表达水平,免疫荧光技术检测Bax的表达水平.结果 毛萼乙素可以明显抑制肝癌细胞的生长,Hoechst染色实验发现毛萼乙素可以诱导肝癌细胞的凋亡,Western-blotting实验检测到实验组Bax高表达,凋亡蛋白PARP的剪切带与对照组相比也明显增强.免疫荧光实验也显示,实验组Bax高表达.结论 毛萼乙素可通过升高促凋亡蛋白Bax的表达,促进肝癌细胞株HepG2的凋亡,从而抑制其增殖.
作者：白海燕；谢丹；廖奕佶；买世娟；阳桂香；普建新；李朝晖 刊期： 2013年第05期
目的 分析惠州市生产加工环节食品质量状况,为提出有针对性的卫生监管措施提供依据.方法 对惠州市2007-2012年质量计量监督检测所抽检的生产加工食品的检验数据进行分类、对比,分析影响质量的因素.结果 2007-2012年间,抽检生产加工食品21 891批次,其中合格18 356批次,批次合格率为83.85％;食品标签合格率为95.26％,食品内在质量合格率为88.59％.食品内在质量不合格的原因主要是微生物指标超标,不合格率为6.03％；其次为理化指标,不合格率为5.04％；理化及微生物指标均不合格率为0.34％.食品种类中,豆制品、蔬菜制品和饮料的不合格率较高.结论 惠州市生产加工环节食品质量总体良好,但仍应加强微生物指标的监测,并提高食品标签的规范程度.
作者：邓晖；陈清 刊期： 2013年第05期
目的 探讨高分辨率熔解曲线法(HRM)检测中国5种常见β-地中海贫血突变的可行性.方法 应用HRM法检测中国5种常见β-地中海贫血突变,检测结果为纯合子的标本进行基因测序验证.结果 HRM法能准确区分-28(c.-78A＞G)、Codon17 (c.52A＞T)、Codons41/42 (c.126_129delCTTT)、Codons71/72 (c.216_217insA)及IVS-Ⅱ-654(c.316_197C＞T)的纯合、杂合突变以及野生型标本,测序结果与HRM法检测结果一致.结论 HRM法检测中国5种常见β-地中海贫血突变具有简便、快速、灵敏度高等优点,有望成为临床尤其是产前诊断领域β-地中海贫血突变筛查的优选方法.
作者：陈汉彪；尹爱华；张彦；何天文 刊期： 2013年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
