何金洋;江远;刘亚敏;郭兴伯;符林春
目的 探讨p38信号通路在丙泊酚抑制呼吸机所致肺损伤(VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用.方法 将32只健康SD大鼠随机分为4组,每组8只.对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(VT)为8 ml/kg;大潮气量通气组(C组)VT为30 ml/kg;大潮气量通气+丙泊酚组(D组)VT为30 ml/kg,同时静脉注射丙泊酚8 mg/(kg·h).机械通气4h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白含量以及p38的激酶活性,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.58±0.46) g/L、白细胞计数(112.05±21.33)×107/L、肺W/D比值(8.25±0.92)、MPO活性(3.08±0.85) U/g、HMGB1蛋白(0.43±0.13)和mRNA( 0.30±0.08)表达以及p38激酶活性(0.52±0.11)均明显增加(P<0.05);与C组相比,D组上述各项指标的变化均明显降低(P<0.05).结论 丙泊酚可改善VILI肺内炎症反应,可能与通过p38信号通路抑制HMGB1蛋白和mRNA的表达有关.
作者:程傲冰;丁宁;许立新;佘守章 刊期: 2012年第07期
目的 探讨应变率成像(SRI)对急性前壁ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者心肌存活的早期预测价值.方法 行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的前壁STEMI患者在术后测量室间隔心尖段的SRI指标,当收缩末期应变(SES)≥-7%时则纳入研究,并于6个月后复查,评价急性期SRI指标对心肌存活的预测价值.结果 46例前壁STEMI患者纳入研究,其中25例在6个月时SES<-7%,我们定义为存活心肌;21例随访时SES≥-7%,我们定义为失活心肌.存活心肌组SES、收缩后应变(SPS)、收缩期应变率(SRS)及舒张早期应变率(SRE)等指标明显优于失活心肌组(P<0.01),而收缩后应变率、舒张晚期应变率两组间无明显差异(P>0.05).SRS、SRE、SPS、SES均能预测心肌的存活,其中SRS曲线下面积大(0.803,P<0.01),当临界值取-0.31 s-1时,其预测存活心肌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为83%、68%、76%、71%.结论 在行急诊PCI的前壁STEMI患者中,SRI技术能早期预测受累心肌的存活性.
作者:钟新波;赵有生;王小庆;王涓;陈文斌;李涯 刊期: 2012年第07期
目的 分析广州市2006-2010年甲乙类传染病流行特征,为今后制定防治措施提供依据.方法 利用“疾病监测信息报告管理系统”对广州市2006-2010年报告的甲乙类传染病进行描述性流行病学分析.结果 2006-2010年广州市甲乙类传染病共报告发病181 927例,年均发病率为334.03/10万,高于广东省及全国平均发病水平,总体呈下降趋势.发病率居前4位的甲乙类传染病为肺结核、病毒性肝炎、梅毒和淋病,占每年甲乙类报告总数的90%.麻疹发病率显著下降.中心商业区与城乡结合部为高发地区,发病率较高的职业为家务待业、民工、工人和农民.结论 广州市传染病防控工作的重点是降低肺结核、病毒性肝炎、梅毒、淋病的流行强度,同时应防范部分输入性传染病引起本地流行的潜在危险.
作者:胡文穗;肖新才;董智强;李美霞;傅传喜 刊期: 2012年第07期
目的 观察Caspase-1抑制剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织及肺内IL-18表达的影响.方法 将42只SD大鼠随机分为对照组(n=6)、SAP-S组(n=18)和SAP造模+Caspase-1抑制剂组(SAP-ICE-Ⅰ组)(n=18).SAP-S组与SAP-ICE-Ⅰ组于造模后6、12、18h心脏穿刺抽血,动态监测血清淀粉酶、肺湿干重比率,光镜下观察胰腺及肺组织病理学改变,采用免疫组化和Western blotting方法检测肺内IL-18的表达情况.结果 SAP-ICE-Ⅰ各组血清淀粉酶、肺湿干重比率较SAP-S组有显著下降(P<0.01).光镜下,SAP-ICE-Ⅰ组对应时间点胰腺和肺组织病理损害程度较SAP-S组明显减轻.免疫组化和Western blotting结果显示,SAP-ICE-Ⅰ组各时间点IL-18较SAP-S组显著减少(P<0.01),但均显著高于对照组(P<0.01).结论 Caspase-1抑制剂可以抑制成熟的IL-18蛋白表达,有效改善SAP时的肺损伤.
作者:史薇;辜金莲;曾峥;黎钟燕;朱人敏;张晓华;袁柏思;李敏利 刊期: 2012年第07期
目的 构建肠道病毒71型(EV71)的感染性克隆,为EV71致病机理的研究和药物的开发建立技术平台.方法 选取临床手足口重症儿童粪便样品,经荧光定量PCR检测为阳性,RT-PCR方法扩增出EV71全基因组,通过TA克隆的方法连接到TOPO-XL-PCR载体中,应用T7聚合酶系统将线性化的EV71 DNA序列体外转录成RNA,转染人横纹肌肉瘤细胞系RD-A细胞,病毒传代并观察病变,通过间接免疫荧光实验进一步鉴定,获得的感染性克隆进行全基因组测序和序列比对分析.结果 RT-PCR可以获得EV71全长约7.5 kb的DNA片段,体外转录并转染后3~5 d可观察到典型的肠道病毒致细胞病变,免疫荧光可看到特异标记,序列比对为C4a亚型的EV71病毒.结论 构建出具有感染性的EV71全长cDNA克隆,在分子生物学水平上有利于深入研究EV71的致病机制和毒力基因、患者抗体的中和特性、疫苗和药物的效力评估与开发等.
作者:罗敏;陈惠玲;杨洪;张海龙;冼慧霞;张仁利 刊期: 2012年第07期
目的 探讨超敏C反应蛋白(hs-CRP)及尿路感染信息(UTI-Info)对尿路感染(UTI)的诊断价值.方法 对380例疑似UTI患者的尿标本进行尿培养,用UF-1000i全自动尿液有形成分分析仪测定白细胞数(WBC)及细菌数(BACT),得到UTI-Info;用AU2700全自动生化分析仪测定静脉血hs-CRP含量;以细菌定量培养结果为标准对照,评估hs-CRP、UTI-Info、hs-CRP+ UTI-Info诊断UTI的灵敏度、特异性、诊断符合率等.结果 除污染标本外,余下360份标本中,细菌培养结果阳性有102份,阳性率为28.3%.以细菌培养为参考方法,hs-CRP诊断UTI的灵敏度、特异性、诊断符合率分别为85.3%、70.9%、75.0%;UTI-Info诊断UTI的灵敏度、特异性、诊断符合率分别为76.5%、84.5%、82.2%;hs-CRP+UTI-Info诊断UTI的灵敏度、特异性、诊断符合率分别为70.6%、97.3%、89.7%.结论 hs-CRP联合UTI-Info能快速诊断UTI并能提高特异性及诊断的准确性.
作者:梁兴东;蒋洪昆;马丽梅;容亓 刊期: 2012年第07期
目的 探讨线粒体脑肌病(MELAS综合征型)的临床、影像及病理特点.方法 回顾性分析2例MELAS综合征患者的临床资料及复习相关文献.结果 2例患者均以视力障碍为首发症状伴头痛、呕吐,发育延迟,血乳酸增高,影像以枕叶皮层受累为主,基底节钙化.肌肉病理发现破碎样红纤维,电镜可见肌膜下异常线粒体增多.结论 以视力障碍为首发症状的青少年患者应考虑到MELAS综合征的可能,以免误诊.
作者:成秋生;李蒙燕;杨勇;郭爱华;潘小平 刊期: 2012年第07期
目的 探讨TRPC离子通道通过p53通路参与一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导的原代培养海马神经元凋亡.方法 原代培养的海马神经元,经RT-PCR检测TRPC1-6的表达;给予SNP处理后,通过Real-time RT-PCR检测p53下游靶基因Bax、Apaf-1、PUMA和Survivin的表达;给予TRPC通道阻断剂和激活剂,检测其是否影响SNP诱导的p53下游靶基因表达.结果 TRPC在原代培养海马神经元上广泛表达.SNP处理神经元4、8、24 h后,p53下游靶基因Bax、Apaf-1和Survivin表达无明显变化(P>0.05).而PUMA则在3个时间点分别增加至1.94、1.86和1.90倍,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).TRPC通道阻断剂2-APB,可降低SNP诱导的PUMA上调(1.91 vs 1.12) (P<0.01).结论 TRPC通道可以通过调节PUMA的表达参与SNP诱导的原代培养海马神经元凋亡.
作者:郭进强;覃旻 刊期: 2012年第07期
目的 分析吸毒人群HIV感染者中HIV-1的基因序列特征,初步确定其感染的基因亚型和各亚型的流行趋势.方法 在Genbank中查找HIV gag基因的序列,设计巢式PCR引物.从全血中提取样本的基因组DNA,进行巢式PCR,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序,所获序列与国际参考株序列进行比对,确定基因型或亚型.结果 对36例HIV-1感染者样本进行扩增,PCR共检测出29例阳性样本,27例测序成功,其中16例为CRF 08-BC重组亚型、7例为CRF 07-BC重组亚型、4例为CRF 01-AE重组亚型,15例阴性对照均无目的条带.结论 在广州吸毒强戒人员HIV-1型中以CRF BC亚型为主,其次为CRF 01-AE亚型.应加强对HIV-1毒株亚型的监测,以制定更好的防治策略.
作者:石泽林;韩慧;吴炳义 刊期: 2012年第07期
淡水螺类是多种吸虫幼以及一些线虫幼虫的中间宿主,它们之间的相容性可以从感染率、感染度等多方面作为评价指标.本文对多种淡水螺类与吸虫幼虫或线虫幼虫相容性研究进行综述,进一步深入对寄生虫幼虫与淡水螺类之间基因相容性的研究,更有助于全面揭示寄生虫与宿主之间的相互关系.
作者:周燕蓉;吴忠道 刊期: 2012年第07期
目的 通过对68例鼻咽癌复发患者癌组织中细胞周期调节蛋白水平的检测,进行鼻咽癌复发的趋势预测和探讨可能的机制.方法 采取免疫组织化学法对所有研究对象的组织标本进行p53、MDM2、p21WAF1、p21ras、VEGF的检测.结果 68例患者平均复发间期为(31.65±24.52)月.未发现不同分期的复发间期差异有统计学意义(P =0.361).单因素分析发现高表达的MDM2水平会缩短复发间期(P=0.016).多因素分析显示年龄(≥50岁)、高表达MDM2和低表达或阴性p21WAF1是复发间期的影响因素.结论 年龄较大、高表达MDM2、低表达或阴性p21WAF1的鼻咽癌患者易较早出现复发.
作者:蒋昌斌;易炜;何芬;秦海燕;李蓉;孙建聪;万明辉 刊期: 2012年第07期
目的 探讨miR-125b-1增强紫杉醇对乳腺癌SKBR-3细胞化疗敏感性的影响,及其对靶基因Her2蛋白表达的影响.方法 合成miR-125b-1并通过LipofectamineTM 2000转染SKBR-3细胞,将实验分为空白对照组(脂质体转染SKBR-3细胞株)、阴性对照组(siRNA转染SKBR-3细胞株)、miR-125b-1组(miR-125-1转染SKBR-3细胞株)3组.分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Her2 mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测miR125b-1对紫杉醇作用于SKBR-3细胞化疗敏感性的影响.结果 miR-125b-1转染后的SKBR-3细胞中Her2 mRNA和蛋白质水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染miRNA-125b-1的SKBR-3细胞G2M期细胞比例显著高于其他组(P=0.000),而空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.094).三组之间比较,G0-G1期、S期比例差异无统计学意义;用miR-125b-1处理组细胞的IC50与未处理组相比下降2.69倍,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125b-1可增强乳腺癌SKBR-3细胞对紫杉醇的化疗敏感性,下调Her2可能是其作用机制之一.
作者:胡斌;吴爱国;李学孝;纪术峰;王梦川;吴凯;邵国利 刊期: 2012年第07期
目的 了解广州地区献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(0BI)的流行病学和血清学情况.方法 对广州地区199 631例无偿献血者标本同时用ELISA法检测HBsAg、紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT、核酸扩增技术(NAT)联合检测HBV/HCV/HIV及HBV单项鉴别试验,对HBsAg阴性HBV DNA阳性者进行随访,用荧光定量PCR检测病毒载量,用ELISA法检测乙肝两对半.结果 199 631例标本中共检出 104例HBsAg阴性HBV DNA阳性者,经随访有54例为OBI,OBI检出率为0.027%,年龄以46~55岁组检出率高(P<0.01),外地身份证的献血者检出率高于广州市身份证者(P<0.01),OBI检出率与性别和献血次数无关(P>0.05).104例HBsAg阴性HBV DNA阳性的标本ALT均正常,病毒载量均<1 000 IU/ml,平均值为162 IU/ml.随访标本中,除6例ALT异常外其余均正常,54例OBI标本病毒载量均<1 000 IU/ml,平均值为122 IU/ml,乙肝两对半中抗-HBc阳性率明显高于其他项目(P<0.01).结论 HBsAg阴性献血者中存在OBI,有必要在献血者中开展核酸检测.
作者:李玉笑;周才;杜耀民;汪传喜;黄伯泉;杜荣松;田也;刘旭映;邓燕清 刊期: 2012年第07期
目的 探讨硫酸镁联合低分子肝素治疗早发型子痫前期的疗效及其妊娠结局.方法 将50例早发型子痫前期患者分为硫酸镁治疗组(n=22)和硫酸镁联合低分子肝素治疗组(n=28),并进行病例对照分析,观察治疗前后的凝血功能、肾功能变化及妊娠结局.结果 两组患者治疗后收缩压及舒张压均明显下降,但下降幅度差异无统计学意义(P>0.05).排除治疗前凝血功能或肾功能基础值的影响,硫酸镁联合低分子肝素治疗使凝血酶原时间(PT)明显延长、凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)明显增大、凝血酶时间(TT)明显延长,差异有统计学意义(P<0.05),但上述各指标改变后仍在正常范围以内.硫酸镁联合低分子肝素治疗对尿蛋白及血尿酸的减少影响更显著,差异有统计学意义(P<0.05).两个治疗组之间的血清尿素氮和血清肌酐的变化差异无统计学意义(P>0.05).两组之间的分娩孕周、期待治疗时间、新生儿体重及新生儿出生Apgar评分及母儿并发症发生率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在传统治疗的基础上加用低分子肝素辅助治疗早发型子痫前期是安全的,且可以对肾功能起到保护作用,明显减少尿蛋白量.尚未观察到低分子肝素对妊娠结局的影响.
作者:肖立;李智泉;周紫琼;冷灵芝 刊期: 2012年第07期
目的 观察1.8%阿维菌素(AVM)乳油对小鼠肝微粒体细胞色素P450 (CYP450)酶系与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的影响,初步探讨1.8%AVM在肝脏的可能的代谢过程和毒性机理.方法 40只清洁级昆明种小鼠(雌雄各半)灌胃给予1.8%AVM乳油(70、35、17.5 mg/kg),连续7d,以0.9%氯化钠溶液作对照.末次给药后处死小鼠,采用差速离心法制备大鼠肝微粒体,Brandford法测定微粒体蛋白浓度,CO还原差示光谱法检测肝微粒体CYP450含量,差示光谱法则定肝微粒体b5 (Cyt-b5)含量,紫外分光光度法则定肝微粒红霉素N-脱甲基酶活性(ERD)和氨基比林-N-脱甲基酶(ADM)和GST的活性.结果 各1.8%AVM乳油染毒剂量组ERD、ADM活性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组小鼠肝脏指数、CYP450与b5的含量及GST的活性与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),且不同剂量组间差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 1.8%AVM乳油可抑制小鼠肝微粒体ERD(主要反映CYP3A活性)和ADM(主要反映CYP2E1)的活力,而对CYP450和b5含量及GST活性影响小,未观察到1.8%AVM乳油对小鼠肝微粒体重要的Ⅰ相酶CYP450和Ⅱ相酶GST的诱导或抑制作用.
作者:喻馨兰;张华;韦艳 刊期: 2012年第07期
目的 探讨标本荧光探针结合区序列突变对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响.方法 采用3种国产荧光定量PCR试剂对200例标本进行平行检测HBV DNA,分析3种试剂检测结果的差异,并对6例3种试剂检测结果无差异的标本和6例达安试剂检测结果明显降低或漏检标本进行测序.结果 3种试剂检测结果相差30倍以上的标本47例,且3种试剂均有不同程度的漏检;6例3种试剂检测结果无差异的标本荧光探针结合区序列无突变,6例达安试剂检测结果明显降低或漏检的标本荧光探针结合区序列均有突变.结论 标本荧光探针结合区序列突变是造成达安试剂检测HBV DNA结果明显降低或漏检的原因.
作者:郑有为;梁敏文;钱靖琳;方伟 刊期: 2012年第07期
目的 探讨结直肠癌合并肠梗阻的相关影响因素.方法 收集466例结直肠癌患者的临床病理资料,分析肠梗阻与患者临床病理因素的关系.结果 全组病例肠梗阻发生率为8.2%(38/466).单因素分析显示,肠梗阻与性别、肿瘤大小、大体类型、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、术前血清癌胚抗原水平以及手术方式相关;Logistic回归分析显示,影响肠梗阻发生的因素为大体类型、年龄、TNM分期和肿瘤大小;其危险程度大小为大体类型>年龄>TNM分期>肿瘤大小.结论 结直肠癌合并肠梗阻的特征是好发于中老年人,病程晚,生物行为恶及根治率低.
作者:许慕明;庄业忠;王伟峰;林佳锐 刊期: 2012年第07期
目的 探讨姜黄素对HepG2细胞Nrf2信号功能的调控作用与其改善胰岛素抵抗的效应关系,并进一步研究高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗时姜黄素干预对肝脏Nrf2系统功能及糖异生作用的影响.方法 在人肝癌细胞HepG2上分别用葡萄糖氧化酶(G0)或长期胰岛素处理,分别制成氧化应激和高胰岛素血症胰岛素抵抗模型;用蛋白印迹方法(WB)检测姜黄素对Nrf2抗氧化系统的作用.另外,对细胞进行短时胰岛素刺激,观察胰岛素信号(PKB Ser473磷酸化水平)变化.为研究姜黄素的整体动物药物作用,在高脂诱导的胰岛素抵抗小鼠模型用姜黄素进行干预(雄性C57BL/6J小鼠,给予高脂饲料加上3%的姜黄素),在第25周进行丙酮酸耐量实验,并于第27周取肝脏组织检测Nrf2系统功能变化.结果 姜黄素可明显激活HepG2细胞Nrf2系统,并对抗GO氧化应激所致的PKB磷酸化损害.在高脂饲喂小鼠胰岛素抵抗模型,姜黄素可改善丙酮酸耐量,提示其增强胰岛素作用(抑制肝脏糖异生),从而缓解肝脏糖代谢异常;姜黄素还明显激活高脂肥胖小鼠肝脏受抑制的Nrf2信号功能.结论 姜黄素通过增强内源性Nrf2系统功能对抗氧化应激,是其缓解肝细胞胰岛素抵抗的重要药理机理.
作者:何惠君;王国玉;高渊;于志文 刊期: 2012年第07期
目的 研究Bif-1基因的过表达对前列腺癌细胞凋亡、增殖以及迁移过程的影响.方法 构建Bif-1基因全克隆并转染LNCap细胞,上调细胞中Bif-1基因的表达水平,通过流式细胞术检测细胞转染前后的细胞凋亡情况;通过MTT法检测细胞的增殖能力变化;通过划痕试验检测细胞迁移能力的变化.结果 转染Bif-1基因后,Real-time PCR检测发现LNCap细胞中Bif-1基因mRNA水平△△CT高于对照组10倍以上;Western blotting条带光密度值提高2倍以上.实验组细胞凋亡比例升高至31.90%,细胞增殖能力减弱.实验组和对照组中LNCap细胞划痕愈合速度基本相同,差异无统计意义(P>0.05).结论 Bif-1基因在LNCap细胞中的过表达促进了细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力,而对前列腺癌细胞的迁移能力无显著影响.基因有可能作为一个潜在的前列腺癌治疗靶点.
作者:王铸;何霞;冯发深;关琳琳;汪杨;罗燕芬;黄斌;徐霖;曹开源 刊期: 2012年第07期
目的 克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶(GST) AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1.方法 设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因.将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1.重组质粒转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况.结果 成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank (accession no.JQ812812).AduGST-1编码序列长度为624 bp,编码307个氨基酸残基.成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21(DE3)中表达并纯化了重组AduGST-1.结论 首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础.
作者:邵正;何庆丰;邓莉;彭礼飞 刊期: 2012年第07期