罗伟强；伍飘雁；杨忠伟；余大年；刘仲昌；刘文锦
目的 构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-EGFP-rtTA,并在PA317细胞中表达.方法 以质粒pEGFP-C1为模板进行PCR反应获得EGFP基因片段,定向插入逆转录病毒载体pLXSN,筛选出正确的重组逆转录病毒载体pLXSN-EGFP.PCR方法从pTet-on质粒中扩增出rtTA基因,酶切纯化后克隆于逆转 录病毒载体pLXSN-EGFP中,限制性内切酶酶切分析及PCR鉴定筛选出正确的重组载体pLXSN-EGFP-rtTA,脂质体介导转染PA317细胞,PCR方法检测PA317细胞内EGFP、rtTA基因,RT-PCR方法检测PA317细胞内rtTA基因的mRNA表达,荧光显微镜观察EGFP基因的表达情况.以NIH3T3细胞为靶细胞测定重组逆转录病毒滴度.结果 成功构建了表达EGFP、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体,转染PA317细胞后,RT-PCR方法可检测到rtTA基因的mRNA表达,荧光显微镜下可观察到EGFP基因表达所产生的绿色荧光,说明连接有EGFP和rtTA双基因的逆转录病毒载体在PA317细胞中可正常表达,转染pLXSN-EGFP-rtTA载体的PA317细胞可产生4.8x 104 CFU/ml病毒滴度的重组病毒.结论 成功构建表达EGFP、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体,该载体可在PA317细胞内正常表达,获得较高滴度的病毒上清.
作者：赵宁；邓新燕；单于；郭中敏 刊期： 2012年第12期
目的 对深圳市宝安区海洛因依赖者进行肺结核的流行病学调查,调查其患病率及分布特征.方法 参照2010年第5次全国结核病流行病学调查方案和实施细则,对深圳市宝安区药物滥用监测点发现的海洛因成瘾者进行结核病筛查.结果 调查海洛因依赖者1 383人,肺结核的患病率为2.96％(41/1 383),高于全省常住人口患病率229.97/10万(x2=359.898,P=0.000).30岁以下、30～39岁、40岁以上年龄组的患病率分别为0.97％、3.00％、5.90％(x2=13.567,P＜0.001).男性肺结核患者高于女性,但差异无统计学意义(x2=0.143,P＞0.05).结论 深圳市宝安区海洛因依赖者肺结核患病率较高,多集中于30～49岁年龄组,而且随着年龄增长患病率有增加的趋势.
作者：夏莉；张泉水；曾令延；钟鸿剑；蔡翠兰；高纯良；任小龙 刊期： 2012年第12期
目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.
作者：李宜学；田喜凤；王晓波；郭全；樊桂玲；刘娜 刊期： 2012年第12期
目的 分析2011年泉州市疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价AEFI监测系统运转情况.方法 通过收集国家AEFI监测系统报告的泉州市2011年AEFI个案数据,采用描述性分析方法对监测资料进行分析.结果 2011年泉州市AEFI监测系统接到报告226例病例,县覆盖率100％,48 h及时报告率为91.15％,48 h内调查率95.65％,个案调查表调查后3d内报告率为73.91％.报告发生年龄67.70％≤1岁,61.50％发生在第1剂次,89.82％发生在接种后≤1d,报告高峰在6-9月,百白破疫苗占56.19％.一般反应占80.09％(181/226),异常反应占16.81％(38/226),异常反应以过敏性反应为主,过敏性反应中以过敏性皮疹为多.报告发生率为6.69/10万剂次,国家免疫规划疫苗报告发生率前三位为无细胞白百破疫苗、麻风疫苗、白破疫苗.结论 2011年泉州市预防接种异常反应监测系统运行在敏感性和及时性较往年有明显提高,报告成常规化、系统化态势,但尚需进一步完善和规范.
作者：陈雅红；洪思让；詹惠春 刊期： 2012年第12期
目的 评价亨氏小体和毛细管电泳联合筛查在α-地中海贫血检测中的应用价值.方法 对669例α-地中海贫血基因确诊病例结果进行回顾性分析,并对享氏小体、毛细管电泳单项检测和平行检测及系列检测的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值进行评价.结果 亨氏小体、毛细管电泳单项检测地中海贫血的灵敏度分别为82.51％、69.06％,特异度分别为92.50％、96.50％.亨氏小体、毛细管电泳平行联合检测的灵敏度和特异度分别为100.00％、95.50％,系列联合检测的灵敏度和特异度分别为64.87％、100.00％.与各单项试验比较,平行联合检测的灵敏度高(P＜0.05)、系列联合检测的特异度高(P＜0.05).结论 亨氏小体和毛细管电泳联合检测是α-地中海贫血筛查较为理想的试验方法.
作者：周剑英；谢杏梅；李东至；李坚；廖灿 刊期： 2012年第12期
目的 了解梅州市手足口病病原学流行情况,为手足口病控制和治疗提供科学依据.方法 对2010-2011年梅州市手足口病哨点病原学监测医院的手足口病病例采集粪便标本,提取标本中的核酸,采用实时荧光定量PCR方法扩增病毒的特异性片段,检测总肠道病毒、EV71和CoxA16核酸.结果 255份手足口病临床诊断病例的粪便标本中,总肠道病毒、EV71和CoxA 16病毒核酸检出率分别为72.55％、40.39％和11.37％,其中EV71和CoxA16核酸检出率差异有统计学意义(x2=55.97,P＜0.01).发病以5-7月高发,占48.65％,有较明显的季节性分布.男性总肠道病毒核酸检出率高于女性(x2=10.24,P＜0.01),但不同性别间的EV71和CoxA16病毒核酸检出率差异均无统计学意义(x2=0.01、0.69,均P＞0.05).结论 EV71是梅州市2010-2011年手足口病的主要病原体.今后应加强手足口病流行特征和病原谱的动态研究,以进一步掌握手足口病流行规律.
作者：陈志青；林立新；王东勉；黄玉玲；杨翼龙；何秋瑜 刊期： 2012年第12期
目的 克隆斑节对虾Penaeidin抗菌肽基因,构建克隆载体,测序后进行序列分析.方法 从斑节对虾采集血淋巴后提取总RNA,经反转录得到eDNA,用特异性引物进行PCR扩增得到具有双酶切位点的重组Penaeidin目的基因片段.将其连接至PMD18-T载体,转化至Top10克隆菌进行克隆并测序,用生物信息学软件进行序列分析.结果 测序结果表明斑节对虾Penaeidin抗菌肽基因全长225 bp,编码74个氨基酸.将克隆所得的斑节对虾Penaeidin基因序列与NCBI数据库中的斑节对虾Penaeidin基因(FJ686016,AF475082)同源性为100％,与其它物种虾的Penaeidin基因同源性为48％～92％.分子进化树显示斑节对虾Penaeidin抗菌肽和印度对虾Penaeidin抗菌肽聚为一大枝,而圣保罗对虾、小褐美对虾、巴西美对虾、白滨对虾Penaeidin聚为一大枝,南方滨对虾Penaeidin则自成一枝.二级结构预测表明本次克隆得到的斑节对虾Penaeidin信号肽区为β折叠片,成熟肽主要为β折叠片和转角结构.成熟肽的N端和C端亲水性较强,N端为柔性区域.其中氨基酸序列30-40和60-70表现为潜在的T细胞抗原表位.结论 成功克隆出斑节对虾Penaeidin基因,对其序列的分析结果将为后续的蛋白表达、工业化生产和理论研究奠定前期基础.
作者：高安健；赵若聪；叶松；曾硕果；邬玉兰；刘志刚；王亚龙 刊期： 2012年第12期
目的 了解深圳市龙岗区吸毒人群艾滋病病毒(HIV)流行趋势及其行为变化.方法 采用SPSS17.0统计软件对2009-2011年深圳市龙岗区吸毒人群艾滋病哨点监测资料进行分析.结果 共调查吸毒者1 214名,HIV年均感染率为2.31％,吸食海洛因毒品的比例呈逐年下降趋势(由64.75％下降至36.66％)(x2=75.27,P＜0.01),吸食新型毒品的比例呈逐年上升趋势(由17.50％上升至39.65％)(x2=36.42,P＜0.01).艾滋病知识年均知晓率为53.13％,呈上升趋势.注射毒品者中,有共用针具史者占45.49％.商业性乱行为中从未使用安全套的比例由2009年的25.64％上升至2011年的57.14％(x2=70.42,P＜0.01).结论 深圳市龙岗区HIV感染率总体处于低流行水平,但吸毒人群新型毒品流行迅速,需引起更多关注.
作者：邹惠英；黎明；刘丽红；罗伟炎 刊期： 2012年第12期
目的 明确人感染高致病禽流感病例的感染来源,探索是否存在人与人之间的传播,为进一步认识与防治禽流感提供科学依据.方法采用现场流行病学调查和实验室检测相结合的方法进行调查、诊断.结果 发现2011年深圳首例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)确诊病例,无明确病、死禽接触史,密切接触者中无不明原因肺炎病例,未发现人-人传播证据.结论 2011年深圳人感染高致病性禽流感病例属感染个案,未发现人传人现象,感染来源可能与农贸市场环境有关.今后应继续加强不明原因肺炎监测,加强人感染高致病性禽流感的应急贮备、培训和健康教育.
作者：秦彦珉；谢旭；梅树江；孔东锋；曹彬 刊期： 2012年第12期
目的 研究DEPDC7基因在正常肝细胞、肝癌细胞及其他肿瘤细胞中的表达情况.方法 常规培养正常肝细胞HL-7702,肝癌细胞SMMC7721、HepG2、Huh-7,其他肿瘤细胞ZR-7530、MDA-MB-231、SGC7901、SW480.用MTT检测肝癌细胞转染前后的增殖情况,用RT-PCR方法在转录水平检测DEPDC7基因的表达,用Western blot方法从蛋白质水平检测DEPDC7蛋白的表达.结果 3株肝癌细胞生长增殖速度差异有统计学意义(P＜0.05).肝癌细胞DEPDC7基因在mRNA和蛋白质表达水平比正常肝细胞降低(P＜0.05),而其他肿瘤细胞DEPDC7基因表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DEPDC7基因在正常肝细胞中选择性高表达,而在肝癌细胞株中呈低表达.
作者：廖之君；王晓江；王心睿；林德馨 刊期： 2012年第12期
目的 探讨胃肠道间质瘤(GIST)的影像学特征,观察其CT征象与病理结果的诊断价值.方法 选取胃肠道间质瘤患者42例,经病理形态学确诊并分为良性组、交界性组及恶性组,手术切除前经CT平扫及增强诊断其恶性程度,比较肿物大小、密度、形态、强化程度及强化方式等CT征象与肿瘤恶性程度的相关性.结果 CT显示不同恶性程度组别间质瘤肿物大小比较差异有统计学意义(P=0.024),肿物密度均匀性和边缘光滑度比较差异亦具有统计学意义(P=0.041,0.034),而肿物形态在良恶性间质瘤中差异无统计学意义(P=0.631)；良性、交界性和恶性间质瘤中CT强化程度比较差异无统计学意义(P=0.628),而强化方式比较各组间差异有统计学意义(P=0.022).结论 CT显示GIST肿物大小、边缘、密度、强化方式与肿瘤恶性程度相关,CT可作为诊断GIST及其良恶性的重要手段.
作者：李胜凯；卞丽娟；郭友逢；朱文标 刊期： 2012年第12期
目的 比较肠出血性大肠埃希菌流行菌株的细胞毒性,筛选强毒株,为进一步研究细菌的致病机理提供理论依据.方法 采用PCR技术鉴定菌株的毒力基因E-hlyA、stx2、stxl,Giemsa染色观察细菌的黏附情况,通过测定感染后Vero细胞的乳酸脱氢酶释放情况了解细菌的Vero细胞毒性强弱.结果 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株含有的毒力基因不同,均具有较强的黏附能力和Vero细胞毒性,其中国际菌株933W/O,中国流行菌株882364、01H112和日本菌株Cua9的Vero细胞毒性较强.结论 筛选出的流行菌株强毒株,可用于进一步的细菌感染模型构建和毒力基因致病机制研究.
作者：王春晖；赵素慧；万成松 刊期： 2012年第12期
目的 评估高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测、液基细胞学(LCT)及阴道镜下组织活检联合应用在宫颈病变诊断中的作用及意义.方法 对2009年1月至2011年10月在广州医学院第二附属医院妇科门诊LCT检查异常的601例患者行HR-HPV检测,与经阴道镜活检结果比较,评价HR-HPV联合LCT诊断宫颈病变的作用.结果 LCT检测细胞学异常者HR-HPV阳性感染率为67.2％(404/601),诊断意义不明的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、非典型鳞状上皮细胞不除外高级别鳞状上皮内病变(ASC-H)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)和侵袭性鳞状细胞癌(CA)组的感染率分别为45.5％ 、66.2％、74.4％、89.1％和100.0％,差异有统计学意义(P＜0.05).LCT与HR-HPV联合检测诊断宫颈上皮内瘤样变(CIN)及以上宫颈病变的敏感性为86.1％,高于LCT(77.1％)和HR-HPV(72.0％)检测,差异有统计学意义(P＜0.05)；假阴性率为13.9％,低于LCT(22.9％)和HR-HPV(38.0％)检测,差异有统计学意义(P＜0.05).在601例LCT异常的患者中,LCT中＜LSIL和阴道镜活检＜CIN结果的一致性为50.8％(102/201),LCT中≥LSIL和阴道镜活检≥CIN结果的一致性为83.3％(333/400),两者均为CA的一致性为88.0％(24/25).201例ASC患者中,慢性炎症或正常102例(50.7％)、CIN Ⅰ 22例(11.0％)、CINⅡ40例(19.9％)、CINⅢ34例(16.9％)和鳞癌2例(1.0％).HR-HPV检测阳性率为59.2％(119/201),其对CIN及以上宫颈病变者检出的敏感度为71.7％(71/99)、特异度为53.0％(54/102)、准确率为64.7％.结论 宫颈病变的发生与HR-HPV感染密切相关,LCT与HR-HPV联合检测对宫颈病变具有较好的检出效果,阴道镜下活检可以大大提高宫颈病变的诊断率.
作者：陈勇霞；刘颖；梁爽爽 刊期： 2012年第12期
目的 比较永生化食道上皮细胞系和食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)细胞系的差异表达细胞骨架相关蛋白图谱,筛选并探讨与ESCC发生发展相关的细胞骨架及相关蛋白.方法 采用组分蛋白分离方法提取细胞骨架相关蛋白,利用双向凝胶电泳(2DE)联合MALDI-TOF/TOF串联质谱技术,分析并鉴定永生化食道上皮细胞系NE1及ESCC细胞系HKESC-2中差异表达的细胞骨架及相关蛋白,并用Westem blot验证其中感兴趣的差异蛋白在一组食道上皮来源细胞系和ESCC患者肿瘤组织中的表达情况.结果 三次独立实验结果表明永生化食道上皮细胞系NE1和ESCC细胞系HKESC-2有52个蛋白点表达差异超过2倍,31个蛋白点经质谱分析鉴定为28种蛋白质,其中16种蛋白质在HKESC-2细胞中表达上调,12种表达下调.Vimentin在所有ESCC细胞系和大部分ESCC肿瘤组织中均呈现高表达,而Annexin Ⅱ则呈现低表达甚至缺失.结论 多种细胞骨架及相关蛋白在ESCC发生发展过程中表达发生变化,某些细胞骨架及相关蛋白的特异性表达模式可能可以作为ESCC诊断的分子标志.
作者：蔡贞；周园；熊石龙；温淑娟；裘宇容 刊期： 2012年第12期
目的 了解广东瑶族人群庚型肝炎病毒(HGV)感染状况,探讨HGV感染与输血相关肝炎病毒HBV、HCV感染关系.方法 采用ELISA法分别检测血清中抗-HGV IgG、HBsAg和抗-HCV.结果 1 056例血清中检出抗-HGV IgG阳性95例,阳性感染率为9.00％,男性阳性检出率为9.40％,女性阳性检出率为8.63％,男女性别之间差异无统计学意义(x=0.189,P＞0.05).抗-HGV IgG阳性检出率随年龄增大而增高,但各年龄组之间差异无统计学意义(x2=0.437,P＞0.05).抗-HGV IgG+HBsAg、抗-HGV IgG+抗-HCV、抗-HGV IgG+HBsAg+抗-HCV的重叠感染率分别为23.16％、4.55％和4.55％,差异有统计学意义(x2=21.815,P＜0.05).结论 广东瑶族人群存在较高的HGV感染率,HBsAg及抗-HCV均存在HGV重叠感染.
作者：刘运保；梁伟文；喻红玲；虢娟；邓凯航；林雪珍 刊期： 2012年第12期
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可感染几乎所有的温血动物,寄生在除红细胞以外的所有有核细胞中,引起人兽共患的弓形虫病.据统计,全世界大约有1/3的人感染弓形虫.弓形虫感染可影响宿主的淋巴结、眼、中枢神经系统、肝和心等脏器的功能.本文对弓形虫感染所引起的肝脏病变作一综述,以期为进一步研究弓形虫所致消化系统疾病提供有价值的参考.
作者：闫俊平 刊期： 2012年第12期
目的 观察双水平无创正压通气技术(BiPAP)治疗急性大面积脑梗死合并呼吸衰竭的疗效及其影响因素.方法 选取大面积脑梗死合并呼吸衰竭患者64例,按照预后分为生存组和死亡组,并检测各组的氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、pH值、氧合指数(OI)、前白蛋白(PA)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响.结果 64例大面积脑梗死合并呼吸衰竭患者的生存率为60.94％(39/64).通气后两组的pH值、PCO2、PO2、OI和PA均较通气前明显提高(P＜0.01),且生存组的PCO2、PO2、OI和PA水平较死亡组升高更为明显(P＜0.01),而pH值两组无明显变化(P＞0.05)；两组的hs-CRP水平均较治疗前明显降低(P＜0.01),且生存组的hs-CRP水平较死亡组降低更为明显(P＜0.01).结论 BiPAP呼吸机在治疗急性大面积脑梗死合并呼吸衰竭的疗效显著,通气前动脉血气、OI、PA和hs-CRP水平对患者的预后有明显的影响.
作者：刘裕英；黄澄；吕艳；陈永烨；李胜玲 刊期： 2012年第12期
目的 探讨早期血乳酸清除率在判断心脏骤停后综合征(PCAS)患者预后的评估价值.方法 回顾性分析96例心脏骤停自主循环恢复后收入ICU的患者临床资料,计算6h血乳酸清除率,同时进行APACHEⅢ评分及记录患者预后情况.根据患者人院72 h转归情况,分成存活≤72 h组和存活＞72 h组,按血乳酸清除率10％为界分成高乳酸清除率组(＞10％)和低乳酸清除率组(≤10％或负值),比较各组间性别、年龄、血乳酸基础值、6h血乳酸值、6h血乳酸清除率、6h中心静脉血氧饱和度(ScvO2)、APACHEⅢ评分、休克指数等的差异性.对有统计学意义的变量进行多因素二元Logistic回归分析筛选出影响PCAS预后的独立危险因素,并绘制ROC曲线,比较危险因素曲线下面积大小.结果 存活≤72 h和存活＞72 h组在性别、年龄、血乳酸基础值、复苏6h内的APACHEⅢ评分等方面差异均无统计学意义(P＞0.05)；而存活＞72 h组的6h血乳酸清除率明显高于存活≤72 h组[(32.72±15.56)％ vs (21.47±18.08)％,P＜0.01]；高乳酸清除率组中存活＞72 h的比率明显高于低乳酸清除率组[73.24％vs 28.00％,P＜0.01].多因素二元Logistic回归分析表明,6h血乳酸清除率、6 h ScvO2是影响PCAS患者预后的独立危险因素；应用6h血乳酸清除率判断PCAS预后的ROC曲线下面积(AUC=0.830)较6 h ScvO2曲线下面积(AUC=0.729)大,差异有统计学意义(P＜0.001),具有更好的特异度和灵敏度.结论 早期血乳酸清除率可作为心脏骤停后综合征患者预后的评估重要且简便的指标之一.
作者：钟坚；李少洪；卜会驹；温海洋；郭少卿；马诚 刊期： 2012年第12期
目的 探讨以腹泻为首发表现的主动脉夹层患者的临床特点.方法 收集主动脉夹层患者353例,寻找以腹泻症状为首发表现的临床病例,分析其发病特点及临床转归.结果 仅发现3例主动脉夹层以腹泻为首发表现,该3例患者以腹泻求治急诊科,均发生不同程度、不同时间的误诊,均在住院期间死亡.3例患者的死亡原因得到确诊,其中1例因主动脉造影确诊,1例因床边超声心动图确诊,1例因尸检确诊.结论 以腹泻为首发表现的主动脉夹层主诉不典型,具有较高的误诊率及院内死亡风险,临床医师应具备较高的警惕性.
作者：肖平喜；戴振林；胡作英；张航；陈绍良；柳剑 刊期： 2012年第12期
目的 克隆西尼罗病毒(WNV)前膜蛋白(prM)基因,将其在果蝇细胞(S2)中表达,为制备研制诊断试剂所需的单克隆抗体奠定基础.方法 以质粒WNV-CME为模板,PCR扩增获得prM基因,与T载体连接,测序正确后酶切,酶切产物与果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisC重组,重组质粒与pCoBlas共转染果蝇S2细胞,25 μg/ml Blasticidin筛选获得抗性细胞,500μmol/L CuSO4溶液诱导表达,72 h后收集细胞与细胞上清进行Western blot鉴定.结果 酶切与测序结果表明成功构建重组表达载体WNV-prM-pMT,Western blot显示目的蛋白在果蝇细胞S2内稳定表达.结论 在果蝇S2细胞内成功地稳定表达WNV prM蛋白,为下一步WNV单克隆抗体的制备奠定了实验基础.
作者：李林海；杜鹏；陈丽丹；王文敬；石玉玲；黎诚耀 刊期： 2012年第12期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
