学术投稿

银屑病患者外周血单个核细胞CCR5的表达及其意义

黄远忠;董正蓉;林伯盛;马丹晓

关键词:银屑病, 细胞免疫, CCR5, 单个核细胞
摘要:目的 研究银屑病患者外周血单个核细胞趋化因子受体5(CCR5)的表达及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)的关系.方法 分离35例中重度寻常型银屑病患者及30例健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs),用RT-PCR法测定PBMCs培养前后CCR5 mRNA的表达水平,免疫荧光标记一流式细胞仪检测CCR5阳性细胞比率.结果 治疗前银屑病患者外周血单个核细胞中CCR5 mRNA表达水平明显高于治疗后及健康对照组,并与PASI呈正相关(r=0.516,P<0.05).结论 CCR5可能通过活化与趋化单个核细胞到银屑病皮损而参与了银屑病的发病.
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  • SHP-1对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭的影响及机制初步探讨

    目的 探讨SHP-1对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响.方法 MCF-7细胞株分别瞬时转染SHP-1的特异性siRNA干扰序列:然后分别通过RT-PCR和Western-blot检测MCF-7细胞十扰前后SHP-1基因和蛋白表达变化,并通过RT-PCR检测干扰前后MMP-9基因变化;通过Transwell小室实验检测干扰SHP-1对细胞侵袭能力的影响.结果 RT-PCR和Western-blot证实SHP-1在人乳腺癌细胞株MCF-7中有表达以及SHP-1 SiRNA的干扰效率:干扰SHP-1后,MMP-9的表达量上调;Transwell小室实验证实,与MCF-7阴性干扰对照及空白对照细胞相比,siRNA组的侵袭能力显著增强(P<0.001).结论 乳腺癌MCF-7中SHP-1的表达水平高低和该细胞侵袭能力高低呈负相关,其侵袭可能和MMP-9的表达呈正相关.

    作者:黄维甄;邹爱梅;石敏;罗荣城;李荣 刊期: 2011年第03期

  • Bcl-xl基因克隆及其在SH-SY5Y细胞中的表达

    目的 研究Bcl-xl基因在SH-SY5Y细胞中的表达.方法 构建真核表达载体plRES2-EGFP/Bcl-xl,采用脂质体介导将重组质粒导入SH-SY5Y细胞,RT-PCR和Western-blot检测外源基因表达.结果 本实验成功构建了真核表达载体plRES2-EGFP/Bcl-xl,并用脂质体介导的方法高效转染SH-SY5Y细胞,RT-PCR显示有Bcl-xl mRNA表达增加,Western-blot显示有32 kD的蛋白质表达增加.结论 重组质粒plRES2-EGFP/Bcl-xl经转染能够在SH-SY5Y细胞中高效表达,为进一步研究Bcl-xl对SH-SY5Y细胞的生物学功能奠定了基础.

    作者:蔡晓冬;杨炼红;吕瑞妍;沈庆煜 刊期: 2011年第03期

  • EGFR与PDGFR-α在肺腺癌中的表达及意义

    目的 探讨血小板衍生生长因子受体(PDGFR-α)和表皮生长因子受体(EGFR)与肺腺癌发生发展的关系.方法 免疫组化SP法检测PDGFR-α与EGFR在60例肺腺癌原发灶和24例正常支气管黏膜中的表达.结果 PDGFR-α主要在肺腺癌细胞质表达,少数在细胞核表达;EGFR主要表达于肿瘤细胞的细胞膜上,细胞浆中也有表达.二者均在肺腺癌细胞中过度表达(P<0.05).PDGFR-α的阳性表达率在肺腺癌高分化组明显高于低分化组(P<0.05),而EGFR在肺腺癌高分化组和低分化组中的表达相仿(P>0.05).结论 PDGFR-α的阳性表达与肺腺癌的分化程度呈正相关,EGFR的阳性表达与肺腺癌的分化程度无相关性.

    作者:赵世强;李宝平;刘擂;张雷 刊期: 2011年第03期

  • 阳山县华支睾吸虫病综合防治示范区中期评估结果

    目的 了解阳山县华支睾吸虫病综合防治示范区人群华支睾吸虫感染状况,评估示范区一年来综合防治效果.方法 按国家中期考核评估方案要求分东西南北中5个片随机抽取调查点,采用改良加藤厚涂片法对人群进行虫卵粪检.结果 东片青莲、西片黎埠、南片七拱、北片小江、中片阳城5个片调查点华支睾吸虫感染率分别为7.26%、6.09%、14.80%、7.14%和10.80%,平均为9.28%.感染率由2006年的14.01%下降到9.28%,下降率为33.76%.结论 阳山县居民华支睾吸虫感染率较2006年基线调查结果明显下降,综合防治效果明显.

    作者:李志奇;黄新华;张学军;刘狄轩 刊期: 2011年第03期

  • 急性应激对大鼠行为学及蓝斑TH、DBH基因表达的影响

    目的 观察急性应激状态下大鼠行为学的改变及不同时间点蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺一β一羟化酶(DBH)的基因表达.方法 将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,模型组又分为造模后1、3、6 h组,每组6只.运用束缚和游泳的方法造模,观察其行为学的改变;并分别在造模后相应时间点取出蓝斑,用RT-PCR法检测蓝斑TH、DBH的表达.结果 模型组造模前后比较,1、6 h组的穿越格数和直立次数明显下降(P<0.05),3 h组的穿越格数、直立次数和理毛次数均明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与对照组大鼠相比,造模后1 h组的穿越格数减少(P<0.05),1、3 h组的直立次数明显降低(P<0.01,P<0.05),1、3、6 h组的理毛次数降低明显且差异均有统计学意义(均P<0.01).模型组蓝斑TH和DBH表达水平较对照组升高,其中3 h组表达高(P<0.05),1、6 h组差异均无统计学意义(P>0.05),TH和DBH两者的表达趋势相似.结论 急性应激使大鼠的行为能力降低,蓝斑去甲肾上腺素能神经元中TH、DBH表达增高,使去甲肾上腺素合成增多,而去甲肾上腺素可以显著影响大鼠的情绪行为,在应激过程中起重要作用;TH、DBH表达的增高可能参与了急性应激所致的行为异常.

    作者:陶杨;丁秀芳;陈育尧;孙学刚;覃桂强;张艳平;黄杰春;吕志平 刊期: 2011年第03期

  • 人SET基因RNA干扰重组质粒载体的构建及其在肝细胞中的表达

    目的 建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础.方法 设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链,退火形成双链DNA后插入到真核表达质粒psiRNA-hH1 neo中产生shRNA重组质粒载体,经酶切和测序鉴定成功后,转染至L-02肝细胞中,48 h后收集细胞提取总蛋白,Western blotting检测干扰后SET蛋白的表达.结果 shRNA重组质粒的酶切和测序鉴定均正确,Western blotting结果显示重组质粒psiRNA1组的干扰效果较好,对SET蛋白表达的抑制率达60%左右,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建针对人SET基因的RNA干扰真核质粒载体,其能有效地抑制肝细胞内SET蛋白的表达,为深入研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性中的作用奠定了基础.

    作者:黄新凤;刘建军;蒋英芝;席仁荣;杨亮 刊期: 2011年第03期

  • 小鼠气性坏疽动物模型的建立

    目的 建立产气荚膜梭菌感染小鼠的后肢的气性坏疽动物模型,为早期诊断、了解气性坏疽的致病机理及治疗方法提供依据.方法 小鼠随机分成4组,每组10只.三个实验组分别肌肉注射3.5x109、3.5x108和3.5x107 cfu/ml浓度的产气荚膜梭菌(ATCC13124)菌液0.1 ml,空白对照组肌肉注射生理盐水0.1 ml,72 h后观察小鼠感染情况,取伤口分泌物作革兰氏染色涂片,细菌血平板厌氧培养和荧光定量PCR方法定量检测.结果 3.5x109、3.5x108、3.5x107 cfu/ml实验组和对照组在肌肉注射72 h内的死亡率为90%、70%、10%和0%.各组平均存活时间依次为(20:43±11:12)h、(37:24±25:39)h、(68:36±10:45)h和(72:00±0:00)h,死亡小鼠出现了气性坏疽的症状,分泌物培养和镜检出产气荚膜梭菌;未死亡小鼠康复;空白对照组无任何症状.各组Ct值均值为21.21±2.69、28.45±2.74、32.49±2.87和0.00±0.00,组间P值均<0.05.结论 成功建立了不同浓度的产气荚膜梭菌在不同时间段内感染小鼠的后肢气性坏疽的动物模型,为了解气性坏疽的致病机理及治疗方法奠定基础.

    作者:石玉玲;徐少珊;孙朝晖;陈丽丹;刘坚 刊期: 2011年第03期

  • 改良品质的转基因番茄研制现状

    番茄(Lycopersicon esculentum)是一种优良的蔬菜品种,应用基因工程技术对番茄进行开发和改造已成为国内外研究的热点.本文综述了延迟成熟品种、耐盐品种和耐寒品种的转基因番茄的研制现状.

    作者:李文桂;陈雅棠 刊期: 2011年第03期

  • 放射性脑病发生的高危因素及MRI影像学改变研究

    目的 探讨放射性脑病(REP)发生的高危因素和MRI在REP早期诊断中的价值.方法 回顾性分析我院近年106例REP患者的临床资料,将发病时间、照射疗程和剂量与MRI影像学检查相结合进行分析.结果 REP发病时间多集中在首次放疗后1~5年,射野上界在OM线上>2.5 cm者及生物效应剂量(BED)>139 Gy者易发生REP;15.09%的患者尚未出现明显神经系统损害表现时,MRI检查提示为T1WI等或低信号、T2WI高信号.结论 对病人采取合理配比照射区域和次数可减少REP的发生,MRI检查有助于早期发现和诊断REP.

    作者:周礼;何文;黄海威 刊期: 2011年第03期

  • 艾滋病抗病毒治疗48例死亡患者相关因素分析

    目的 分析本院艾滋病抗病毒治疗死亡患者的相关因素.方法 利用国家统一使用的DataFax抗病毒治疗信息系统所收集的数据资料,对抗病毒治疗死亡患者的相关情况进行分析.结果 共有315例艾滋病患者接受治疗,有48例抗病毒治疗患者死亡.治疗前所有患者出现艾滋病临床Ⅲ期或Ⅳ期表现,CD4细胞小值为4个/μl,大值为263个/μl,平均为36.4个/μl.接受治疗时间短1 d,长2年半,其中39例的治疗时间小于3个月.死于艾滋病相关性疾病42例,其中9例系统治疗无效死亡,11例治疗过程中出现机会性感染,放弃治疗在家中死亡;22例在停药后0.5~8月出现艾滋病相关疾病死亡.自杀4例,死亡原因不明2例.结论 艾滋病抗病毒治疗患者的主要死亡原因是艾滋病相关疾病,依从性困难是患者死亡的另一个原因,经济困难、歧视和药物副作用与病人死亡有直接关系.

    作者:韦秋玲;韦克召;韦超;潘利永;韦幕葵 刊期: 2011年第03期

  • 液相芯片技术在人乳头瘤病毒分型检测中的应用

    目的 构建人乳头瘤病毒(HPV)基因分型的液相芯片,针对中国常见的23种型别的HPV进行分型检测,并探讨其在临床应用中的特异性和敏感性.方法 采用HPV通用型引物MY09/11以及一条简并引物对临床样本进行PCR扩增;针对HPV不同型别设计分型探针,并偶联到Luminex微球上,通过Luminexm平台对PCR产物进行分型检测.同时以测序法作为验证标准,对液相芯片法(Luminex法)检测结果进行评价.结果 以测序法作为验证标准,Luminex法对314例HPV样本的分型检测结果为灵敏度98.10%,特异性98.08%,符合率98.09%.Kappa一致性检验结果为0.962.结论 Luminex法用于HPV感染样本中的分型检测具有高灵敏度和特异性,可以用于临床HPV诊断.

    作者:彭春梅;邓先连;林斌;胡守旺;陈晓光 刊期: 2011年第03期

  • 三种沙门菌分离培养基的性能评价

    目的 对XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂3种沙门菌分离培养基的性能进行评价.方法 选取3个不同批次的待测样品,以生长率、选择性和特异性为测试指标,分别重复测定20次.结果 标准菌株鼠伤寒沙门菌CMCC (B)50115和福氏志贺菌CMCC(B) 51572在SS琼脂、XLD琼脂、HE琼脂上三批次培养基中的生长率均大于0.5,且三批次间差异无统计学意义(P>0.05);亚利桑那沙门菌CMCC(B)47001在XLD琼脂上三批次培养基中的生长率均在0.9以上,三批次间差异亦无统计学意义(P>0.05).3株目标菌在受试三批次培养基上均呈现正常的生理生化特性,形成具特征性的菌落.粪肠球菌ATCC29212在3种培养基上生长均受抑制.结论 根据ISO/TS11133.2-2003培养基的性能评价标准判断,XLD琼脂、SS琼脂、HE琼脂培养基均符合标准要求,整体性能稳定、一致.

    作者:苏丽春;柯碧霞;陈经雕;谭海玲;严纪文;蔡芷荷 刊期: 2011年第03期

  • 含人P21启动子双荧光素酶基因载体的构建

    目的 构建带有EGFP标记含人P21启动子的双荧光素酶报告基因载体.方法 从人血白细胞DNA中克隆P21启动子,用于控制firefly荧光素酶的表达;renilla荧光素酶基因和EGFP基因用IRES连接,在CMV启动子控制下表达:上述元件和基因克隆至载体pLL3.7中,应用酶切和测序的方法进行鉴定正确后转染至293FT细胞观察EGFP表达.结果 经酶切、测序证实成功构建了带有EGFP标记的含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体,并成功表达EGFP.结论 含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体成功构建,为下一步的药物筛选打下基础.

    作者:陈荣誉;郑文岭;吴清华;张宝;马文丽 刊期: 2011年第03期

  • 急性心肌梗死后心脏性猝死的探讨

    目的 探讨急性心肌梗死后心脏性猝死(SCD)预防的关键环节.方法 回顾56例急性心肌梗死后心脏性猝死患者的病历及随访资料,分析其原因或诱因、发病季节与发病时间、溶栓治疗与SCD的关系、致命性心律失常与SCD的相关性与预后等.结果 严重心律失常为SCD的主要诱因,冬秋季多于春夏季,白天多于晚上,上午多于下午:住院治疗1周后、出院1周后为SCD的高发期,血钾偏低者多见,前壁多于下壁,未溶栓及溶栓未再通者SCD死亡率高.结论 综合分析患者病例资料,密切观察病情变化,加强对关键环节的管理,对降低急性心肌梗死后心脏性猝死的发生具有积极的意义.

    作者:朱兵 刊期: 2011年第03期

  • 丙型肝炎疫苗的研究现状

    丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起输血相关肝炎及慢性肝炎、肝硬化、肝癌的主要病原,目前尚无有效的治疗与预防手段.本文综述了当前世界HCV疫苗研究的进展,并分析了疫苗研制中存在的问题和疫苗研制的策略.

    作者:张立营;高博 刊期: 2011年第03期

  • 实时荧光PCR法检测}HER2基因扩增方法的建立

    目的 探讨应用双标准曲线的实时荧光PCR法检测原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增在临床乳腺癌诊治中的可行性.方法 收集500例乳腺癌术后新鲜组织标本,抽提组织DNA进行实时荧光PCR检测,采用双标准曲线法定量,通过计算目的 基因浓度和内标基因浓度的比值来判断HER2基因的扩增情况.选择灵敏度和特异度均较高的荧光原位杂交方法作为对照方法.结果 检测阳性标本72例,阴性样本419例.该方法检测的灵敏度为85.9%,特异度为98.79%,准确度为96.74.与荧光原位杂交法(FISH)检测结果相比,二者具有较好的一致性.结论 双标准曲线的实时荧光PCR法用于检测HER2基因扩增相对准确可靠,有较好的临床应用前景.

    作者:邓艳华;吴荃;陈华云;李明 刊期: 2011年第03期

  • 急性脑出血患者血清甲状腺激素水平的变化及其临床意义

    目的 探讨急性脑出血患者血清甲状腺激素水平及其临床意义.方法 根据脑出血量多少、神经功能缺损程度及治疗2周后的疗效,将98例急性脑出血患者分为:脑出血量≤30 ml为A组、>30 ml为B组;神经功能缺损程度轻型的为C组、中型的为D组、重型的为E组;疗效为显效的为F组、有效的为G组、无效的为H组.选择40例健康者作对照.采用电化学发光法检测急性脑出血患者和健康对照者血清中T3、T4、FT3、FT4、TSH水平.结果 急性脑出血患者A、B、C、D、E、G和H组与健康对照组,B组与A组,D、E组与C组,G、H组与F组之间,甲状腺激素水平差异均有统计学意义(P<0.05),T4、FT4、TSH水平升高,而T3、FT3,水平下降.而疗效为显效的F组与健康对照组比较.甲状腺激素水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 急性脑出血患者T4、FT4、TSH水平升高和T3、FT3水平下降与病情的严重程度及预后密切相关.

    作者:龙熙德;郭毅;朱平安 刊期: 2011年第03期

  • 2009-2010年广州甲型H1N1流感的流行特征分析

    目的 分析甲型H1N1流感在广州的流行特征.方法 2009年5月至2010年4月,每周分别从广州四家监测医院采集流感样症状患者的嗽口液或咽拭子,采用real-time PCR方法鉴定甲型H1N1流感病毒;在广州5大城区采集不同年龄的人群血清,通过血凝抑制实验检测血清中甲型H1N1流感抗体;对其时间和年龄的分层进行分析.结果 全年共采集嗽口液或咽拭子3 580份,甲型H1N1流感核酸检测阳性530份,阳性率为14.8%,阳性率高的月份出现在10~12月,为36.5%~42.3%,阳性率高的年龄组为5~岁和15~岁组,为18.5%和24.2%.低的年龄组为≥60岁组,为4.1%.人群血清标本共采集1 527份,甲型H1N1流感抗体阳性439份,阳性率为28.7%,阳性率高的年龄组为5~岁和15~岁组,为36.1%和39.5%,低的年龄组为≥60岁组,为8.6%.结论 甲型H1N1流感的流行期发生在10~12月,流行时间短,感染的主要人群是学龄组人群,而老年人群的感染率相对较低.预防流感的工作重点应放在学校内.

    作者:陈艺韵;耿进姝;吴继彬;鲁恩洁;李铁钢;狄飚 刊期: 2011年第03期

  • 中药与西药对照治疗偏头痛的Meta分析

    目的 评价中药治疗偏头痛的临床疗效和安全性.方法 计算机检索中国期刊全文数据库、维普中文期刊数据库、万方学术期刊全文数据库、中国生物医学文献服务系统(CBM)、中国生物医学期刊引文数据库(CMCI/CMCC整合版)、中医药在线数据库,检索2000年1月一2009年12月10年间的相关文献,收集中药治疗偏头痛的随机对照试验(RCTs).按纳入排除标准筛选试验、评价研究质量、提取有效数据,并采用RevMan 5.0进行统计分析.结果 终纳入20个RCT评价中药与西药在偏头痛疗效方面的差异,Meta分析显示:有效率[RR=1.22,95%CI(1.15,1.29),P<0.01],差异有统计学意义.敏感性分析表明评价结果稳定.漏斗图显示不对称,提示纳入评价的文献存在发表性偏倚.结论 中药治疗偏头痛有效,但由于本系统评价纳入研究的方法学质量较低,尚需开展更多设计合理、执行严格的多中心大样本且随访时间足够长的随机对照试验验证其疗效及安全性.

    作者:谢炜;史国军;于林;鲍勇;杜念念;于云红 刊期: 2011年第03期

  • 冠心病患者外周血T淋巴细胞PD-L1的表达及意义

    目的 研究程序性死亡配体-1(PD-L1)在冠心病患者外周血中T淋巴细胞上的表达及意义.方法 按照WHO关于冠心病诊断标准,将实验分为稳定型心绞痛(SA)组(n=23)、急性冠脉综合征(ACS)组(n=21)和正常对照组(n=18),三组均经冠状动脉造影证实.采集三组人群的外周血,用流式细胞技术及RT-PCR技术测定T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达情况.结果 与正常对照组比较,SA组和ACS组外周血T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.01);但SA组与ACS组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 冠心病患者外周血T淋巴细胞PD-L1表达上调,其可能在动脉粥样硬化斑块形成过程中起作用.

    作者:陈君;魏亚非;缪绯;武凯;刘映峰;孙茂本;江玲 刊期: 2011年第03期

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