赵世强；李宝平；刘擂；张雷
目的 综合评价国内三种副溶血性弧菌商品试剂盒的检测效果.方法 选用TIANDA公司的副溶血性弧菌PCR检测试剂盒、TAITAI GEN公司的副溶血性弧菌Real-time PCR检测试剂盒和HF公司的副溶血性弧菌LAMP检测试剂盒,以10倍稀释梯度的标准菌液确定各种试剂盒检出限;以国标法为标准,评价每种试剂盒的灵敏度、特异度和符合率;后比较三种试剂盒的耗时、成本和操作性.结果 PCR、Real-time PCR和LAMP检测试剂盒的检出限分别为1.18x103 cfu/ml、11.8 cfu/ml和11.8 cfu/ml;在74份海产品检测中,三种试剂盒的灵敏度分别为100%、100%和100%;特异度分别为56%、48%和50%;符合率分别为70%、65%和66%;三种试剂盒检测结果之间差异无统计学意义(P=0.074);耗时分别为120、80和80 rain;成本分别为:10、40和45元/次;操作性从难到易排列依次为PCR、Real-time PCR和LAMP检测试剂盒.结论 三种分子检测试剂盒的灵敏度高,特异度较低,操作简便,可推荐作为副溶血性弧菌检测的初筛方法.
作者：黄弦；江晓玲；贺小峰；胡贵方 刊期： 2011年第03期
目的 建立产气荚膜梭菌感染小鼠的后肢的气性坏疽动物模型,为早期诊断、了解气性坏疽的致病机理及治疗方法提供依据.方法 小鼠随机分成4组,每组10只.三个实验组分别肌肉注射3.5x109、3.5x108和3.5x107 cfu/ml浓度的产气荚膜梭菌(ATCC13124)菌液0.1 ml,空白对照组肌肉注射生理盐水0.1 ml,72 h后观察小鼠感染情况,取伤口分泌物作革兰氏染色涂片,细菌血平板厌氧培养和荧光定量PCR方法定量检测.结果 3.5x109、3.5x108、3.5x107 cfu/ml实验组和对照组在肌肉注射72 h内的死亡率为90%、70%、10%和0%.各组平均存活时间依次为(20:43±11:12)h、(37:24±25:39)h、(68:36±10:45)h和(72:00±0:00)h,死亡小鼠出现了气性坏疽的症状,分泌物培养和镜检出产气荚膜梭菌;未死亡小鼠康复;空白对照组无任何症状.各组Ct值均值为21.21±2.69、28.45±2.74、32.49±2.87和0.00±0.00,组间P值均<0.05.结论 成功建立了不同浓度的产气荚膜梭菌在不同时间段内感染小鼠的后肢气性坏疽的动物模型,为了解气性坏疽的致病机理及治疗方法奠定基础.
作者：石玉玲；徐少珊；孙朝晖；陈丽丹；刘坚 刊期： 2011年第03期
目的 评价碘缺乏病的防治效果,分析影响因素,为制定防治方案提供依据.方法 各区县随机抽取9个乡镇检查居民食用盐含碘量;抽取5所小学8～10岁儿童检查甲状腺、尿碘和五年级学生碘缺乏病防治知识;查阅组织领导、防治监测、碘盐管理和健康教育资料,进行综合评分;重庆市对区县评估结果进行复核;用X2检验作统计学分析.结果 全市40个区县检查居民食用盐14 217户,合格碘盐食用率为90.00%-99.72%,平均为95.90%,尿碘检测4 050人,中位数为247.20μg/L,300μg/L以上占37.10%,区县中位数100-200μg/L占25%(10/40),200～300 μg/L占57.5%(23/40),>300μg/L占17.5%(7/40);甲状腺检查16 852人,肿大率为3.25%一9.00%,平均为5.80%;学生防治知识平均得分3.1～5.0分,平均为4.4分;防治措施综合评分为86.00～99.00分,平均为95.00分.市级复查中检查食用盐1 250户,合格碘盐食用率为90.91%～100.00%,平均为96.88%;甲状腺检查16 852人,肿大率触诊和B超法为5.00%～8.33%,乎均分别为7.02%和6.64%;防治知识调查1 366人,得分2.5～4.9分;防治措施综合评分为88.8～99.5分.结论 重庆市有39个区县实现了消除碘缺乏病目标,1个县实现了基本消除碘缺乏病目标,市级层级实现了消除碘缺乏病目标,防治工作取得显著成效.但存在碘过量,须降低食盐加碘浓度.
作者：肖邦忠；罗兴建；李心术；吴成果；陈亚琳；黄文利；谢君 刊期： 2011年第03期
目的 研究建立BALB/c小鼠肥大细胞瘤/白血病模型.方法 BALB/c小鼠尾静脉注入小鼠肥大细胞瘤P815细胞,实验按每只小鼠接种细胞数量分为1×107/只组、5×106/只组、2.5×106/只组、1×106/只组、5×105/只组、1×105/只组和溶剂(RPMI 1640 培养液)对照组.观察小鼠的生存状态、体重及肝肺脾(重量、形态、病理)、染色体、血涂片、骨髓涂片、白细胞及血小板计数.结果 注入P815细胞≥1×106/只的所有组小鼠均死亡,<1×106/只的所有组生存良好,且死亡小鼠的生存时间与注入细胞数量呈负向依赖关系(P<0.05).死亡组小鼠体重较注射前相当或减轻、肝肺脾重较对照组及未死亡组显著增加(P<0.05);肝质地变硬,表面可见大量大小不一的白色结节突起,部分脾肺可见出血梗死灶,病理示肝脾有大量异形肥大细胞瘤细胞浸润;脾细胞染色体分析可见肥大细胞瘤细胞的非正常染色体核型;白细胞和血小板计数较对照组降低(P<0.01),血涂片可见少量肥大细胞瘤细胞,骨髓涂片示骨髓原始细胞比例增高.结论 P815细胞通过静脉注射能使BALB/c小鼠形成肥大细胞瘤/白血病,可作为肿瘤实验研究的一种模型构建方法.
作者：孙茂本；王亮；邓兰；周雪云；吴少杰；张超凤；曾雅丽；吴海燕；余莉华；郭坤元 刊期： 2011年第03期
目的 探讨应用双标准曲线的实时荧光PCR法检测原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增在临床乳腺癌诊治中的可行性.方法 收集500例乳腺癌术后新鲜组织标本,抽提组织DNA进行实时荧光PCR检测,采用双标准曲线法定量,通过计算目的 基因浓度和内标基因浓度的比值来判断HER2基因的扩增情况.选择灵敏度和特异度均较高的荧光原位杂交方法作为对照方法.结果 检测阳性标本72例,阴性样本419例.该方法检测的灵敏度为85.9%,特异度为98.79%,准确度为96.74.与荧光原位杂交法(FISH)检测结果相比,二者具有较好的一致性.结论 双标准曲线的实时荧光PCR法用于检测HER2基因扩增相对准确可靠,有较好的临床应用前景.
作者：邓艳华；吴荃；陈华云；李明 刊期： 2011年第03期
目的 分析甲型H1N1流感在广州的流行特征.方法 2009年5月至2010年4月,每周分别从广州四家监测医院采集流感样症状患者的嗽口液或咽拭子,采用real-time PCR方法鉴定甲型H1N1流感病毒;在广州5大城区采集不同年龄的人群血清,通过血凝抑制实验检测血清中甲型H1N1流感抗体;对其时间和年龄的分层进行分析.结果 全年共采集嗽口液或咽拭子3 580份,甲型H1N1流感核酸检测阳性530份,阳性率为14.8%,阳性率高的月份出现在10～12月,为36.5%～42.3%,阳性率高的年龄组为5～岁和15～岁组,为18.5%和24.2%.低的年龄组为≥60岁组,为4.1%.人群血清标本共采集1 527份,甲型H1N1流感抗体阳性439份,阳性率为28.7%,阳性率高的年龄组为5～岁和15～岁组,为36.1%和39.5%,低的年龄组为≥60岁组,为8.6%.结论 甲型H1N1流感的流行期发生在10～12月,流行时间短,感染的主要人群是学龄组人群,而老年人群的感染率相对较低.预防流感的工作重点应放在学校内.
作者：陈艺韵；耿进姝；吴继彬；鲁恩洁；李铁钢；狄飚 刊期： 2011年第03期
目的 探讨2型糖尿病肾病患者外周血单个核细胞组织因子促凝活性(TF-PCA)的改变及其临床意义.方法 63名2型糖尿病患者按照尿白蛋8/肌酐比共分为三组:比值<30 mg/g为正常蛋白尿组(n=22),30 mg/g≤比值<300 mg/g为微量白蛋白尿组(n=26),比值≥300 mg/g为大量白蛋白尿组(n=15);同时选择21名健康体检者作为对照组.采用一期凝固法测定外周血单个核细胞TF-PCA.常规检测空腹血糖、糖化血红蛋白、超敏CRP(Hs.CRP)、尿酸(UA)、胱抑素C(CYSC),并进行相关分析.结果 糖尿病组外周血TF-PCA随尿蛋白水平升高而升高,同时单个核细胞TF-PCA与空腹血糖、Hs-CRP、UA等呈正相关,相关系数分别为0.419、0.293、0.232(P<0.05).结论 2型糖尿病患者外周血单个核细胞TF-PCA明显升高,且与多种因素相关,TF-PCA升高可能与DN的发病机制、病程进展相关.
作者：付文金；郑磊；王前；汤惠华；王少波；叶长钦；陈载鑫；熊石龙；彭兰芬 刊期： 2011年第03期
目的 构建人乳头瘤病毒(HPV)基因分型的液相芯片,针对中国常见的23种型别的HPV进行分型检测,并探讨其在临床应用中的特异性和敏感性.方法 采用HPV通用型引物MY09/11以及一条简并引物对临床样本进行PCR扩增;针对HPV不同型别设计分型探针,并偶联到Luminex微球上,通过Luminexm平台对PCR产物进行分型检测.同时以测序法作为验证标准,对液相芯片法(Luminex法)检测结果进行评价.结果 以测序法作为验证标准,Luminex法对314例HPV样本的分型检测结果为灵敏度98.10%,特异性98.08%,符合率98.09%.Kappa一致性检验结果为0.962.结论 Luminex法用于HPV感染样本中的分型检测具有高灵敏度和特异性,可以用于临床HPV诊断.
作者：彭春梅；邓先连；林斌；胡守旺；陈晓光 刊期： 2011年第03期
目的 了解柳州市不同层次商业性工作者人群特征、艾滋病相关知识、行为及梅毒、艾滋病病毒感染等现状.方法 采用二阶段整群抽样方法抽取调查对象,使用健康问卷面对面调查并采集血样检测HIV和梅毒抗体.结果 本次研究共调查403人.部分调查对象认为能够从表面区分艾滋病感染者,与客人发生性行为时安全套使用率较高,但与固定性伴安全套使用率很低.不同档次对象的年龄、婚姻和文化程度略有不同,安全套使用率也略有差别.调查者中1d接客多20人,1周接客多25人;首次性行为年龄小12岁,首次商业性服务年龄小14岁.58.50%的调查者近1年患过性传播疾病.未发现HIV阳性者,但发现梅毒RPR初筛阳性者10人,阳性率为2.48%.结论 在干预活动时应针对不同层次人群特点,对有配偶或固定性伴者应当加大干预力度和采取不同的策略促其使用安全套,以减少HIV进一步传播.
作者：张英霞；林海涛；俸卫东；单桂苏；张铁军 刊期： 2011年第03期
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是引起输血相关肝炎及慢性肝炎、肝硬化、肝癌的主要病原,目前尚无有效的治疗与预防手段.本文综述了当前世界HCV疫苗研究的进展,并分析了疫苗研制中存在的问题和疫苗研制的策略.
作者：张立营；高博 刊期： 2011年第03期
目的 分析石墨炉原子吸收光谱法测定矿泉水中总铬的测量不确定度.方法 应用测量不确定度评定理论,结合试验方法,建立数学模型,确定和计算测定过程各不确定度分量,分析石墨炉原子吸收光谱法测定矿泉水中总铬的测量不确定度.结果 矿泉水中总铬含量为3.87μg/L,取包含因子k=2,其扩展不确定度为0.16μg/L,终报告矿泉水中的总铬含量为(3.87±0.16)μg/L;同时对影响测定结果的不确定度的各部分因素进行了量化,由标准物质引入的相对不确定度分量urel(标准)=1.1%;由标准曲线引入的相对不确定度分量urel(拟合)=1.3%,由重复测定引入的不确定度分量urel(重复)=0.93%,由回收率引入的不确定度分量urel(Rec)=0.89%.结论 影响测量结果的不确定度主要因素是标准曲线拟合引入的误差,标准物质及其稀释过程引入的不确定度次之,其他因素如环境条件、重复测定、回收率等对测量结果的不确定度影响较小.
作者：苏丹华；梁春霞 刊期： 2011年第03期
目的 从SD大鼠胚胎中获取附植后胚胎上胚层干细胞(post-implantation epiblast stem cells,Episc),并探讨组织来源、胎龄、细胞因子、传代方法等条件对SD大鼠Episc(SD Episc)分离与培养的影响.方法 分别取5.5 d和7.75 d胎龄囊胚上胚层(epiblast),以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,于添加白血病抑制因子(leucocyte inbibitory factor,LIF)或活化素(activin)的基础培养基中,进行原代培养.分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代.后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并对其体外分化能力进行检测.结果 培养于LIF培养基和activin 培养基中的囊胚均发生严重分化.培养于LIF的培养基中的epiblast也发生了严重的自发分化.而在activin培养基中,epiblast形成SD Episc原代集落.经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SD Episc.结论 利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.75 d胎龄SD大鼠胚胎中获得SD Episc.
作者：卢安尚；张薇；邓新燕；赵勇；郭思政；郭中敏 刊期： 2011年第03期
目的 观察急性应激状态下大鼠行为学的改变及不同时间点蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺一β一羟化酶(DBH)的基因表达.方法 将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,模型组又分为造模后1、3、6 h组,每组6只.运用束缚和游泳的方法造模,观察其行为学的改变;并分别在造模后相应时间点取出蓝斑,用RT-PCR法检测蓝斑TH、DBH的表达.结果 模型组造模前后比较,1、6 h组的穿越格数和直立次数明显下降(P<0.05),3 h组的穿越格数、直立次数和理毛次数均明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与对照组大鼠相比,造模后1 h组的穿越格数减少(P<0.05),1、3 h组的直立次数明显降低(P<0.01,P<0.05),1、3、6 h组的理毛次数降低明显且差异均有统计学意义(均P<0.01).模型组蓝斑TH和DBH表达水平较对照组升高,其中3 h组表达高(P<0.05),1、6 h组差异均无统计学意义(P>0.05),TH和DBH两者的表达趋势相似.结论 急性应激使大鼠的行为能力降低,蓝斑去甲肾上腺素能神经元中TH、DBH表达增高,使去甲肾上腺素合成增多,而去甲肾上腺素可以显著影响大鼠的情绪行为,在应激过程中起重要作用;TH、DBH表达的增高可能参与了急性应激所致的行为异常.
作者：陶杨；丁秀芳；陈育尧；孙学刚；覃桂强；张艳平；黄杰春；吕志平 刊期： 2011年第03期
目的 探讨SHP-1对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响.方法 MCF-7细胞株分别瞬时转染SHP-1的特异性siRNA干扰序列:然后分别通过RT-PCR和Western-blot检测MCF-7细胞十扰前后SHP-1基因和蛋白表达变化,并通过RT-PCR检测干扰前后MMP-9基因变化;通过Transwell小室实验检测干扰SHP-1对细胞侵袭能力的影响.结果 RT-PCR和Western-blot证实SHP-1在人乳腺癌细胞株MCF-7中有表达以及SHP-1 SiRNA的干扰效率:干扰SHP-1后,MMP-9的表达量上调;Transwell小室实验证实,与MCF-7阴性干扰对照及空白对照细胞相比,siRNA组的侵袭能力显著增强(P<0.001).结论 乳腺癌MCF-7中SHP-1的表达水平高低和该细胞侵袭能力高低呈负相关,其侵袭可能和MMP-9的表达呈正相关.
作者：黄维甄；邹爱梅；石敏；罗荣城；李荣 刊期： 2011年第03期
目的 探讨脑死亡供体肾脏病理改变及对临床使用的指导意义.方法 对13例脑死亡供体26个肾脏进行了穿刺活检,做HE染色、网状纤维染色及PAS染色.结果 发现大多数患者均有不同程度的近曲小管坏死,而远曲小管、肾小球、基底膜多无改变.选择肾近曲小管上皮细胞坏死<50%、肾小球无明显改变、肌酐<250 μmol/L、年龄<55岁的供体26个肾脏施行了移植,均取得成功.结论 脑死亡供体肾脏根据穿刺病理活检改变并结合临床表现可以作为临床移植的评判依据.
作者：农江；孙煦勇；秦科；赖彦华；聂峰；董建辉；文海涛；李壮江；杨建均；何昌桓 刊期： 2011年第03期
目的 了解阳山县华支睾吸虫病综合防治示范区人群华支睾吸虫感染状况,评估示范区一年来综合防治效果.方法 按国家中期考核评估方案要求分东西南北中5个片随机抽取调查点,采用改良加藤厚涂片法对人群进行虫卵粪检.结果 东片青莲、西片黎埠、南片七拱、北片小江、中片阳城5个片调查点华支睾吸虫感染率分别为7.26%、6.09%、14.80%、7.14%和10.80%,平均为9.28%.感染率由2006年的14.01%下降到9.28%,下降率为33.76%.结论 阳山县居民华支睾吸虫感染率较2006年基线调查结果明显下降,综合防治效果明显.
作者：李志奇；黄新华；张学军；刘狄轩 刊期： 2011年第03期
目的 建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础.方法 设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链,退火形成双链DNA后插入到真核表达质粒psiRNA-hH1 neo中产生shRNA重组质粒载体,经酶切和测序鉴定成功后,转染至L-02肝细胞中,48 h后收集细胞提取总蛋白,Western blotting检测干扰后SET蛋白的表达.结果 shRNA重组质粒的酶切和测序鉴定均正确,Western blotting结果显示重组质粒psiRNA1组的干扰效果较好,对SET蛋白表达的抑制率达60%左右,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建针对人SET基因的RNA干扰真核质粒载体,其能有效地抑制肝细胞内SET蛋白的表达,为深入研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性中的作用奠定了基础.
作者：黄新凤；刘建军；蒋英芝；席仁荣；杨亮 刊期： 2011年第03期
目的 制作广州地区自然水域水中常见硅藻图谱并分析其分布特点.方法 在广州地区自然水域抽取水样,离心沉淀,用硝酸消化处理沉淀物,去酸去盐并涂片镜检,观察、分析其中硅藻的形态并拍摄照片.结果 在2010年3-8月间在测水域共检出硅藻50多种,并制作成图谱;硅藻分布特点:水中硅藻的密度或种类构成比例在同源而分隔的两个水域间可存在明显差异,在水体流动性不强的同一片水域中不同局域问也存在差异,存在潮汐性的河段水体中,这种差异相对较小.结论 硅藻在自然静溢的水体中分布呈局域性,水体自身的来回流动及受到的外来扰动是使水中硅藻分布趋向均匀分布的重要原因.
作者：毕启明；郭晓然；郭鹏；黄成成；曲冬阳；王迪佳；王宇鹏；杨鼎 刊期： 2011年第03期
目的 研究程序性死亡配体-1(PD-L1)在冠心病患者外周血中T淋巴细胞上的表达及意义.方法 按照WHO关于冠心病诊断标准,将实验分为稳定型心绞痛(SA)组(n=23)、急性冠脉综合征(ACS)组(n=21)和正常对照组(n=18),三组均经冠状动脉造影证实.采集三组人群的外周血,用流式细胞技术及RT-PCR技术测定T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达情况.结果 与正常对照组比较,SA组和ACS组外周血T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.01);但SA组与ACS组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 冠心病患者外周血T淋巴细胞PD-L1表达上调,其可能在动脉粥样硬化斑块形成过程中起作用.
作者：陈君；魏亚非；缪绯；武凯；刘映峰；孙茂本；江玲 刊期： 2011年第03期
目的 探讨急性脑出血患者血清甲状腺激素水平及其临床意义.方法 根据脑出血量多少、神经功能缺损程度及治疗2周后的疗效,将98例急性脑出血患者分为:脑出血量≤30 ml为A组、>30 ml为B组;神经功能缺损程度轻型的为C组、中型的为D组、重型的为E组;疗效为显效的为F组、有效的为G组、无效的为H组.选择40例健康者作对照.采用电化学发光法检测急性脑出血患者和健康对照者血清中T3、T4、FT3、FT4、TSH水平.结果 急性脑出血患者A、B、C、D、E、G和H组与健康对照组,B组与A组,D、E组与C组,G、H组与F组之间,甲状腺激素水平差异均有统计学意义(P<0.05),T4、FT4、TSH水平升高,而T3、FT3,水平下降.而疗效为显效的F组与健康对照组比较.甲状腺激素水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 急性脑出血患者T4、FT4、TSH水平升高和T3、FT3水平下降与病情的严重程度及预后密切相关.
作者：龙熙德；郭毅；朱平安 刊期： 2011年第03期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
