张欧;陈清;朱江峰;贾宇静;冯嘉丽;陈冰;胡静
目的 鉴定OCI-Ly1,OCI-Ly8,OCI-Ly10 3株弥漫大B细胞(diffuse large B-cell lymphoma,DI.BCL),并进行分子亚类分型及临床病理相关分析.方法 采用细胞块切片HE染色观察细胞形态,运用CD3,CD20,CD10、Bcl-6、MUM-1抗体进行免疫标记确定其分子亚类;MTT法测定细胞的增殖活力.结果 OCI-Ly1和OCI-Ly8细胞形态以中心母细胞为主,OCI-Ly10以免疫母细胞为主.3株细胞CD20和CD10均弥漫阳性,CD3阴性.OCI-Ly1个别细胞Bcl-6阳性,MUM-1阴性;OCI-Ly8细胞Bcl-6、MUM-1均阴性;OCI-Ly10个别细胞Bcl-6阳性,MUM-1散在或簇状阳性,CD10和MUM-1的表达具有互补现象,在36例DLBCL临床病理标本中发现有7例(19%)CD10和MUM-1表达互补.OCI-Ly10增殖能力显著高于OCI-Ly1、OCI-Ly8(P<0.001).结论 ;OCI-Ly1和OCI-Ly8属于GCB型,OCI-Ly10属于NC型(non-classfied ); OCI-Ly10细胞系及组织标本CD10和MUM-1的表达互补现象有待进一步研究.
作者:王志强;吴自勍;黎相照;杨建芳;黄学平;李锋;周新华;赵彤 刊期: 2011年第04期
目的 了解香港海鸥形菌(LH)对理化生因子的抵抗力.方法 用紫外线、高温、干燥、pH、常用多种化学消毒剂及部分抗菌药物处理两株分离于病人的香港海鸥形菌,定量观察其生长情况.结果 温度≥56℃即可灭活香港海鸥形菌;紫外线照射30s杀灭率>90%,照射20 min可完全灭菌;菌株在pH>8.5或<5.0条件下不能存活,适生存pH范围为5.5~8.5;在3%以上盐浓度的肉汤中不生长;对化学消毒剂和干燥较敏感,除对2%碳酸氢钠、2%来苏儿、0.1%迭氮钠和70%乙醇有一定耐受力外,其余消毒剂均可在30 s内杀灭该菌;香港海鸥形菌在自然干燥后15 min即全部死亡;在18种常见抗菌药物中,仅对头孢噻吩、头孢呱酮、氨苄西林、头孢唑啉、头孢他啶、克林霉素耐药,其余均敏感.结论 香港海鸥形菌对多数理化生因子抵抗力较弱,常用的消毒剂能够有效杀灭LH.
作者:张欧;陈清;朱江峰;贾宇静;冯嘉丽;陈冰;胡静 刊期: 2011年第04期
随着艾滋病感染患者的不断增多,艾滋病检测技术的发展在防止艾滋病的大规模流行以及在艾滋病的早期诊断和治疗方面发挥着重要作用.本文介绍了引起艾滋病的人类免疫缺陷病毒的检测方法,重点说明了各种检测方法 的原理、特异性、可靠性及该方法 的临床实用性.目前艾滋病检测技术正向着开发简易、快速、可靠的方法 的方向发展,以适应艾滋病的大规模筛查和尽量早期诊断治疗的需要.
作者:张英 刊期: 2011年第04期
目的 分析Tumer综合征患儿染色体不同核型的遗传学特征及其与性激素水平的关系.方法 将181例Tumer综合征患儿根据染色体核型分成3组进行统计分析,并对其中75例测定性激素患儿与30例健康女孩血清性激素水平进行比较,并作对照统计分析.结果 181例Tumer综合征中检出45,X核型84例(46.4%),嵌合型25例(13.8%),X染色体结构畸变72例(39.8%); 45,X核型和结构畸变核型组患儿血清中促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH)浓度明显高于对照组(P<0.05),嵌合体核型与对照组差异则无统计学意义;45,X核型组中有4例患儿血清FSH、LH处于正常水平.结论 对于青春前期的生长落后女性患儿建议常规进行染色体核型分析,以排除染色体异常或明确诊断.多数TS患儿伴有血清性激素水平的异常.不同核型对性激素水平影响明显,性激素水平检测对了解Tumer综合征患儿生殖内分泌状态非常必要,可以为激素替代治疗提供依据.
作者:蔡燕娜;邝璐;赵小媛;吴冬燕;刘丽;廖伟娇 刊期: 2011年第04期
目的 探讨高血压患者Hotter上心肌缺血性改变与左心室后壁(LVPW)厚度之间的相关性.方法 收集2005年5月至2008年9月在本院经查冠脉CTA及超声心动图排除冠心病的高血压患者共138例,首先根据Holter上有无发作性ST段压低将资料分为有缺血性改变与无缺血性改变两组,分析缺血性改变与LVPW厚度之间的相关性,并比较两组间LVPW厚度的大小;然后以单因素及多因素分析筛选Hotter上缺血性改变的影响因素;后建立ROC曲线评估LVPW厚度预测发生缺血性改变的价值.结果 高血压患者Holte:上有或无缺血性改变与LVPW厚度及收缩压(SBP)均呈正相关(r=0.429,P=0.000;r=0.274,P=0.034),高血压伴有缺血性改变的患者其LVPW厚度与无缺血性改变的患者相比差异有统计学意义(z=-5.025,P=0.000);伴有LVPW增厚的高血压患者出现Holter上缺血性改变的机率高于无LVPW增厚的患者(χ(2)=23.670,P=0.000);多因素分析中只有LVPW厚度被筛选出来(OR=26.024,P=0.001);以LVPW厚度预测心肌缺血的AUC为(0.760土0.044),P=0.000.佳分界值为9.5mm,以LVPW≥9.5 mm来预测高血压患者Holter上出现缺血性改变,敏感性为63.6%,特异性为80.9%.结论 高血压患者Holter上出现缺血性改变与LVPW厚度呈正相关;以LVPW预测高血压患者Holter上出现缺血性改变的特异性较高,但敏感性较差.
作者:廖海星;汤庆;何文凯 刊期: 2011年第04期
目的 分析东莞市2008-2009年手足口病流行病学特征,为制定有效防控措施提供科学依据.方法 描述性分析东莞市2008-2009年网络直报的手足口病资料.结果 东莞市2008-2009年共报告手足口病病例12687例,年均发病率为87.21/10万,其中2008年发病率为46.26/10万,2009年发病率为128.16/10万,不同年份间发病率的差异具有统计学意义(P<0.01);发病主要集中在4-7月,占总病例数的56.59%;我市各镇(街)均有病例报告,发病率高为大朗镇(364.64/10万),低为长安镇(34.05/10万),不同地区间发病率差异具有统计学意义(P<0.01);发病主要集中在5岁以下儿童,占总病例数的91.09%;以散居儿童为主,占总病例数的76.81%;男性发病率高于女性;两年间共报告暴发疫情22起,罹患率为0.48%~14.58%,时间集中在4-6月份.结论 手足口病是东莞市重点防控的传染病之一,应加强疫情监测和控制,防止其暴发流行.
作者:曾耀明;卢展鹏;张巧利 刊期: 2011年第04期
目的 探讨抗凝血酶III(AT-Ⅲ),凝血因子V (Factor V)基因多态性与广东籍汉族早孕期妇女子痫前期和子痫发生的关系.方法 回顾性分析567例早孕期广东籍汉族妇女AT-Ⅲ及Factor V基因的突变情况,将其中54例妊娠20周后发生子痫前期和子痫的患者作为观察组,513例正常妊娠者作为对照组.基因突变检测分别采用DdeI和MnlI限制性内切酶片段长度多态性分析.结果 观察组AT Ⅲ DdeI++、Ddel+-及DdeI--基因型频率分别为51.9%、27.8%和20.4%,对照组则分别为66.7%,25.5%和7.8%.观察组AT Ⅲ Ddel-基因型频率显著高于对照组(34.3%,20.6%,P<0.01),AT Ⅲ Ddel--基因型在子痫前期和子痫发病中的相对风险率为3.025.观察组和对照组均未检出Factor V Leiden突变.结论 AT Ⅲ基因多态性可能与广东籍汉族妇女子痫前期和子痫发病相关,而Factor V Leiden突变与其发病无关.
作者:苏念军;李冰;冯建怀;于滨 刊期: 2011年第04期
目的 建立成熟、完善的不明原因性习惯性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者子宫蜕膜树突状细胞(dendritic cell,DC )的体外培养体系.方法 选取2008年7月至2009年4月就诊于本院的妊娠早期流产的URSA患者(孕7-14周),将其子宫蜕膜组织初步机械破碎,经混合酶(IV型胶原酶/DNA酶I)消化法分离,梯度离心获得单个核细胞,以粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF )和白介素4(IL-4)体外诱导培养,光镜观察,于第10天收集的悬浮细胞用FITC-HLA-DR、PE-Lin小鼠抗人抗体顺序标记,采用流式细胞术鉴定.结果 从蜕膜组织可获取足够数量蜕膜树突状细胞,体外培养24 h细胞聚集成大小不等葡萄串状,逐渐悬浮,长出突起,第9天悬浮细胞增多,单个悬浮为主,细胞仍小而圆、表面突起少等未成熟DC的形态特征,培养过程中夹杂有少许细长梭状巨噬细胞培养.流式细胞术鉴定培养到第10天的悬浮细胞中DC纯度达80%以上.结论 混合酶消化合并梯度离心法能成功分离URSA患者蜕膜树突状细胞的前体细胞单个核细胞,经GM-CSF联合IL-4培养可以成功诱导具有未成熟特性的DC,为研究树突状细胞在URSA患者母胎免疫耐受中的作用奠定基础.
作者:刘梅兰;刘玉昆;陈慧;王蕴慧;张睿;刘颖琳;张建平 刊期: 2011年第04期
目的 探讨胃十二指肠溃疡穿孔的特征和治疗方法.方法 回顾本院1995-2009年收治的胃十二指肠溃疡穿孔患者病例资料,对年龄、发病至就诊时间、治疗等进行分析.结果 共收治胃十二指肠溃疡穿孔患者共326人.有240例可见不同程度的隔下游离气体,其中25例经胃管注气后再行腹部立卧位X线检查发现隔下游离气体,阳性率为81.29%.消化性溃疡患者中,35岁以下所占比重逐渐下降,而55岁以上患者的比率逐渐增加,老年性患者使用非甾体类消炎药的比率随时间的推移逐渐增加.269例行单纯穿孔缝合术,18例行胃大部分切除术,穿孔缝合+高选迷走神经切断6例,保守治疗33例.结论 根据病史、体征和积极的腹部X线一般可诊断.消化性溃疡的患者中,老年人的比率呈现逐渐增高的趋势,可能与老年性患者非甾体类消炎药使用机率的增加有关.上消化道溃疡穿孔行单纯缝合修补操作简单、安全、并发症少,术后结合正规内科治疗,效果满意.
作者:解传仁;尹锡洲;殷容暖;谢健;郝永钟;丁胜文 刊期: 2011年第04期
目的 制备人微小RNA-16(miR-16)重组腺病毒,研究其在人骨髓间充质于细胞(hMSCS)中的表达及对细胞周期素依赖蛋白激酶6(CDK6)表达的影响.方法 从人基因组DNA中扩增miR-16前体的DNA,定向插人腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV.将经Pme I线性化的重组穿梭载体pAdTrack-CMV-miR-16与腺病毒骨架质粒pAdEasy- I共转化感受态大肠杆菌BJ5183,在细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒rAdTrack-miR-16.将经Pac I线性化的rAdTrack-miR-16在人胚肾293细胞(HEK293 )中包装并扩增出miR-16的重组腺病毒rAd-miR-16.将重组腺病毒感染hMSCs,分别检测miR-16前体和miR-16靶基因CDK6的表达.结果 pAdTrack-CMV-miR-16构建正确,在HEK293细胞中成功包装并扩增出重组腺病毒rAd-miR-16.rAd-miR-16感染的hMSCs中miR-16前体水平显著升高(P<0.05),CDK6mRNA的表达降低不明显,CDK6蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 成功制备了表达人miR-16的重组腺病毒,并能有效介导 miR-16在hMSCs中的表达,为进行miR-16的功能研究创造了条件.
作者:刘居理;林秋雄;邓春玉;朱杰宁;麦丽萍;余细勇;单志新 刊期: 2011年第04期
目的 研究紧张型头痛与中医风湿头痛的对等关系.方法 从理论和临床两个方面论证:①理论研究:734例头痛患者的中医舌脉调查及138例TTH患者中医证型的分布情况;②临床研究:随机选取2007年3月至2010年10月在广州南方医科大学南方医院中医科头痛专科门诊就诊的TTH患者138例,将此138名患者随机分为头痛新1号组、羌活胜湿汤组、盐酸乙哌立松片组各46例,分别给予头痛新1号方、羌活胜湿汤方、盐酸乙哌立松片治疗.疗程3个月.结果 734例头痛患者,按8型分证,仅舌脉而论,573例为舌质暗红或者红,苔薄白,脉缓或弦缓;138例TTH患者中医证型分布如下:风湿头痛101例(73.18%),风湿兼血瘀头痛26例(18.84%),风湿兼肝阳上亢头痛11例(7.98%).临床治疗:头痛新1号组总有效率为93.4%,羌活胜湿汤组总有效率为76.0%,西药组为65.3%,头痛新1号组疗效明显优于两对照组.结论 中医头痛的分型是症状学诊断与中医的舌脉没有明显相关性,TTH属于中医的风湿头痛范畴,TTH的两个亚型分别对应于风湿兼血瘀头痛、风湿兼肝阳上亢头痛,临床上也进一步论证TTH的中医治疗当以祛风、活血、除湿立法,兼以养肝、平肝、安神之法疗效更佳.
作者:伍志勇;陈宝田;聂玲辉;许慧 刊期: 2011年第04期
目的 探讨MMP-9、TIMP-1在HIE患儿血清中表达的临床意义.方法 采集正常新生儿和30例HIE患儿(按病情分为轻度、中度、重度3组)发病后1、3、7 d血液,采用ELISA法检测MMP-9,透射比浊法检测TIMP-1浓度,并与正常组进行比较分析.结果 轻、中、重度3组HIE患儿血清MMP-9与TIMP-1水平于发病后1、3、7 d与对照组比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05);3组患儿中尤以重度组增高显著(P<0.01),且发病第3天MMP-9与TIMP-1均达峰值.结论 MMP-9,TIMP-1参与了HIE的发病,检测其血清水平对疾病严重程度及预后有一定的提示作用.
作者:王瑞华;庞国象;史治宙 刊期: 2011年第04期
目的 探讨AEG-1在大肠癌中的表达及其临床病理意义.方法 采用免疫组化的方法 检测60例正常大肠粘膜、22例大肠腺瘤和60例大肠腺癌中AEG-1的表达.结果 大肠腺癌和腺瘤中AEG-1的阳性率分别为91.7%和90.9%,明显高于正常大肠粘膜组织的23.3%,两者之间差异有统计学意义(P<0.001),其中大肠腺癌的中度阳性率和强阳性率分别为31.7%和60%,而大肠腺瘤分别为63.6%和27.3%,两者差异具有统计学意义(P=0.019);对大肠腺癌中AEG-1表达与肿瘤临床病理特征做相关性分析,结果 表明,AEG-1表达强度与肿瘤T、N分期显著正相关(P<0.05).结论 AEG-1在大肠癌和大肠腺瘤中表达增强,在大肠腺瘤恶变、大肠癌发生发展过程中发挥重要作用,可作为诊断大肠癌新的生物标记物.
作者:罗何三;董忠谊;邹金金;曾钦;吴德华 刊期: 2011年第04期
目的 研究高血压病患者外周血树突状细胞(DCs)的表达情况及其在高血压病发生发展过程中的作用.方法 用流式细胞仪四色荧光标记技术检测29例高血压病(HT)患者(实验组)及31例非高血压患者(对照组)外周血树突状细胞亚群的比例及数量,评价组间差异,并分析高血压病患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDC)与血压(blood pressure,BP)的关系.结果 高血压病(HT)患者与血压正常患者相比,外周血中髓样树突状细胞(mDC)比例[(7.917土4.296)‰比(8.18士5.669)‰]及绝对数[(6.971士2.115)x10(7)/L比(7.123土5.387)×10(7)/L]均降低,但差异无统计学意义(P>0.05).而浆细胞样树突状细胞(pDC)比例[(1.239士0.669)‰比(1.897±0.859) ‰]及绝对数[(1.794土2.244)×10(7)/L比(2.819土4.997) ×10(7)/L]明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05),高血压病患者的外周pDC数量与收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均成呈正相关关系(r=0.424及0.487,P<0.05),pDC比例与SBP、DBP无明显相关(P>0.05).结论 高血压病的发生发展中存在着炎症反应和免疫活化,树突状细胞可能在该过程中发挥一定的作用.
作者:华经海;傅强;李志梁;刘亚杰;靳文;陶丹萍;曹龙兴;刘鹏 刊期: 2011年第04期
目的 采用组织块培养技术探索大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养方法.方法 以成年SPF级Sprague-Dawley大鼠为研究对象,采用组织块培养法获取大鼠骨骼肌卫星细胞,并与C2C 12成肌细胞进行比较,对两种细胞进行形态学研究及采用免疫荧光和免疫组织化学法测定两种细胞a-actin蛋白和Desmin蛋白的表达及分布,从而对骨骼肌卫星细胞进行鉴定.结果 通过组织块培养法获取的细胞增殖旺盛,分化良好.免疫细胞荧光和免疫组织化学实验结果 显示,a-actin蛋白和Desmin蛋白在两种细胞胞浆中均有分布.结论 用组织块培养法获取的骨骼肌卫星细胞具有良好的增殖与分化能力,用此种方法 可培养出高纯度的骨骼肌卫星细胞.
作者:陈思凡;李文学;陈建玲;杨光宇;刘华章;朱伟 刊期: 2011年第04期
目的 构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW.方法 Xho I线性化plenti-EFla-c-Myc-IRES-EGFP,回收片段并补平Xho I,接着BamH I酶切该片段,回收2722 bp片段而获连接用c-Myc-IRES-EGFP;EcoR I线性化pFUGW,回收并补平EcoR I,然后BamH I酶切该片段,回收9174bp片段获连接用载体片段,后使用DNA连接试剂盒(TaKaRa)中的 Solution I将其与连接用c-Myc-IRES-EGFP连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,提取质粒并行酶切鉴定.所构建载体命名为pFUMGW.获pFUMGW后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒感染人胚肾细胞株293、肿瘤细胞株CNE1和C666以建立相应的病毒感染体系.结果 酶切证实成功构建了pFUMGW,按标准程序生产的携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染293,CNE1和C666.结论 成功构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW,为相关后续研究打下了良好基础.
作者:李艳青;史俊文;肖高芳;肖东;姚开泰 刊期: 2011年第04期
目的 测量尿毒症腹膜透析(PD)患者、尿毒症非腹膜透析患者及正常对照者肠系膜上动脉(SMA)血流动力学参数,观察PD后尿毒症患者SMA血流动力学的改变.方法 运用彩色多普勒超声诊断仪检测尿毒症(50例,其中PD 25例、非PD患者25例)及健康对照者(25例))SMA血流动力学参数.结果 3组间管径(D)和收缩期峰值流速(PSV)差异无统计学意义(P>0.05);尿毒症PD组舒张末期流速(EDV)、时间平均流速(TAV)、血流量(Q)均较对照组及尿毒症非PD组明显增高(P<0.05),而阻力指数(RI)、搏动指数(PI)明显低于对照组及尿毒症非PD组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与尿毒症非PD组间上述参数差异均无统计学意义(P>0.05);尿毒症PD组RI,PI与PD时间呈负相关关系(r=-0.72,P<0.05;r=-0.51,P<0.05).尿毒症患者C-反应蛋白、甘油三酯、脂蛋白a明显高于对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇明显低于对照组(P<0.05).结论 彩色多普勒超声可以有效无创地检测尿毒症PD患者SMA血流动力学的改变,从而可能间接了解PD对腹膜功能的影响.
作者:过新民;马文斌;陈辉;钟小仕 刊期: 2011年第04期
目的 研究汞暴露对男性工人血清睾酮水平的影响.方法 选择111名职业性汞作业工人为暴露组,46名无汞暴露史的工人为对照组,测定两组工人血清睾酮(ST)水平,并分析ST与年龄、工龄和尿汞(HgU)的相关性.结果 暴露组工人HgU、ST显著升高,暴露时间是ST升高的主要因素;暴露组工人ST升高率明显高于对照组;暴露组工人ST和尿汞水平无明显相关性.结论 职业性汞暴露可使工人血清睾酮水平明显升高.
作者:赖关朝;艾宝民;梁金霞;刘晓勇;张爱华;唐小江 刊期: 2011年第04期
目的 制备重组人源细胞珠蛋白(recombinant human Cytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备.方法 用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法.结果 筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Westem-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应.本方法 灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10~1250 ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%.结论 成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础.
作者:汤金萍;魏威;王萍;李珍;李莹;董文其 刊期: 2011年第04期
目的 探讨扩散加权成像技术在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)预后评估中的价值.方法 回顾性分析96例临床确诊为HIE患儿的所得资料.将96例患儿分为A组和B组,A组采用常规核磁检查,B组采用扩散加权成像技术检查.观察两种检查方法 在HIE诊断中的影像学特点,并随访患儿的预后.结果 两组患儿一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05).A组检出影像学变化21例,随访预后不良7例,B组检出影像学变化32例,随访预后不良19例;B组HIE患儿的预后评估价值明显高于A组(P<0.05).结论 扩散加权成像可充分反映HIE患儿的病理变化和脑损害,对评估HIE患儿的预后具有一定的应用价值,有利于临床及早采取干预治疗措施.
作者:崔云刚 刊期: 2011年第04期