学术投稿

TRAIL诱导乙型肝炎病毒转染细胞株凋亡的实验研究

唐永玮;吴晓蔓

关键词:TRAIL, HepG2.2.15细胞, 细胞凋亡
摘要:目的 探讨人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15的凋亡诱导效果.方法 应用MTT法了解TRAIL对HepG2.2.15细胞的诱导效果.琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术和Caspase-3酶活性分析TRAIL诱导HepG2.2.15细胞凋亡过程.结果 TRAIL(0.1μg/mL)作用于HepG2.2.15细胞株12、24、36 h后,细胞抑制率分别为17.91%、41.26%、59.85%;PI单染亚二倍体含量12 h后为21.8%,高于对照组的8.7%;24 h后DNA电泳200 bp处出现特异性条带;6 h后Caspase-3酶活性为对照组的4.76倍.结论 TRAIL诱导后,HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15发生凋仁.
热带医学杂志相关文献
  • AECOPD继发肺侵袭性真菌感染临床特征及预后

    目的 探索慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)继发侵袭性肺真菌感染的早期诊断方法,以及影响预后的因素.方法 查阅2000-2008年因AECOPD入院继发肺真菌感染病例,符合侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)者,调阅CT及X档案,记录住院期间抗生素和皮质激素使用史、真菌培养和药敏试验、基础病等进行分析.结果 AECOPD合并肺侵袭性真菌感染25例,死亡4例.其病原学分析显示:白假丝酵母菌16例(64%),光滑假丝酵母菌4例(16%),热带假丝酵母菌2例(8%),克柔假丝酵母菌1例(4%),曲霉菌2例(8%).胸部CT改变以结节影、结节晕轮征、团块影以及空洞为主,分别为:20、17、14和8例次,其中结节晕轮征具有特征性;X线胸片以支气管肺炎样改变、团块影、空洞和支气管炎改变为主,分别为16、14、5、5例次.预后分析提示:机械通气、抗生素使用时间超过7 d、同时使用抗生素种类超过3种、大剂量激素和合并呼吸衰竭等基础病是AECOPD继发肺侵袭性真菌感染预后不良的因素.结论 AECOPD继发肺真菌感染预后差,病死率高(16%),早期胸部CT以及痰检对及早发现肺侵袭性真菌感染有价值.合理使用抗生素,严格掌握AECOPD使用皮质激素以及机械通气的适应证,对改善预后有积极作用.

    作者:蒋文中;马洪明 刊期: 2009年第01期

  • MARS治疗重症恙虫病合并多脏器功能障碍综合征的疗效

    目的 评价分子吸附再循环系统(MARS)治疗重症恙虫病合并多脏器功能障碍综合征(MODS)的效果.方法 60例重症恙虫病合并MODS患者,随机分为MARS治疗组、连续性肾脏替代(CRRT)治疗组和常规综合治疗组.观察并比较组间血流动力学、肝肾功能、凝血功能、呼吸功能、炎症介质以及Marshall评分等在治疗前后的变化,比较3组患者60 d内的生存曲线的差异.结果 MARS治疗后平均心率减慢,平均动脉压升高.总胆红素明显降低,白细胞计数、D-二聚体水平明显降低,血小板计数明显升高,一氧化氮、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13和LBP水平明显降低,PaO2和氧合指数水平均显著提高,气道峰压明显降低,Marshall值降低,均优于常规综合治疗组和CRRT组(P<0.05).MARS治疗后呼吸频率和肌酐水平降低、SaO2和白蛋白水平升高,优于常规综合治疗组(P<0.05).60 d的生存概率分析,MARS组存活率90%(18/20),优于常规综合治疗组存活率45%(9/20)(P=0.001),优于CRRT组60%(12/20)(P=0.031).结论 MARS治疗重症恙虫病合并MODS疗效良好,优于常规综合治疗和CRRT治疗.

    作者:罗红涛;谭家驹;叶一农;刘全妹;龙辉;严海明 刊期: 2009年第01期

  • 膀胱移行细胞癌中E2F3的表达及意义

    目的 探讨E2F3在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR和免疫组化技术检测32例膀胱移行细胞癌及14例正常膀胱移行上皮组织中E2F3 mRNA及蛋白的表达.结果 膀胱移行细胞癌中E2F3 mRNA及蛋白的表达明显高于正常膀胱移行上皮组织(P<0.05),E2F3 mRNA及蛋白的表达随肿瘤分级、分期增高而相应增高(P<0.05).结论 E2F3对膀胱移行细胞癌的发生发展发挥重要的作用,并可在一定程度上反映肿瘤的恶性程度.

    作者:李锦秀;李家兵;张盼;姚惠 刊期: 2009年第01期

  • 胰岛移植研究进展

    胰腺组织的移植,包括胰腺器官(胰腺)和胰岛细胞(胰岛)移植,已经被公认为是治疗1型糖尿病的一个临床选择.成功的胰腺或胰岛移植相对于传统的外源性胰岛素注射疗法来说,可以达到一个正常或接近正常的血糖控制水平和糖化血红蛋白水平,而且还不会出现胰岛素疗法经常出现的严重的低血糖反应.两种类型胰腺组织的移植,都可以有效的降低严重低血糖的事件发生.而且胰腺移植已经被证实可以长时间使血糖保持一种持续正常稳定的状态.对于接受胰腺移植的糖尿病患者,其优点是血糖可以很好的得到控制;但同时也面临着出现手术以及移植后并发症的风险.与胰腺移植相比,成人胰岛细胞移植更加安全,手术简捷,并发症极少.并可多次重复进行;其更加吸引人的地方是它创伤性更小.而且,通过移植前的特殊培养,未来有望实现脱离免疫抑制剂的胰岛移植.不足之一是胰岛移植往往不能使血糖控制在一个稳定的水平,这一点对降低糖尿病并发症的发生往往又是必须的.另外,胰岛移植又使接受移植的患者不得不承受免疫抑制治疗带来的一系列不良反应.尽管新近的发展已使胰岛移植后脱离胰岛素治疗的比率有了很大提高,但是如何使移植物保持更长时间的活力和功能以更好的控制血糖,今后还有很多的事情要我们去做.本文将就近些年胰岛移植的一些相关内容做一简要综述,以期能给临床及科研工作者带来一定的启示.

    作者:马广念;贺德 刊期: 2009年第01期

  • 疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策研究

    目的 探讨深圳市赴疟疾高度流行区回国人员的疟疾综合防制对策,为进一步加强我市的疟疾防制工作提供科学依据.方法 对我市某高新企业赴疟疾高度流行区外派人员进行出国前健康教育、出国间药物预防和回国后健康排查并对该防制对策的效果进行分析研究.结果 在疟疾相关知识健康教育前后,涉外员工的教育依从性和疟疾相关知识水平有显著提高,其中问卷回收率(x2=21.024,v=1,P<0.001)、疫区知识正确性(x2=21.213,v=1,P<0.001)和态度行为正确性(x2=15.142,v=1,P<0.001)增高明显.被干预人员的预防药物使用率逐年上升,疟疾发病率维持在较低水平.疟疾快速筛查方法与病原学检查结果符合率高,有助于病例的早期诊断和治疗.结论 深圳市针对从疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策为我市和其他涉外交流频繁地区的疟疾防制提供了重要的工作经验.

    作者:耿艺介;高世同;黄达娜;李晓恒;张仁利 刊期: 2009年第01期

  • 一起亚硝酸盐污染自来水管网的急性中毒暴发事件调查

    目的 寻找及分析因井水亚硝酸盐污染自来水管网导致中毒暴发事件的原因.方法 根据流行病学调查、环境卫生现场调查资料和水质检验结果分析事故.结果 事故工厂生产工艺需用大量亚硝酸钠和水,生产区有一工业用井水,生产区内井水亚硝酸钠严重超标,井水管道与镇自来水管网相通,事故原因是井水亚硝酸钠污染自来水引起的19例人员亚硝酸盐中毒.结论 工厂违反饮用水卫生规范要求,擅自将井水管道与镇自来水管网相连接,有关部门缺乏对工厂饮用水安全的检查.

    作者:钟嶷;孙兰;景钦隆;石同幸;黄汝明;王德东 刊期: 2009年第01期

  • 广州动物园鸬鹚鲁道夫对盲囊线虫的分子鉴定

    目的 以核糖体DNA(rDNA)的第一与第二内转录间隔区序列(ITS-1及ITS-2)鉴定从广州动物园鸬鹚体内分离出来的鲁道夫对盲囊线虫种类.方法 将鲁道夫对盲囊线虫样品GZ1、GZ2、GZ3和GZ4的ITS-1、5.8 S、ITS-2进行PCR扩增及序列分析,并与GenBankTM公布的Contracaecum rudolphii A、B种相应序列进行比较.结果 来自鸬鹚体内的4条鲁道夫对盲囊线虫具有相同长度的ITS序列,其ITS-1、5.8 S、ITS-2分别为451、157和268 bp,与GenBankTM公布的鲁道夫对肓囊线虫B种(C.rudolphii B)序列几乎完全一致,但在第108位缺失T.结论 来自广州动物园鸬鹚体内的对盲囊线虫是C.rudolphii B.

    作者:张媛;陈武;林瑞庆;黄勉;宋慧群;朱兴全 刊期: 2009年第01期

  • 淮北市仓储环境中粉螨种群组成及多样性分析

    目的 调查仓储环境中粉螨的孳生情况及多样性.方法 采用直接镜检法和水膜镜检法分离粉螨,并进行计数、鉴定及数据分析.结果 420份样本中339份检出粉螨,检出率为80.71%.粉螨密度差异较大,从1.5~286.2 NO·g-1不等.共检获粉螨26种,隶属7科17属.多样性分析表明,丰富度指数(Rmangalef)为2.65,多样性指数(H')为3.14,均匀度指数(J)为0.96.结论 淮北市仓储环境中粉螨种类较多,污染严重,群落组成多样化,应引起重视.

    作者:王慧勇;宋福春;沈静 刊期: 2009年第01期

  • Quik Read CRP分析仪与Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪的临床应用评价

    目的 评价Quik Read CRP分析仪与Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪进行C-反应蛋白(CRP)测定的可靠性.方法 用Quik Read CRP分析仪及Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪分别对不同浓度CRP标准血清,质控血清及30例病人血清进行测定,对比其精密度、准确性和线性,并行干扰试验,经统计学方法进行数据处理,再作相关性比较.结果 实验数据表明,两种仪器相关性良好(r=0.955),且两种仪器受溶血、甘油三酯(TG)以及胆红素凶素的干扰影响极小.结论 这两种仪器精密度和线性较好,准确度较高,抗干扰能力强,具有简便、快速、仪器维护简单等优点,可用于急诊及常规CRP检查,并可适用于多种形式的血液标本(血清、血浆、末梢血及静脉全血).

    作者:王立军 刊期: 2009年第01期

  • 脂质体介导E1A—TK基因转染人肺腺癌细胞A549体外研究

    目的 用脂质体转染真核表达质粒PcDNA3E1A-TK入人肺腺癌细胞A549,观察丙氧鸟苷(GCV)、X射线及二者联合对转染细胞的体外杀伤作用.方法 用阳离子脂质体介导真核表达质粒PcDNA3E1A-TK转染人肺腺癌细胞A549,PCR、RT-PCR方法分别检测转染细胞中E1A-TK基因DNA整合、mRNA表达.MTT法测不同浓度GCV、不同剂量X射线及一定剂量X线照射后再给一定量GCV对转染细胞的生长抑制率.结果 PCR、RT-PCR结果表明转染细胞有EIA-TK基因整合、mRNA表达.根据IC50,转染细胞对GCV、X射线的敏感性分别比亲代细胞提高111.3倍和2.9倍,在作用相同时间后,GCV+X线照射治疗对转染细胞的生长抑制作用比单纯GCV或X线治疗明显增强(P<0.01).结论 脂质体介导外源基因E1A-TK成功转入人肺腺癌A549细胞并获得表达;转染细胞获得了对GCV和X线的敏感性,GCV和X线对转染细胞有协同杀伤作用.

    作者:何祥梁;黄龙生;刘贵真;夏增献;郑广昆;杨小南;马中富;何东华 刊期: 2009年第01期

  • 细粒棘球蚴AgB亚单位基因的联合表达和血清学评价

    目的 为进一步提高AgB抗原在诊断中的敏感性和特异性,将细粒棘球蚴AgB1和AgB2两个亚单位基因在同一载体中进行联合表达,并对联合表达的重组抗原和单基因表达的AgB1、AgB2在血清抗体检测中的差异进行比较研究.方法 在表达载体PET32a中构建AgB1+AgB2(AgBs)联合基因的重组质粒,用ELISA检测重组抗原与病人血清的反应性.结果 构建了AgBs重组质粒,经测序证实插入的联合基因片段序列正确.AgBs重组质粒表达的融合蛋白分子量为38 kDa,为不溶性蛋白.联合表达抗原AgBs对细粒棘球蚴病(CE)血清的敏感性为84.4%,特异性为80.5%;单基因表达的AgB1和AgB2的敏感性分别为75.6%和57.8%,特异性分别为72.6%和91.2%.结论 成功构建了AgB亚单位联合表达基因,联合表达的AgBs抗原对CE血清的诊断价值优于单基冈表达的AgB1或AgB2抗原.

    作者:江莉;冯正;许学年 刊期: 2009年第01期

  • 重组人血红蛋白δ链的制备与鉴定

    目的 克隆人血红蛋白δ(delta)链蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达,经纯化与鉴定,获得δ链蛋白,为建立β-地中海贫血的免疫学筛查方法提供特异性抗原.方法 从K562细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术获得目的 片段并将其克隆到pET-32a及pET43.1a载体中,经PCR、酶切及测序验证,以IPTG诱导其在大肠杆菌中表达.包涵体经变性、复性后以Ni2+亲和层析柱纯化,可溶性蛋白直接以Ni2+亲和层析柱纯化.采用Western Blot和ELISA分析鉴定表达产物.结果 成功构建两种融合表达载体pET32-Hbδ及pET43.1.Hbδ,分别为包涵体表达和可溶性表达,纯化产物经Western blotting和ELISA鉴定均为δ链蛋白.结论 克隆表达并获得了纯化的人血红蛋白δ链,为后续的抗体制备及地中海贫血的免疫筛选方法的建立提供了抗原.

    作者:卢晓;蒋小滔;朱平;富宁 刊期: 2009年第01期

  • 脂多糖诱导家蝇胚胎细胞抗菌肽的初步研究

    目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导家蝇胚胎细胞产生抗菌肽的抗菌活性.方法 LPS诱导家蝇胚胎细胞系(MDEC-07114),收集诱导后4、8、12、16、20、24 h上清液,三氯醋酸提取抗菌肽,抑菌圈法测定抗菌活性.结果 LPS作用处于对数生长的家蝇胚胎细胞后,细胞形态、增殖无明显变化;诱导后8 h家蝇胚胎细胞开始产生抗菌肽,16 h达高峰.诱导后24 h仍有抗菌活性.结论 LPS可诱导家蝇胚胎细胞系MDEC-07114产生具抗菌活性的抗菌肽.

    作者:刘晖;贺莉芳;万启惠;张曦 刊期: 2009年第01期

  • 慢性阻塞性肺疾病大鼠中磷酸化蛋白激酶B与γ—谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达研究

    目的 通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)与磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制.方法 28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组.采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型.检测肺组织中γ-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平.结果 γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组.组间差异有统计学意义(P<0.05).原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).Western blot显示γ-GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05).SPSS10.0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关.结论 COPD大鼠肺组织γ-GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导.

    作者:申严;戴爱国 刊期: 2009年第01期

  • 87例药物性肝损伤的临床特点分析

    目的 研究药物性肝损伤的病因及临床特点,从而提高临床医师对该病的认识.方法 对2003-2008年在本院住院治疗的药物性肝损伤87例进行回顾性研究,分析其所用药物、临床表现和转归等特点.结果 引起肝损伤的药物种类繁多.抗结核药物占首位,其次为抗甲状腺药物和解热镇痛药.肝损伤的临床表现无特异性.经正规的治疗后大多数可以得到满意的治疗效果,也有极少数出现肝衰竭.结论 肝损伤的致病原因繁多,临床表现未发现特异性,也可导致严重后果,临床医师临床用药时应该注意监测肝功能.

    作者:李德昌;朱现丽 刊期: 2009年第01期

  • 育龄青年静止型α—地中海贫血的表型分析

    目的 了解育龄青年静止型α-地中海贫血的表型特征,探讨表型特征的诊断价值.方法 利用血细胞仪和高效液相色谱仪,对117例经基因诊断为静止型α-地中海贫血的佛山地区育龄青年进行MCV、MCH和HbA2等指标的检测,并对其均值及处于正常范围的例数进行统计学分析.结果 在117例静止型仅α-地中海贫血中,MCV、MCH和HbA2分别为(83.55±5.60)fl、(26.10±1.03)pg和(2.84±0.29)%;其中MCV、MCH和HbA2处于正常范围的例数分别占52.99%(62/117)、59.83%(70/117)和92.30%(108/117).右缺失组的MCV及MCH均值分别比左缺失组的高,两者之间差异均有统计学意义(84.17 vs 82.02,t=-2.180,P=0.032;27.06 vs 26.10,t=-3.642,P=0.000).结论 静止型α-地中海贫血表型特征不明显,应用表型特征进行静止型α-地中海贫血初筛存在较高的漏检风险.右缺失的表型特征比左缺失更轻微,其筛查漏检的风险更高.

    作者:曾劲伟;杨光;崔金环;区丽群 刊期: 2009年第01期

  • 手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

    目的 探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义.方法 采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞水平.结果 与正常对照组相比,手足口病患者组CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4-CD8+双阴性调节性T细胞的百分率降低(P值分别为0.008、0.050、0.025),CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-百分率以及CD4/CD8比值差异无统计学意义(P值分别为0.847、0.775、0.149),以上各细胞亚群的百分率以及CD4/CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义.结论 手足口病患者CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞、CD3+、CD3+CD4-CD8+异常变化提示其免疫功能异常.

    作者:裘宇容;何宗忠;孙德华;王强;杨春莉 刊期: 2009年第01期

  • 清远市2006—2007年法定传染病报告信息质量分析

    目的 分析清远市法定传染病报告信息质量情况,为进一步完善传染病管理措施提供科学信息.方法 参照<全国疾病预防控制机构工作规范(2001版)>和<全国法定传染病漏报调查方案>,每年通过自查和抽查相结合的方法对清远市法定传染病漏报及及时报告情况进行调查和分析.结果 2006-2007年共查出医疗机构报告法定传染病种5 622例,漏报1 114例,平均漏报率为19.82%.其中,不同年份、不同地区之间漏报率差异均有统计学意义(P<0.001);乙、丙类传染病的漏报率分别为15.51%、31.93%,丙类传染病漏报率明显高于乙类(P<0.001);医疗机构级别越高漏报率越低;2007年报告和审核及时率均高于2006年.结论 清远市传染病漏报率仍然较高,建立健全传染病疫情报告相关管理制度并贯彻落实,加强传染病防治知识培训,提高医务人员传染病报告意识,加大监督力度,是提高清远市传染病疫情报告质量的重要措施.

    作者:何慧萍;黄金英;孙小康;黄晋飞;曾茜茜 刊期: 2009年第01期

  • TRAIL诱导乙型肝炎病毒转染细胞株凋亡的实验研究

    目的 探讨人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15的凋亡诱导效果.方法 应用MTT法了解TRAIL对HepG2.2.15细胞的诱导效果.琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术和Caspase-3酶活性分析TRAIL诱导HepG2.2.15细胞凋亡过程.结果 TRAIL(0.1μg/mL)作用于HepG2.2.15细胞株12、24、36 h后,细胞抑制率分别为17.91%、41.26%、59.85%;PI单染亚二倍体含量12 h后为21.8%,高于对照组的8.7%;24 h后DNA电泳200 bp处出现特异性条带;6 h后Caspase-3酶活性为对照组的4.76倍.结论 TRAIL诱导后,HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15发生凋仁.

    作者:唐永玮;吴晓蔓 刊期: 2009年第01期

  • 清新县2006—2007年麻疹发病情况分析

    目的 通过对清新县2006-2007年麻疹的发病情况分析,了解其流行趋势,为制定防控措施提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法,运用Epi Info软件进行分析、评价.结果 2006-2007年清新县共报告253例麻疹病例,确诊190例,临床诊断63例,麻疹平均发病率22.14/10万.病例发病时间主要集中在4~7月,占全年病例的67.19%.发病年龄分布呈现<8月龄的婴儿和>20岁年龄组的成人发病增高的现象.56.13%的病例无麻疹疫苗免疫史,32.80%的病例接种史不详.病例呈现全县散发流行及局部地区聚集的现象,乡镇发病率高的达138.72/10万.结论 麻疹的发病水平与其疫苗的初免和复种工作落实情况有密切的关系,免疫接种是目前麻疹防控的重要手段.

    作者:周志珊;李初升 刊期: 2009年第01期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会