申严;戴爱国
目的 用脂质体转染真核表达质粒PcDNA3E1A-TK入人肺腺癌细胞A549,观察丙氧鸟苷(GCV)、X射线及二者联合对转染细胞的体外杀伤作用.方法 用阳离子脂质体介导真核表达质粒PcDNA3E1A-TK转染人肺腺癌细胞A549,PCR、RT-PCR方法分别检测转染细胞中E1A-TK基因DNA整合、mRNA表达.MTT法测不同浓度GCV、不同剂量X射线及一定剂量X线照射后再给一定量GCV对转染细胞的生长抑制率.结果 PCR、RT-PCR结果表明转染细胞有EIA-TK基因整合、mRNA表达.根据IC50,转染细胞对GCV、X射线的敏感性分别比亲代细胞提高111.3倍和2.9倍,在作用相同时间后,GCV+X线照射治疗对转染细胞的生长抑制作用比单纯GCV或X线治疗明显增强(P<0.01).结论 脂质体介导外源基因E1A-TK成功转入人肺腺癌A549细胞并获得表达;转染细胞获得了对GCV和X线的敏感性,GCV和X线对转染细胞有协同杀伤作用.
作者:何祥梁;黄龙生;刘贵真;夏增献;郑广昆;杨小南;马中富;何东华 刊期: 2009年第01期
目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导家蝇胚胎细胞产生抗菌肽的抗菌活性.方法 LPS诱导家蝇胚胎细胞系(MDEC-07114),收集诱导后4、8、12、16、20、24 h上清液,三氯醋酸提取抗菌肽,抑菌圈法测定抗菌活性.结果 LPS作用处于对数生长的家蝇胚胎细胞后,细胞形态、增殖无明显变化;诱导后8 h家蝇胚胎细胞开始产生抗菌肽,16 h达高峰.诱导后24 h仍有抗菌活性.结论 LPS可诱导家蝇胚胎细胞系MDEC-07114产生具抗菌活性的抗菌肽.
作者:刘晖;贺莉芳;万启惠;张曦 刊期: 2009年第01期
目的 了解育龄青年静止型α-地中海贫血的表型特征,探讨表型特征的诊断价值.方法 利用血细胞仪和高效液相色谱仪,对117例经基因诊断为静止型α-地中海贫血的佛山地区育龄青年进行MCV、MCH和HbA2等指标的检测,并对其均值及处于正常范围的例数进行统计学分析.结果 在117例静止型仅α-地中海贫血中,MCV、MCH和HbA2分别为(83.55±5.60)fl、(26.10±1.03)pg和(2.84±0.29)%;其中MCV、MCH和HbA2处于正常范围的例数分别占52.99%(62/117)、59.83%(70/117)和92.30%(108/117).右缺失组的MCV及MCH均值分别比左缺失组的高,两者之间差异均有统计学意义(84.17 vs 82.02,t=-2.180,P=0.032;27.06 vs 26.10,t=-3.642,P=0.000).结论 静止型α-地中海贫血表型特征不明显,应用表型特征进行静止型α-地中海贫血初筛存在较高的漏检风险.右缺失的表型特征比左缺失更轻微,其筛查漏检的风险更高.
作者:曾劲伟;杨光;崔金环;区丽群 刊期: 2009年第01期
目的 了解深圳市娱乐场所服务小姐AIDS知识和相关危险行为,为AIDS行为干预提供依据.方法 按国家综合监测点方案抽样方法抽取4个区娱乐场所性服务小姐413名,采用一对一匿名的问卷式调查和采血.结果 调查对象平均年龄为(22.4±4)岁,性服务小姐AIDS知识较缺乏,蚊虫钉咬会感染艾滋病全对率50%、同桌吃饭会感染艾滋病全对率64.6%、不共用注射器能预防艾滋病全对率95.4%、AIDS传播途径全对率69.1%.安全套使用率低.近一次与客人发生性关系时只有75.9%的性服务小姐使用安全套.性服务小姐感染艾滋病的有1例,占0.24%;感染梅毒的有18例,占4.4%.结论 多数暗娼对艾滋病严重性认识不足,在卖淫活动中未能100%地使用安全套进行安全的性行为,存在着感染与传播艾滋病的高危险性,应加强综合监测与科学防控.
作者:陈琳;谭京广;罗贤如;石向东;甘永霞;张燕;赵锦;蔡文德;宋俊敏;王晓辉 刊期: 2009年第01期
目的 为进一步提高AgB抗原在诊断中的敏感性和特异性,将细粒棘球蚴AgB1和AgB2两个亚单位基因在同一载体中进行联合表达,并对联合表达的重组抗原和单基因表达的AgB1、AgB2在血清抗体检测中的差异进行比较研究.方法 在表达载体PET32a中构建AgB1+AgB2(AgBs)联合基因的重组质粒,用ELISA检测重组抗原与病人血清的反应性.结果 构建了AgBs重组质粒,经测序证实插入的联合基因片段序列正确.AgBs重组质粒表达的融合蛋白分子量为38 kDa,为不溶性蛋白.联合表达抗原AgBs对细粒棘球蚴病(CE)血清的敏感性为84.4%,特异性为80.5%;单基因表达的AgB1和AgB2的敏感性分别为75.6%和57.8%,特异性分别为72.6%和91.2%.结论 成功构建了AgB亚单位联合表达基因,联合表达的AgBs抗原对CE血清的诊断价值优于单基冈表达的AgB1或AgB2抗原.
作者:江莉;冯正;许学年 刊期: 2009年第01期
目的 探索慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)继发侵袭性肺真菌感染的早期诊断方法,以及影响预后的因素.方法 查阅2000-2008年因AECOPD入院继发肺真菌感染病例,符合侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)者,调阅CT及X档案,记录住院期间抗生素和皮质激素使用史、真菌培养和药敏试验、基础病等进行分析.结果 AECOPD合并肺侵袭性真菌感染25例,死亡4例.其病原学分析显示:白假丝酵母菌16例(64%),光滑假丝酵母菌4例(16%),热带假丝酵母菌2例(8%),克柔假丝酵母菌1例(4%),曲霉菌2例(8%).胸部CT改变以结节影、结节晕轮征、团块影以及空洞为主,分别为:20、17、14和8例次,其中结节晕轮征具有特征性;X线胸片以支气管肺炎样改变、团块影、空洞和支气管炎改变为主,分别为16、14、5、5例次.预后分析提示:机械通气、抗生素使用时间超过7 d、同时使用抗生素种类超过3种、大剂量激素和合并呼吸衰竭等基础病是AECOPD继发肺侵袭性真菌感染预后不良的因素.结论 AECOPD继发肺真菌感染预后差,病死率高(16%),早期胸部CT以及痰检对及早发现肺侵袭性真菌感染有价值.合理使用抗生素,严格掌握AECOPD使用皮质激素以及机械通气的适应证,对改善预后有积极作用.
作者:蒋文中;马洪明 刊期: 2009年第01期
目的 建立并分析人源隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确其形态学变化特点.方法 收集一名严重腹泻儿童的粪便,涂片经改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊.应用奥林巴斯(Olympus)BX50万能生物显微镜(日本)摄像系统采集1 439个隐孢子虫卵囊的图像,利用计算机数字图像分析系统测定其长径(L)、短径(W)、周长、面积,用SPSS数据处理软件(12.0版本)分析,计算其卵形指数(L/W)等一系列形态学参数.结果 计算机数字图像分析技术测定人源1 439个隐孢子虫卵囊长径均值为4.78 μm,95%可信区间为4.73~4.82;卵囊短径均值为4.35 μm,95%可信区间为4.33~4.37;卵囊周长、面积和卵形指数均值分别为15.63 μm、15.22 μm2和1.10.计算机数字图像分析技术测定的人、狗和小鼠源隐孢子虫卵囊的形态学参数,经方差分析F值在10.7374~68.8776,P<0.01.结论 利用计算机数字图像分析系统和SPSS数据处理软件,获得人源隐孢子虫卵囊长径、短径、周长、面积、卵形指数的累加和、均值、中值、大值、小值、标准差及95%可信区间等一系列形态学参数.获得的资料是精确的,为鉴别人源隐孢子虫提供了科学信息.
作者:宫玉香;韩秀霞 刊期: 2009年第01期
目的 探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离培养,为内皮祖细胞的临床应用提供实验方法.方法 选择脐静脉血,应用密度梯度离心法,获取单个核细胞,接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板.用加入生长因子VEGF165和bFGF的内皮细胞专用培养基EGM-2MV培养细胞,3 d后,洗掉非贴壁细胞,换培养液继续培养至7 d,收集贴壁细胞进行细胞分析.激光共聚焦显微镜进行细胞功能学鉴定,流式细胞术测定祖细胞和内皮细胞系标志,MTT比色法检测细胞的生长状态.结果 经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞能特异性吸附FITC标记的荆豆凝集素并内吞Dil-acLDL,祖细胞标志CD133及内皮细胞特异性抗原CD34、KDR检测.其阳性率分别为(27.05±2.94)%、(16.37±2.69)%和(56.67±7.29)%;体外培养的内皮祖细胞具有良好的细胞增殖活性.结论 人脐静脉血中可以分离培养内皮祖细胞,为内皮祖细胞的进一步研究及临床应用奠定了基础.
作者:熊石龙;王前;郑磊;包杰;曾方银;裘宇容 刊期: 2009年第01期
目的 研究药物性肝损伤的病因及临床特点,从而提高临床医师对该病的认识.方法 对2003-2008年在本院住院治疗的药物性肝损伤87例进行回顾性研究,分析其所用药物、临床表现和转归等特点.结果 引起肝损伤的药物种类繁多.抗结核药物占首位,其次为抗甲状腺药物和解热镇痛药.肝损伤的临床表现无特异性.经正规的治疗后大多数可以得到满意的治疗效果,也有极少数出现肝衰竭.结论 肝损伤的致病原因繁多,临床表现未发现特异性,也可导致严重后果,临床医师临床用药时应该注意监测肝功能.
作者:李德昌;朱现丽 刊期: 2009年第01期
目的 探讨血清YKL-40和CA125联合检测在卵巢癌诊断中的应用价值.方法 分别用酶免分析法(EIA)和微粒子酶免分析法(MEIA)测定39例卵巢癌、27例卵巢良性肿瘤及40例健康对照妇女血清YKL-40和CA125水平,YKL-40以健康对照组95%可信区间的上限值为阳性,比较YKL-40和CA125在三组间、卵巢癌病人不同临床分期和手术治疗前后水平和阳性率的差异.结果 正常对照组血清YKL-40水平的95%可信区间的上限值为71.9 ng/mL;卵巢癌患者血清YKL-40水平及阳性率显著高于卵巢良性肿瘤组和对照组(t>4.83,P<0.01),而卵巢良性肿瘤组和对照组之间差异无统计学意义(t=0.96,P>0.05).Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌患者血清YKL-40水平显著高于I/Ⅱ期患者(167.9 ng/mL vs 87.7 ng/mL,t=1.86,P<0.01).卵巢癌患者术后第3天和第7天血清YKL-40水平显著低于术前水平(t>2.92,P<0.01);未能手术切除的患者血清YKL-40水平显著高于手术切除者(t=4.06,P<0.01).YKL-40联合CA125诊断卵巢癌的灵敏度为87.2%,特异性为91.0%,阳性预测值为85.0%,阴性预测值为92.4%;YKL-40与CA125联合诊断早期卵巢癌的灵敏度从CA125单指标的33.3%提高到66.7%.结论 YKL-40是一种新的诊断卵巢癌的肿瘤标志物.联合YKL-40与CA125检测可提高对早期卵巢癌诊断的灵敏度.
作者:郝艳华;刘香萍;陈文萍;姚吉龙;程明刚 刊期: 2009年第01期
将内因与外因、局部与整体、一般与特殊、量变与质变、认识论与方法论等唯物辩证法哲学范畴和观点应用于医学检验形态学实验教学中,融知识传授与哲学观渗透于一体,不断提高学生的学习兴趣和分析问题、解决问题的能力,同时培养学生的科学辩证思维,用科学的态度和方法指导工作、学习,逐步成为具有创新精神和实践能力的高素质应用型检验医学人才.
作者:张继瑜;裘宇容;李海侠;包杰 刊期: 2009年第01期
目的 通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)与磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制.方法 28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组.采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型.检测肺组织中γ-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平.结果 γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组.组间差异有统计学意义(P<0.05).原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).Western blot显示γ-GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05).SPSS10.0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关.结论 COPD大鼠肺组织γ-GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导.
作者:申严;戴爱国 刊期: 2009年第01期
目的 以核糖体DNA(rDNA)的第一与第二内转录间隔区序列(ITS-1及ITS-2)鉴定从广州动物园鸬鹚体内分离出来的鲁道夫对盲囊线虫种类.方法 将鲁道夫对盲囊线虫样品GZ1、GZ2、GZ3和GZ4的ITS-1、5.8 S、ITS-2进行PCR扩增及序列分析,并与GenBankTM公布的Contracaecum rudolphii A、B种相应序列进行比较.结果 来自鸬鹚体内的4条鲁道夫对盲囊线虫具有相同长度的ITS序列,其ITS-1、5.8 S、ITS-2分别为451、157和268 bp,与GenBankTM公布的鲁道夫对肓囊线虫B种(C.rudolphii B)序列几乎完全一致,但在第108位缺失T.结论 来自广州动物园鸬鹚体内的对盲囊线虫是C.rudolphii B.
作者:张媛;陈武;林瑞庆;黄勉;宋慧群;朱兴全 刊期: 2009年第01期
目的 寻找及分析因井水亚硝酸盐污染自来水管网导致中毒暴发事件的原因.方法 根据流行病学调查、环境卫生现场调查资料和水质检验结果分析事故.结果 事故工厂生产工艺需用大量亚硝酸钠和水,生产区有一工业用井水,生产区内井水亚硝酸钠严重超标,井水管道与镇自来水管网相通,事故原因是井水亚硝酸钠污染自来水引起的19例人员亚硝酸盐中毒.结论 工厂违反饮用水卫生规范要求,擅自将井水管道与镇自来水管网相连接,有关部门缺乏对工厂饮用水安全的检查.
作者:钟嶷;孙兰;景钦隆;石同幸;黄汝明;王德东 刊期: 2009年第01期
目的 研究检测生化标志物血清肌红蛋白(MYO)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和C-反应蛋白(CRP)对急性心肌梗死溶栓冠脉再通的早期诊断价值.方法 MYO、cTnI、CK-MB使用酶联免疫分析法、CRP使用激光散射比浊法测定127例急性心肌梗死患者溶栓治疗前后MYO、cTuI、CK-MB和CRP浓度和时间的变化,分析急性心肌梗死患者溶栓再通组(83例)和溶栓未通组(44例)上述指标的连续、动态演变.结果 急性心肌梗死溶栓再通组MYO、cTnI、CK-MB和CRP达到峰值浓度的时间较未通组明显提前(P<0.01).其中MYO较cTnI、CK-MB和CRP峰值时间出现更早,分别为(6.1±2.4)h、(13-8±3.5)h、(14.4±3.8)h和(25.2±5.7)h(P<0.01);再通组MYO和CRP峰值浓度明显高于未通组(P<0.01);MYO、cTnI、CK-MB和CRP对判断冠脉再通的敏感性、特异性、预测值差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清MYO、cTnI、CK-MB和CRP可以较好地预测急性心肌梗死患者溶栓再通,其中MYO较cTnI、CK-MB和CRP能更早期判断冠状动脉是否再灌注;CRP对溶栓后冠脉再通的判断也有积极的参考意义.
作者:李挺;伍华;黄杰雄;何慧娟 刊期: 2009年第01期
隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种重要的人畜共患病.近年来,隐孢子虫病的检出率逐年增高,已被列为世界常见的6种腹泻病之一.犬隐孢子虫病世界各地均有报道.严重威胁着人类和动物的健康.本文对犬隐孢子虫病的病原分类、虫体形态和寄生部位、流行病学特点、诊断、防治等方面研究状况进行了综述,为犬隐孢子虫病的有效防制提供参考.
作者:董和平;菅复春;张龙现;宁长申 刊期: 2009年第01期
哺乳动物的Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是一种重要的模式识别受体,TLR3是Toll样受体家族中的一员,与病毒感染密切相关.本文就TLR3相关信号转导途径与病毒感染及凋亡作一综述.
作者:徐娟;黄俊琪 刊期: 2009年第01期
目的 评价Quik Read CRP分析仪与Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪进行C-反应蛋白(CRP)测定的可靠性.方法 用Quik Read CRP分析仪及Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪分别对不同浓度CRP标准血清,质控血清及30例病人血清进行测定,对比其精密度、准确性和线性,并行干扰试验,经统计学方法进行数据处理,再作相关性比较.结果 实验数据表明,两种仪器相关性良好(r=0.955),且两种仪器受溶血、甘油三酯(TG)以及胆红素凶素的干扰影响极小.结论 这两种仪器精密度和线性较好,准确度较高,抗干扰能力强,具有简便、快速、仪器维护简单等优点,可用于急诊及常规CRP检查,并可适用于多种形式的血液标本(血清、血浆、末梢血及静脉全血).
作者:王立军 刊期: 2009年第01期
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)联合人参皂甙Rg3对移植瘤肝癌细胞凋亡的影响.方法 体外培养人肝癌Bel-7402细胞株,种植于雄性裸鼠皮下,32只鼠随机均分成4组:Rg3组(5、10、20 mg/kg)、三氧化二砷组、人参皂甙Rg3+三氧化二砷组(联合用药组)及对照组.实验自肿瘤接种第3天开始,人参皂甙Rg3,隔日灌胃,共20次,三氧化二砷,每次给药为40μg/(kg·d),每日腹腔内注射,连续28 d.对照剂为生理盐水.停药一周后,脱颈处死.完整取出瘤块,检测肿瘤的重量,计算抑瘤率.采用免疫组织化学法检测联合用药组、RS3组、三氧化二砷组及对照组中在裸鼠肝癌移植瘤组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况.结果 三氧化二砷组上调Bax,下调Bcl-2蛋白的表达,作用高于Rg3组,联合组Bcl-2值低,Bax值高,随着Rg3药物浓度的升高,联合组的效果更为明显(P<0.05).结论 在裸鼠体内实验中,人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合应用,可以显著的抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长.其具体机理可能与下调抑凋亡基因Bcl-2的表达,增强促凋亡基因Bax的表达有关.
作者:何芳;何黎 刊期: 2009年第01期
目的 分析清远市法定传染病报告信息质量情况,为进一步完善传染病管理措施提供科学信息.方法 参照<全国疾病预防控制机构工作规范(2001版)>和<全国法定传染病漏报调查方案>,每年通过自查和抽查相结合的方法对清远市法定传染病漏报及及时报告情况进行调查和分析.结果 2006-2007年共查出医疗机构报告法定传染病种5 622例,漏报1 114例,平均漏报率为19.82%.其中,不同年份、不同地区之间漏报率差异均有统计学意义(P<0.001);乙、丙类传染病的漏报率分别为15.51%、31.93%,丙类传染病漏报率明显高于乙类(P<0.001);医疗机构级别越高漏报率越低;2007年报告和审核及时率均高于2006年.结论 清远市传染病漏报率仍然较高,建立健全传染病疫情报告相关管理制度并贯彻落实,加强传染病防治知识培训,提高医务人员传染病报告意识,加大监督力度,是提高清远市传染病疫情报告质量的重要措施.
作者:何慧萍;黄金英;孙小康;黄晋飞;曾茜茜 刊期: 2009年第01期