何芳；何黎
将内因与外因、局部与整体、一般与特殊、量变与质变、认识论与方法论等唯物辩证法哲学范畴和观点应用于医学检验形态学实验教学中,融知识传授与哲学观渗透于一体,不断提高学生的学习兴趣和分析问题、解决问题的能力,同时培养学生的科学辩证思维,用科学的态度和方法指导工作、学习,逐步成为具有创新精神和实践能力的高素质应用型检验医学人才.
作者：张继瑜；裘宇容；李海侠；包杰 刊期： 2009年第01期
目的 克隆人血红蛋白δ(delta)链蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达,经纯化与鉴定,获得δ链蛋白,为建立β-地中海贫血的免疫学筛查方法提供特异性抗原.方法 从K562细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术获得目的 片段并将其克隆到pET-32a及pET43.1a载体中,经PCR、酶切及测序验证,以IPTG诱导其在大肠杆菌中表达.包涵体经变性、复性后以Ni2+亲和层析柱纯化,可溶性蛋白直接以Ni2+亲和层析柱纯化.采用Western Blot和ELISA分析鉴定表达产物.结果 成功构建两种融合表达载体pET32-Hbδ及pET43.1.Hbδ,分别为包涵体表达和可溶性表达,纯化产物经Western blotting和ELISA鉴定均为δ链蛋白.结论 克隆表达并获得了纯化的人血红蛋白δ链,为后续的抗体制备及地中海贫血的免疫筛选方法的建立提供了抗原.
作者：卢晓；蒋小滔；朱平；富宁 刊期： 2009年第01期
目的 探索慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)继发侵袭性肺真菌感染的早期诊断方法,以及影响预后的因素.方法 查阅2000-2008年因AECOPD入院继发肺真菌感染病例,符合侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)者,调阅CT及X档案,记录住院期间抗生素和皮质激素使用史、真菌培养和药敏试验、基础病等进行分析.结果 AECOPD合并肺侵袭性真菌感染25例,死亡4例.其病原学分析显示:白假丝酵母菌16例(64%),光滑假丝酵母菌4例(16%),热带假丝酵母菌2例(8%),克柔假丝酵母菌1例(4%),曲霉菌2例(8%).胸部CT改变以结节影、结节晕轮征、团块影以及空洞为主,分别为:20、17、14和8例次,其中结节晕轮征具有特征性;X线胸片以支气管肺炎样改变、团块影、空洞和支气管炎改变为主,分别为16、14、5、5例次.预后分析提示:机械通气、抗生素使用时间超过7 d、同时使用抗生素种类超过3种、大剂量激素和合并呼吸衰竭等基础病是AECOPD继发肺侵袭性真菌感染预后不良的因素.结论 AECOPD继发肺真菌感染预后差,病死率高(16%),早期胸部CT以及痰检对及早发现肺侵袭性真菌感染有价值.合理使用抗生素,严格掌握AECOPD使用皮质激素以及机械通气的适应证,对改善预后有积极作用.
作者：蒋文中；马洪明 刊期： 2009年第01期
目的 了解江西省余干县驾湖村2007年血吸虫病疫情监测情况.方法 人群以间接血凝试验(IHA)进行免疫学筛查,阳性者再以Kato-katz法进行病原学检查;家畜以顶管孵化法检测;4月上旬采用系统抽样和环境抽样法查螺,对查获的钉螺全部用压碎法检查是否阳性.结果 共检查常住人口906人,阳性155人,阳性率17.11%;粪检阳性9人,阳性率5.92%,推算人群平均感染率为1.01%.耕牛粪检60头,阳性2头,阳性率为3.33%.共查螺238只,无阳性钉螺.结论 江西省余干县驾湖村血吸虫病疫情监测点人、牛感染率和螺情呈明显的下降趋势.
作者：高波；黄兴华；李子圣；方助俊 刊期： 2009年第01期
目的 建立并分析人源隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确其形态学变化特点.方法 收集一名严重腹泻儿童的粪便,涂片经改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊.应用奥林巴斯(Olympus)BX50万能生物显微镜(日本)摄像系统采集1 439个隐孢子虫卵囊的图像,利用计算机数字图像分析系统测定其长径(L)、短径(W)、周长、面积,用SPSS数据处理软件(12.0版本)分析,计算其卵形指数(L/W)等一系列形态学参数.结果 计算机数字图像分析技术测定人源1 439个隐孢子虫卵囊长径均值为4.78 μm,95%可信区间为4.73～4.82;卵囊短径均值为4.35 μm,95%可信区间为4.33～4.37;卵囊周长、面积和卵形指数均值分别为15.63 μm、15.22 μm2和1.10.计算机数字图像分析技术测定的人、狗和小鼠源隐孢子虫卵囊的形态学参数,经方差分析F值在10.7374~68.8776,P<0.01.结论 利用计算机数字图像分析系统和SPSS数据处理软件,获得人源隐孢子虫卵囊长径、短径、周长、面积、卵形指数的累加和、均值、中值、大值、小值、标准差及95%可信区间等一系列形态学参数.获得的资料是精确的,为鉴别人源隐孢子虫提供了科学信息.
作者：宫玉香；韩秀霞 刊期： 2009年第01期
目的 用脂质体转染真核表达质粒PcDNA3E1A-TK入人肺腺癌细胞A549,观察丙氧鸟苷(GCV)、X射线及二者联合对转染细胞的体外杀伤作用.方法 用阳离子脂质体介导真核表达质粒PcDNA3E1A-TK转染人肺腺癌细胞A549,PCR、RT-PCR方法分别检测转染细胞中E1A-TK基因DNA整合、mRNA表达.MTT法测不同浓度GCV、不同剂量X射线及一定剂量X线照射后再给一定量GCV对转染细胞的生长抑制率.结果 PCR、RT-PCR结果表明转染细胞有EIA-TK基因整合、mRNA表达.根据IC50,转染细胞对GCV、X射线的敏感性分别比亲代细胞提高111.3倍和2.9倍,在作用相同时间后,GCV+X线照射治疗对转染细胞的生长抑制作用比单纯GCV或X线治疗明显增强(P<0.01).结论 脂质体介导外源基因E1A-TK成功转入人肺腺癌A549细胞并获得表达;转染细胞获得了对GCV和X线的敏感性,GCV和X线对转染细胞有协同杀伤作用.
作者：何祥梁；黄龙生；刘贵真；夏增献；郑广昆；杨小南；马中富；何东华 刊期： 2009年第01期
目的 探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义.方法 采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞水平.结果 与正常对照组相比,手足口病患者组CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4-CD8+双阴性调节性T细胞的百分率降低(P值分别为0.008、0.050、0.025),CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-百分率以及CD4/CD8比值差异无统计学意义(P值分别为0.847、0.775、0.149),以上各细胞亚群的百分率以及CD4/CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义.结论 手足口病患者CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞、CD3+、CD3+CD4-CD8+异常变化提示其免疫功能异常.
作者：裘宇容；何宗忠；孙德华；王强；杨春莉 刊期： 2009年第01期
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)联合人参皂甙Rg3对移植瘤肝癌细胞凋亡的影响.方法 体外培养人肝癌Bel-7402细胞株,种植于雄性裸鼠皮下,32只鼠随机均分成4组:Rg3组(5、10、20 mg/kg)、三氧化二砷组、人参皂甙Rg3+三氧化二砷组(联合用药组)及对照组.实验自肿瘤接种第3天开始,人参皂甙Rg3,隔日灌胃,共20次,三氧化二砷,每次给药为40μg/(kg·d),每日腹腔内注射,连续28 d.对照剂为生理盐水.停药一周后,脱颈处死.完整取出瘤块,检测肿瘤的重量,计算抑瘤率.采用免疫组织化学法检测联合用药组、RS3组、三氧化二砷组及对照组中在裸鼠肝癌移植瘤组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况.结果 三氧化二砷组上调Bax,下调Bcl-2蛋白的表达,作用高于Rg3组,联合组Bcl-2值低,Bax值高,随着Rg3药物浓度的升高,联合组的效果更为明显(P<0.05).结论 在裸鼠体内实验中,人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合应用,可以显著的抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长.其具体机理可能与下调抑凋亡基因Bcl-2的表达,增强促凋亡基因Bax的表达有关.
作者：何芳；何黎 刊期： 2009年第01期
目的 调查仓储环境中粉螨的孳生情况及多样性.方法 采用直接镜检法和水膜镜检法分离粉螨,并进行计数、鉴定及数据分析.结果 420份样本中339份检出粉螨,检出率为80.71%.粉螨密度差异较大,从1.5～286.2 NO·g-1不等.共检获粉螨26种,隶属7科17属.多样性分析表明,丰富度指数(Rmangalef)为2.65,多样性指数(H')为3.14,均匀度指数(J)为0.96.结论 淮北市仓储环境中粉螨种类较多,污染严重,群落组成多样化,应引起重视.
作者：王慧勇；宋福春；沈静 刊期： 2009年第01期
目的 通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)与磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制.方法 28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组.采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型.检测肺组织中γ-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平.结果 γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组.组间差异有统计学意义(P<0.05).原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).Western blot显示γ-GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05).SPSS10.0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关.结论 COPD大鼠肺组织γ-GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导.
作者：申严；戴爱国 刊期： 2009年第01期
目的 研究检测生化标志物血清肌红蛋白(MYO)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和C-反应蛋白(CRP)对急性心肌梗死溶栓冠脉再通的早期诊断价值.方法 MYO、cTnI、CK-MB使用酶联免疫分析法、CRP使用激光散射比浊法测定127例急性心肌梗死患者溶栓治疗前后MYO、cTuI、CK-MB和CRP浓度和时间的变化,分析急性心肌梗死患者溶栓再通组(83例)和溶栓未通组(44例)上述指标的连续、动态演变.结果 急性心肌梗死溶栓再通组MYO、cTnI、CK-MB和CRP达到峰值浓度的时间较未通组明显提前(P<0.01).其中MYO较cTnI、CK-MB和CRP峰值时间出现更早,分别为(6.1±2.4)h、(13-8±3.5)h、(14.4±3.8)h和(25.2±5.7)h(P<0.01);再通组MYO和CRP峰值浓度明显高于未通组(P<0.01);MYO、cTnI、CK-MB和CRP对判断冠脉再通的敏感性、特异性、预测值差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清MYO、cTnI、CK-MB和CRP可以较好地预测急性心肌梗死患者溶栓再通,其中MYO较cTnI、CK-MB和CRP能更早期判断冠状动脉是否再灌注;CRP对溶栓后冠脉再通的判断也有积极的参考意义.
作者：李挺；伍华；黄杰雄；何慧娟 刊期： 2009年第01期
目的 以核糖体DNA(rDNA)的第一与第二内转录间隔区序列(ITS-1及ITS-2)鉴定从广州动物园鸬鹚体内分离出来的鲁道夫对盲囊线虫种类.方法 将鲁道夫对盲囊线虫样品GZ1、GZ2、GZ3和GZ4的ITS-1、5.8 S、ITS-2进行PCR扩增及序列分析,并与GenBankTM公布的Contracaecum rudolphii A、B种相应序列进行比较.结果 来自鸬鹚体内的4条鲁道夫对盲囊线虫具有相同长度的ITS序列,其ITS-1、5.8 S、ITS-2分别为451、157和268 bp,与GenBankTM公布的鲁道夫对肓囊线虫B种(C.rudolphii B)序列几乎完全一致,但在第108位缺失T.结论 来自广州动物园鸬鹚体内的对盲囊线虫是C.rudolphii B.
作者：张媛；陈武；林瑞庆；黄勉；宋慧群；朱兴全 刊期： 2009年第01期
目的 探讨血清YKL-40和CA125联合检测在卵巢癌诊断中的应用价值.方法 分别用酶免分析法(EIA)和微粒子酶免分析法(MEIA)测定39例卵巢癌、27例卵巢良性肿瘤及40例健康对照妇女血清YKL-40和CA125水平,YKL-40以健康对照组95%可信区间的上限值为阳性,比较YKL-40和CA125在三组间、卵巢癌病人不同临床分期和手术治疗前后水平和阳性率的差异.结果 正常对照组血清YKL-40水平的95%可信区间的上限值为71.9 ng/mL;卵巢癌患者血清YKL-40水平及阳性率显著高于卵巢良性肿瘤组和对照组(t>4.83,P<0.01),而卵巢良性肿瘤组和对照组之间差异无统计学意义(t=0.96,P>0.05).Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌患者血清YKL-40水平显著高于I/Ⅱ期患者(167.9 ng/mL vs 87.7 ng/mL,t=1.86,P<0.01).卵巢癌患者术后第3天和第7天血清YKL-40水平显著低于术前水平(t>2.92,P<0.01);未能手术切除的患者血清YKL-40水平显著高于手术切除者(t=4.06,P<0.01).YKL-40联合CA125诊断卵巢癌的灵敏度为87.2%,特异性为91.0%,阳性预测值为85.0%,阴性预测值为92.4%;YKL-40与CA125联合诊断早期卵巢癌的灵敏度从CA125单指标的33.3%提高到66.7%.结论 YKL-40是一种新的诊断卵巢癌的肿瘤标志物.联合YKL-40与CA125检测可提高对早期卵巢癌诊断的灵敏度.
作者：郝艳华；刘香萍；陈文萍；姚吉龙；程明刚 刊期： 2009年第01期
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对白血病NB4细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法 以不同浓度的RGZ作用于体外培养的NB4细胞0、24、48及72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,并对细胞凋亡前后P53蛋白的表达水平进行检测.结果 RGZ可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系,在细胞凋亡的同时,P53蛋白的表达水平明显升高.结论 PPARγ激动剂RGZ能显著抑制NB4细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,升高促凋亡蛋白P53的表达水平可能是RGZ诱导NB4细胞发生凋亡的重要作用机制之一.
作者：刘晓丽；林东军；肖若芝；刘加军 刊期： 2009年第01期
目的 评价Quik Read CRP分析仪与Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪进行C-反应蛋白(CRP)测定的可靠性.方法 用Quik Read CRP分析仪及Nycocard READER Ⅱ型金标定量仪分别对不同浓度CRP标准血清,质控血清及30例病人血清进行测定,对比其精密度、准确性和线性,并行干扰试验,经统计学方法进行数据处理,再作相关性比较.结果 实验数据表明,两种仪器相关性良好(r=0.955),且两种仪器受溶血、甘油三酯(TG)以及胆红素凶素的干扰影响极小.结论 这两种仪器精密度和线性较好,准确度较高,抗干扰能力强,具有简便、快速、仪器维护简单等优点,可用于急诊及常规CRP检查,并可适用于多种形式的血液标本(血清、血浆、末梢血及静脉全血).
作者：王立军 刊期： 2009年第01期
隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种重要的人畜共患病.近年来,隐孢子虫病的检出率逐年增高,已被列为世界常见的6种腹泻病之一.犬隐孢子虫病世界各地均有报道.严重威胁着人类和动物的健康.本文对犬隐孢子虫病的病原分类、虫体形态和寄生部位、流行病学特点、诊断、防治等方面研究状况进行了综述,为犬隐孢子虫病的有效防制提供参考.
作者：董和平；菅复春；张龙现；宁长申 刊期： 2009年第01期
目的 探讨人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15的凋亡诱导效果.方法 应用MTT法了解TRAIL对HepG2.2.15细胞的诱导效果.琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术和Caspase-3酶活性分析TRAIL诱导HepG2.2.15细胞凋亡过程.结果 TRAIL(0.1μg/mL)作用于HepG2.2.15细胞株12、24、36 h后,细胞抑制率分别为17.91%、41.26%、59.85%;PI单染亚二倍体含量12 h后为21.8%,高于对照组的8.7%;24 h后DNA电泳200 bp处出现特异性条带;6 h后Caspase-3酶活性为对照组的4.76倍.结论 TRAIL诱导后,HBV稳定转染的肝癌细胞株HepG2.2.15发生凋仁.
作者：唐永玮；吴晓蔓 刊期： 2009年第01期
目的 探讨结核分枝杆菌稳定L型感染标本的病原学的检测方法.方法 以非高渗分离培养法诱导并获得结核分枝杆菌稳定L型纯培养物,将其感染豚鼠后进行病原体分离培养,采用PCR方法检测稳定L型培养物的IS986序列并鉴定其性质.结果 结核分枝杆菌稳定L型在常规细菌学方法检查中不能发现或鉴定,但采用非高渗分离培养法能够检出,5例动物病变组织有4例检测出稳定L型,PCR直接扩增动物病变组织有3例呈阳性反应.结论 采用以非高渗分离培养和基因检测为主要内容的非高渗分离培养法,能够快速的检测出样品中潜伏存在的结核分枝杆菌稳定L型,可提高病原学诊断的阳性率和特异性.
作者：罗振华；王和 刊期： 2009年第01期
目的 了解医院消毒质量变化,分析评价消毒效果.方法 每年对医疗机构进行1～2次采样检测,按照卫生部<医院消毒卫生标准>和<消毒与灭菌效果的评价方法与标准>判定样品是否合格,计算合格率,以卫生统计学方法分析消毒质量变化.结果 共监测9所医院,检测样品3 099份,合格率为82.1%,其中2006年(86.1%)和2007年(85.7%)显著高于2005年(67.3%).分类样品中,合格率高为医疗器械,为95.4%;其次是物体表面,为90.3%:医务人员手次之,为78.9%;室内空气低,为35.2%.2005-2007年,分类样品年份比较,空气合格率2007年高为53.7%,2005、2006和2007年间相互比较,差异具有统计学意义.医务人员手合格率2006年为81.3%,高于2005年的72.4%.医疗器械合格率2005年为100%,2006-2007年呈下降趋势.结论 九龙坡区消毒效果合格率虽呈逐年上升趋势,但总体合格率不高,分类合格率不平衡.消毒措施有待加强,消毒质量有待提高.
作者：杨以平；谢健 刊期： 2009年第01期
目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导家蝇胚胎细胞产生抗菌肽的抗菌活性.方法 LPS诱导家蝇胚胎细胞系(MDEC-07114),收集诱导后4、8、12、16、20、24 h上清液,三氯醋酸提取抗菌肽,抑菌圈法测定抗菌活性.结果 LPS作用处于对数生长的家蝇胚胎细胞后,细胞形态、增殖无明显变化;诱导后8 h家蝇胚胎细胞开始产生抗菌肽,16 h达高峰.诱导后24 h仍有抗菌活性.结论 LPS可诱导家蝇胚胎细胞系MDEC-07114产生具抗菌活性的抗菌肽.
作者：刘晖；贺莉芳；万启惠；张曦 刊期： 2009年第01期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
