郭卫平;卫洪波;郑峰;陈图锋;黄江龙;刘建培;区广生
胚胎干细胞是能在体外培养中保持自我更新和多分化潜能的细胞.因此,牛胚胎干细胞系是基因工程、治疗性克隆、发育生物学、人类疾病动物模型研究的良好实验载体.公认的胚胎干细胞系已在小鼠和灵长类动物中建立.虽然关于牛类胚胎干细胞的报道也已有不少,但是真正的牛胚胎干细胞建系尚未获得成功.本文将综述当前牛胚胎干细胞建系的研究进展并对其中存在的问题,如胚胎分离胎龄、牛胚胎干细胞识别与鉴定、培养条件和与分化相关细胞因子和信号通路等,进行探讨并提出可能采取的解决办法.
作者:卢安尚;胡海勋;张薇;郭中敏 刊期: 2009年第12期
医学发展到今天,传染病的发生和流行已得到了有效的控制,某些烈性传染病有的已被消灭或接近消灭,这表明人类在同感染性疾病的斗争中取得了一定的胜利,然而随着社会和环境的变迁,人类的疾病谱也不断发生着变化,如一些先前不被重视的感染性疾病如机会性感染已成为临床比较棘手的难题,某些情况下,免疫低下导致的机会性感染比原发基础疾病更为凶险.因而,机会性感染已成为临床各项工作的重要研究课题,本文就机会性感染的现状和相关研究的发展作一概述.
作者:谷俊朝;刘建 刊期: 2009年第12期
目的 了解湘潭地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价.方法 用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析.结果 HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100%,湘潭地区HBV各种基因型分布比例:B型占74.74%,C型占11.58%,B、C型混合感染占13.68%.无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBV B型和C型感染率存在显著性差异,其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组.结论 HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值.湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点.
作者:段建平;朱坤;吴薇佳;张太松;易红根;李明 刊期: 2009年第12期
目的 了解本院2006-2008年住院患者痰液中病原菌的主要种类和耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法进行药敏试验.念珠菌利用显色平板分离和鉴定,采用K-B法进行药敏试验.数据分析用WHONET5.4软件.结果 住院患者痰液中细菌以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主,念珠菌属以白色念珠菌为主.痰液中G-杆菌耐药率一直较低的为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为56.0%~69.0%和59.7%~68.1%.痰液中G+球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率一直为100%,其他抗菌药物的耐药率均较高.金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药率居高不下,为68.0%~71.6%和85.8%~90.0%.念珠菌属对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0.结论 住院患者痰液中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs水平、非发酵G-杆菌碳青霉烯类耐药率和葡萄球菌属甲氧西林耐药率均不断增高或居高不下,应加强抗菌药物的合理使用,以降低耐药率;采取有效的隔离措施可以防止多重耐药菌的扩散.
作者:芮勇宇;王前;裘宇容 刊期: 2009年第12期
目的 研究胎儿血红蛋白纯化的佳方法,并对其进行免疫活性鉴定.方法 采用生理盐水洗涤、四氯化碳萃取得到粗提胎儿血红蛋白,再经sephadexG50凝胶层析柱纯化.纯化后的胎儿血红蛋白利用SDS-PAGE电泳、蛋白质印迹鉴定其性质.结果 获得了具有生物活性的胎儿血红蛋白,经SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白杂带消失,蛋白单体相对分子质量为16000 Mr,纯度为95%,蛋白质印迹结果显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性.结论 该方法成功获得了纯度较高的胎儿血红蛋白,且操作简便,纯化效果好.
作者:李星;曾嵘;金春华;张青;李莉 刊期: 2009年第12期
目的 了解东莞市美沙酮维持治疗门诊海洛因成瘾者的心理健康及社会支持情况,为采取进一步的干预措施提供依据.方法 采用症状自评量表SCL-90和社会支持量表对2007年4月至2008年8月在美沙酮维持治疗门诊就诊的海洛因成瘾者进行调查.结果 除阳性均分外,该人群的症状总分、总均分、阳性项目数、躯体化、强迫、人际关系、抑郁、焦虑、敌意、恐怖、偏执、精神病性因子得分均显著高于全国常模(P<0.001).其社会支持总分与全国常模比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 接受调查的东莞市美沙酮治疗门诊的海洛因成瘾者存在感觉、情绪、行为、人际关系、饮食睡眠等方面的心理问题,但该人群近期获得的社会支持良好.应进一步加大对该人群的尊重、关爱、支持和鼓励的力度,同时有必要对该人群的心理健康和社会支持情况进行动态测定和分析.
作者:张巧利;金行申;袁丁;方晓君;郑少敏 刊期: 2009年第12期
齿龈阿米巴(Entamoeba gingivalis)与口腔毛滴虫(Trichomonas tenax)是寄居人体口腔龈沟、龋齿和牙垢内的原虫.越来越多的流行病学调查及动物实验都间接或直接的证明了两种原虫与口腔疾病的密切关系.本文重点综述两种口腔原虫的形态学观察、人群中感染情况、致病机制、病原诊断方法和防治措施方面的研究进展,以期推动研究的进一步深入,为口腔疾病的治疗带来新的曙光.
作者:徐曙光;吕向辉;牛卫兵 刊期: 2009年第12期
目的 动态观察细粒棘球绦虫转正Eg95-Eg31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠后脾T淋巴细胞的增殖情况.方法 热絮凝法提取转基因苜蓿疫苗叶蛋白,配成浓度为20 μg/μL.88只BALB/c小鼠随机分为两组,用100 μl(约含1μg融合抗原)口服灌胃和10 μl(约含0.1μg融合抗原)鼻腔黏膜接种分别免疫小鼠,每3天1次,连续免疫2月.在末次免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各组随机剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,体外经Eg粗抗原(EgAg)或刀豆素A(ConA)刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测免疫小鼠脾T淋巴细胞增殖情况.结果 口服灌胃组的脾T淋巴细胞增殖水平在末次免疫后4~10周升高,在末次免疫后6周达高水平;鼻腔黏膜接种组的脾T淋巴细胞增殖水平在末次免疫后4~12周升高,在末次免疫后6周达高水平;鼻腔黏膜接种组脾T淋巴细胞增殖水平高于口服灌胃组.EgAg或ConA刺激组脾T淋巴细胞增殖水平高于相应原液组,且ConA刺激组高于相应EgAg刺激组(P<0.01或P<0.05).结论 细粒棘球绦虫转正Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗能诱导免疫鼠产生脾T淋巴细胞增殖反应,鼻腔黏膜接种途径优于口服灌胃途径.
作者:叶艳菊;李文桂 刊期: 2009年第12期
目的 研究抗病毒药物利巴韦林体外抗肠道病毒(EV)的效果.方法 采用细胞病变效应(CPE)法和MTT分析法,观察利巴韦林对肠道病毒(EV71、CAV16、CBV3、ECHO11、EV84)的抑制作用.结果 利巴韦林对Vero细胞的半数毒性浓度(TC_(50))为2.09 mg/mL,0.2 mg/mL浓度的利巴韦林对5种肠道病毒均有抑制作用,对CAV16、EV71、ECHo11、EV84、CBV3的抑制率分别为13%、27%、36%、23%、58%.对EV84、EV71病毒,利巴韦林浓度为0.1 mg/mL时其抑制率为16.5%、29.5%;对CBV3病毒,利巴韦林抗病毒作用与其剂量呈正相关,半数有效浓度(IC_(50))为0.125 mg/mL,治疗指数(TI)为16.72.结论 利巴韦林在体外对肠道病毒具有抑制作用,对不同的肠道病毒其抑制效率不同,对CVB3的抑制率较高.
作者:田新贵;李翔;周荣;彭涛 刊期: 2009年第12期
目的 应用简并引物RT-PCR和RACE方法获取白纹伊蚊Rh类糖蛋白(Aedes albopictus rhesus-like glycoprotein,AaRh)基因的全长cDNA.方法 根据冈比亚按蚊、埃及伊蚊等亲缘关系较近物种的Rb类糖蛋白同源性分析结果,在氨基酸高度保守区域184/343和219/337氨基酸位点设计2对简并引物,以白纹伊蚊雌蚊总RNA为模板,应用巢式RT-PCR扩增AaRh的基因片段.根据获得的AaRh基因部分序列,设计2对特异性引物AaRh GSP1、CSP2和AaRh GSP3、GSP4,应用5'RACE和3'RACE分别扩增AaRh基因的5'端和3'端cDNA片段,然后拼接出全长cDNA序列.通过在线生物信息学分析(NCBI和Expasy),对目的 基因序列进行生物信息学分析.结果 应用2对简并引物进行巢式RT-PCR,获得379 bp AaRh基因片段.应用5'RACE和3'RACE方法,分别获得AaRh基因5'端1008 bp、3'端822 bp cDNA序列,根据两个片段的首/尾共同序列拼接为1717 bp的基因片段.该核苷酸序列经BLASTn分析显示,与埃及伊蚊Rh蛋白的一致性高达95%,鉴定其为白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因.AaRh基因具有完整的开放阅读框,其ORF从第128位到1516位含1389bp,编码462个氨基酸.Expasy在线生物信息学程序分析显示,白纹伊蚊Rh类糖蛋白是一个整合膜蛋白,跨膜11次,58aa-446aa具有铵离子通道的结构功能域;理论等电点(pI)5.37,分子量49775.10 Mr,1aa-26aa可能为分泌信号肽序列;含有4个潜在的天冬酰胺糖基化位点和17个线性抗原决定簇,翻译后可能进行糖基化修饰,提示其为糖蛋白.结论 成功获取AaRh基因的全长cDNA,生物信息学分析结果为AaRh蛋白的生物学特性和功能研究奠定了基础.
作者:吴瑜;郑小英;张美春;何蔼;李卓雅;詹希美 刊期: 2009年第12期
目的 调查分析桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义.方法 采用女性阴道分泌物革兰染色方法检测阴道毛滴虫、念珠菌和线索细胞,酶联免疫法检测沙眼衣原体,培养法鉴定淋球菌和支原体.结果 1030例样本中,人型支原体阳性52例(5%),其中5例为单独人型支原体定植,而47例(90.4%)为混合菌感染,以解脲脲原体为主(30/52,57.7%).宫颈炎组与非宫颈炎组人型支原体的感染率差异无统计学意义(X~2=0.51,P>0.05).7例人型支原体阳性的宫颈炎病例同时混合感染沙眼衣原体或淋球菌,10例人型支原体阳性的非宫颈炎病例同时伴有念珠菌或阴道毛滴虫感染,或细菌性阴道病.结论 无论女性是否患宫颈炎,人型支原体均可以定植于宫颈管,但并不是单独引起宫颈炎的病原体.
作者:郑和平;李美玲;冯占芹;黄进梅 刊期: 2009年第12期
目的 查明广州市2例人感染猪链球菌病的感染来源、流行特征,为预防控制疫情提供依据.方法 采用流行病学调查方法进行回顾性调查和现场调查,采集脑脊液标本进行细菌培养、分离,用PCR进行鉴定.结果 患者均有明显的生猪接触史且首例患者手部有伤口,起病急,全身中毒症状明显,病程进展迅速,均为脑膜炎型.患者脑脊液分离培养出猪链球菌经生化和PCR检测结果为猪链球菌Ⅱ型,病人经及时治疗均痊愈出院.结论 2例病例均为人感染猪链球菌病(Ⅱ型)实验室确诊病例,为散发疫情,相互间无流行病学关联,传播途径可能为接触被猪链球菌污染的生猪肉.
作者:李美霞;杨智聪;汤国球;沈秋逢 刊期: 2009年第12期
目的 开展肺炎链球菌自溶酶(LytA)生物安全性的动物实验研究,为其申报生物制品鉴定提供实验数据.方法 制备纯化的重组表达LytA蛋白,以6.5 μg、13.0 μg和19.5 μg 3种剂量黏膜免疫BALB/c小鼠,根据(中华人民共和国国家标准食品安全性毒理学评价程序>(GB15193.1-1994)进行LytA的90 d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验检测,以分析其生物安全性. 结果 90 d喂养试验结果显示各实验组小鼠与对照组小鼠的体重增长趋势一致,且各时间点检测的小鼠体重均无显著性差异(P>0.05).传统致畸试验检测发现各实验组小鼠与对照组小鼠心脏、肺、肝脏、肾、脾、胃、子宫重量、红细胞和白细胞数目、谷丙转氨酶、尿素氮、总胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、白蛋白及球蛋白等指标均无明显差异(P>0.05).小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果显示LytA经鼻腔黏膜免疫小鼠无遗传毒性.结论 利用90 d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验证明LytA鼻腔黏膜免疫BALB/c小鼠安全、毒副作用不明显,有良好的生物安全性,值得进一步研究.
作者:尤旭;吴忠道;韩艳平;徐一月;何思杰;吴利;魏洁;鲜墨;张莉滟;吕志跃 刊期: 2009年第12期
目的 分析结核病控制项目实施近4年以来,湘潭市肺结核患者中,不同样本人群中断治疗的原因,探索减少中断治疗的针对性对策.方法 收集整理我市2005-2008年因各种原因中断治疗的肺结核患者共377例,对样本人群的人口、社会经济情况(包括样本的年龄、性别、收入水平、是否常住人口、医疗保险享受情况)以及样本的诊疗相关信息(包括患者的就医过程、不良反应发生情况)进行建模分析,分析导致中断/终止治疗的影响因素.结果 湘潭市2005-2008年发生肺结核中断治疗情况的样本人群中,常住人口与流动性人口具有不同的人口、社会经济背景:中断治疗的影响因素集中表现为疾病相关知识的缺乏、严重的不良反应、以及经济困难与交通不便.数据建模分析结果显示,高知识水平、享受医疗保险成为中断治疗模型中的保护性因素,而严重不良反应以及年龄较大成为中断治疗模型中的危险性因素.结论 针对湘潭市不同人口、社会经济背景的样本人群,分析其肺结核中断发生的各自影响因素,并制定有针对性的对策,有助于进一步提高我市肺结核病防治工作的成效.
作者:袁伟;杨华林;李家明 刊期: 2009年第12期
目的 分析一起甲肝的暴发原因及控制措施.方法 经过规范的流行病学调查,在SPSS13.0软件上对所得数据进行统计分析.结果 有21名甲肝患者,其中19例有饮用生水史,2例未有饮用生水史(P<0.001).结论 饮用水污染是本次甲肝暴发的原因,应该加强生活饮用水的安全检测,防止污染.
作者:李建勋;张胜勇;郝洪武 刊期: 2009年第12期
目的 了解延安市嗜肺军团菌的感染情况.方法 采用微量凝集法对286份呼吸科住院患者血清标本进行嗜肺军团菌Lp1型军团菌抗体测定.结果 抗体阳性率为17.13%,其中男为18.56%,女为15.13%;在各年龄组均有嗜肺军团菌Lp1型抗体阳性者,其中40岁年龄组的感染率(26.09%)高;呼吸科疾病中肺结核患者合并嗜肺军团菌LP1感染率较高,为26.56%,各疾病类型之间感染率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 延安市存在一定的嗜肺军团菌感染,需加强对军团病血清学的监测工作.
作者:景彩霞;薛亚娟;陈建平 刊期: 2009年第12期
目的 研究中药方剂对急性骨髓型放射病的治疗效果和对造血系统的作用及其作用机理.方法 选用元参等11种中药组成元参组方,小鼠一次皮下注射后,观察不同时间外周血细胞、胸腺重量、骨髓有核细胞、粒系造血祖细胞、胸腺细胞与骨髓细胞混合培养后粒系造血祖细胞的变化.结果 元参组方早期加速粒细胞的成熟和释放,第6天约为注射前的1.5倍.给药8 d后,试验组胸腺重量、骨髓有核细胞、脾指数分别为(85.9±5.6)mg、(8.9±1.3)×10~6/每根股骨、1.42,对照组胸腺重量、骨髓有核细胞、脾指数分别为(74.2±6.2)mg、(6.8±0.5)×10~6/每根股骨、1.0, 试验组明显高于对照组.试验组小鼠胸腺细胞与对照组小鼠骨髓细胞按20∶1混合培养,骨髓CFU-G约为加入未注射元参组方的小鼠胸腺细胞的1.5倍.未注射元参组方则未见有放大作用.结论 元参组方对外周血白细胞、骨髓有核细胞、胸腺重量和粒系造血祖细胞有明显的升高作用,激活胸腺细胞对粒系造血祖细胞的增殖有明显的放大作用.这种放大作用通过元参组方激活胸腺细胞实现.
作者:刘保昌;虢国泰;马丽;刀鸿威 刊期: 2009年第12期
目的 了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布.方法 在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA 法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较.RT-PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒.结果 登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3%,非疫点健康人群抗登革病毒IgGc抗体阳性率为3.8%,两者差异有统计学意义(P<0.01);登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0~20、21~30、31~40、41~50、51~60、61~70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3.8%、5.8%、9.1%、26.5%、27.7%、32.5%和35.1%.30岁以下年龄组与31~40岁年龄组、31~40岁年龄组与41~60岁年龄组、41~60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义(P<0.05).登革熱疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体.RT-PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒.结论 登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环.
作者:郑小英;吴瑜;张美春;何霭;李卓雅;曲振宇;詹希美 刊期: 2009年第12期
目的 观察双水平气道正压通气对慢性阻塞性肺疾病夜间低氧的治疗作用.方法 取60例慢性阻塞性肺疾病患者,随机分成2组.对照组30例使用吸氧、抗感染等常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用夜间双水平气道正压通气治疗4 h,疗程为7 d.分别观察2组在治疗前后低氧血症及心率失常发生率和肺动脉压力的变化.结果 双水平气道正压通气组在治疗前后自身对照以及与对照组比较,夜间低氧血症及心律失常发生率和肺动脉压力的改变均有统计学意义(P<0.05~0.01).结论 双水平气道正压通气能改善慢性阻塞性肺疾病患者的夜间低氧血症,减少心律失常的发生率,降低肺动脉压力,可作为治疗慢性阻塞性肺疾病的重要方法之一.
作者:张春云;陈益民 刊期: 2009年第12期
目的 探讨中低位直肠癌合并自发性穿孔的诊断与治疗措施.方法 回顾性分析11例中低位直肠癌合并肠穿孔的诊断与治疗.收集患者的一般情况、发病时临床表现、实验室检查、术中探查情况、手术方式、病理资料及患者结果等临床资料,探讨其临床诊疗特点.结果 除弥漫性腹膜炎及腹腔内游离气体等消化道穿孔常见临床表现外,穿孔12 h内,11例中有7例(63%)白细胞计数未见升高,其中有4例(36%)白细胞计数下降明显.术前仅2例(18%)经直肠指诊诊断为直肠癌.除3例(28%)肿瘤自身穿孔外,8例(72%)穿孔部位位于乙状结肠.9例(81%)一期肿瘤切除患者中8例痊愈出院.结论 术前明确诊断较为困难,直肠指诊是术前明确诊断的唯一方法.弥漫性腹膜炎症状后短期内出现白细胞水平下降这种现象可能是下消化道穿孔特征性表现.除少数肿瘤部位穿孔外,穿孔部位多位于乙状结肠.治疗以手术治疗为主,一期肿瘤切除是安全可靠的.
作者:郭卫平;卫洪波;郑峰;陈图锋;黄江龙;刘建培;区广生 刊期: 2009年第12期