学术投稿

人胎儿血红蛋白的纯化及免疫活性鉴定

李星;曾嵘;金春华;张青;李莉

关键词:胎儿血红蛋白, 蛋白纯化, 产前诊断
摘要:目的 研究胎儿血红蛋白纯化的佳方法,并对其进行免疫活性鉴定.方法 采用生理盐水洗涤、四氯化碳萃取得到粗提胎儿血红蛋白,再经sephadexG50凝胶层析柱纯化.纯化后的胎儿血红蛋白利用SDS-PAGE电泳、蛋白质印迹鉴定其性质.结果 获得了具有生物活性的胎儿血红蛋白,经SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白杂带消失,蛋白单体相对分子质量为16000 Mr,纯度为95%,蛋白质印迹结果显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性.结论 该方法成功获得了纯度较高的胎儿血红蛋白,且操作简便,纯化效果好.
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  • 晚期血吸虫病门脉高压症术后近期再手术分析

    目的 分析晚期血吸虫病门脉高压症术后近期再手术原因,探讨控制再手术率的措施.方法 回顾性分析2004年9月至2009年9月湖南省晚期血吸虫病救助期间23例近期再手术病例资料.结果 晚期血吸虫病门脉高压症手术589例,近期再手术23例,再手术率为3.9%.其中2次手术16例,3次手术6例,4次手术1例.再手术原因有腹腔大出血、消化道穿孔、胰尾部损伤、粘连性肠梗阻、切口感染、切口裂开、膈下脓肿.所有患者均痊愈出院,随访5~20月均无严重并发症出现.结论 晚期血吸虫病术后近期再次手术原因与术前准备不充分,术中操作过失及术后处理不到位有关.加强围术期处理是提高手术质量和疗效、控制再手术率的关键.

    作者:邓维成;丁国建;王鹏;李紫成;潘舸;陈学金;刘佳新 刊期: 2009年第12期

  • 广州市18岁以下儿童青少年血脂水平的正常参考值调查

    目的 了解广州市18岁以下儿童青少年血脂水平,为该群体提供血脂水平正常参考值范围.方法 采用多阶段随机抽样,抽取广州市区1390例(男/女=701/689)18岁以下人群,根据年龄(每3岁为一年龄段)及性别分为12组(0~岁男女组,3~岁男女组,6~岁男女组,9~岁男女组,12~岁男女组,15~18岁男女组),采集空腹静脉血,应用罗氏Integra400plus全自动生化仪,酶法测定总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG),采用美国儿童青少年国家胆固醇教育计划(NCEP)推荐的取TC及LDL-C第75及第90百分位点作为临界脂蛋白水平及高脂蛋白浓度标准.并取TG第90百分位点作为高甘油三酯血症浓度.取HDL-C第5百分位点作为低高密度脂蛋白浓度,建立广州地区儿童血脂正常参考值.结果 0~岁组、3~岁组男女组间的血脂4项浓度无统计学差异;6~岁性别组间中,HDL-C男性高于女性,LDL-C及TG女性高于男性;9~岁性别组间中,HDL~C男性高于女性,LDL~C女性高于男性;12~岁性别组间,TC和LDL-C女性高于男性;15~18岁性别组间中,HDL-C女性高于男性.结论 通过对1390名广州市18岁以下儿童青少年的血脂调查,为建立广州地区不同年龄性别儿童青少年的血脂正常值提供了数据,确立了临界高胆固醇和高胆固醇血症浓度、高甘油三酯血症浓度和低高密度脂蛋白浓度.

    作者:徐建敏;罗不凡;曹毅敏;张旭;梁雪莹;李铁钢 刊期: 2009年第12期

  • 东莞市美沙酮维持治疗门诊海洛因成瘾者心理健康及社会支持情况调查

    目的 了解东莞市美沙酮维持治疗门诊海洛因成瘾者的心理健康及社会支持情况,为采取进一步的干预措施提供依据.方法 采用症状自评量表SCL-90和社会支持量表对2007年4月至2008年8月在美沙酮维持治疗门诊就诊的海洛因成瘾者进行调查.结果 除阳性均分外,该人群的症状总分、总均分、阳性项目数、躯体化、强迫、人际关系、抑郁、焦虑、敌意、恐怖、偏执、精神病性因子得分均显著高于全国常模(P<0.001).其社会支持总分与全国常模比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 接受调查的东莞市美沙酮治疗门诊的海洛因成瘾者存在感觉、情绪、行为、人际关系、饮食睡眠等方面的心理问题,但该人群近期获得的社会支持良好.应进一步加大对该人群的尊重、关爱、支持和鼓励的力度,同时有必要对该人群的心理健康和社会支持情况进行动态测定和分析.

    作者:张巧利;金行申;袁丁;方晓君;郑少敏 刊期: 2009年第12期

  • 桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义

    目的 调查分析桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义.方法 采用女性阴道分泌物革兰染色方法检测阴道毛滴虫、念珠菌和线索细胞,酶联免疫法检测沙眼衣原体,培养法鉴定淋球菌和支原体.结果 1030例样本中,人型支原体阳性52例(5%),其中5例为单独人型支原体定植,而47例(90.4%)为混合菌感染,以解脲脲原体为主(30/52,57.7%).宫颈炎组与非宫颈炎组人型支原体的感染率差异无统计学意义(X~2=0.51,P>0.05).7例人型支原体阳性的宫颈炎病例同时混合感染沙眼衣原体或淋球菌,10例人型支原体阳性的非宫颈炎病例同时伴有念珠菌或阴道毛滴虫感染,或细菌性阴道病.结论 无论女性是否患宫颈炎,人型支原体均可以定植于宫颈管,但并不是单独引起宫颈炎的病原体.

    作者:郑和平;李美玲;冯占芹;黄进梅 刊期: 2009年第12期

  • 湘潭市2005-2008年377例肺结核中断治疗原因分析

    目的 分析结核病控制项目实施近4年以来,湘潭市肺结核患者中,不同样本人群中断治疗的原因,探索减少中断治疗的针对性对策.方法 收集整理我市2005-2008年因各种原因中断治疗的肺结核患者共377例,对样本人群的人口、社会经济情况(包括样本的年龄、性别、收入水平、是否常住人口、医疗保险享受情况)以及样本的诊疗相关信息(包括患者的就医过程、不良反应发生情况)进行建模分析,分析导致中断/终止治疗的影响因素.结果 湘潭市2005-2008年发生肺结核中断治疗情况的样本人群中,常住人口与流动性人口具有不同的人口、社会经济背景:中断治疗的影响因素集中表现为疾病相关知识的缺乏、严重的不良反应、以及经济困难与交通不便.数据建模分析结果显示,高知识水平、享受医疗保险成为中断治疗模型中的保护性因素,而严重不良反应以及年龄较大成为中断治疗模型中的危险性因素.结论 针对湘潭市不同人口、社会经济背景的样本人群,分析其肺结核中断发生的各自影响因素,并制定有针对性的对策,有助于进一步提高我市肺结核病防治工作的成效.

    作者:袁伟;杨华林;李家明 刊期: 2009年第12期

  • 护肝合剂对肝星形细胞的活化及胶原表达的作用和机制

    目的 观察护肝合剂对肝损害模型大鼠血清TGF-β1的影响及护肝合剂含药血清对HSC-T6细胞的增殖、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达的影响,探讨该复方对肝纤维化的可能作用及其机制.方法 设立正常组、护肝合剂组、模型组,采用卡介苗和脂多糖进行肝损害造模,然后观察3组ALT、AST和血清TGF-β1的变化.制备各组大鼠的血清,进行HSC-T6细胞的培养,采用MTT方法观察该细胞的增殖情况,并用RT-PCR的方法观察Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结果 模型组造模前后的ALT、AST及了TGF-β1都显著升高(P<0.01),护肝合剂组上述指标较模型组显著下降(P<0.01),护肝合剂组的HSC-T6细胞增殖较模型组显著下降(P<0.01),且没有Ⅱ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结论 护肝合剂能在一定程度上通过改善肝功能、降低FGF-β1水平抑制肝星形细胞的增殖,改善肝纤维化程度.

    作者:游唯春;项凤梅;卢建溪 刊期: 2009年第12期

  • 反向点杂交法检测湘潭地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究

    目的 了解湘潭地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价.方法 用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析.结果 HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100%,湘潭地区HBV各种基因型分布比例:B型占74.74%,C型占11.58%,B、C型混合感染占13.68%.无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBV B型和C型感染率存在显著性差异,其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组.结论 HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值.湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点.

    作者:段建平;朱坤;吴薇佳;张太松;易红根;李明 刊期: 2009年第12期

  • 人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

    目的 通过建立人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法,快速鉴定人3型腺病毒感染,为早期诊断提供依据.方法 以人3型腺病毒感染的细胞和常见的呼吸道消化道感染的病原体为研究对象,根据病毒六邻体高度保守的序列,设计荧光定量PCR反应体系,并分析实验的敏感性和特异性.结果 人3型腺病毒TCID_(50)细胞培养液中病毒核酸低检出稀释度是10~(-6),对应的拷贝数分别是5.802x10~3 copies/mL和6.968x10~2copies/mL,呼吸道和消化道感染常见的病原体未出现交叉反应.结论 荧光定量PCR的应用,可有效缩短检测时间,提高检测的敏感度.

    作者:谭耀驹;周荣;杨复华 刊期: 2009年第12期

  • 某院近3年住院患者痰液中病原菌的主要种类及耐药性分析

    目的 了解本院2006-2008年住院患者痰液中病原菌的主要种类和耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法进行药敏试验.念珠菌利用显色平板分离和鉴定,采用K-B法进行药敏试验.数据分析用WHONET5.4软件.结果 住院患者痰液中细菌以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主,念珠菌属以白色念珠菌为主.痰液中G-杆菌耐药率一直较低的为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为56.0%~69.0%和59.7%~68.1%.痰液中G+球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率一直为100%,其他抗菌药物的耐药率均较高.金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药率居高不下,为68.0%~71.6%和85.8%~90.0%.念珠菌属对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0.结论 住院患者痰液中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs水平、非发酵G-杆菌碳青霉烯类耐药率和葡萄球菌属甲氧西林耐药率均不断增高或居高不下,应加强抗菌药物的合理使用,以降低耐药率;采取有效的隔离措施可以防止多重耐药菌的扩散.

    作者:芮勇宇;王前;裘宇容 刊期: 2009年第12期

  • 深圳市福田区2006-2008年流行性腮腺炎流行特征分析

    目的 了解深圳市福田区2006-2008年流行性腮腺炎的发病情况及流行特征,为今后制定防治措施提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法对全区近3年内的流行性腮腺炎的疫情资料进行分析.结果 福田区3年累计报告流行性腮腺炎病例623例,无死亡病例,年平均报告发病率为17.28/10万.2006与2008年发病率稍高,不同年份间报告的发病率相比较差异有统计学意义(P<0.01);各年全区各街道均有发病,3~8月为高发月,占全年腮腺炎报告发病总数的59.87%;病例主要为学生(38.84%)、幼托儿童(20.71%)、散居儿童(15.09%);男性报告发病率高于女性(P<0.01),男女性别比为1.53∶1,差异有统计学意义.结论 加强监测及提高重点人群疫苗的接种覆盖率,是预防与控制流行性腮腺炎的主要措施.

    作者:肖骞;司徒潮满;黄慈林;石向辉;范苏云;段丽娜;牛姬飞 刊期: 2009年第12期

  • 广州市2例人感染猪链球菌病的流行病学调查

    目的 查明广州市2例人感染猪链球菌病的感染来源、流行特征,为预防控制疫情提供依据.方法 采用流行病学调查方法进行回顾性调查和现场调查,采集脑脊液标本进行细菌培养、分离,用PCR进行鉴定.结果 患者均有明显的生猪接触史且首例患者手部有伤口,起病急,全身中毒症状明显,病程进展迅速,均为脑膜炎型.患者脑脊液分离培养出猪链球菌经生化和PCR检测结果为猪链球菌Ⅱ型,病人经及时治疗均痊愈出院.结论 2例病例均为人感染猪链球菌病(Ⅱ型)实验室确诊病例,为散发疫情,相互间无流行病学关联,传播途径可能为接触被猪链球菌污染的生猪肉.

    作者:李美霞;杨智聪;汤国球;沈秋逢 刊期: 2009年第12期

  • 利巴韦林对肠道病毒体外抑制作用的研究

    目的 研究抗病毒药物利巴韦林体外抗肠道病毒(EV)的效果.方法 采用细胞病变效应(CPE)法和MTT分析法,观察利巴韦林对肠道病毒(EV71、CAV16、CBV3、ECHO11、EV84)的抑制作用.结果 利巴韦林对Vero细胞的半数毒性浓度(TC_(50))为2.09 mg/mL,0.2 mg/mL浓度的利巴韦林对5种肠道病毒均有抑制作用,对CAV16、EV71、ECHo11、EV84、CBV3的抑制率分别为13%、27%、36%、23%、58%.对EV84、EV71病毒,利巴韦林浓度为0.1 mg/mL时其抑制率为16.5%、29.5%;对CBV3病毒,利巴韦林抗病毒作用与其剂量呈正相关,半数有效浓度(IC_(50))为0.125 mg/mL,治疗指数(TI)为16.72.结论 利巴韦林在体外对肠道病毒具有抑制作用,对不同的肠道病毒其抑制效率不同,对CVB3的抑制率较高.

    作者:田新贵;李翔;周荣;彭涛 刊期: 2009年第12期

  • 1例接种人用狂犬病疫苗后偶合死亡的病例报告分析

    应用狂犬病疫苗预防狂犬病,是百余年来公共卫生措施中预防狂犬病的一种成功的方法[1,2].由于我市尚未将犬只管理纳入法制化管理轨道,近年来各地犬患时有发生.2005年8月咸宁市某县疾病预防控制中心(CDC)预防接种门诊报告1例犬伤患者接种狂犬病疫苗后不明原因死亡,此种情况国内报道甚少,现将死亡病例分析如下.

    作者:周红俊 刊期: 2009年第12期

  • AFP联合CA19-9检查对良恶性肝病鉴别诊断的临床研究

    目的 探讨APP(甲胎蛋白)联合CA19-9(糖链抗原)检查对原发性肝癌、转移性肝癌、肝硬化、病毒性肝炎的鉴别诊断价值.方法 采用全自动电化学发光系统对300例各类肝病患者及50例健康对照者进行血清AFP和CA19-9检查.结果 原发性肝癌患者AFP值(838.5±175.4)μg/L较其他患者明显增高,而肝硬化患者AFP中度升高,病毒性肝炎和转移性肝癌患者AFP仅轻度升高.当以AFP>500 μg/L作为原发性肝癌诊断界值时,其灵敏度为70.3%,特异性为98.8%.转移性肝癌患者CA19-9值(1265.8±113.4)U/ml较原发性肝癌、肝硬化、病毒性肝炎患者明显增高.结论 AFP联合CA19-9检测在原发性肝癌和转移性肝癌,以及对其他良恶性肝病的鉴别诊断具有良好的价值.

    作者:钟永根;古旭东 刊期: 2009年第12期

  • 齿龈内阿米巴与口腔毛滴虫的研究进展

    齿龈阿米巴(Entamoeba gingivalis)与口腔毛滴虫(Trichomonas tenax)是寄居人体口腔龈沟、龋齿和牙垢内的原虫.越来越多的流行病学调查及动物实验都间接或直接的证明了两种原虫与口腔疾病的密切关系.本文重点综述两种口腔原虫的形态学观察、人群中感染情况、致病机制、病原诊断方法和防治措施方面的研究进展,以期推动研究的进一步深入,为口腔疾病的治疗带来新的曙光.

    作者:徐曙光;吕向辉;牛卫兵 刊期: 2009年第12期

  • 机会性感染的现状与展望

    医学发展到今天,传染病的发生和流行已得到了有效的控制,某些烈性传染病有的已被消灭或接近消灭,这表明人类在同感染性疾病的斗争中取得了一定的胜利,然而随着社会和环境的变迁,人类的疾病谱也不断发生着变化,如一些先前不被重视的感染性疾病如机会性感染已成为临床比较棘手的难题,某些情况下,免疫低下导致的机会性感染比原发基础疾病更为凶险.因而,机会性感染已成为临床各项工作的重要研究课题,本文就机会性感染的现状和相关研究的发展作一概述.

    作者:谷俊朝;刘建 刊期: 2009年第12期

  • 臭氧治疗外阴阴道假丝酵母菌病的临床观察

    目的 观察臭氧对外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的治疗效果.方法 将102例VVC患者随机分为观察组(51例)和对照组(51例),观察组接受臭氧治疗,对照组接受达克宁硝酸咪康唑栓治疗.两组于治疗后第3天进行临床和真菌学疗效分析.结果 治疗结束后第3天,观察组治愈42例(82.3%)、显效6例(11.8%)、有效3例(5.3%),总有效率为100%;对照组治愈28例(55.0%)、显效12例(23.5%)、有效6例(11.8%)、总有效率为90.3%.两组治愈率差异有统计学意义(P<0.01).结论 臭氧治疗外阴阴道假丝酵母菌病效果显著,不良反应发生率低.

    作者:谭川云 刊期: 2009年第12期

  • 抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定

    目的 制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb).方法 利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合.通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价.ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物.其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别.结论 成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体.为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础.

    作者:顾耀亮;李佳娜;陈家杰;吉坤美;刘志刚 刊期: 2009年第12期

  • 一起甲型肝炎暴发疫情调查与控制分析

    目的 分析一起甲肝的暴发原因及控制措施.方法 经过规范的流行病学调查,在SPSS13.0软件上对所得数据进行统计分析.结果 有21名甲肝患者,其中19例有饮用生水史,2例未有饮用生水史(P<0.001).结论 饮用水污染是本次甲肝暴发的原因,应该加强生活饮用水的安全检测,防止污染.

    作者:李建勋;张胜勇;郝洪武 刊期: 2009年第12期

  • 登革热疫点22年后的血清流行病学调查

    目的 了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布.方法 在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA 法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较.RT-PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒.结果 登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3%,非疫点健康人群抗登革病毒IgGc抗体阳性率为3.8%,两者差异有统计学意义(P<0.01);登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0~20、21~30、31~40、41~50、51~60、61~70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3.8%、5.8%、9.1%、26.5%、27.7%、32.5%和35.1%.30岁以下年龄组与31~40岁年龄组、31~40岁年龄组与41~60岁年龄组、41~60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义(P<0.05).登革熱疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体.RT-PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒.结论 登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环.

    作者:郑小英;吴瑜;张美春;何霭;李卓雅;曲振宇;詹希美 刊期: 2009年第12期

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