学术投稿

人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

谭耀驹;周荣;杨复华

关键词:人腺病毒, 实时RT-PCR, 检测
摘要:目的 通过建立人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法,快速鉴定人3型腺病毒感染,为早期诊断提供依据.方法 以人3型腺病毒感染的细胞和常见的呼吸道消化道感染的病原体为研究对象,根据病毒六邻体高度保守的序列,设计荧光定量PCR反应体系,并分析实验的敏感性和特异性.结果 人3型腺病毒TCID_(50)细胞培养液中病毒核酸低检出稀释度是10~(-6),对应的拷贝数分别是5.802x10~3 copies/mL和6.968x10~2copies/mL,呼吸道和消化道感染常见的病原体未出现交叉反应.结论 荧光定量PCR的应用,可有效缩短检测时间,提高检测的敏感度.
热带医学杂志相关文献
  • 东莞市美沙酮维持治疗门诊海洛因成瘾者心理健康及社会支持情况调查

    目的 了解东莞市美沙酮维持治疗门诊海洛因成瘾者的心理健康及社会支持情况,为采取进一步的干预措施提供依据.方法 采用症状自评量表SCL-90和社会支持量表对2007年4月至2008年8月在美沙酮维持治疗门诊就诊的海洛因成瘾者进行调查.结果 除阳性均分外,该人群的症状总分、总均分、阳性项目数、躯体化、强迫、人际关系、抑郁、焦虑、敌意、恐怖、偏执、精神病性因子得分均显著高于全国常模(P<0.001).其社会支持总分与全国常模比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 接受调查的东莞市美沙酮治疗门诊的海洛因成瘾者存在感觉、情绪、行为、人际关系、饮食睡眠等方面的心理问题,但该人群近期获得的社会支持良好.应进一步加大对该人群的尊重、关爱、支持和鼓励的力度,同时有必要对该人群的心理健康和社会支持情况进行动态测定和分析.

    作者:张巧利;金行申;袁丁;方晓君;郑少敏 刊期: 2009年第12期

  • 延安地区中枢神经系统疾病患者弓形虫感染的抽样调查

    目的 了解延安地区中枢神经系统疾病患者弓形虫(Toxoplasma gondii,TOX)的感染情况.方法 应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immune absorbent assay,ELISA)对180例不明原因神经系统疾病患者和135例健康体检者进行抗弓形虫抗体(antitxoplasma antibody,ATAb)的检测.结果 研究组ATAb的阳性率为28.89%(52/180),对照组为9.63%(13/135).不同类型疾病患者ATAb阳性率分别为:脑型28.05%(23/82)、癫痫型44.44%(4/9)、精神病型32.14%(9/28)、神经衰弱型26.23%(16/61).有宠物接触史者ATAb阳性率为47.62%(30/63),无接触史者ATAb阳性率为18.80%(22/117).结论 研究组ATAb阳性率明显高于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.01).不同类型疾病患者ATAb阳性率差异无统计学意义(P>0.05).有宠物接触史者ATAb阳性率明显高于无接触史者,两者间差异有统计学意义(P<0.01),说明TOX感染与接触宠物有关.

    作者:张晓文 刊期: 2009年第12期

  • 臭氧治疗外阴阴道假丝酵母菌病的临床观察

    目的 观察臭氧对外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的治疗效果.方法 将102例VVC患者随机分为观察组(51例)和对照组(51例),观察组接受臭氧治疗,对照组接受达克宁硝酸咪康唑栓治疗.两组于治疗后第3天进行临床和真菌学疗效分析.结果 治疗结束后第3天,观察组治愈42例(82.3%)、显效6例(11.8%)、有效3例(5.3%),总有效率为100%;对照组治愈28例(55.0%)、显效12例(23.5%)、有效6例(11.8%)、总有效率为90.3%.两组治愈率差异有统计学意义(P<0.01).结论 臭氧治疗外阴阴道假丝酵母菌病效果显著,不良反应发生率低.

    作者:谭川云 刊期: 2009年第12期

  • 护理本科人体寄生虫学双语教学的探索

    目的 探讨人体寄生虫学双语教学在护理本科学生中的应用效果.方法 在2007级护理学专业的人体寄生虫学教学中,将83名学生随机分成双语教学组(45人)和中文教学组(38人)进行教学.结果 两个教学组在考试总成绩和试题得分上虽未见明显差异(P>0.05),但是调查问卷显示双语教学对于提高学生英语阅读能力、学习专业词汇的能力、英语水平的能力有很大的帮助.结论 在护理学本科生中开展人体寄生虫学双语教学是可行的、对学生未来的可持续发展具有重要意义.

    作者:陈金铃;段义农;秦永伟 刊期: 2009年第12期

  • 护肝合剂对肝星形细胞的活化及胶原表达的作用和机制

    目的 观察护肝合剂对肝损害模型大鼠血清TGF-β1的影响及护肝合剂含药血清对HSC-T6细胞的增殖、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达的影响,探讨该复方对肝纤维化的可能作用及其机制.方法 设立正常组、护肝合剂组、模型组,采用卡介苗和脂多糖进行肝损害造模,然后观察3组ALT、AST和血清TGF-β1的变化.制备各组大鼠的血清,进行HSC-T6细胞的培养,采用MTT方法观察该细胞的增殖情况,并用RT-PCR的方法观察Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结果 模型组造模前后的ALT、AST及了TGF-β1都显著升高(P<0.01),护肝合剂组上述指标较模型组显著下降(P<0.01),护肝合剂组的HSC-T6细胞增殖较模型组显著下降(P<0.01),且没有Ⅱ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结论 护肝合剂能在一定程度上通过改善肝功能、降低FGF-β1水平抑制肝星形细胞的增殖,改善肝纤维化程度.

    作者:游唯春;项凤梅;卢建溪 刊期: 2009年第12期

  • 人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

    目的 通过建立人3型腺病毒荧光定量PCR检测方法,快速鉴定人3型腺病毒感染,为早期诊断提供依据.方法 以人3型腺病毒感染的细胞和常见的呼吸道消化道感染的病原体为研究对象,根据病毒六邻体高度保守的序列,设计荧光定量PCR反应体系,并分析实验的敏感性和特异性.结果 人3型腺病毒TCID_(50)细胞培养液中病毒核酸低检出稀释度是10~(-6),对应的拷贝数分别是5.802x10~3 copies/mL和6.968x10~2copies/mL,呼吸道和消化道感染常见的病原体未出现交叉反应.结论 荧光定量PCR的应用,可有效缩短检测时间,提高检测的敏感度.

    作者:谭耀驹;周荣;杨复华 刊期: 2009年第12期

  • 2008年江门市居民全死因分析

    目的 探讨江门市居民主要死亡原因,为制定防治对策提供科学依据.方法 对2008年江门市居民死亡报告进行统计分析,计算死亡率、死因顺位、构成比等指标.结果 2008年江门市户籍居民报告死亡23 734例,死亡率为701.33/10万,男性死亡率高于女性,死因顺位前十位依次为循环系统疾病、肿瘤、衰老、呼吸系统疾病、损伤和中毒、消化系统疾病、诊断不明、内分泌、营养和代谢疾病、传染病和寄生虫病、泌尿系统疾病,不同性别及不同年龄组人群死因顺位不相同.结论 循环系统疾病、肿瘤、呼吸系统疾病、损伤和中毒等疾病已成为我市居民的主要死因,今后疾病防治工作的重点在于进一步健全社区卫生服务,加强慢性非传染性疾病的防治力度,开展伤害监测.

    作者:莫兆波;周悦亮;黄艳珍 刊期: 2009年第12期

  • 双水平气道正压通气治疗慢阻肺的临床研究

    目的 观察双水平气道正压通气对慢性阻塞性肺疾病夜间低氧的治疗作用.方法 取60例慢性阻塞性肺疾病患者,随机分成2组.对照组30例使用吸氧、抗感染等常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用夜间双水平气道正压通气治疗4 h,疗程为7 d.分别观察2组在治疗前后低氧血症及心率失常发生率和肺动脉压力的变化.结果 双水平气道正压通气组在治疗前后自身对照以及与对照组比较,夜间低氧血症及心律失常发生率和肺动脉压力的改变均有统计学意义(P<0.05~0.01).结论 双水平气道正压通气能改善慢性阻塞性肺疾病患者的夜间低氧血症,减少心律失常的发生率,降低肺动脉压力,可作为治疗慢性阻塞性肺疾病的重要方法之一.

    作者:张春云;陈益民 刊期: 2009年第12期

  • 延安市286例呼吸科患者血清嗜肺军团菌抗体的检测

    目的 了解延安市嗜肺军团菌的感染情况.方法 采用微量凝集法对286份呼吸科住院患者血清标本进行嗜肺军团菌Lp1型军团菌抗体测定.结果 抗体阳性率为17.13%,其中男为18.56%,女为15.13%;在各年龄组均有嗜肺军团菌Lp1型抗体阳性者,其中40岁年龄组的感染率(26.09%)高;呼吸科疾病中肺结核患者合并嗜肺军团菌LP1感染率较高,为26.56%,各疾病类型之间感染率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 延安市存在一定的嗜肺军团菌感染,需加强对军团病血清学的监测工作.

    作者:景彩霞;薛亚娟;陈建平 刊期: 2009年第12期

  • 齿龈内阿米巴与口腔毛滴虫的研究进展

    齿龈阿米巴(Entamoeba gingivalis)与口腔毛滴虫(Trichomonas tenax)是寄居人体口腔龈沟、龋齿和牙垢内的原虫.越来越多的流行病学调查及动物实验都间接或直接的证明了两种原虫与口腔疾病的密切关系.本文重点综述两种口腔原虫的形态学观察、人群中感染情况、致病机制、病原诊断方法和防治措施方面的研究进展,以期推动研究的进一步深入,为口腔疾病的治疗带来新的曙光.

    作者:徐曙光;吕向辉;牛卫兵 刊期: 2009年第12期

  • 降氟除氟技术措施推广应用示范研究的防治现状分析

    目的 了解降氟除氟技术措施推广应用示范研究的6个示范村燃煤型氟中毒的防治现状,为实施降氟除氟技术措施提供科学依据.方法 采用整群抽样法对6个示范村进行入户调查,调查示范村居民基本情况、卫生行为习惯、能源结构、健康教育知识知晓情况、炉灶使用等情况,计算居民地氟病防治知识知晓率、炉灶改造率和正确使用率.结果 示范村村民饮食结构中,以大米(52.9%)、土豆(33.5%)、玉米(7.3%)、面食(6.3%)为主,其中玉米(6.52%)、薰肉(80.40%)、辣椒(18.07%)存在烤食或烤干的问题.空气氟监测30户中,封火期平均值为0.0083 mg/m~3,范围在0.0003~0.0286 mg/m~3之间;旺火期平均值为0.0037 mg/m~3,范围在0.0003~0.0340 mg/m~3之间.灶的改造率为84.23%,正确使用率为50.90%;炉的改造率为95.26%,正确使用率为63.66%,以户为单位的炉灶正确使用率为53.29%.户主地氟病危害知晓率为45.02%,防治措施知晓率为45.50%.结论 6个示范村以煤作为主要燃料,以炉灶使用为主,仍然存在烤火取暖和烤食的生活习惯,人体摄入氟的途径中空气氟所占比重加大,村民炉灶的正确使用率低,地氟病危害和防治措施的知晓率均较低.因此,根据病区生活习惯、饮食结构、炉灶使用习惯等因素采取以排出室内空气氟为主的新型降氟除氟技术措施,辅之以改变饮食习惯,进一步加强地氟病危害和防治措施的健康教育宣传,可以达到降氟除氟的目的 .

    作者:晏维;王豫林;肖邦忠;罗兴建;张洁;苏勇;杨伟;黎华君 刊期: 2009年第12期

  • 深圳市福田区2006-2008年流行性腮腺炎流行特征分析

    目的 了解深圳市福田区2006-2008年流行性腮腺炎的发病情况及流行特征,为今后制定防治措施提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法对全区近3年内的流行性腮腺炎的疫情资料进行分析.结果 福田区3年累计报告流行性腮腺炎病例623例,无死亡病例,年平均报告发病率为17.28/10万.2006与2008年发病率稍高,不同年份间报告的发病率相比较差异有统计学意义(P<0.01);各年全区各街道均有发病,3~8月为高发月,占全年腮腺炎报告发病总数的59.87%;病例主要为学生(38.84%)、幼托儿童(20.71%)、散居儿童(15.09%);男性报告发病率高于女性(P<0.01),男女性别比为1.53∶1,差异有统计学意义.结论 加强监测及提高重点人群疫苗的接种覆盖率,是预防与控制流行性腮腺炎的主要措施.

    作者:肖骞;司徒潮满;黄慈林;石向辉;范苏云;段丽娜;牛姬飞 刊期: 2009年第12期

  • 肺炎链球菌自溶酶(LytA)黏膜免疫小鼠的生物安全性评价

    目的 开展肺炎链球菌自溶酶(LytA)生物安全性的动物实验研究,为其申报生物制品鉴定提供实验数据.方法 制备纯化的重组表达LytA蛋白,以6.5 μg、13.0 μg和19.5 μg 3种剂量黏膜免疫BALB/c小鼠,根据(中华人民共和国国家标准食品安全性毒理学评价程序>(GB15193.1-1994)进行LytA的90 d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验检测,以分析其生物安全性. 结果 90 d喂养试验结果显示各实验组小鼠与对照组小鼠的体重增长趋势一致,且各时间点检测的小鼠体重均无显著性差异(P>0.05).传统致畸试验检测发现各实验组小鼠与对照组小鼠心脏、肺、肝脏、肾、脾、胃、子宫重量、红细胞和白细胞数目、谷丙转氨酶、尿素氮、总胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、白蛋白及球蛋白等指标均无明显差异(P>0.05).小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果显示LytA经鼻腔黏膜免疫小鼠无遗传毒性.结论 利用90 d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验证明LytA鼻腔黏膜免疫BALB/c小鼠安全、毒副作用不明显,有良好的生物安全性,值得进一步研究.

    作者:尤旭;吴忠道;韩艳平;徐一月;何思杰;吴利;魏洁;鲜墨;张莉滟;吕志跃 刊期: 2009年第12期

  • 湘潭市2005-2008年377例肺结核中断治疗原因分析

    目的 分析结核病控制项目实施近4年以来,湘潭市肺结核患者中,不同样本人群中断治疗的原因,探索减少中断治疗的针对性对策.方法 收集整理我市2005-2008年因各种原因中断治疗的肺结核患者共377例,对样本人群的人口、社会经济情况(包括样本的年龄、性别、收入水平、是否常住人口、医疗保险享受情况)以及样本的诊疗相关信息(包括患者的就医过程、不良反应发生情况)进行建模分析,分析导致中断/终止治疗的影响因素.结果 湘潭市2005-2008年发生肺结核中断治疗情况的样本人群中,常住人口与流动性人口具有不同的人口、社会经济背景:中断治疗的影响因素集中表现为疾病相关知识的缺乏、严重的不良反应、以及经济困难与交通不便.数据建模分析结果显示,高知识水平、享受医疗保险成为中断治疗模型中的保护性因素,而严重不良反应以及年龄较大成为中断治疗模型中的危险性因素.结论 针对湘潭市不同人口、社会经济背景的样本人群,分析其肺结核中断发生的各自影响因素,并制定有针对性的对策,有助于进一步提高我市肺结核病防治工作的成效.

    作者:袁伟;杨华林;李家明 刊期: 2009年第12期

  • 反向点杂交法检测湘潭地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究

    目的 了解湘潭地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价.方法 用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析.结果 HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100%,湘潭地区HBV各种基因型分布比例:B型占74.74%,C型占11.58%,B、C型混合感染占13.68%.无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBV B型和C型感染率存在显著性差异,其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组.结论 HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值.湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点.

    作者:段建平;朱坤;吴薇佳;张太松;易红根;李明 刊期: 2009年第12期

  • IL-17与甲状腺功能亢进症患者血清中FT3、FT4的关系研究

    目的 探讨甲状腺功能亢进症患者血清IL-17的水平及其FT3、FT4的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验测定30例健康对照者和30例甲亢患者血清中IL-17的水平,化学发光法检测FT3、FT4,并分析IL-17与FT3、FT4的相关性.结果 甲亢组血清中的IL-17(1089.5±101.9)pg/L与正常对照组(725.4±94.6)pg/L比较明显升高(P<0.05);同时相关性分析表明甲亢患者血清中IL-17的表达水平与FT3、FT4的浓度呈明显的正相关[r(FT3)=0.68,r(FT4)=0.56,P<0.05].结论 甲亢患者血清中IL-17的高表达可能与FT3、FT4激素分泌有关.

    作者:蔡安季;郝建华;张建华;张庆侠;苏卓娃;谢忠奎;李江;胡峰兰 刊期: 2009年第12期

  • 一起甲型肝炎暴发疫情调查与控制分析

    目的 分析一起甲肝的暴发原因及控制措施.方法 经过规范的流行病学调查,在SPSS13.0软件上对所得数据进行统计分析.结果 有21名甲肝患者,其中19例有饮用生水史,2例未有饮用生水史(P<0.001).结论 饮用水污染是本次甲肝暴发的原因,应该加强生活饮用水的安全检测,防止污染.

    作者:李建勋;张胜勇;郝洪武 刊期: 2009年第12期

  • 广州市2例人感染猪链球菌病的流行病学调查

    目的 查明广州市2例人感染猪链球菌病的感染来源、流行特征,为预防控制疫情提供依据.方法 采用流行病学调查方法进行回顾性调查和现场调查,采集脑脊液标本进行细菌培养、分离,用PCR进行鉴定.结果 患者均有明显的生猪接触史且首例患者手部有伤口,起病急,全身中毒症状明显,病程进展迅速,均为脑膜炎型.患者脑脊液分离培养出猪链球菌经生化和PCR检测结果为猪链球菌Ⅱ型,病人经及时治疗均痊愈出院.结论 2例病例均为人感染猪链球菌病(Ⅱ型)实验室确诊病例,为散发疫情,相互间无流行病学关联,传播途径可能为接触被猪链球菌污染的生猪肉.

    作者:李美霞;杨智聪;汤国球;沈秋逢 刊期: 2009年第12期

  • 桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义

    目的 调查分析桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义.方法 采用女性阴道分泌物革兰染色方法检测阴道毛滴虫、念珠菌和线索细胞,酶联免疫法检测沙眼衣原体,培养法鉴定淋球菌和支原体.结果 1030例样本中,人型支原体阳性52例(5%),其中5例为单独人型支原体定植,而47例(90.4%)为混合菌感染,以解脲脲原体为主(30/52,57.7%).宫颈炎组与非宫颈炎组人型支原体的感染率差异无统计学意义(X~2=0.51,P>0.05).7例人型支原体阳性的宫颈炎病例同时混合感染沙眼衣原体或淋球菌,10例人型支原体阳性的非宫颈炎病例同时伴有念珠菌或阴道毛滴虫感染,或细菌性阴道病.结论 无论女性是否患宫颈炎,人型支原体均可以定植于宫颈管,但并不是单独引起宫颈炎的病原体.

    作者:郑和平;李美玲;冯占芹;黄进梅 刊期: 2009年第12期

  • 白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因的克隆与生物信息学分析

    目的 应用简并引物RT-PCR和RACE方法获取白纹伊蚊Rh类糖蛋白(Aedes albopictus rhesus-like glycoprotein,AaRh)基因的全长cDNA.方法 根据冈比亚按蚊、埃及伊蚊等亲缘关系较近物种的Rb类糖蛋白同源性分析结果,在氨基酸高度保守区域184/343和219/337氨基酸位点设计2对简并引物,以白纹伊蚊雌蚊总RNA为模板,应用巢式RT-PCR扩增AaRh的基因片段.根据获得的AaRh基因部分序列,设计2对特异性引物AaRh GSP1、CSP2和AaRh GSP3、GSP4,应用5'RACE和3'RACE分别扩增AaRh基因的5'端和3'端cDNA片段,然后拼接出全长cDNA序列.通过在线生物信息学分析(NCBI和Expasy),对目的 基因序列进行生物信息学分析.结果 应用2对简并引物进行巢式RT-PCR,获得379 bp AaRh基因片段.应用5'RACE和3'RACE方法,分别获得AaRh基因5'端1008 bp、3'端822 bp cDNA序列,根据两个片段的首/尾共同序列拼接为1717 bp的基因片段.该核苷酸序列经BLASTn分析显示,与埃及伊蚊Rh蛋白的一致性高达95%,鉴定其为白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因.AaRh基因具有完整的开放阅读框,其ORF从第128位到1516位含1389bp,编码462个氨基酸.Expasy在线生物信息学程序分析显示,白纹伊蚊Rh类糖蛋白是一个整合膜蛋白,跨膜11次,58aa-446aa具有铵离子通道的结构功能域;理论等电点(pI)5.37,分子量49775.10 Mr,1aa-26aa可能为分泌信号肽序列;含有4个潜在的天冬酰胺糖基化位点和17个线性抗原决定簇,翻译后可能进行糖基化修饰,提示其为糖蛋白.结论 成功获取AaRh基因的全长cDNA,生物信息学分析结果为AaRh蛋白的生物学特性和功能研究奠定了基础.

    作者:吴瑜;郑小英;张美春;何蔼;李卓雅;詹希美 刊期: 2009年第12期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会