学术投稿

白假丝酵母菌DNA提取方法的研究

王萍;厉荣玉;董群

关键词:白假丝酵母菌, DNA提取, PCR
摘要:目的 建立一种提取白假丝酵母菌DNA 的有效方法.方法 采用蜗牛酶消化破壁形成原生质体,饱和酚/氯仿抽提法提取基因组DNA,用琼脂糖凝胶电泳及PCR反应等进行鉴定.结果 提取物经琼脂糖凝胶电泳检测到DNA主带,基本无DNA碎带,提取的DNA浓度为(1.18±0.36)μg/μl,纯度好(OD260/OD280>1.7),不用 RNase酶处理,无需任何纯化即可用于PCR扩增.结论 本研究中提取DNA的方法简便易行,提取物可适用于各种分子生物学研究.
热带医学杂志相关文献
  • 川崎病患儿血清抗血管内皮细胞抗体检测的临床意义

    目的 探讨抗血管内皮细胞抗体(AECA)榆测在川崎病(KD)早期诊断及体液免疫状况方面的临床意义.方法 检测58例KD急性期患儿和43例对照组(其中普通发热对照23例.健康对照20例)儿童的血清AECA-IgG、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4,计算各组AECA的阳性率,进而分别比较AECA阳性KD组、AECA阴性KD组与对照组的上述指标的浓度差异.结果 ①KD患儿AECA-IgG的阳性率为39.7%,明显高于健康对照组的5.0%(P<0.01),也高于发热对照组的17.4%,但无统计学差异(P>0.05);②AECA阳性组与AECA阴性组IgG、IgM、igA、C3浓度均分别明显高于发热对照组和正常对照组(P<0.05),C4水平只有AECA阳性组明显高于发热对照组和健康对照组(P<0.05),但AECA阳性组与阴性组间上述指标差异无统计学意义(p>0.05).结论 血清抗内皮细胞抗体在川崎病患儿中有较高的阳性率,具有一定的早期辅助诊断价值.川崎病急件期存在着明显的体液免疫异常,IgA介导的体液免疫可能在其中扮演着重要角色.

    作者:伍绍国;刘海英;李孜;黄钰君;刘云峰;赵明光;曾华松;梁明伟 刊期: 2008年第12期

  • 铜过量小鼠肝损伤模型的建立及各项指标的观察研究

    目的 探讨昆明小鼠在不同剂量的铜负荷时所引起的肝脏抗氧化水平和相关病理的改变.方法 32只昆明小鼠平均分为4组,第1组为对照组,每天灌胃生理盐水2次,第2、3、4组作为实验组,分别用小同浓度(12.8、25.6和38.4 mg/mL)的硫酸铜每日灌胃2次,16周后,观察肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)以及血清和肝组织中铜含,并做Hf脏病理以及电镜检查.结果 与正常对照组相比,实验组肝组织中MDA含量明显升高(P<0.05),而SOD和GSH-Px活性明显下降(P<0.05);血清ALT、AST活性以及血清、肝脏铜含量明显升高(P<0.05);病理组织学检查可见高剂量铜灌胃组小鼠肝细胞变性坏死以及少量铜颗粒沉积;电镜提示肝细胞核、线粒体等细胞器异常,并可见铜颗粒.结论 过量的铜可对肝脏造成损害,其机制可能与释放出的铜离子介导脂质过氧化而造成肝脏损害有关.其病变过程与Wilson's病相似,可为进一步研究铜代谢异常等疾病提供动物模型.

    作者:李万立;罗海吉;查龙应 刊期: 2008年第12期

  • 极低出生体重儿预防性抗真菌治疗的临床意义

    目的 探讨极低出生体重儿(very low birthweight infant,VLBWI)抗真菌治疗的临床意义与疗效.方法 以我科2003~2007年收治的VLBWI为研究对象,在患儿持续使用抗生素大于2~3周时给予预防性静脉抗真菌治疗(氟康唑氯化钠注射液4 mg/kg·d,用2 d停1 d,疗程2周),观察患儿病情转归情况,监测肝、肾功能及血象情况.结果 患儿病情进展较顺利,无1例出现肝、肾功能损害等副作用.结论 VLBWI适时给予预防性静脉抗真菌治疗具有重要的临床意义,而且安全性较好,无明显副作用.

    作者:乔萍;严越秀;梁建红;谭枝涛;覃桂锋 刊期: 2008年第12期

  • 病原生物学精品课程建设的探索与实践

    目的 做好病原生物学精品课程的建设工作.方法 从师资队伍、教学管理、教学内容、教学方法、课程文化等方面进行了探讨和实践.结果 精品课程的建没工作取得了显著的成效.结论 课程建设是衡量学校办学水平和教学质量的重要标志,是实现人才培养同标的基本保证.

    作者:严华;李国才;陈红菊;焦红梅;龚卫娟;潘兴元;季明春 刊期: 2008年第12期

  • 巨噬细胞移动抑制因子、高敏C-反应蛋白与颈动脉粥样硬化和急性脑梗死的关系

    目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子、高敏C-反应蛋白与颈动脉粥样硬化和急性脑梗死的关系.方法 103例首次发病的脑梗死患者和40例健康体检者,应用酶联免疫双抗体夹心法测定血清MIF浓度,免疫散射比浊法测定血清hs-CRP浓度.应用颈动脉超声检测颈动脉内膜状况,并对急性脑梗死患者进行神经功能缺损评分.结果 急性脑梗死患者血清MIF和hs-CRP浓度显著高于正常对照组(P<0.01).不稳定斑块组(混合斑块组、软斑组)血清MIF和hs-CRP浓度显著高于稳定斑块组(硬化斑块组)和内膜粗糙组(P<0.01).血清MIF和hs-CRP浓度分别与急性脑梗死患者神经功能缺损评分呈正相关.结论 急性脑梗死患者血清MIF和hs-CRP水平可以反映颈动脉斑块的性质和稳定性,是临床了解脑梗死严重程度的重要指标.

    作者:黄帆;杨静;仲飞;徐雪;马中富 刊期: 2008年第12期

  • 异丙酚复合芬太尼在人工流产手术中的应用

    目的 观察异丙酚复合芬太尼应用于无痛人工流产的临床效果.方法 将异丙酚联合芬太尼应用于人工流产术,并与一般人工流产手术对比,观察镇痛效果、手术时间、宫颈口松弛率、术中出血量及人工流产综合征发生率等指标.结果 异丙酚复合芬太尼应用于无痛人工流产,镇痛率为100%,宫颈口松弛率高,手术时间缩短、人工流产综合征发生率低,术中出血量无明显增加.结论 异丙酚复合芬太尼应用于无痛人工流产,具有效果好、副反应小等优点.

    作者:刘湘;程相华;罗佩琼 刊期: 2008年第12期

  • 液基细胞学在子宫颈病变筛查中的诊断价值

    目的 评价液基细胞学在宫颈癌前病变早期诊断中的价值.方法 采用贝塞斯达(TBS)诊断系统对3227例经宫颈/阴道液基薄层细胞学检查(TCT)的标本进行分析,部分病例经组织学对比印证.结果 不典型鳞状细胞(ASCUS)以上异常228例(7.1%):ASCUS 119例(3.69%),低度上皮内瘤变(L-SIL)79例(2.44%),高度上皮内瘤变(H-SIL)18例(0.56%),鳞癌(SCC)9例(0.28%),不典型腺细胞(AGUS)3例(O.09%).其中66例细胞异常者行病理活检,CIN 2以上病变两种检测方法的符合率为92.6%(25/27).结论 液基细胞学检查为一种准确、简便的宫颈早期病变筛查方法,可作为宫颈癌防治的有效工具.

    作者:刘自光;汪江萍;谢芬 刊期: 2008年第12期

  • 全自动酶免分析仪与临床实验室信息系统的信息化智能互动监控及应用

    目的 通过全自动酶免分析仪与临床实验室信息系统(LIS)的信息化智能互动监控,建立全自动酶免分析仪自动加样信息采集与手工检测流程的信息化监控系统和实验过程节点监控,完善全自动酶免分析仪的自动化检测与手工流程互补,实现酶免分析仪可以进行随机组合项目自动化测定.方法 全自动酶免分析仪读取标本条码后,标本加样及检测过程的所有相关信息通过串口和网口传送到LIS,实时对每个检测标本进行节点监控.当全自动酶免分析仪的后处理FAME发生任何故障时,用手工方法继续操作检测的结果可以通过LIS读取全自动酶免分析仪的加样信息后根据条码唯一属性准确无误地传送.结果 成功建立了全自动酶免分析仪自动加样信息采集与手工检测流程的信息化监控系统和实验过程节点监控,解决了由于全自动酶免分析仪的后处理发牛故障后的结果传送难题,并实现了酶免分析仪可以进行随机组合项目自动化测定.结论 该信息化智能互动监控系统大大地提高了检测效率,尤其在当全自动酶免分析仪的后处理产生故障时,该系统能够通过标本条码的唯一性将随机组合项目的 手工继续检测结果准确无误地传送,为临床和体检工作提供了高效、快速、准确的检验结果.

    作者:张婷;陈涛;廖伟娇 刊期: 2008年第12期

  • 2007年重庆市土源性寄生虫监测结果分析

    目的 了解和掌握重庆市土源性线虫病流行动态及影响因素,分析流行规律,预测流行趋势.为制订防治对策和评价防治效果提供科学依据.方法 根据重庆市地理环境状况在东南山区、中部城郊、西部丘陵分别选择梁平、长寿、永川各设1个监测点.监测点内年龄在3周岁以上的常驻居民,采集粪便1000人以上,采用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz)一粪三检,计数检查钩虫、蛔虫、鞭虫虫卵,检查到的其它虫种一并记录.3~12周岁儿童加做透明胶纸肛拭法定必检查蛲虫卵.各监测点随机抽取10户,每户采集菜园、厕所周边、庭院、尉房四类场所土壤各1份,每份30g,离心取沉淀液镜检受精或未受精蛔虫卵,土壤培养法区别死活受精蛔虫卵.结果 3个监测点共调查3142人,蛔虫、钩虫和鞭虫感染者975人,感染率为31.03%.其中蛔虫感染者736人,感染率为23.42%;钩虫感染率为7.89%;鞭虫感染率为5-41%;儿童蛲虫感染率为16.54%.蛔虫和鞭虫性别感染率无差异.钩虫感染女性高于男性;蛔虫和钩虫50岁以上年龄组显著低于低年龄组,鞭虫感染年龄组间无筹异.菜园地、厕所周边、庭院、厨房各监测点均检出蛔虫卵,各场所间检出率无差异.结论 重庆市人群土源性寄生虫感染率仍然处于较高水平,且渝东山区重于渝中和渝丙,环境土壤蛔虫卵检出结果与人群感染率基本一致.

    作者:蒋诗国;罗飞;肖邦忠;罗兴建;李继艮;陈英;谢辉;雷群建;许静茹;游茂林;廖云贞 刊期: 2008年第12期

  • 2007年深圳市第四人民医院流感监测结果分析

    目的 了解深圳市福田区2007年流感病原学和流行特征.方法 每周采集流感样病例的咽拭子10~40份.用MDCK细胞培养法进行流感病毒分离,采用血凝抑制试验鉴定流感病毒型别.结果 2007年全年共监测样品273份,分离出流感病毒62株,阳性率为22.8%,其中HINI亚型2株,H3N2亚型41株,B(Victoria)型13株,B(Vamagata)亚型6株.6月流感分离率(51.52%)高.结论 2007年深圳市福Ⅲ区流感流行情况较为平稳.有明显季节性,在6月出现流感病毒分离高峰,流行优势株为H3N2亚型,与全市流行株型相同.

    作者:莫浩联;肖骞;侯红斌;李波;杨长贵 刊期: 2008年第12期

  • 广州大学城广州管圆线虫疫源地调查

    目的 捕捉广州大学城褐云玛瑙螺(Achatina fulica)检查广州管圆线虫(Angiostrongyluscantonensis)第Ⅲ期幼虫的感染情况.方法 采集大学城10所高校生活区和教学区褐云玛瑙螺.人工消化酶消化分离第Ⅲ期幼虫,计算感染率和感染度并与广州其他地区进行比较.结果 除广东外语外贸大学、华南理工大学2个校园内未捕捉到褐云玛瑙螺外,其他8所高校均发现有褐云玛瑙螺;广州大学城广州管圆线虫总体感染率为11.8%(76/642),平均感染度为872条/螺,阳性螺中高15725条,低17条;中山大学校园内感染率和感染度比其他校园高,分别为22.0%(56/255),1007条/螺.结论 广州大学城广州管圆线虫感染率低于广州其他地区.

    作者:黄继山;曲振宇;王维;苏文哲;岳盼;邓云花;苏广校;刘森;张骁;曾胜蓝;林彦彤;詹希美 刊期: 2008年第12期

  • 番禺区人群B型流感嗜血杆菌(Hib)疫苗接种情况及影响因素调查

    目的 了解番禺区人群Hib疾病免疫状况及影响因素,为预防和控制Hib疾病提供基础资料和科学依据.方法 随机抽取番禺区一个城区疫苗接种门诊和两个乡镇疫苗接种门诊,对所有带儿童到接种点接种的监护人进行既往Hib疫苗免疫状况及影响因素的问卷调查.结果 儿童监护人对Hib疾病的了解程度比较低,城区和乡镇均为35%左右;城区儿童监护人对Hih疫苗的了解明显比乡镇高(P=0.000).分别为65.3%和38.4%;城区的Hib疫苗接种率明显比乡镇接种率高(P=0.000),分别为72.4%和36.2%.影响Hib疫苗接种态度的因素主要为疫苗的效果,经医生介绍后儿童监护人对接种Hib疫苗的积极性都较好,城区和乡镇分别达到94.5%和80.4%.结论 Hib疫苗的接种率比较低,主要是因为儿童监护人对Hib疾病和疫苗的认识不足.应加强宣传教育,提高儿童监护人接种Hib疫苗的意识.

    作者:许晓茵;李功理;李伟强;陈光艳 刊期: 2008年第12期

  • 大鼠IgE依赖组胺释放因子重组蛋白纯化效果的优化

    目的 提高大鼠IgE依赖组胺释放因子(rHRF)的可溶性表达水平,改善其亲和层析纯化效果,为深入研究该重组蛋白的生物学功能奠定基础.方法 选择多克隆酶切化点BamH I和Xho I,将rHRF完整编码区基因从原有的pET-30a-rHRF重组质粒亚克隆至pET-28a载体,构建重组质粒pET-28a-rHRF;转化大肠杆菌BL21(DE3)后,通过改变IPTG浓度(0.1~1.0 mmol/L),调节诱导表达温度(25~37℃)和时间(1~5 h),筛选能够提高rHRF可溶性表达水平的条件;同时改进亲和层析纯化的条件,提高纯化效果.结果 成功构建重组质粒pET-28a-rHRF,不同IPTG浓度、诱导温度和时间对重组蛋白的可溶件表达水平无明显影响.但是,与pET-30a-rHRF转化菌相比,pET-28a-rHRF转化菌所表达的重组蛋白因其N端和C端均带有6xhis标签,增强了目的 蛋白与树脂的结合力,而使亲和层析纯化效果(重组蛋白的浓度和纯度)显著提高.结论 rHRF重组蛋白的可溶性表达水平不受IPTG浓度、诱导表达温度和时间的影响.但是可溶性重组蛋白两端均携带6xhis标签可使亲和层析纯化效果显著提高,从而有利于获得足昔rHRF 用于进一步的生物学功能研究.

    作者:陈晓湘;胡旭初;徐劲;余新炳 刊期: 2008年第12期

  • 1950-2000年汕头市病毒性传染病流行状况分析

    目的 调查汕头地区近50年病毒性传染病的流行情况,为病毒性传染病预防和控制措施的实施提供科学依据.方法 收集1950-2000年汕头市病毒性传染病疫情资料,采用描述流行病学方法进行分析.结果 建国以后汕头地区发生过9种病毒传染性疾病:天花(甲类)、病毒性肝炎、脊髓灰质炎、麻疹、狂犬病、流行性乙型脑炎、登革热、艾滋病、流行性感冒.统计资料同时显示,天花已经灭绝,发病率明显上升的病种主要有登革热、病毒性肝炎、艾滋病,发病明显下降的病种主要有脊髓灰质炎、流行性感冒、狂犬病、流行性乙型脑炎、麻疹.结论 汕头地区需要重点监测的传染病为登革热、艾滋病、流行性感冒、麻疹、病毒性肝炎.

    作者:张敏红;赵卫;林周孟;周焕汉;马锦霞;朱利 刊期: 2008年第12期

  • 甲醛、甲苯和二甲苯对SD大鼠胚胎肢芽细胞的联合毒性作用

    目的 研究3种主要挥发性有机化合物(VOCs)甲醛、甲苯和二甲苯对SD大鼠胚胎肢芽细胞的联合毒性作用.方法 将肢芽细胞分别暴露于不同浓度的甲醛、甲苯和二甲苯及3种挥发性有机化合物的混合溶液中.采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTF)法分别检测对肢芽细胞的半数抑制浓度(IC50).结果 作用5 d后,甲醛、甲苯和二甲苯对肢芽细胞的IC50分别为10.41、45.58、37.12 mg/L,3种物质混合液的IC50为26.51.Q值为1.07.结论 甲醛、甲苯和二甲苯均有明显的细胞毒性,3种物质的联合毒性类型为相加作用.

    作者:张全新;朱伟;李军涛;杨光宇 刊期: 2008年第12期

  • MCS+血细胞分离机在治疗性红细胞采集术中的应用

    目的 探讨MCS+血细胞分离机应用于治疗性红细胞采集(TE)时的操作要点和临床观察指标.方法 采用治疗性自体红细胞采集(TAE)程序,选择随机等量补充补偿液,不加添加剂模式.比较采集前后的红细胞(RBC)、红细胞比积(HCT)、血红蛋白(HGB)、B超等结果,观察治疗效果;分析比较机器显示的预计采后HCT值与实际采后的外周血HCT的差别.结果 6例病人采集后外周血血常规(血Rt)示RBC、HCT、HGB均明显下降.与采集前比较差异有统计学意义(P<0.01),原有脾肿大的患者B超均明显缩小;机器显示的预计采后HCT均比实际采后外周血HCT低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 应用MCS+血细胞分离机进行TE是安全有效的.

    作者:吴艳丽;卢岑;冯雅芳 刊期: 2008年第12期

  • 丹红注射液对急性脑梗死大鼠保护作用的研究

    目的 探讨丹红注射液对大鼠急性脑梗死后自由基损伤的脑保护作用.方法 制备脑缺血模型.假手术组、手术组(注射生理盐水),手术+丹红组(注射丹红注射液),连续5d后测定脑组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(CSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量,同时观察海马CA1区病理组织学改变.结果 手术+丹红组大鼠脑组织的SOD和GSH-Px活力较手术组增高,MDA含量降低,其差异有统计学意义(P<0.05).手术+丹红组脑组织病理改变较手术组轻.结论 丹红注射液可增强缺血脑组织SOD和GSH-Px活力,降低MDA含量,清除氧自由基,达到保护脑细胞的作用.

    作者:胡波;吴禹 刊期: 2008年第12期

  • 黄曲霉毒素B1快速检测方法的研究进展

    黄曲霉毒素B1是黄曲霉毒素系列中毒性、危害性、污染性大的一种,且分布广,对世界范围内的大多数食品原料及成晶均有小同程度的污染,严重威胁人类健康.目前,国内外对于黄曲霉毒素B1的检测要求越来越高,新发展起来的快速分析技术也逐渐应用于黄曲霉毒素B1的检测.除了常规的液相色谱法、薄层层析法、胶体金法、酶联免疫吸附法得到更充分的研究和应用外,时间分辨荧光免疫法等新兴免疫学快速检测方法以及具有创新意义的ELISA-TLC组合分析法也已初步建立,这些为实现快速筛查、现场快检,提高检测效率、降低检测成本提供了很好的思路;同时也为更好地维护人民群众饮食安全提供重要支撑.本文就黄曲霉毒素B1的快速检测方法做一综述.以期为进一步提高对黄曲霉毒素B1的监控水平和效率提供参考.

    作者:高秀洁;邓中平;焦红;胡守旺;奚星林;李明 刊期: 2008年第12期

  • 深圳市宝安区2007年338家五金类企业职业病危害情况分析

    目的 了解深圳市宝安区五金类企业主要职业病的危害因素,为制订相应行业职业病预防提供依据.方法 收集2007年深圳市宝安区基本职业卫生服务现场职业病危害因素监测数据并进行统计分析.结果 五金类企业主要职业病危害因素是噪声、三氯乙烯、正己烷,合格率分别为37.0%、68.9%、69.8%.结论 噪声、三氯乙烯、正己烷等是深圳市宝安区五金类企业的重要职业病危害因素.应加强卫生监督监测,做好相应的防护丁作.

    作者:袁建辉;杨建平;朱志良 刊期: 2008年第12期

  • 广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化及其抗原分析

    目的 建立广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化方法,分析其抗原特性及血清学诊断价值.方法 分别用贝尔曼漏斗法、蔗糖离心浮选法及改良贝尔曼法联合胰酶消化法从大鼠粪便中分离纯化一期幼虫;用SDS-PAGE和Western blotting进行蛋白潜与抗原谱分析;分别用一期幼虫和成虫抗原包被ELISA反应板,间接法检测不同样本中相应抗体.结果 3种方法分离效率分别为50.1%、33.6%和19.7%;联合法获得的纯度高,凡90%以上的幼虫有活力;贝尔曼漏斗法分离的幼虫99%以上具有活力但纯度低;蔗精离心浮选法分离的绝大多数虫体失去活力.一期幼虫104 000 Mr与广州管圆线虫感染2 周的大鼠血清出现强反应,32 000 Mr和31 000 Mr与感染6周的大鼠血清、32 000 Mr与广州管圆线虫病患者血清均出现较强反应,与对照血清均未出现明显的反应;在ELISA检测中,一期幼虫抗原对广州管圆线虫病患者血清和感染大鼠血清的检出率与成虫抗原无统计学筹异.结论 改良贝尔曼法联合胰酶消化法可从大鼠的粪便中分离高纯度且具有活力的一期幼虫,一期幼虫104 000 Mr、32 000 Mr和31 000 Mr具有潜在的诊断价值,可望从大鼠粪便中分离一期幼虫开发诊断性抗原.

    作者:刘敏;顾金保;李华;陈晓光;詹希美 刊期: 2008年第12期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会