黄丽芬;唐小平;蔡卫平;雷春亮;王琦;岑玉文;陈万山;钟活麟
目的 探索SYBR Green Ⅰ联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义.方法 选择浓度为108.48、105.70和103.70 copies/ml的3种HBV-DNA阳性血清和<1×103.0 copies/ml的阴性血清各1份,在TaqManPCR混合反应体系中加入SYBR Green Ⅰ组成双荧光PCR(TaqMan+SYBR Green Ⅰ组),同时进行TaqMan和SYBR Green Ⅰ的单荧光PCR(分别为TaqMan组和SYBR Green I组),设置同一PCR和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其Tm,每种方法一次检测每份血清5次.结果 TaqMan+SYBR Green Ⅰ组检测的HBV-DNA阳性血清均为阳性,其平均含量为108.55±0.32、105.79±0.29、103.810.30,与TaqMan组的108.49±0.31、105.69±0.30、103.72±0.25 copies/ml 对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31、0.54和0.27,P>0.05);与SYBR Green Ⅰ组的108.41±0.35、105.21±0.34和103.26±0.26 copies/ml(不含未检出的两次血清)比较,除高浓度外,中低浓度有统计学意义(t=2.90和2.62,P<0.05).TaqMan+SYBR Green Ⅰ组和SYBR Green Ⅰ组阳性血清均出现明显熔解曲线,熔解温度(Tm)分别为71.8℃、72℃和79.8℃,阴性血清未出现扩增曲线和Tm值.结论 SYBR Green Ⅰ联合TaqMan-PCR检测HBV-DNA时,具有能维持TaqMan-PCR的高灵敏度、特异性更强,并能同时检测HBV-DNA Tm的特点,为HBV的DNA多态性分析,尤其是在HBV基因分型方面提供了新的检测思路.
作者:赵友云;高应林;王春香;乐惠荣 刊期: 2007年第06期
目的 研究脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的变化及其与p53蛋白表达的关系.方法 以盲肠结扎穿刺法复制脓毒症大鼠模型,以电镜和凋亡原位末端标记法(TUNEL法)检测其心肌细胞凋亡变化,用免疫组化方法检测p53蛋白的表达.结果 一定时间内脓毒症大鼠心肌细胞凋亡率均明显高于正常对照组和假手术对照组(P均<0.05),p53蛋白表达阳性数均较正常对照或假手术组明显升高(P均<0.05),其变化与TUNEL法检测凋亡的结果一致(P<0.05).结论 细胞凋亡可能是脓毒症时心肌损害的机制之一,其调控基因p53的改变或许可以作为脓毒症病情改变的标志,可利用它对脓毒症进行干预,以改善脓毒症的预后.
作者:许衍硕;翟诚顺;梁艳冰;唐皓;马中富 刊期: 2007年第06期
目的 研究岗梅水提取物体内外抗流感病毒的活性.方法 体外抗病毒试验采用CPE法,按Reed.Muench方法计算TC50、IC50和TI,观察岗梅水提取物体外对流感病毒引起的细胞病变的影响;体内抗病毒试验采用小鼠经滴鼻感染流感病毒造成肺炎模型,以肺部炎症、死亡率和生命延长率为指标,观察岗梅水提取物体内抗流感病毒的活性.结果 岗梅水提取物在体外对流感病毒引起的细胞病变有明显的抑制作用,其IC50为88.2μg/ml,TI为5.82;在给药剂量为8g生药/kg和16g生药/kg时,对流感病毒所致的小鼠肺部炎症有明显抑制作用,并能明显降低流感病毒感染小鼠的死亡率和延长其存活时间.结论 岗梅水提取物在体内外均具有明显抗流感病毒的作用.
作者:朱伟群;刘汉胜;晏桂华;李沛波 刊期: 2007年第06期
目的 研究热应激作用下A549细胞热休克蛋白70(HSP70)和XPA修复酶的表达规律及其可能的意义.方法 利用免疫印迹方法(Western blot)检测A549细胞中HSP70、XPA修复酶的表达水平.结果 A549细胞接受不同温度(39、41、42、43℃)处理2h后,HSP70表达水平随温度的增高而逐渐增加,并在42℃应激时表达高,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);细胞接受42℃应激1~4h,HSP70表达水平随应激时间的增加而递增,与对照组相比,细胞在42℃应激2~4h时HSP70表达显著上调(P<0.05).两处理组细胞XPA修复酶表达水平均无明显变化(P>0.05).结论 高温能诱导HSP70的表达,并呈一定的温度-效应和时间-效应关系,而对XPA修复酶未见明显影响.
作者:隆宗(龙天);张林;邬堂春 刊期: 2007年第06期
目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)和白血病抑制因子(LIF)水平及其在MDS免疫发病机制中的作用.方法 采用酶联免疫夹心(ELISA)法检测25例MDS患者和20例正常人血清sICAM-1、TGF-β1、和LIF水平.结果 与正常组比较,MDS患者sICAM-1水平明显升高(P<0.01);TGF-β1水平明显降低(P<0.01);LIF水平有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05).结论 sICAM-1、TGF-β1和LIF三种细胞因子与MDS免疫发病机制密切相关.
作者:刘瑞玉;张舜玲;许先吟;巫远忠;余相;曹海燕;陈江涛;胡俊 刊期: 2007年第06期
目的 探讨上腔静脉压剧增对幼犬脑损伤的影响.方法 6个月健康杂种犬15只,随机分为3组,阻断上腔静脉使其压力分别为25 mmHg(Ⅰ组),30 mmHg(Ⅱ组),35 mmHg(Ⅲ组),持续30 min,分别检测3组动物不同时点血丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAOC)的浓度变化.结果 SVCP达35 mmHg并持续30 rain时血MDA、TAOC浓度明显升高(P<0.01),开放后30 min,MDA、TAOC浓度明显降低(与开放前比较P<0.01),但仍高于基础值(P<0.01).结论 上腔静脉压剧增为35 mmHg以上、且持续30 min时,可导致幼犬脑损伤.
作者:宋兴荣;胡方方;丁以群;梁杰贤 刊期: 2007年第06期
目的 从我国细粒棘球绦虫分离株(新疆源和甘肃源)中克隆AgB1和AgB2两个亚单位基因,并试用不同的表达载体对两个AgB亚单位基因的表达情况进行比较观察.方法 设计特异性引物,扩增AgB1和AgB2亚单位抗原基因,分别用pET28a(+)、pET32a(+)和pGEX4T-13种表达载体构建重组质粒,对AgB亚单位基因在不同载体中的表达情况进行比较.结果 从我国细粒棘球绦虫分离株中克隆的AgB1和AgB2抗原基因与GenBank中的序列比对,AgB1与德国人源、巴西羊源、意大利牛源均有一定的核苷酸和氨基酸差异;AgB2与乌拉圭羊源序列完全一致.在3种载体中表达重组蛋白的结果显示,不同载体和表达系统对重组表达蛋白的生物活性和可溶性有较大的影响.结论 成功地克隆了细粒棘球蚴AgB亚单位基因,AgB1和AgB2基因在3种不同表达载体中的表达情况及对融合标签蛋白的血清基础反应性的比较分析表明,两个重组抗原在pET32a载体中的表达优于pET28a和pGEX4T-1载体.
作者:江莉;冯正;许学年;薛海筹;冯宇 刊期: 2007年第06期
目的 探讨瑞芬太尼复合七氟烷应用于腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果、不良反应及对麻醉苏醒的影响.方法 Ⅰ~Ⅱ级,无合并症,拟行腹腔镜胆囊切除术的成年患者100例,随机分为瑞芬和对照组,各50例,两组术前用药,麻醉诱导用药及方法相同,观察组于诱导开始用微量泵连续静脉输入瑞芬太尼(20μg/ml NS),输注速率根据麻醉深度及生命体征变化调节,不采用单次注药.麻醉期间常规监测NIBP、ECG、HR、SpO2观察麻醉效果、苏醒时间,麻醉苏醒程度、不良反应.结果 术中芬太尼用量、七氟烷吸人浓度,瑞芬组较对照组低,观察组麻醉清醒时间、拔管时间明显短于对照组(P<0.01),苏醒评分明显高于对照组(P<0.05),两组术中低血压及心动过缓的发生差异无统计学意义(P>0.05).结论 应用瑞芬太尼复合七氟烷能明显加快腹腔镜胆囊切除术病人全身麻醉后的苏醒,其药理特性符合快通道麻醉的求,安全有效.
作者:李雅兰;蔡磊;彭雪梅;刘育勇;王仲红;蔡明雪;周长忍 刊期: 2007年第06期
目的 分析妊娠合并肝炎患者的临床特点.方法 将55例妊娠合并肝炎病例按照孕周分为早中期妊娠组及晚期妊娠组,比较重症肝炎的发生率、肝功能及转归.结果 妊娠期肝炎以慢性乙型肝炎患者占绝大多数,晚期妊娠组较早中期妊娠组重型肝炎发生率高(P=0.011),且病死率高(P=0.001),晚期妊娠组ALT、AST、ALP均高于早中期妊娠(P<0.05).结论 晚期妊娠合并肝炎病情重、预后差,临床上应严密观察病情变化,以减少孕产妇的病死率.
作者:翟洁卿;张晓红;林炳亮 刊期: 2007年第06期
目的 了解本院临床分离细菌和念珠菌的分布特征和耐药性,为合理使用抗生素提供依据.方法 大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法.念珠菌利用显色平板进行分离和鉴定,K-B法测药敏.结果 3144株细菌和念珠菌中前6位的种类及百分比为白色念珠菌12.02%、铜绿假单胞菌11.10%、大肠埃希菌9.64%、金黄色葡萄球菌7.09%、表皮葡萄球菌6.36%和肺炎型肺炎克雷伯菌6.14%.G-杆菌中耐药率较低的为亚安培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为44.2%和43.5%.C+球菌耐药率较低的为万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、阿米卡星、氯霉素、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦.金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率分别为52.1%和65.1%.念珠菌对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0.结论 本院临床分离肠杆菌科各种细菌产ESBLs水平、非发酵菌耐药率和葡萄球菌对甲氧西林耐药率均较高,应加强抗生素的合理使用.
作者:耿穗娜;周晓红;王前;柴志欣;张洁;芮勇宇 刊期: 2007年第06期
目的 研究3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(3-chloro-4-dichloromethyl-5-hydroxy-2(5H)-furanone,MX)对小鼠多组织的ras与野生型p53基因(wt-p53)表达的影响,从基因水平探讨MX致癌的机制.方法 昆明种雄性成年小鼠,每天按21 mgMX/kg的剂量经腹腔注射染毒,连续6d,生理盐水作溶剂对照.末次染毒24h后处死.运用原位杂交技术检测MX对小鼠肝、肾和小肠组织的ras基因与wt-p53基因表达的影响.结果 MX染毒组小鼠的肝、肾和小肠的ras-mRNA表达水平(0.165±0.007,0.155±0.011,0.196±0.035)明显高于溶剂对照组(0.147±0.007,0.136±0.004,0.132±0.026),且差异有统计学意义(P<0.05).wt-p53-mRNA表达水平在MX染毒组略为降低,但与溶剂对照组相比没有统计学意义.结论 MX可诱导小鼠肝、肾和小肠组织中ras基因转录活性增强,但未能诱导野生型p53基因的异常表达.
作者:刘慧;邹亚玲;周利红;刘爱林;鲁文清 刊期: 2007年第06期
目的 研究适合猪蛔虫幼虫体外培养的佳条件.方法 将猪蛔虫幼虫在不同培养液(KW-2、RPMI-1640、DMEM(含酚红)、DMEM(不含酚红))中进行培养,并观察其存活、生长以及发育情况.结果 幼虫在KW-2培养液中生长情况好,虫体活力很强,3d后成活率高达87.67%,其次是在RPMI-1640培养液中.在培养液DMEM(含酚红)、DMEM(不含酚红)中生长情况较差,存活不超过7d.其中KW-2培养液中在4~5d出现虫体头端有松动的鞘出现,在RPMI-1640培养液中7~8d出现鞘松动,DMEM(含酚红)、DMEM(不含酚红)中未发现有脱鞘现象出现.结论 猪蛔虫的体外培养的佳条件还需要进一步探索,从而为研究寄生线虫的发育生物学以及特异性发育的功能基因组学奠定基础.
作者:陈宁;黄翠琴;林瑞庆;宋惠群;朱兴全 刊期: 2007年第06期
目的 分析糖尿病病人并发肝脓肿的易发部位及有效治疗措施.方法 对16例糖尿病合并肝脓肿患者临床资料进行回顾性分析.结果 糖尿病合并肝脓肿占同期收治肝脓肿的40%,血糖控制不理想、临床表现不典型、脓肿液化不明显是本病的主要特点.本组8例行B超引导下穿刺引流+抗生素冲洗治愈,平均住院(30±2.4)d,8例厚壁脓肿行手术脓肿局部切除,平均住院(18±2.6)d,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 糖尿病病人并发肝脓肿以厚壁脓肿较多见,脓肿局部切除术是治疗本病的重要方法且安全有效,能缩短患者住院时间.
作者:凌济忠;周荣芳;庾玉林;任国军 刊期: 2007年第06期
目的 探讨女性非淋菌性尿道炎或宫颈炎(NGU)与解脲脲原体(Uu)分群和分型的关系.方法 采用液体培养,A7固体分离,液体纯化的方法获得Uu纯菌株,分别对114例女性单纯Uu感染的NGU和113例单纯Uu感染的女性携带者的Uu做PCR分群和生长抑制试验分型.结果 NGU组1群56例(49.12%),2群58例(50.88%).正常组1群51例(45.13%),2群62例(54.87%);NGU组Uu分型阳性率高依次为2型、7型、6型,正常人组高依次为7型、2型、14型.结论 Uu感染所致NGU与Uu分群关系不大.
作者:柯建良;钟山;祝新;黄澍杰;朱国兴 刊期: 2007年第06期
目的 了解广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况.方法 对2006年在广州市某三甲医院妇产科就诊的年龄介于18~47岁的3208名生育期妇女的血清标本用酶联免疫法检测乙肝两对半,并随机抽取其中200份标本用聚合酶链反应法检测SEN病毒D和H亚型.结果 HBsAg阳性率为14.3%(459/3208),其中HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性占3.2%(103/3208),HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性占8.4%(269/3208),未检出SENV-D和H.结论 广州市生育期妇女乙肝病毒携带率高,必须强化乙肝疫苗预防接种,确保新生儿及时、全程接种乙肝疫苗,杜绝乙肝病毒经血传播.SEN病毒感染状况有待进一步研究.
作者:蔡衍珊;钟柳英;黄盛昌;蒋力云;刘远 刊期: 2007年第06期
目的 利用99mTc-大颗粒聚合白蛋白(MAA)肺灌注显像(PPI)监测下肢创伤及手术后(LEPP)肺栓塞(PE)患者疗效并对其评价.方法 19例临床确诊的LEPP合并PE患者分别于溶栓治疗前、治疗2~4周后进行PPI;PPI图像上显示一个肺段灌注完全缺损记3分,缺损25%~75%记2分,<25%记1分,无异常记0分,根据记分变化分析溶栓治疗前后临床改善情况.结果 19例患者溶栓治疗2~4周后临床症状完全消失10例、明显改善6例、有改善3例,治疗前(10.2±3.8)后(2.8±1.4)PPI记分有明显差异(t=7.75,P<0.01).结论 PPI为一种准确、可靠的无创性评价肺血流改善的手段,对LEPP合并PE患者疗效观察具有重要的临床价值.
作者:林晓生;谢昌辉;马志海;朱琳;段清萍 刊期: 2007年第06期
目的 初步探讨安贺拉滴眼液对兔干眼的疗效及其可能的机制.方法 新西兰白兔20只,制作碱烧伤干眼模型,随机分为对照组和安贺拉组,分别滴生理盐水和安贺拉滴眼液.定期眼表检查、结膜荧光素染色、虎红染色、泪膜破裂时间,泪液蕨样变试验等检查.结果 安贺拉组眼表检查、结膜荧光素染色、虎红染色逐渐减轻,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);泪膜破裂时间术后逐渐下降,第7天明显,随后逐渐升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);泪液蕨样变试验显示安贺拉组Ⅲ、Ⅳ级结晶逐渐减少,与对照组比较有统计学意义(P<0.05).结论 安贺拉滴眼液通过降低兔眼表的炎症反应而减轻干眼体征,提示其在干眼治疗方面具有一定的应用前景.
作者:周清;陈剑;张静辉;杨水平;陈敏;陈琳 刊期: 2007年第06期
目的 分析广西壮族自治区南丹县旋毛虫(Trichinella spiralis)COX1和5SrRNA基因特点,阐述该分离株的系统发生关系及基因变异规律.方法 PCR扩增南丹旋毛虫分离株COX1和5S rRNA基因片段并对扩增产物进行测序;应用Blast和Clustal X软件计算其碱基组成,分析该分离株与GenBank中相应序列的同源性及遗传距离,同时应用UPGMA方法分析聚类关系.结果 扩增后COX1基因片段长419 bp.5S rRNA基因片段长695 bp.南丹旋毛虫分离株与Trichinella spiralis(T.spiralis)的同源性高,分别为99.0%和99.1%,遗传距离小,分别为0.005和0.014.采用UPGMA法构建的2个系统发生树,南丹分离株和T.spiralis具有高度同源性,位于同一分枝,与无囊包旋毛虫(T.papuae和T.zimbabwensis)分枝较远,后者独成一枝,与T.spiralis相比,2个基因均存在变异,且变异位点均为4个,分别占相应基因序列的1.19%和0.57%.2个基因均富含A和T碱基,A+T含量分别占相应基因的61.8%和66.4%.COX1变异存在转换和颠换,但均发生在密码子第三位点.5SrRNA基因变异位点分散,但变异均为转换,无颠换.结论 南丹旋毛虫分离株与T.spiralis具有高度的亲缘关系,其COX1和5S rRNA基因的碱基组成、变异位点及变异类型均具有偏好现象.
作者:欧阳颐;黎学铭;张鸿满;杨益超;王勇 刊期: 2007年第06期
目的 了解肇庆市华支睾吸虫(肝吸虫)中间宿主感染的情况及流行因素,阻断和控制肝吸虫病在我市的传播流行.方法 流行因素现场调查;淡水螺类采用解剖压片法;淡水鱼采用人工消化法;猫、狗、猪采用动物肝脏胆囊解剖法.结果 肇庆市家常淡水鱼中的鲩鱼、鳙鱼、鲤鱼等3种鱼检出华支睾吸虫囊蚴,其中感染率高的是鲩鱼为20.0%,各种鱼类总感染率为6.67%.阳性鱼主要集中在端州、高要和鼎湖等地.第一中间宿主淡水螺及保虫宿主均没检出阳性.结论 鼎湖区、高要市是肇庆市肝吸虫病传播流行的源头,也是我市肝吸虫病防控的重点所在.
作者:高向雄;区意;李伟文;郭艳玲;伍立 刊期: 2007年第06期
本科教学工作水平评估是教育部对高等学校办学水平和办学能力的一次全面检验,是对高校的人才培养质量和本科教学工作的高权威评价.教师应不断加强自身的素质修养,迎接教育部的评估工作.
作者:陈新宇;陈代雄;沈浩贤;马长玲;李小敏 刊期: 2007年第06期