学术投稿

腺病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用

刘泽玉;李国伟;陆家海

关键词:腺病毒, 载体, 基因治疗
摘要:腺病毒载体目前广泛地应用于肿瘤的基因治疗.随着对腺病毒分子结构、功能以及感染机制的进一步深入了解,人们在降低其免疫原性,增强基因导入特异性,增强感染和表达效率等方面进行了许多探索,开发具有肿瘤靶向性的溶瘤腺病毒载体是其发展方向与研究热点.本文对腺病毒载体的生物学、构建策略及其在肿瘤基因治疗中的应用进行综述.
热带医学杂志相关文献
  • 180例慢性咽炎患者咽部细菌分布的调查与分析

    目的 了解慢性咽炎患者咽部细菌种类及分布特征,研究细菌感染与慢性咽炎的相互关系.方法 采集180例各类型慢性咽炎患者咽后壁分泌物,进行细菌培养和鉴定.结果 慢性咽炎患者咽拭子标本中,细菌培养检出率为100%.检出率前三位的细菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、卡它莫拉菌(26.7%)、副流感嗜血杆菌(26.1%);检出率前3位的致病菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、副流感嗜血杆菌(26.1%)、表皮葡萄球菌(22.8%),慢性咽炎患者咽部细菌检出率明显高于对照组(P<0.05).α-溶血性链球菌为临床各类型慢性咽炎患者中检出率高的细菌,其次为副流感嗜血杆菌(慢性单纯性咽炎患者),或肺炎克雷伯菌(慢性肥厚性咽炎患者),或金黄色葡萄球菌(干燥性咽炎患者),其检出率分别为32.9%、28.8%和23.3%.结论 慢性咽炎患者咽部携带的细菌谱与健康人群有明显的差异,且致病菌的检出率较高,不同临床分型慢性咽炎发病与咽部优势菌群有一定关系.

    作者:杜利军;张莉滟;吕志跃;吴忠道 刊期: 2007年第11期

  • HCV2a(JFH1)NS5A蛋白在原核和真核细胞中的表达、鉴定及分析

    目的 在原核与真核细胞中表达丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)2a型JFH1(japanese fulminant hepatitis 1)株NS5A蛋白,分析JFH1 NS5A蛋白与其它基因型NS5A蛋白间的差异,为进一步研究NS5A蛋白在HCV病毒复制中的作用奠定基础.方法 PCR特异扩增JFH1 NS5A基因,克隆入pET-32a和pEGFP-N1载体中,构建JFH1 NS5A的原核和真核重组表达质粒pET-JFH1 NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.将pET-JFH1 NS5A转化大肠杆菌BL21(DE3),pEGFP-JFH1 NS5A转染HEK 293T细胞,在原核与真核系统中进行表达,并以SDS-PAGE、荧光显微术和Western blot方法检测.利用PubMed BLAST软件对JFH1与HCV1a、1b、2b和2c型NS5A蛋白间的同源性进行了分析.结果 酶切鉴定及测序结果表明成功构建了重组质粒pET-JFH1NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.SDS-PAGE电泳检测到融合蛋白在原核细胞中的表达,荧光显微镜观察和Western blot检测到了GFP-JFH1 NS5A融合蛋白在HEK 293T细胞中表达.BLAST分析显示,JFH1和H77、HC-J4、HCV-J8和BEBE1病毒株NS5A蛋白的同源性分别为57%、60%、68%和74%.结论 JFH1 NS5A蛋白在原核与真核细胞中表达成功,为研究HCV NS5A在JFH1株病毒高效复制中的作用提供了材料.

    作者:王永智;任浩;丁惠;赵平;薛利军;潘卫;戚中田 刊期: 2007年第11期

  • 不动杆菌医院感染流行病学调查及耐药性现状

    不动杆菌广泛存在于自然界、医院环境及人体皮肤表面,为条件致病菌,已成为严重的医院感染病原菌.由于该菌耐药性不断增强,大多数为多重耐药,临床治疗十分棘手,因此了解不动杆菌的临床分布特征及耐药性机制对有效治疗和预防该菌感染非常重要.本综述通过资料的总结,掌握医院内该菌感染现状和耐药性特征,对其进行预防和合理使用抗生素治疗提供了有效的资料.

    作者:张卫云;陈清 刊期: 2007年第11期

  • 赤芍总苷抗血栓作用的研究

    目的 探讨赤芍总苷(TPG)静脉给药抗血栓作用以及其作用机制.方法 通过动静脉旁路血栓形成实验,观察TPG对血栓形成的抑制作用;建立电刺激致大鼠血栓模型,观察TPG抗血栓作用以及对血液流变学指标、凝血-纤溶系统的影响;TPG静脉注射给药5 d后,测定其对小鼠凝血时间的影响;以体外法观察TPG对ADP诱导家兔血小板聚集的影响.结果 TPG 25、50、100mg/kg能明显抑制大鼠动-静脉旁路血栓的形成,抑制率分别为32.59%、34.33%、24.88%;TPG 25、50、100 mg/kg能明显延长电刺激大鼠动脉血栓形成所需的时间,所需时间分别为648.2 s、651.1 s、746.4 s,与对照组(540.2 s)比较,差异有统计学意义(P<0.05);降低血粘度,延长凝血酶原时间和部分凝血活酶时间,降低血纤维蛋白原浓度;有效延长小鼠的凝血时间;显著抑制ADP诱导的血小板聚集(抑制率分别为23.4%、37.2%、44.9%).结论 TPG具有较好的抗血栓作用,其作用机制与其能降低血粘度,延长大鼠凝血酶原时间、部分凝血活酶时间以及降低血纤维蛋白原浓度,抑制血小板聚集有着密切的关系.

    作者:邱灿华;陈健文;蓝秀健;马仁强;王家伟;张天举;林明栋;周璇和 刊期: 2007年第11期

  • 四年制医学检验本科《临床免疫学检验》教学的几点体会

    在四年制医学检验本科《临床免疫学检验》教学中,进行合理的教学时数分配,优化教学内容,采用灵活多样的教学模式是提高教学质量的方法手段,并取得了明显的效果.

    作者:裘宇容;杨佳 刊期: 2007年第11期

  • 亚洲带绦虫肌动相关蛋白2/3复合体结构与功能的生物信息学分析

    目的 分析和预测亚洲带绦虫肌动相关蛋白2/3复合体亚单位4(Actin related protein 2/3 complex subunit 4,Atp2/3)基因及其编码蛋白的结构和特性.方法 利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,如Pcgene和Vector NTI suite,从亚洲带绦虫全长cDNA质粒文库中识别Arp2/3基因及其编码区,分析、预测该基因编码蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等.结果 该基因全长718 bp,编码区为30-530,编码167个氨基酸,为全长基因.GenBank中与日本血吸虫Arp2/3氨基酸序列一致性达78%,相似性达90%.理论分子量为19533.9.没有跨膜区和各种亚细胞序列.预测3个主要的抗原表位为53~58,74~82,138~143均在Arp2/3空间结构的分子表面.结论 应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出Arp2/3基因.

    作者:唐保东;黄江;胡旭初;黄艳;包怀恩;郎书源 刊期: 2007年第11期

  • 抗乳腺癌免疫毒素EGF-TCS的构建及生物学活性

    目的 制备对乳腺癌细胞具有特异性杀伤活性的抗乳腺癌重组免疫毒素.方法 利用大肠杆菌系统表达抗乳腺癌EGF-TCS重组免疫毒素.表达产物经Ni-NTA Agrose亲和层析柱纯化,进行特异性杀伤活性检测.结果 以可溶性形式表达于大肠杆菌培养上清中,并获得有效纯化.细胞毒试验表明其对乳腺癌细胞具有杀伤作用,而对正常乳腺细胞无损伤.结论 已成功地制备了具有杀伤活性的抗乳腺癌EGF-TCS重组免疫毒素,为其进一步应用奠定基础.

    作者:杨海文;李咏梅;陈金龙;罗仁 刊期: 2007年第11期

  • 盆腔脓肿20例误诊分析

    目的 回顾性分析盆腔脓肿的临床表现,提高妇科的诊疗水平.方法 对1998年1月至2005年12月,收住我院的盆腔脓肿共89例,其中误诊为其他疾病20例进行分析.结果 误诊为外科急腹症阑尾炎7例,卵巢瘤扭转及卵巢囊破裂各5例,异位妊娠2例,卵巢癌1例.结论 要提高对盆腔脓肿的认识,尤其是临床症状不典型的患者,详细询问病史,认真进行体格检查,明确诊断,但决不能一味依赖辅助检查或主观臆断,草率诊断,匆忙手术.

    作者:杜莲芳 刊期: 2007年第11期

  • 腺病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用

    腺病毒载体目前广泛地应用于肿瘤的基因治疗.随着对腺病毒分子结构、功能以及感染机制的进一步深入了解,人们在降低其免疫原性,增强基因导入特异性,增强感染和表达效率等方面进行了许多探索,开发具有肿瘤靶向性的溶瘤腺病毒载体是其发展方向与研究热点.本文对腺病毒载体的生物学、构建策略及其在肿瘤基因治疗中的应用进行综述.

    作者:刘泽玉;李国伟;陆家海 刊期: 2007年第11期

  • 5 225例唐氏综合征孕早期筛查数据分析

    目的 探讨孕妇孕早期血清标志物筛查与胎儿唐氏综合征检出的关系.方法 应用全自动时间分辨荧光测定仪及配套试剂对妊娠9~13周的5 225例孕妇进行血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)和游离β-人绒毛膜促性腺激素(free β-HCG)的测定,筛查结果应用PerkinElmer公司提供的1T软件计算唐氏综合征风险.风险率≥1:250定为筛查阳性,再做羊水或脐带血产前诊断以确认.结果 5 225例孕妇中筛查阳性者为283例,阳性率为5.42%,有159例接受了产前诊断,检出唐氏综合征胎儿4例,漏诊2例,检出率为66.67%,还检出其它染色体异常3例、畸形10例、死胎6例、18-三体2例.结论 孕早期血清PAPP-A和free β-HCG联合筛查胎儿唐氏综合征是行之有效的方法,结合MOM对防止先天缺陷有实用性价值.

    作者:周剑英;廖灿;孙茜;龚惠芳;苏洁玲 刊期: 2007年第11期

  • HBV基因型对慢性乙型肝炎临床的影响

    目的 了解HBV基因型对乙型肝炎病毒慢性感染者临床影响.方法 采用限制性片段长度多态性(RFLP)及序列测定法检测广东地区27例HBV携带者和173例慢性乙肝患者的HBV基因型.结果 B基因型105例(52.5%),C型94例(47%),D型1例,未发现其它基因型.B型中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)所占比例(18.1%)显著高于C型中ASC所占比例(8.5%).C型中肝硬化所占比例(23.4%)显著高于B型中肝硬化所占比例(7.6%).C型在ASC、慢性乙肝轻度、中度、重度及重型肝炎、肝硬化的比例依次增高.C型较B型年龄大,但二者间性别差异无统计学意义.结论 广州地区HBV基因型由B、C、D型构成,以B型为主.C型较B型年龄大.C型与较重肝病有关.B、C型间性别差异无统计学意义.

    作者:冼建中;关玉娟;唐小平 刊期: 2007年第11期

  • HBV-DNA含量升高患者血清PreS1抗原和其他标志物相关性分析

    目的 探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1)与HBV-DNA、HBV血清标志物(HBV-M)和ALT之间的相关性和临床应用价值.方法 收集380例荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量升高患者血清,用酶联免疫法(ELISA)检测乙肝病毒前S1抗原和HBV血清标志物、用速率法检测ALT.结果 380例HBV-DNA含量升高乙肝患者中,PreS1的阳性率为84.6%,HBeAg阳性率为67.8%,两者比较差异有统计学意义(P<0.005);在各种模式HBV血清标志物中,HBeAg阳性组PreS1阳性率和ALT异常升高与HBeAg阴性组比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着HBV-DNA含量的增加,HBeAg和PreS1的阳性率也增加,HBV-DNA拷贝数为5×102~1×105 范围时,PreS1的阳性率高于HBeAg阳性率(P<0.005),当HBV-DNA拷贝数高于1×105时,HBeAg阳性率与PreS1阳性率相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 乙肝病毒前S1抗原和HBeAg两者阳性率与HBV-DNA含量密切关联,乙肝病毒前S1抗原检测可作为乙肝病毒复制、传染性及肝细胞损伤的指标,同时也可用于指导临床由于病毒变异和其他原因造成HBeAg阴性乙肝患者的诊断和治疗.

    作者:张婷;廖伟娇;陈涛;高俊;温丹萍 刊期: 2007年第11期

  • 抗蓝载体单克隆抗体的制备及特性鉴定

    目的 制备抗蓝载体(blue carrier,BC)单克隆抗体(mAb),为相关研究提供支持与工具.方法 用人工合成肽与蓝载体交联后免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.用ELISA以及Dot-ELISA方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力).结果 筛选到1株可稳定分泌抗蓝载体单克隆抗体的杂交瘤细胞5B5,腹水效价2×10-6,单抗亚类为IgG1,抗体亲和力为7.8×108.Dot-ELISA结果显示,在相同条件下5B5 mAb只与蓝载体特异性结合,与钥孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等载体蛋白不发生交叉反应.结论 获得1株能特异性识别蓝载体蛋白的mAb,为评价短肽及半抗原交联免疫效果、某些疾病诊断及治疗方法疗效提供了工具.

    作者:叶青;刘艳君;朱平;富宁 刊期: 2007年第11期

  • PCR-反向斑点杂交法检测HBV YMDD模序混合感染

    目的 为HBV感染临床个体化治疗、指导临床用药寻找一种能更好地检测HBV YMDD模序混合感染的方法.方法 28份已知乙肝病人血清,其中10份为HBV YMDD模序感染,5份为HBV YIDD模序感染,5份为HBV YVDD模序感染,2份为HBV YMDD和YIDD模序混合感染,2份为HBV YMDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YIDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YMDD、YIDD和YVDD模序混合感染,都用PCR产物直接测序和PCR-流过式反向斑点杂交(Flowthrough-RDB)方法检测.结果 HBV YMDD模序单一感染标本用两种方法检测准确性都达到100%,对混合感染标本PCR-流过式反向斑点杂交方法检测准确性也可达100%,然而用PCR产物直接测序方法只能检测其中一种或两种型别.结论 PCR-流过式反向斑点杂交方法是一种敏感、特异和快速的检测HBV YMDD野生型及其突变型模序单一感染和混合感染的有效方法,比PCR产物直接测序更优越,更有利于实现临床个体化治疗和指导临床用药.

    作者:袁耀钦;潘小划;何东华;欧志英 刊期: 2007年第11期

  • 湖北省恩施市输入性间日疟病例控制与监测

    目的 控制输入性间日疟继发病例.方法 对输入性间日疟现症病人采用氯喹、伯喹8日根治疗法,回归人员进行假定抗疟治疗,所有治疗人员由乡村医生实施督导服药.流行季节输入性疟疾发病的村点开展重点人群预防服药.对流动人口及本地居民定期监测疟疾发病情况.结果 2003-2005 年,流动人员96人,输入疟疾47例,发病率48.96%,现症病人治疗47例,预防性治疗49人.经监测连续3年未发生当地继发病例.结论 及时控制传染源,有效遏制二代病例的发生.

    作者:黄光全;袁方玉;吕伦权;胡乐群;刘井元 刊期: 2007年第11期

  • 血清AFP、AFU、CEA联合检测对原发性肝癌诊断的临床价值

    目的 探讨血清甲胎蛋白(AFP)、a-L-岩藻糖苷酶(AFU)、癌胚抗原(CEA)联合检测对原发性肝癌诊断的诊断价值.方法 正常健康对照组84例,原发性肝癌组69例,肝炎肝硬化组44例,均同时检测血清AFP、AFU、CEA.结果 原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA与肝硬化组、正常健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA单独检测时的敏感性分别为71.0%、81.2%和26.1%,联合检测AFP和AFU或CEA可使检测敏感性提高到87.0%和77.0%,三者联合检测敏感性为92.8%,血清AFP阴性标本AFU、CEA的敏感性分别为55.0%和25.0%.结论 联合检测AFP、AFU和CEA 3项指标可以大大提高原发性肝癌尤其是AFP阴性的诊断率.

    作者:刘刚;庞利群;徐三荣;朱秋伟 刊期: 2007年第11期

  • 半巢式聚合酶链反应在浆膜腔细菌感染诊断中的初步应用

    目的 观察革兰分型半巢式聚合酶链反应(PCR)在浆膜腔细菌感染诊断中的应用价值.方法 对30例浆膜腔积液标本,以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物和一条革兰阴性菌特异性引物,以半巢式PCR方法进行检测,并同时作细菌培养.结果 以通用引物对30例标本作第1次PCR,11例扩增出371 bp长度的DNA片段,阳性率为36.7%;对阳性PCR产物再以革兰阴性菌特异性引物作第2次PCR,9例扩增出353 bp的DNA片段即为革兰阴性菌.对此30例标本作细菌培养,阳性率为16.7%,低于PCR扩增法.5例标本细菌分离结果与半巢式PCR革兰分型结果相同.结论 革兰分型半巢式PCR方法能够灵敏地检测细菌并作出革兰阴性、阳性分型,对于浆膜腔感染的早期诊断具有较好的应用价值.

    作者:周跃;王建民;沈轶瑶;汤伟;顾宇峰 刊期: 2007年第11期

  • 登革病毒感染与信号转导

    登革病毒(dengue virus,DV)主要引起登革热、登革出血热和登革休克综合症,广泛流行于全球热带与亚热带,迄今仍未能清晰地阐明其致病机制.细胞信号转导与人类疾病的关联是目前生命科学的研究热点之一,对揭示疾病发生的本质具有极其重要的作用.本文从DV的各组成成分与信号转导的关联、DV感染引起细胞凋亡与信号转导的研究、DV相关受体与信号转导等方面加以综述,从一新的角度深入探讨其发病机制.

    作者:廖红舞;黄俊琪;吴长有 刊期: 2007年第11期

  • 检测水产品食物中副溶血弧菌基因分型方法的建立

    目的 建立副溶血弧菌的基因分型技术,应用于广州市水产品食物中毒居前列的致病菌--副溶血弧菌的检测,寻找一种简便快速准确的检验方法.方法 分析副溶血性弧菌分离株的16S-23S rDNA IGS的相关信息(电泳图谱、序列分析等),找出合适的16S-23S rDNA IGS作为基因分型依据,建立副溶血性弧菌的基因分型技术.结果 通过克隆和测序,分析了副溶血性弧菌的16S-23S rDNAIGS片段,初步确定了以16S-23SrDNAIGS为分子标记的副溶血性弧菌基因分型技术.结论 本检测方法不但快速、灵敏,还对深入了解副溶血性弧菌的发病机制,研究其分子流行病学特征具有重要的意义.

    作者:何晖;邓庆丽;李秀珍;黎淑端;刘振熙 刊期: 2007年第11期

  • 某市吸毒人群基数估计方法研究

    目的 采用两种基数估计方法对某市吸毒人群的基本规模进行估计,试图找到一种经济快捷、相对准确和可操作性强的基数估计方法.方法 采用简易乘数法和捕获-再捕获法对某市吸毒人群进行基数估计.结果 简易乘数法估计该市吸毒人群基数为34 145~87 469 人,捕获-再捕获法估计为63 030~105 609 人.两种方法估计数的中位数为68 616人,估计其中静脉注射吸毒人群基数为38082人.结论 该市吸毒人群基数估计为68 616人,其中静脉注射吸毒者38 082人.简易乘数法和捕获-再捕获法可行性好,对时间、人力、物力资源的耗费较少,可联合使用对吸毒人群进行估计,综合所得结果较为准确.

    作者:钟斐;徐慧芳;赵宇腾 刊期: 2007年第11期

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