叶青；刘艳君；朱平；富宁
目的 在原核与真核细胞中表达丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)2a型JFH1(japanese fulminant hepatitis 1)株NS5A蛋白,分析JFH1 NS5A蛋白与其它基因型NS5A蛋白间的差异,为进一步研究NS5A蛋白在HCV病毒复制中的作用奠定基础.方法 PCR特异扩增JFH1 NS5A基因,克隆入pET-32a和pEGFP-N1载体中,构建JFH1 NS5A的原核和真核重组表达质粒pET-JFH1 NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.将pET-JFH1 NS5A转化大肠杆菌BL21(DE3),pEGFP-JFH1 NS5A转染HEK 293T细胞,在原核与真核系统中进行表达,并以SDS-PAGE、荧光显微术和Western blot方法检测.利用PubMed BLAST软件对JFH1与HCV1a、1b、2b和2c型NS5A蛋白间的同源性进行了分析.结果 酶切鉴定及测序结果表明成功构建了重组质粒pET-JFH1NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.SDS-PAGE电泳检测到融合蛋白在原核细胞中的表达,荧光显微镜观察和Western blot检测到了GFP-JFH1 NS5A融合蛋白在HEK 293T细胞中表达.BLAST分析显示,JFH1和H77、HC-J4、HCV-J8和BEBE1病毒株NS5A蛋白的同源性分别为57%、60%、68%和74%.结论 JFH1 NS5A蛋白在原核与真核细胞中表达成功,为研究HCV NS5A在JFH1株病毒高效复制中的作用提供了材料.
作者：王永智；任浩；丁惠；赵平；薛利军；潘卫；戚中田 刊期： 2007年第11期
目的 了解南阳市流行性乙型脑炎的流行情况,为制定乙脑预防控制措施提供依据.方法 采用Excel软件进行描述流行病学分析.结果 南阳市乙脑发病呈现明显的季节变化,发病以小年龄组为主.1990年以前每8～10 年发生一次较大流行,1991年以来乙脑发病总体呈明显下降趋势.结论 提高乙脑疫苗接种率,加强乙脑病例的主动监测,提高血清学检测率以提高乙脑诊断的符合率,是进一步降低乙脑发病率的关键.
作者：卢千超；陈广玉；张红普；王卫民 刊期： 2007年第11期
不动杆菌广泛存在于自然界、医院环境及人体皮肤表面,为条件致病菌,已成为严重的医院感染病原菌.由于该菌耐药性不断增强,大多数为多重耐药,临床治疗十分棘手,因此了解不动杆菌的临床分布特征及耐药性机制对有效治疗和预防该菌感染非常重要.本综述通过资料的总结,掌握医院内该菌感染现状和耐药性特征,对其进行预防和合理使用抗生素治疗提供了有效的资料.
作者：张卫云；陈清 刊期： 2007年第11期
目的 构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体.方法 PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因组;乙肝病毒基因组和真核表达载体pcDNA3.1(+)经Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶切,连接并转化大肠杆菌DH5α.结果 PCR、酶切和测序表明乙肝病毒全长基因组成功插入真核表达载体pcDNA3.1(+).结论 成功构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体.
作者：周豪杰；聂咏梅；付涌水；汪传喜；郑优荣 刊期： 2007年第11期
目的 探讨血清甲胎蛋白(AFP)、a-L-岩藻糖苷酶(AFU)、癌胚抗原(CEA)联合检测对原发性肝癌诊断的诊断价值.方法 正常健康对照组84例,原发性肝癌组69例,肝炎肝硬化组44例,均同时检测血清AFP、AFU、CEA.结果 原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA与肝硬化组、正常健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA单独检测时的敏感性分别为71.0%、81.2%和26.1%,联合检测AFP和AFU或CEA可使检测敏感性提高到87.0%和77.0%,三者联合检测敏感性为92.8%,血清AFP阴性标本AFU、CEA的敏感性分别为55.0%和25.0%.结论 联合检测AFP、AFU和CEA 3项指标可以大大提高原发性肝癌尤其是AFP阴性的诊断率.
作者：刘刚；庞利群；徐三荣；朱秋伟 刊期： 2007年第11期
莱姆病是一种新发虫媒传染病,也是一种重要的人兽共患病,其病原体是伯氏疏螺旋体.莱姆病流行范围广,发病率较高,对人类,特别是林区工作者、野外作业人员、旅游者的健康危害大.本文对近年伯氏疏螺旋体与莱姆病研究的某些进展进行简要介绍.
作者：宝福凯；柳爱华 刊期： 2007年第11期
目的 了解慢性咽炎患者咽部细菌种类及分布特征,研究细菌感染与慢性咽炎的相互关系.方法 采集180例各类型慢性咽炎患者咽后壁分泌物,进行细菌培养和鉴定.结果 慢性咽炎患者咽拭子标本中,细菌培养检出率为100%.检出率前三位的细菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、卡它莫拉菌(26.7%)、副流感嗜血杆菌(26.1%);检出率前3位的致病菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、副流感嗜血杆菌(26.1%)、表皮葡萄球菌(22.8%),慢性咽炎患者咽部细菌检出率明显高于对照组(P＜0.05).α-溶血性链球菌为临床各类型慢性咽炎患者中检出率高的细菌,其次为副流感嗜血杆菌(慢性单纯性咽炎患者),或肺炎克雷伯菌(慢性肥厚性咽炎患者),或金黄色葡萄球菌(干燥性咽炎患者),其检出率分别为32.9%、28.8%和23.3%.结论 慢性咽炎患者咽部携带的细菌谱与健康人群有明显的差异,且致病菌的检出率较高,不同临床分型慢性咽炎发病与咽部优势菌群有一定关系.
作者：杜利军；张莉滟；吕志跃；吴忠道 刊期： 2007年第11期
目的 探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1)与HBV-DNA、HBV血清标志物(HBV-M)和ALT之间的相关性和临床应用价值.方法 收集380例荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量升高患者血清,用酶联免疫法(ELISA)检测乙肝病毒前S1抗原和HBV血清标志物、用速率法检测ALT.结果 380例HBV-DNA含量升高乙肝患者中,PreS1的阳性率为84.6%,HBeAg阳性率为67.8%,两者比较差异有统计学意义(P＜0.005);在各种模式HBV血清标志物中,HBeAg阳性组PreS1阳性率和ALT异常升高与HBeAg阴性组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);随着HBV-DNA含量的增加,HBeAg和PreS1的阳性率也增加,HBV-DNA拷贝数为5×102～1×105 范围时,PreS1的阳性率高于HBeAg阳性率(P＜0.005),当HBV-DNA拷贝数高于1×105时,HBeAg阳性率与PreS1阳性率相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙肝病毒前S1抗原和HBeAg两者阳性率与HBV-DNA含量密切关联,乙肝病毒前S1抗原检测可作为乙肝病毒复制、传染性及肝细胞损伤的指标,同时也可用于指导临床由于病毒变异和其他原因造成HBeAg阴性乙肝患者的诊断和治疗.
作者：张婷；廖伟娇；陈涛；高俊；温丹萍 刊期： 2007年第11期
腺病毒载体目前广泛地应用于肿瘤的基因治疗.随着对腺病毒分子结构、功能以及感染机制的进一步深入了解,人们在降低其免疫原性,增强基因导入特异性,增强感染和表达效率等方面进行了许多探索,开发具有肿瘤靶向性的溶瘤腺病毒载体是其发展方向与研究热点.本文对腺病毒载体的生物学、构建策略及其在肿瘤基因治疗中的应用进行综述.
作者：刘泽玉；李国伟；陆家海 刊期： 2007年第11期
目的 建立B型流感病毒实时荧光PCR检测(FQ-PCR)法,并与常规病毒培养法比较,判断二者结果的相关性,确定两种检测方法各自更适合的应用领域.方法 建立FQ-PCR法并对76株经Quidel胶体金试纸条鉴定型别的流感病毒分离培养株进行检测,比较其敏感性和特异性.21～223梯度稀释的B型流感病毒分别用FQ-PCR法和病毒培养法进行检测,记录FQ-PCR的Ct值及培养物的血凝效价,并对FQ-PCR阳性但血凝无效价的梯度进行盲传,再次检测HA效价,比较二法的灵敏度及相关性.对临床采集的881份咽拭子标本做FQ-PCR检测,同时进行病毒培养并盲传、血凝试验及Quidel胶体金试纸条分型,综合比较两种检测方法之间的差异.结果 在76株已知流感病毒标本中,FQ-PCR方法检出B型16份,与Quidel胶体金分型结果相符.FQ-PCR方法的灵敏度约高出常规培养法的25～26倍.FQ-PCR法对临床咽拭子的检测灵敏度高,无非特异性反应.结论 流感病毒FQ-PCR法具有与组织培养法一致的特异性,前者操作简便快捷,灵敏度更高,在流感病毒临床快速检测和鉴定中具有更广阔的应用前景.
作者：彭春梅；李军涛；林斌；陈美翩；周曦；杨仁峰；周荣 刊期： 2007年第11期
目的 制备抗蓝载体(blue carrier,BC)单克隆抗体(mAb),为相关研究提供支持与工具.方法 用人工合成肽与蓝载体交联后免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.用ELISA以及Dot-ELISA方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力).结果 筛选到1株可稳定分泌抗蓝载体单克隆抗体的杂交瘤细胞5B5,腹水效价2×10-6,单抗亚类为IgG1,抗体亲和力为7.8×108.Dot-ELISA结果显示,在相同条件下5B5 mAb只与蓝载体特异性结合,与钥孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等载体蛋白不发生交叉反应.结论 获得1株能特异性识别蓝载体蛋白的mAb,为评价短肽及半抗原交联免疫效果、某些疾病诊断及治疗方法疗效提供了工具.
作者：叶青；刘艳君；朱平；富宁 刊期： 2007年第11期
食品添加剂在食品工业中越来越被广泛使用,但过量摄入食品添加剂会对儿童的神经系统造成损害,也会对人体各部分器官造成不同程度的损害,我国大部分地区的食品都不同程度地存在过量使用食品添加剂的情况,更有甚者将工业添加剂用作食品添加剂.本文就我国目前使用广泛的食品添加剂的特性及其使用情况作一综述.
作者：彭志丽；蒋卓勤 刊期： 2007年第11期
目的 探讨黄芪对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响.方法 CHB患者和健康人的外周血单个核细胞体外经黄芪作用,培养48 h后,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测培养上清中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)的含量变化.结果 在黄芪诱导下:①健康对照组和CHB患者组Th1类细胞因子明显增高(P＜0.01),Th2类细胞因子水平无明显变化(P＞0.05);②CHB患者组IFN-γ水平明显高于健康对照组(P＜0.01),IL-2水平两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);③Th2类细胞因子水平CHB患者组比健康对照组高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 黄芪可明显提高CHB患者Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2)的产生水平,改善CHB患者Th1/Th2功能失衡状态,可使CHB患者Th2优势应答状态部分得到纠正.
作者：吴晓蔓；袁文声 刊期： 2007年第11期
在四年制医学检验本科《临床免疫学检验》教学中,进行合理的教学时数分配,优化教学内容,采用灵活多样的教学模式是提高教学质量的方法手段,并取得了明显的效果.
作者：裘宇容；杨佳 刊期： 2007年第11期
目的 观察革兰分型半巢式聚合酶链反应(PCR)在浆膜腔细菌感染诊断中的应用价值.方法 对30例浆膜腔积液标本,以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物和一条革兰阴性菌特异性引物,以半巢式PCR方法进行检测,并同时作细菌培养.结果 以通用引物对30例标本作第1次PCR,11例扩增出371 bp长度的DNA片段,阳性率为36.7%;对阳性PCR产物再以革兰阴性菌特异性引物作第2次PCR,9例扩增出353 bp的DNA片段即为革兰阴性菌.对此30例标本作细菌培养,阳性率为16.7%,低于PCR扩增法.5例标本细菌分离结果与半巢式PCR革兰分型结果相同.结论 革兰分型半巢式PCR方法能够灵敏地检测细菌并作出革兰阴性、阳性分型,对于浆膜腔感染的早期诊断具有较好的应用价值.
作者：周跃；王建民；沈轶瑶；汤伟；顾宇峰 刊期： 2007年第11期
目的 制备对乳腺癌细胞具有特异性杀伤活性的抗乳腺癌重组免疫毒素.方法 利用大肠杆菌系统表达抗乳腺癌EGF-TCS重组免疫毒素.表达产物经Ni-NTA Agrose亲和层析柱纯化,进行特异性杀伤活性检测.结果 以可溶性形式表达于大肠杆菌培养上清中,并获得有效纯化.细胞毒试验表明其对乳腺癌细胞具有杀伤作用,而对正常乳腺细胞无损伤.结论 已成功地制备了具有杀伤活性的抗乳腺癌EGF-TCS重组免疫毒素,为其进一步应用奠定基础.
作者：杨海文；李咏梅；陈金龙；罗仁 刊期： 2007年第11期
目的 了解HBV基因型对乙型肝炎病毒慢性感染者临床影响.方法 采用限制性片段长度多态性(RFLP)及序列测定法检测广东地区27例HBV携带者和173例慢性乙肝患者的HBV基因型.结果 B基因型105例(52.5%),C型94例(47%),D型1例,未发现其它基因型.B型中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)所占比例(18.1%)显著高于C型中ASC所占比例(8.5%).C型中肝硬化所占比例(23.4%)显著高于B型中肝硬化所占比例(7.6%).C型在ASC、慢性乙肝轻度、中度、重度及重型肝炎、肝硬化的比例依次增高.C型较B型年龄大,但二者间性别差异无统计学意义.结论 广州地区HBV基因型由B、C、D型构成,以B型为主.C型较B型年龄大.C型与较重肝病有关.B、C型间性别差异无统计学意义.
作者：冼建中；关玉娟；唐小平 刊期： 2007年第11期
目的 探讨孕妇孕早期血清标志物筛查与胎儿唐氏综合征检出的关系.方法 应用全自动时间分辨荧光测定仪及配套试剂对妊娠9～13周的5 225例孕妇进行血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)和游离β-人绒毛膜促性腺激素(free β-HCG)的测定,筛查结果应用PerkinElmer公司提供的1T软件计算唐氏综合征风险.风险率≥1:250定为筛查阳性,再做羊水或脐带血产前诊断以确认.结果 5 225例孕妇中筛查阳性者为283例,阳性率为5.42%,有159例接受了产前诊断,检出唐氏综合征胎儿4例,漏诊2例,检出率为66.67%,还检出其它染色体异常3例、畸形10例、死胎6例、18-三体2例.结论 孕早期血清PAPP-A和free β-HCG联合筛查胎儿唐氏综合征是行之有效的方法,结合MOM对防止先天缺陷有实用性价值.
作者：周剑英；廖灿；孙茜；龚惠芳；苏洁玲 刊期： 2007年第11期
目的 采用两种基数估计方法对某市吸毒人群的基本规模进行估计,试图找到一种经济快捷、相对准确和可操作性强的基数估计方法.方法 采用简易乘数法和捕获-再捕获法对某市吸毒人群进行基数估计.结果 简易乘数法估计该市吸毒人群基数为34 145～87 469 人,捕获-再捕获法估计为63 030～105 609 人.两种方法估计数的中位数为68 616人,估计其中静脉注射吸毒人群基数为38082人.结论 该市吸毒人群基数估计为68 616人,其中静脉注射吸毒者38 082人.简易乘数法和捕获-再捕获法可行性好,对时间、人力、物力资源的耗费较少,可联合使用对吸毒人群进行估计,综合所得结果较为准确.
作者：钟斐；徐慧芳；赵宇腾 刊期： 2007年第11期
目的 为HBV感染临床个体化治疗、指导临床用药寻找一种能更好地检测HBV YMDD模序混合感染的方法.方法 28份已知乙肝病人血清,其中10份为HBV YMDD模序感染,5份为HBV YIDD模序感染,5份为HBV YVDD模序感染,2份为HBV YMDD和YIDD模序混合感染,2份为HBV YMDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YIDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YMDD、YIDD和YVDD模序混合感染,都用PCR产物直接测序和PCR-流过式反向斑点杂交(Flowthrough-RDB)方法检测.结果 HBV YMDD模序单一感染标本用两种方法检测准确性都达到100%,对混合感染标本PCR-流过式反向斑点杂交方法检测准确性也可达100%,然而用PCR产物直接测序方法只能检测其中一种或两种型别.结论 PCR-流过式反向斑点杂交方法是一种敏感、特异和快速的检测HBV YMDD野生型及其突变型模序单一感染和混合感染的有效方法,比PCR产物直接测序更优越,更有利于实现临床个体化治疗和指导临床用药.
作者：袁耀钦；潘小划；何东华；欧志英 刊期： 2007年第11期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
