学术投稿

一种新型鱼病口服疫苗的研制和示踪研究

李荔;刘志刚;喻海琼;邓利;王勤;马慧

关键词:鱼病, 口服疫苗, PLGA, FITC, 示踪
摘要:目的研制一种新型的鱼病口服疫苗,并进行鱼体内的示踪研究.方法通过物理方法(油/水/油)制备包裹模式蛋白的PLGA微粒;将FITC标记蛋白与PLGA结合,观察该新型疫苗在鱼体内的消化过程;将特异性尘螨Der f1蛋白结合PLGA口服给予鱼,不包裹PLGA的Der f1蛋白作为对照,运用ELISA方法测定该疫苗给予后不同时间在血液中的含量.结果PLGA包裹的荧光标记蛋白在消化道1 h内即可被鱼小肠上皮细胞吸收,24 h小肠消化道内残余很少.包裹特异性尘螨Der f1蛋白的PLGA微粒给予鱼1 h后血液中特异性蛋白浓度高,2、4和24 h后仍在血液中保持一定浓度.而不给药对照或Der f1直接给予则在鱼血液中不能测到该特异性蛋白.结论以PLGA为佐剂的蛋白鱼病疫苗可通过消化道吸收入血,是一种新型的鱼病口服疫苗给药系统.
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    目的分析苏北农村结核分枝杆菌临床分离株的耐药现状和特点,为结核病防制提供依据.方法应用间接比例法药敏试验测定苏北两县2001年结核病人的初始分离株对异胭肼(INH)、利福平(RIF)、乙胺丁醇(EMB)和链霉素(STR)的敏感性.结果152株临床分离株的总耐药率为32.9%,初始耐药率和获得性耐药率分别为28.6%和48.5%;耐多药率为17.1%,初始和获得性耐多药率分别为16.0%和21.2%.同时耐INH和STR是常见的耐两药或多药类型,其次是耐INH和RIF.四种抗结核药物的耐药率依次为INH(26.3%)、STR(24.3%)、RIF(18.4%)、EMB(10.5%).RIF耐药株中,92.9%的同时耐INH.结论当地农村结核病耐药水平较高,耐药性的发生趋向于对多种药物同时耐药,RIF耐药可作为耐多药的标志.

    作者:杨本付;徐飚;蒋伟利;周佩源;姜庆五 刊期: 2006年第04期

  • SRAP分子标记及其应用概述

    序列相关扩增多态性(SRAP)是近年来发展起来的一种新型分子标记系统,它具有简便、中等产量、高共显性、重复性、易于分离条带及测序等优点,大的特点是它针对的是基因的阅读框区域(ORFs).SRAP标记中,引物的设计是关键,它是基于两个引物的扩增,上游引物长17 bp,对外显子进行特异扩增,下游引物长18 bp,特异扩增的是内含子及启动子区域,由于个体不同以及物种之间的内含子、启动子之间间隔长度不同而产生多态性.两个引物均由5'端14~15 bp的核心序列,和3'端3个选择性碱基组成,其中核心序列又由长为10~11 bp的无特异性的填充序列以及CCGG(正向引物中),或AATT(反向引物中)组成.且正向和反向引物中的填充序列必须不同.扩增的过程采用复性变温法,前5个循环复性温度为35℃,后30~35个循环则为50℃,扩增后的DNA片段可用聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离,EB、银染或放射自显影检测.目前SRAP已开始在植物种质资源鉴定评价、种缘进化关系、遗传图谱构建、基因定位、重要性状标记以及比较基因组学方面得到成功应用.

    作者:李巧燕;林瑞庆;朱兴全 刊期: 2006年第04期

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    目的探讨核酸诊断方法用于广州管圆线虫诊断的可能性.方法根据广州管圆线虫成虫rRNA大亚基基因部分序列设计引物,对广州管圆线虫成虫DNA进行PCR扩增,并对该方法的敏感性和特异性进行评价.结果经琼脂糖凝胶电泳和DNA序列测定证实:PCR产物的大小和序列结构与待扩增的广州管圆线虫目的基因完全一致.结论本方法有较好的敏感性和特异性,为将其用于人体广州管圆线虫病的诊断奠定了基础.

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  • 广州地区无偿献血人群HHV-8 DNA检测及部分基因的序列分析

    目的了解广州地区无偿献血人群人类疱疹病毒8型(HHV-8)的感染情况.方法从全血标本中提取基因组DNA,用巢式聚合酶链反应检测HHV-8 DNA开放读码框26基因(ORF26),对其中一阳性PCR产物用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定,测序结果用DNAstar软件分析.结果239例献血者标本中有2例(0.84%)扩增出一条约233 bp DNA电泳带.经序列分析证实为HHV-8 DNA片段.结论广州地区无偿献血者存在HHV-8感染,但感染率较低.

    作者:付涌水;周豪杰;管洪宇;聂咏梅;汪传喜;江朝富 刊期: 2006年第04期

  • 妊娠合并梅毒170例临床分析

    目的探讨妊娠梅毒患者临床特点、治疗方法和妊娠结局,以降低先天性梅毒发生率.方法170例经血清学检查确诊为梅毒的孕妇,根据妊娠期是否行全疗程抗梅毒治疗,分为治疗组(92例)和未治疗组(78例),选择同期正常孕妇为对照组(100例).比较三组孕妇的妊娠结局,治疗组和未治疗组围产儿预后及新生儿先天梅毒的发生情况.结果①妊娠结局:治疗组足月分娩率为93.47%(86/92),未治疗组仅为30.76%(24/78),对照组为96.00%(96/100).未治疗组与治疗组、对照组比较,差异有显著性(P<0.05).治疗组早产及死胎发生率分别为6.52%(6/92)和2.17%(2/92),接近对照组的6.00%(6/100)、0,明显低于未治疗组的30.77%(24/78)、28.21%(22/78),差异有显著性(P<0.05).治疗组窒息儿、低体重儿、先天梅毒患儿发生率及新生儿死亡率明显低于未治疗组,两组比较,差异有显著性(P<0.05).治疗组分娩正常新生儿者占60.86%(56/92),未治疗组仅占25.64%(20/78).②治疗孕周越早,先天梅毒患儿发生率越低(P<0.05).先天梅毒患儿的发生率,应用苄星青霉素孕妇为23.07%(18/78),应用红霉素孕妇为100%(14/14).③新生儿血清RPR阳性率治疗组为79.50%,未治疗组为100%,差异无显著意义.结论妊娠梅毒患者临床分期以潜伏期梅毒为主,体征及症状不典型,容易误诊.因此,妊娠早期常规梅毒筛查特别重要.治疗开始时的孕周及用药,是影响妊娠梅毒结局的重要因素.

    作者:陈丽梅 刊期: 2006年第04期

  • 樟树花粉泛变应原基因的克隆与序列分析

    目的从樟树花粉中克隆泛变应原基因.方法通过对多个植物泛变应原基因进行序列同源性比对,根据保守区域序列设计简并性引物,利用RT-PCR结合RACE技术对樟树花粉中的泛变应原基因进行克隆.结果从樟树花粉中克隆到一个新的基因.序列分析显示:所克隆到的基因与其它植物的泛变应原肌动蛋白结合蛋白基因有很高的同源性,因此认为该基因为泛致敏原基因,命名为Cin c1.其在GenBank数据库中的登录号为DQ335252.结论采用简并引物从樟树花粉中克隆到一泛变应原基因,为进一步研究该变应原奠定了理论基础.

    作者:宋娟娟;张红云;刘志刚;康敏雄 刊期: 2006年第04期

  • 中性粒细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

    目的探讨感染旋毛虫大鼠中性粒细胞(Neu)在免疫血清协助下对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用.方法采用体外CO2培养法,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入Wistar雄性大鼠血液中的Neu、旋毛虫肌幼虫、血清(对照血清或经不同条件处理的血清)及含有10%灭活小牛血清的R/MINI-1640培养液,连续培养2 d.显微镜下,在12、24、36、48 h等时相观察大鼠Neu、免疫血清及补体对旋毛虫肌幼虫的影响.结果无论是感染鼠或正常鼠的单纯Neu或正常血清对旋毛虫肌幼虫均无杀伤作用.在免疫血清及补体参与下,Neu对幼虫的杀伤作用明显增强,同时灭活补体和IgE与仅灭活补体的免疫血清效果相似.结论在体外培养的条件下,感染鼠或正常鼠的单纯Neu或正常血清均无杀伤旋毛虫肌幼虫的作用,感染旋毛虫大鼠的Neu在免疫血清及补体的协助下对旋毛虫肌幼虫具有较强的杀伤作用.免疫血清在灭活IgE前后对Neu杀伤靶虫作用不明显,说明Neu介导的ADCC效应主要依赖的是IgG,并非IgE.

    作者:闫玉文;李鹏;邢杰;马平;张旭 刊期: 2006年第04期

  • 新鲜全血在不同系列血液分析仪校准中的应用

    目的应用新鲜全血对实验室不同系列血液分析仪进行校准.方法以可溯源的规范操作的检测系统对新鲜全血的WBC、RBC、HB、HCT和PLT进行定值,再用定值新鲜全血对2台不同型号的仪器进行校准,并比较校准前后的偏差变化.结果校准后偏差超过允许范围的测定参数为30%(3/10),较校准前的偏差超过允许范围测定参数80%(8/10)明显降低.结论定值新鲜全血适用于不同系列血液分析仪的校准.

    作者:王希平;李鄂;叶丽燕;黎卓华 刊期: 2006年第04期

  • 噬菌体随机肽库技术及其应用

    噬菌体随机肽库是噬菌体呈现技术的重要分支,是应用噬菌体表面呈现技术将外源编码多肽基因随机克隆入噬菌体载体中而构建的噬菌体肽库.近年来,噬菌体随机肽库已成功地应用于基因治疗、表位研究、细胞信号传导与药物开发、寄生虫病研究、肿瘤导向治疗等领域,显示了广阔的应用前景.本文就针对以上几个方面做一综述.

    作者:杨海燕;李妍;董文其 刊期: 2006年第04期

  • 肺表面活性物质防治支气管肺发育不良的临床研究

    目的探讨肺表面活性物质(PS)对支气管肺发育不良(BPD)的预防和治疗意义.方法将20例早产儿呼吸窘迫综合征(RDS)机械通气的患儿按是否早期使用PS分两组,观察病情的转归及BPD的发生情况,并对8例BPD患者按是否使用PS治疗分两组,观察两组呼吸机依赖例数及转归,分析和对比使用PS前后的临床表现、动脉血气.结果早期使用PS组机械通气的时间及BPD的发生率均较对照组有显著差异(P<0.05),且BPD患者使用PS后的动脉血气、氧和指数较使用前明显改善,差异显著(P<0.05,P<0.01).结论PS可以改善肺的顺应性及氧和功能,对BPD的预防和治疗具有积极的意义.

    作者:乔萍;严越秀;莫伟雄;梁星群;汤鸣;肖力;汪江萍 刊期: 2006年第04期

  • 妊娠高血压疾病与TNF水平和TNF-βG252A基因多态性的相关性研究

    目的研究肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)水平和TNF-β G252A基因多态性与妊娠高血压疾病的关系.方法用放射酶联免疫法测定54例妊娠高血压疾病患者和60例健康对照者血清TNF水平,聚合酶链反应扩增TNF-β第一内含子含有1069位核苷酸A→G多态位点的基因片段,Nco Ⅰ内切酶进行限制性酶切反应.结果54例妊娠高血压疾病患者及60例正常对照者中TNF-β基因型及等位基因频率均无显著性差异(P>0.05),而血浆TNF水平妊娠高血压疾病组为(1.28±0.42)μg/L,显著高于对照组的(0.32±0.21)μg/L,两组之间比较差异有显著性意义(P<0.05).结论血清TNF水平显著升高提示炎性反应在妊娠高血压疾病病程中有重要作用,TNF-β G252A基因多态性与妊娠高血压疾病无关联.

    作者:何慧仪;陈盛强;柳息洪 刊期: 2006年第04期

  • 尿结石中支原体培养和药敏分析及其流行特征

    目的了解本地区尿石患者支原体感染状况及流行特点,为临床治疗提供参考依据.方法对423例尿石患者的结石标本进行支原体培养和药敏试验以及尿石化学成分分析.结果解脲脲原体(Uu)阳性90例(21.3%),人型支原体(Mh)阳性1例(0.2%),Uu合并Mh阳性11例(2.7%),共102例(24.1%).感染的年龄段主要分布在30~39岁(阳性率为24.5%)、40~49岁(阳性率为19.6%)和50~59岁(阳性率为31.4%);189例女性患者支原体阳性为59例(31.2%),234例男性患者支原体阳性为43例(18.3%),女性感染率明显高于男性(P<0.01).对强力霉素敏感率为81.5%,四环素敏感率为64.7%,交沙霉素、红霉素、阿齐霉素、原始霉素敏感率分别为44.6%、42.1%、47.8%、45.3%,氧氟沙星、环丙沙星为29.5%和26.5%.其尿石的主要成分为磷酸钙,草酸钙以及尿酸盐,多见于肾和输尿管.结论本地区尿石中的支原体感染以Uu感染为主,检出率达23.98%,好发年龄在30~59岁之间,女性明显高于男性(P<0.01),并对多种抗生素已产生耐药性,强力霉素可作为治疗尿结石中支原体感染的首选药物.

    作者:曾赤佳;仇杭佳;彭健桥 刊期: 2006年第04期

  • 不同剂量137Csγ射线辐照全血后T淋巴细胞亚群的变化

    目的应用不同剂量的137Cs γ-射线(0~35 Gry)照射ACD-B配方保存的新鲜全血,观察照射前后T淋巴细胞亚群[CD3+(总T)、CD4+(辅助性T)、CD8+(抑制性T)]的变化.方法将10份每份容量为200 ml的ACD-B配方保存的新鲜全血(保质期21 d)分为4组,分为用15 Gry、25 Gry、35 Gry不同剂量r-射线照射的实验组及未照射的对照组,于采血后立即进行照射,用流式细胞仪检测照射前后及不同照射剂量之间T淋巴细胞亚群的变化.结果不同剂量的137Cs γ-射线照射新鲜全血,照射前后T淋巴细胞亚群百分数(CD3+、CD4+、CD8+)的变化无显著性差异.结论15~35 Gry的137Cs γ-射线照对新鲜全血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比数量无改变,CD4+/CD8+比值无改变.

    作者:胡继征;陆典瑞;卢岑;周梅;欧丽萍 刊期: 2006年第04期

  • 两次异位妊娠后再次宫内妊娠的临床分析

    目的探讨异位妊娠保守治疗的效果.方法回顾性分析12例孕妇前两次(共24次)异位妊娠的发病特点、辅助检查、治疗方法及结局.结果两次异位妊娠行米非司酮药物保守治疗共7次,其中成功4次,失败3次;剖腹探查17次,其中予切除患侧输卵管4次,保留患侧输卵管13次.宫内妊娠剖宫产9例,顺产3例.结论异位妊娠的再发率较高,慎重选取异位妊娠的治疗方法可提高其治疗效果.

    作者:胡映红;黄宝珍 刊期: 2006年第04期

  • 一种新型鱼病口服疫苗的研制和示踪研究

    目的研制一种新型的鱼病口服疫苗,并进行鱼体内的示踪研究.方法通过物理方法(油/水/油)制备包裹模式蛋白的PLGA微粒;将FITC标记蛋白与PLGA结合,观察该新型疫苗在鱼体内的消化过程;将特异性尘螨Der f1蛋白结合PLGA口服给予鱼,不包裹PLGA的Der f1蛋白作为对照,运用ELISA方法测定该疫苗给予后不同时间在血液中的含量.结果PLGA包裹的荧光标记蛋白在消化道1 h内即可被鱼小肠上皮细胞吸收,24 h小肠消化道内残余很少.包裹特异性尘螨Der f1蛋白的PLGA微粒给予鱼1 h后血液中特异性蛋白浓度高,2、4和24 h后仍在血液中保持一定浓度.而不给药对照或Der f1直接给予则在鱼血液中不能测到该特异性蛋白.结论以PLGA为佐剂的蛋白鱼病疫苗可通过消化道吸收入血,是一种新型的鱼病口服疫苗给药系统.

    作者:李荔;刘志刚;喻海琼;邓利;王勤;马慧 刊期: 2006年第04期

  • 新生儿肺出血与妊娠高血压综合征相关性探讨

    目的探讨新生儿肺出血与妊娠高血压综合征(简称妊高征)之间的关系.方法对218例新生儿肺出血患者的临床资料进行分析.结果218例新生儿肺出血患者中,妊娠高血压母亲所生婴儿占62.38%(136例),非妊娠高血压综合征母亲所生婴儿占37.62%(82例),妊娠高血压综合征母亲所生婴儿肺出血的发病率明显高于其它母亲所生婴儿(P<0.01).结论妊高征母亲所生新生儿肺出血的发生率高,早期干预妊高征对降低新生儿死亡率有重要意义.

    作者:张坤尧;严文康;韩思敏;林静吟 刊期: 2006年第04期

  • 低温状态下兔动脉舒张功能的研究

    目的探讨在不同介质条件下低温对兔肺动脉、肾动脉、颈动脉内皮依赖性舒张与非内皮依赖性舒张的影响.方法选48只新西兰兔,每24只分为一组,每8只兔取一种血管环,每一实验组血管环选自同一只新西兰兔.8只血管环为一实验组,随机分为对照组(37℃)、实验组1(30℃)、实验组2(24℃)、实验组3(16℃).另24只重复相同实验,取平均数.建立不同低温条件下乙酰胆碱、硝酸甘油浓度依赖性曲线.测定不同低温对乙酰胆碱及硝酸甘油引起动脉内皮依赖性舒张及非内皮依赖性舒张的影响.结果各低温与常温组及前一低温组之间相比,显著抑制肺动脉、肾动脉、颈动脉内皮依赖性舒张与非内皮依赖性舒张(P<0.001).结论低温抑制动脉内皮依赖性舒张与非内皮依赖性舒张功能减弱,这对心脏手术后并发症的发生机制的深入理解有重要临床意义.

    作者:李灼;李斌;陈勇;苏文杰;莫昌玉;陈长春 刊期: 2006年第04期

  • 广州市2003~2004年鼠疫宿主动物监测

    目的了解广州市鼠疫宿主动物的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料.方法采用夜笼法捕鼠,并对鼠类及捡获蚤类进行鉴定,计算鼠染蚤率和蚤指数.用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体.结果捕获鼠形动物2 259只,分属2目2科3属7种.其中啮齿目动物2 014只,食虫目动物245只,总鼠密度为12.09%,鼠密度为10.78%.在559只鼠形动物中发现有蚤鼠只73只,捡获蚤297匹,鼠体表蚤经鉴定为印鼠客蚤,鼠染蚤率为13.05%,总蚤指数为0.53,未查出鼠疫F1抗体.结论褐家鼠仍是广州市主要鼠种,主要蚤种是印鼠客蚤,未发现鼠间鼠疫流行迹象.

    作者:潘志明;高雨藩;郭荣同;罗雷;刘小宁;唐锡美;李钏华 刊期: 2006年第04期

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