学术投稿

阴道毛滴虫长寿保障基因Tv-LAG1的克隆和表达

刘红;傅玉才;张仁利;钱元恕

关键词:阴道毛滴虫, 衰老, Tv-LAG1
摘要:目的 克隆原生动物阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,Tv)长寿保障基因[longevity assurance gene 1(LAG1)]的同源基因Tv-LAG1.构建Tv-LAG1原核表达重组体及表达其融合蛋白.方法 从阴道毛滴虫cDNA表达文库中筛选LAG1的同源基因,用pET41表达载体与Tv-LAG1 cDNA克隆构建原核表达重组体并表达融合蛋白,纯化表达产物用SDS-PAGE法鉴定.用纯化的融合蛋白免疫家兔,获得抗血清,采用Westernblot法对抗体特异性进行分析鉴定.结果 成功构建pET41/Tv-LAG1原核表达重组体,并表达出预期大小的重组蛋白.用融合蛋白免疫家兔获得的抗体能特异性识别Tv-Lag1p/GST融合蛋白.结论 Tv-Lag1p/GST融合蛋白获得高效表达,并成功纯化,初步实验证明具有一定的免疫原性,为研究Tv-Lag1p在模式生物阴道毛滴虫的细胞定位以及其功能奠定了基础.
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  • 新型DNA疫苗佐剂-DC的研究进展

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    作者:赵以睿;张仁利;朱兴全 刊期: 2006年第12期

  • 维拉帕米治疗肾综合征出血热的效果评价

    目的 探讨维拉帕米治疗肾综合征出血热(HFRS)的疗效和安全性.方法 174例HFRS患者随机分为维拉帕米治疗组(88例)和对照组(86例),比较两组患者的治疗结局、尿蛋白、BUN和Cr恢复时间、少尿发生率和少尿期持续时间、住院时间之间的差异,监测治疗组患者的不良反应.结果 治疗组重型患者的病死率显著低于对照组(P=0.013),但对中型HFRS患者的死亡率两组无显著性差异(P=0.500);治疗组患者的尿蛋白、BUN和Cr恢复时间均短于对照组(P<0.05);治疗组患者出现少尿的发生率显著低于对照组(P=0.009),发生少尿的患者的少尿期持续时间在两组之间无显著性差异(P=0.050);在治愈的患者中,治疗组患者的住院时间显著短于对照组(P=0.017).治疗组所有患者均未发生不良反应.结论 维拉帕米能提高HFRS治疗的疗效,安全性好,值得临床推广.

    作者:钟淑君;罗瑞虹;李丽芳;高志良 刊期: 2006年第12期

  • 全程超滤在重症风心病患者瓣膜置换术中的应用

    目的 探讨体外循环中全程超滤对重症风湿性心脏病伴肾功能不全患者行瓣膜置换术的临床作用.方法 25例肾功能不全的重症风湿性心脏患者,经气管插管行静脉复合全身麻醉,在体外循环中全程使用常规超虑,以中度血液释,术中使用TetumoH14超滤器,本组从体外循环结束始终保持超滤,使体外循环结束时Hct>30%,胶体渗透压>2.08 kPa(16 mmHg).超 滤流量控制在200~400 ml/min.结果 术中血尿素氮(BUN)下降到(8.63±5.88)mmol/L与术前相比有显著差异(P<0.01)术后BUN为(10.67±3.89)mmol/L,与术前比有显著下降(P<0.05).20例患者心脏直视手术体外循环下转流时间大于180 min,5例患者转流时间大于300min,25例患者术中超滤量均大于2000 ml.结论 在风湿性心脏病肾功能不全行心脏手术患者体外循环中全程超滤可降低BUN,除去体内过多的水分,减少术后并发症的发生.

    作者:罗智超;梁杰贤 刊期: 2006年第12期

  • 广州地区人群食源性寄生虫感染现状与防治对策

    目的 了解和掌握广州地区部分可生吃蔬菜及淡水鱼类食品中寄生虫虫卵污染情况和市民食源性寄生虫感染状况,以探讨食品污染和食源性寄生虫感染的相关危险因素,为制定防治策略和进一步提高食品卫生和食品安全提供依据.方法 采用流行病学、现场流行病学的询问调查和现场采样方式,以清水沉淀法、盐水漂浮法和改良加藤氏厚涂片法、消化法等方法检验寄生虫虫卵及华支睾吸虫囊蚴.结果 2004年检测8种共365份可生吃的蔬菜寄生虫及虫卵检出率为21.37%(钩虫卵检出率15.34%,钩蚴检出率11.23%,蛔虫卵检出率4.93%等);饮食业制作可生食蔬菜两种不同清洗方式半成品寄生虫及虫卵检出率为10.40%(浸洗的检出率为28.95%,冲洗的检出率为3.77%).2006年检测25家餐饮业60份售卖的淡水鱼、虾的华支睾吸虫囊蚴检出率为9.84%(鲩鱼感染率占13.33%,虾感染率占6.67%);1998~2003年一般人群蠕虫感染率为15.21%,其中华支睾吸虫感染率为6.95%;2005年部分职业人群华支睾吸虫感染率为12.46%,远高于全国感染率(0.40%).结论 广州地区可生吃蔬菜和淡水鱼受到肠道线虫及华支睾吸虫(囊蚴)等寄生虫虫卵污染,人群华支睾吸虫感染率较高,应加强食品卫生宣教工作,改变人们不良的饮食习惯,采取有效的综合防治措施,以确保提供更安全的食品.

    作者:张玉莲;冯月菊;何洁仪;刘小宁;区继军;邓小冰 刊期: 2006年第12期

  • 淋巴细胞微核试验用于全血γ射线辐照效果评价

    目的 探讨淋巴细胞微核试验用于全血γ射线的辐照效果.方法 分别用15、25、35 Gy射线剂量的137Cs辐照血液,注入含有PHA的RPIM 1640培养基的小瓶中培养(37℃,72 h),收集淋巴细胞,制片,观察和计算微核细胞率;另分离淋巴细胞,进行淋巴细胞增殖试验.结果 与对照组相比,随着辐照剂量的升高,微核细胞率显著升高(P<0.01),而淋巴细胞增殖率显著下降(P<0.01).微核细胞率与淋巴细胞增值率之间有高度相关性,曲线拟合方程为:(Y)=1021.246613-43.872036X+0.825340x2-0.004886X3,R2=0.999999,P<0.01.结论 微核试验用于评价γ射线灭活淋巴细胞的效果有一定的应用前景,35 Gy剂量的137Cs γ射线对淋巴细胞的灭活效果较好.

    作者:陆典瑞;卢岑;高彩凤;孙杰;唐小江 刊期: 2006年第12期

  • 两种驱虫药治疗华支睾吸虫病的疗效比较

    目的 比较阿苯达唑咀嚼片和吡喹酮两组药物治疗华支睾吸虫病的疗效和副作用,为我市开展华支睾吸虫病的群防群治工作选择高效、安全的药物.方法 分别应用以上两组药物治疗华支睾吸虫阳性者,治毕1个月以改良加藤氏(Kato-katz)厚涂片法检查粪便样本,以虫卵阴转率为疗效评价指标,并了解药物副作用情况.结果 阿苯达唑咀嚼片组在轻度感染组和中重度感染组的转阴率为92.56%,83.33%;吡喹酮组为98.59%,100%.两组药物疗效的分层比较:轻度感染组P=0.115,中度和重度感染组P=0.494,两组药物疗效差异没有统计学意义.阿苯达唑咀嚼片服药后随访254人,其中3人出现腹痛或恶心等现象,吡喹酮组治后随访73人,25人出现腹痛或恶心等副反应(χ2=77.31,P<0.001),吡喹酮组病人出现副作用的几率远大于阿苯达唑咀嚼片组.结论 阿苯达唑与吡喹酮的疗效没有差异,但副作用较少,在人群普查普治时应首先考虑用阿苯达唑.

    作者:冯强;罗乐;夏生林;张瑞红;吴海东;范木耿;陈小红 刊期: 2006年第12期

  • 阴道毛滴虫Rab1a重组蛋白的表达和细胞内定位

    目的 制备阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,Tv)Rab1a重组蛋白及其多克隆抗体,并对TvRab1a蛋白进行阴道毛滴虫的细胞内定位.方法 将我们已构建的pQE80L/TvRab1a重组表达质粒转入大肠埃希菌E.coli M15,在IPTG诱导下表达重组蛋白,经Ni-NTA亲和柱层析后获得纯度较高的TvRab1a的重组蛋白;用经复性处理的重组蛋白免疫动物,获得TvRab1a重组蛋白抗血清,免疫印迹Western Blot鉴定抗血清.采用荧光免疫细胞化学对TvRab1a蛋白进行细胞内定位.结果 Western Blot分析显示,TvRab1a重组蛋白可与豚鼠的抗TvRab1a血清反应,同时该抗血清在滴虫提取蛋白中检测到与预测TvRab1a分子量一致的条带;免疫荧光化学检测发现TvRab1a分布于细胞核周围的高尔基复合体与内质网.结论 获得的抗TvRab1a蛋白的多抗血清可用于TvRab1a基因功能的研究;TvRab1a功能场所位于高尔基复合体与内质网.

    作者:徐晓园;傅玉才;许铭炎;许锦阶;张仁利 刊期: 2006年第12期

  • 胚胎干细胞的研究进展和面临的挑战

    胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)是存在于胚胎发育早期阶段,具有自我更新和多分化潜能性的干细胞,是组成机体各种组织器官的起源细胞.一定条件下,其在体外可以保持未分化状态,长期存活无限繁殖.有关ES细胞在动物疾病模型中治疗作用的研究,尤其是在小鼠中的研究,已趋于成熟.在此基础上,人们开始尝试人类ES细胞用于临床治疗各种疾病,探讨其可行性和安全性等问题.本文主要综述了ES细胞的发展历史,特性和鉴定的方法及目前ES细胞在治疗糖尿病、帕金森及心血管损伤等各种疾病中的应用,讨论了培养体系中的一些问题和ES细胞研究中所面临的难点与挑战.

    作者:徐绍坤;郭中敏 刊期: 2006年第12期

  • B超对当归补血汤复方及单味药治疗兔血吸虫病肝纤维化的效果评价

    目的 探讨B超对当归补血汤复方及单味药治疗兔血吸虫病肝纤维化效果评价的价值.方法 建立家兔血吸虫性肝纤维化模型,并将实验动物分成四组,其中三组分别用从当归、黄芪、当归加黄芪中提取的口服液结合吡喹酮进行治疗,对照组只给予吡喹酮进行病原学治疗.再用B超声像图评估当归、黄芪和当归补血汤治疗血吸虫病肝纤维化的效果.结果 治疗A组(当归)、B组(黄芪)和C组(当归补血汤)均对兔血吸虫病肝纤维化有一定的疗效,其中C组(当归补血汤)的疗效好,治疗前后肝长径、厚径、横径、PV内径测值均有显著性意义(P<0.05).结论 当归补血汤对血吸虫病肝纤维化的治疗作用优于单味药当归或黄芪.

    作者:何永康;喻鑫玲;孙可英;梁逸曾;周杰;侯循亚;付晓;赵雅琴;刘宗传;李岳生 刊期: 2006年第12期

  • 关于我国血吸虫病防治的策略问题

    我国流行的血吸虫病为日本血吸虫病.日本血吸虫病是一种人兽共患寄生虫病,其流行具有地方性、季节性和自然疫源性特点.该病的流行与防治不仅受到生物因素的影响,而且受社会经济因素与环境因素的制约.血吸虫病危害程度、防治工作难度远远超过国外流行的埃及血吸虫病和曼氏血吸虫病.

    作者:郑江 刊期: 2006年第12期

  • 2005年海珠区部分干部人群华支睾吸虫感染现状分析

    目的 了解和掌握广州市海珠区公安、工商、医疗系统的部分干部人群华支睾吸虫感染现状及流行特点,为制订防治策略提供科学依据.方法 采用改良加藤氏粪检法对检查对象进行华支睾吸虫虫卵检测.结果 共检测382人,阳性43人,感染率为11.26%.上述三类不同职业的干部人群感染率无显著性差异,男女感染率存在显著差异,男性高于女性,且31~50岁年龄组感染率较高.结论 干部人群感染率高,应重视对该人群的防治工作,加强对其健康教育,改善其不良饮食习惯,以降低华支睾吸虫的感染率.

    作者:赵丽庆;李幸儿 刊期: 2006年第12期

  • 肝癌肝移植患者术后感染情况及影响因素分析

    目的 调查肝癌患者肝移植术后引起感染的病原菌分布与耐药情况并探讨感染的相关因素.方法 回顾性调查中山大学肿瘤医院在2003年9月至2005年8月间的肝癌肝移植患者的病历资料并进行统计学分析.结果 32例肝癌患者在肝移植术后1个月内29例(90.6%)出现一个部位或以上的细菌培养阳性,从呼吸道、腹腔、泌尿道共分离出病原菌119株.感染以呼吸道和腹腔常见,各有22例(68.8%),第1周内发生率高.119株病原体的分布比较分散,其中葡萄球菌占31.09%(64.86%为MRSE/MRSA),白假丝酵母菌占6.72%,阴沟肠杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌各占5.88%,产ESBLs酶的肠杆菌科菌株占G-杆菌的19.30%.术后ALB水平有下降趋势,但第1个月内尚正常.免疫抑制剂FK506术后第1个月内平均血药浓度(11.64 μg/L)高于第2个月,其中尤以第1周高.结论 肝移植术后1个月内呼吸道和腹腔感染发生率较高.G+球菌和G-杆菌感染机会均等,其余为真菌,约占一成多.G+球菌以葡萄球菌为主,MRSE/MRSA比例较高,G-杆菌以阴沟肠杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌为主,真菌以白假丝酵母菌多.营养、免疫抑制剂及手术本身可能是导致术后高感染率的重要易感因素.

    作者:石悦;王浩渊;赵擎宇 刊期: 2006年第12期

  • 人群血吸虫病抗体水平检测技术的研究进展

    人群血吸虫病抗体水平检测方法近年发展迅速,随着各种抗原提纯技术的成熟和生物克隆技术的运用,以及多项血清学检测技术的联合,检测方法的灵敏性和特异性越来越高,进而使人群抗体水平检测技术广泛地应用于人群血吸虫病的普查、抽查、监测以及病例的诊断和疗效评估中.

    作者:罗兴建;周晓农;肖邦忠 刊期: 2006年第12期

  • 蛋白激酶C在ET-1引起热痛觉过敏中的作用

    目的 研究蛋白激酶C(PKC)途径在内皮素-1(ET-1)引起热痛觉过敏中的作用.方法 小鼠分为PKC抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ(BIM)组(BIM组)、ET-1组(ET组)、BIM加ET-1组(BE组),每组6只.BIM组足底注射BIM 5 nmol 15 min后再注射PBS,ET-1组注射PBS 15 min后再注射10 pmol ET-1,BE组注射5 nmol BIM 15 min后再注射10 pmol ET-1.测量注药前及注药后15、30、45及60 min对热逃避反应时间.结果 BIM组与BE组热痛觉阈值无明显变化,ET组热痛觉阈值降低.结论 局部注射ET-1通过激活PKC途径从而引起热痛觉过敏.

    作者:梁杰贤;郭中敏;季文进;刘培庆 刊期: 2006年第12期

  • 高频超声对肠间隙少量积液在急性阑尾炎诊断中的价值

    目的 探讨高频超声对肠间隙少量积液在急性阑尾炎诊断中的价值.方法 对84例阑尾炎病人B超诊断结果进行回顾性分析,并将声像表现与手术后病理学诊断结果相比较.结果 对于急性阑尾炎病人,高频超声能明确显示肿大阑尾为70%,能显示阑尾周围肠间隙积液者可达94%.结论 结合病史和临床症状及阑尾周围有肠间隙积液,对急性阑尾炎的诊断具有重要参考价值.

    作者:易松涛 刊期: 2006年第12期

  • 浅谈《人体寄生虫学》应用CAI的几个问题

    CAI作为一种新的教学手段,其生动形象、提高教学质量的优势是不容质疑的,但在使用CAI的教学过程中也存在一些值得探讨的问题.本文就<人体寄生虫学>教学中合理应用CAI课件的教学方法、CAI课件制作、多媒体素材库的建立及CAI课件的知识产权进行探讨,以期在教学中更加科学、有效的使用多媒体教学手段.

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    作者:袁照;陆秀棠;罗爱珍;高新梅 刊期: 2006年第12期

  • 日本血吸虫Calpain疫苗候选分子抗感染的免疫机制

    目的 探讨日本血吸虫疫苗候选分子-钙离子激活的中性蛋白激酶(Calpain)的保护性免疫力和免疫保护性机制.方法 用重组纯化的Calpain抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗Calpain血清,抗Calpain血清与机械转化的日本血吸虫童虫和来自于同种鼠激活的嗜酸性粒细胞共同培养,观察细胞对血吸虫童虫的粘附及对童虫的杀伤效果;RT-PCR分析Calpain抗原免疫BALB/c小鼠一氧化氮激酶(iNos.eNos.nNos)mRNA的表达;ELISA分析免疫小鼠体外培养脾细胞产生的细胞因子IFN-γ和IL-4.结果 重组Calpain抗原免疫小鼠后,产生了一个极高的抗Calpain特异性抗体,此抗体介导了同种鼠的嗜酸性粒细胞对日本血吸虫童虫的粘附,37℃、5%CO2培养48 h后,33.8%的日本血吸虫童虫被杀死,与控制组14.5%的自然死亡率相比有一个显著性的增高(P<0.01);RT-PCR测定重组Calpain抗原免疫1周小鼠iNos mRNA的表达显著性的增强,培养24 h脾细胞上清中IFN-γ浓度高于对照组.结论 Calpain特异性抗体介导了对日本血吸虫童虫的细胞毒作用,Calpain抗原能够诱导IFN-γ的产生,提示Calpain诱导Th1的免疫应答反应来抗日本血吸虫的感染.

    作者:张仁利;黄达娜;高世同;耿艺介;吴少庭;胡章立;张顺祥;程锦泉 刊期: 2006年第12期

  • 血清新蝶呤检测对登革病毒感染的早期评估

    目的 探讨血清新蝶呤检测在登革病毒感染早期诊断中的潜在应用价值.方法 检测110例登革热(DF)病人血中新蝶呤的含量,将其与50份水痘病人和40份流感病人血中新蝶呤的含量进行比较,155份来自健康献血员的血清作为对照.结果 急性期登革热病人血中新蝶呤的平均含量为48.2 nmol/L,高于水痘病人、流感病人和健康对照者血中的平均含量(分别为36.3 nmol/L、18.8 nmol/L和6.7 nmol/L,P<0.001).在已经确诊的登革热病人中,症状出现第一天即可检测到血中新蝶呤含量升高,且在病程第四天升至大值54.3nmol/L.血中新蝶呤含量升高的水平与热程相关,因而可以用来确定病程长短.结论 登革热病人血中新蝶呤含量较健康对照者以及其它病毒感染者显著升高(P<0.001),可以作为早期确定登革热严重程度的指标.

    作者:候喜琴;刘建伟;徐霖;袁广卿;王鸣;郑伯建;曹开源 刊期: 2006年第12期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会