袁淑兰
目的利用杆状病毒-昆虫细胞系统构建日本血吸虫 (Schistosoma japonicum, Sj)Sj16基因重组杆状 病毒.方法从日本血吸虫尾蚴提取总 RNA,通过 RT- PCR扩增出 Sj16基因全编码区序列,将其克隆到载体 pET30a(+ )中,通过 PCR将 Sj16基因连同 pET30a(+ )多克隆位点下游的 6× His· Tag一起扩增出来,插入 donor载体 pFastBacHTa中,构建重组杆状病毒 donor载体 pFastBacHTa- Sj16- His,转化大肠杆菌 DH10Bac- GFP进行转座,提取重组 Bacmid,用 Lipofectin法转染昆虫细胞 Sf9使其包装成有感染性的重组杆状病毒.结果构建了含日本血吸虫 Sj16基因的重组 Bacmid- GFP- Sj16- His,转染 Sf9细胞后,获得了有感染力的重组杆状病毒. 结论成功构建了日本血吸虫 Sj16基因重组杆状病毒,为下一步重组 Sj16蛋白表达和 Sj16基因功能研究打下了基础.
作者:胡少敏;王海;阮志燕;余新炳;吴忠道 刊期: 2005年第01期
目的通过对江门市人体肠道寄生虫的感染情况进行调查分析,为该市制定今后的人体寄生虫防治对策提供科学依据.方法对调查对象采取改良加藤氏厚涂片法检查肠道寄生虫卵,用透明胶纸肛拭法检查蛲虫卵,并对检查结果进行分析讨论.结果共调查 1 530人,查出肠道寄生虫 5种,共有 521人感染,总感染率为 34.05%,其中华支睾吸虫、钩虫、鞭虫、蛔虫和蛲虫的感染率分别为 27.18%、 6.67%、 0.85%、 0.33%和 39.15%.结论经过多年的努力,江门市的寄生虫防治工作取得了显著的成效,但华支睾吸虫和蛲虫的感染率还很高,今后要加强这两虫种的防治工作.
作者:周悦亮;李凤玲;区博文 刊期: 2005年第01期
目的对合成的 ICAM- 1模拟肽 P1(KLYLIAEGSVAA) 的抗原性及生物活性进行鉴定. 方法化学合成 ICAM- 1模拟肽 KLYLIAEGSVAA,以间接 ELISA及竞争抑制试验鉴定合成肽的抗原性,以玻片免疫组化方法鉴定合成肽的生物活性.结果合成肽能与抗 ICAM- 1单抗 15.2发生特异性结合,并且能够竞争抑制 ICAM- 1分子及相应的阳性噬菌体克隆与单抗 15.2的结合作用.玻片免疫组化显示合成肽及 ICAM- 1分子均能有效抑制相应的阳性噬菌体展示肽与白细胞的结合.结论合成的短肽具有 ICAM- 1与 15.2抗体结合的抗原性,并能有效模拟 ICAM- 1分子与白细胞结合的功能.
作者:郝文波;徐伟文;李明;王萍 刊期: 2005年第01期
目的获取日本血吸虫(Sj)精氨酸酶(ARG)新基因的DNA编码序列及其启动子序列,实验验证ARG基因编码序列的完整性.方法 以日本血吸虫成虫 DNA做模板,PCR扩增 ARG基因编码区的DNA序列并测序;根据Sj ARG基因已扩增的 DNA序列设计2条巢式引物,用TaKaRa LA Taq PCR Cloning in vitro Kit,扩增 Sj ARG基因的启动子序列;对已扩增得到的序列进行 TATA盒的寻找以分析启动子序列的位置,实验验证我们曾获取的 Sj ARG新基因编码序列的完整性. 结果 扩增得到长约 1 000bp ARG基因 DNA序列 , Sj ARG基因 DNA序列内没有内含子,与 cDNA序列完全一致.对启动子序列扩增后,得到一略大于 250bp的序列,测序后分析发现其中有 36bp与 ARG基因 DNA序列的 5′端重叠.因此 ,将精氨酸酶基因的 DNA序列又向前延伸了 221bp,与前面得到的序列拼接后得到一条 1 486bp的总序列,将该序列在 NCBI上进行 ORF的寻找发现其长的 ORF达 1 164bp,起始密码子在第 156位,终止密码子在第 1 319位 ,该起始密码子前 32位为 TATA盒的位置.因此,确定该 Sj ARG基因全长 cDNA编码序列长应为 1 164bp.结论 成功扩增获得了日本血吸虫精氨酸酶基因编码区的 DNA序列,其不含有内含子;并扩增得到了该基因的启动子序列,从而获得了 Sj ARG基因真正的全长 cDNA序列,为进一步的功能鉴定奠定了基础.
作者:李孜;余新炳;吴忠道 刊期: 2005年第01期
目的总结妊娠高血压综合征 (妊高征 )行剖宫产术的麻醉处理过程.方法对 35例妊高征患者在围术期采取一系列救治措施:①有效防治子痫发作;②麻醉诱导要求占时短,循环干扰少,能有效抑制有害应激反应和消除病人的精神紧张和不安,消除因疼痛而引起血压继续升高;③合理降低高血压,改善血流动力学,避免术中发生高血压危象;④改善肾脏及子宫血流灌注;⑤避免或慎用对新生儿呼吸有抑制作用的麻醉药.结果全组病例经麻醉处理后,循环稳定,均无发生任何并发症,经术后进一步积极支持治疗后全部康复.结论术前全面了解病情,充分完善术前准备,选择合理的麻醉方法,围术期对患者的合并症进行积极治疗,采取止惊、降压、强心、扩容等综合措施,是提高妊高征患者麻醉成功的重要因素.
作者:张坤全;欧阳文博;冯肇洪 刊期: 2005年第01期
目的分离纯化日本血吸虫成虫 (AWA)和未成熟虫卵 (SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白,为血吸虫病 免疫诊断、预防提供新的抗原分子.方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原, SDS- PAGE及银染色进行分析鉴定.结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原 AWA18 000u, SIEA42 000u, SIEA130 000u.结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法.
作者:彭先楚;汪世平;周松华;姜孝新;吕志跃;徐绍锐;肖小芹;曾少华;余俊龙;戴橄;李文凯;吴仕筠 刊期: 2005年第01期
目的了解广州开发区企业职工肝病发病情况,协助企业做好肝病防治工作,防止肝脏疾病的发生和发展. 方法对 1 638例被检者采用 ELISA法检测血清中 HBV的抗原抗体.对其中 242例办公室人员用超声诊断仪检查肝脏和胆囊.结果 HBsAg阳性率为 9.83%,男性为 10.97%,女性为 5.93%. ALT异常的发病率为 4.88%,其中不明原因的占 71.25%.超声诊断仪发现肝病的发病率为 16.94% (其中脂肪肝 12.4%、肝囊肿 0.83%、肝胆结石 1.65%、胆息肉 0.83%和胆囊炎 1.24% ),与 HBsAg阳性率相比,差异非常显著 (P< 0.001).结论企业职工各种肝病的检出率高,应做好肝病防治工作.
作者:叶华清;陈茂招;黄莉;李莉 刊期: 2005年第01期
目的了解福州市不同年龄段学生的口腔原虫感染情况以及与口腔疾患之间的关系,并探讨提高检出齿龈内阿米巴 (Eg)的方法.方法采用 locke液培养法与直接涂片法检测口腔原虫并进行比较,记录学生的牙龈出血与龋齿情况.结果学生的总感染率为 57.58%,其中大学生的 Eg感染率 (71.15% )依次高于中专生 (53.49% )、初中生 (42.47% ), 小学生 (39.13% )低.用 locke液培养 Eg检出率 (71.15% )明显较直接涂片法 (44.87% )高 (P< 0.005).牙龈出血和龋齿的口腔疾患者的口腔原虫感染率 (80.62% )较口腔健康者 (39.41% )高 (P< 0.005).结论随着年龄增长口腔原虫感染增高,普查或个体检查时采用 locke液培养法可提高检出率,口腔疾患的口腔原虫感染率较健康人群高,提示 Eg感染在一定条件下可引起牙周病.
作者:陈豪;魏雪英;刘光英;李存辉 刊期: 2005年第01期
目的了解海南省恶性疟原虫 Pfmdr1基因中的关键性点突变是否与海南株恶性疟原虫产生氯喹抗性有关.方法采用套式 PCR法分别扩增 Pfmdr1基因中含有第 86位和 1246位氨基酸的多态性片段,并对扩增产物进行限制性内切酶酶切分析,观察是否存在突变位点. 结果 45个样本中, Pfmdr1基因第 86位氨基酸均未发生点突变,即 86位密码子是 Asn而非突变型的 Tyr; Pfmdr1基因发生 D1246Y突变的样本有 3个,其中 1个是抗性株, 2个为敏感株.结论我国海南株恶性疟原虫产生氯喹抗性与 Pfmdr1基因的多态性无显著关系.
作者:宋杰;江钢锋;陈沛泉 刊期: 2005年第01期
目的探索化妆品生产车间空气尘埃粒子在不同时间、不同季节和不同生产车间的分布情况,对化妆品生产企业的 GMP建立提供科学依据.方法选择广州市采用空气过滤净化系统的化妆品厂 11家 (以下简称净化厂 )和非采用空气过滤净化系统的化妆品厂 13家 (以下简称非净化厂 ),分别在不同生产时间、不同季节和不同生产车间的情况下,分析车间空气中 0.3、 0.5、 1、 2、 3、 5μ m尘埃粒子数的分布情况,评价其污染水平.结果净化厂和非净化厂在生产中均产生不同程度的尘埃粒子污染 ;净化厂空气中尘埃粒子在季节上基本无统计学意义,非净化厂季节上主要以中、大颗粒粒径尘埃粒子 (1、 2、 3、 5μ m)有统计学意义,夏秋季高于冬春季;生产车间中净化厂以配制间、配料间和分装间产生的尘埃粒子浓度相对较高,非净化厂以配制、卫生通道、更衣室产生的尘埃粒子浓度相对较高.结论加强配制间、分装间和卫生通道的卫生管理,注意产品制作过程的密封工作,并改善制作和灌装设备;加强非净化厂生产过程的通风排气;制订洁净度标准,应不需考虑季节之分.
作者:钟嶷;马林;郭重山;李小晖 刊期: 2005年第01期
目的探讨纸片法检测大肠菌群的结果判断标准.方法对餐 (饮 )具消毒效果监测的大肠菌群检测纸片状况进行详细记录,将纸片以无菌状态转入单料乳糖胆盐发酵管中,用发酵法来证实其大肠菌群的阴阳性.结果按 GB14934-94判断纸片法大肠菌群的阴阳性,其灵敏度为 73.6%,特异度为 98.8%;若按作者提出的标准进行判断,其灵敏度为 98.2%,特异度为 89.8%.结论二者比较灵敏度有显著性差异.消毒剂的残留可能是导致结果判断出偏差的主要原因.建议完善纸片法测大肠菌群的判断标准,以便更准确地反映大肠菌群的真实情况.
作者:卢崇南 刊期: 2005年第01期
目的通过调查了解旋毛虫病在云南省流行程度和分布情况,为制定防治措施和策略提供科学依据.方法根据以往人体感染和动物感染程度确定轻、中、重流行区,采用 ELISA检测法进行检测.结果共调查 10个县, 20个点的 10 109人份血清,血清阳性人数 852,阳性率 8.43%,以陇川县血清阳性率高 25.87%,文山县血清阳性率低 1.00%; 30~ 40岁中青年组阳性率较高 10.64%,血清学阳性率年龄大 79岁,小 2岁;血清学阳性与地区、年龄、居住地、生吃或半生吃猪肉和用不洗砧板切熟食等生活、行为习惯的关系具有统计学差异 (χ 2=767.64、χ 2=65.66、χ 2=9.435、χ 2=22.19, P< 0.005),男女性别与血清学阳性无统计学差异 (χ 2=0.851, P >0.005). 结论旋毛虫病为我省重要公共卫生问题,各级卫生部门加强卫生宣教,健全农村食品卫生监督制度.
作者:汪丽波;杜尊伟;王学忠;董莹;姜进勇;李菊升;刘慧;李春富 刊期: 2005年第01期
目的建立一套快速检测霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株同源性的实验方法.方法设计 4对引物进行多重 PCR检测菌株毒力基因特征;采用随机扩增多态性 DNA(RAPD)结合 SPSS软件分析不同菌株的同源性.结果通过多重 PCR同时检测菌株 CtxA、 TcpA、 Ace、 Zot 4种主要的毒力基因,并快速判定其毒力强弱; RAPD产生的指纹图谱条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀,结合 SPSS软件分析可判断菌株间的同源性关系.结论多重 PCR和 RAPD结合 SPSS软件分析可在 4h内完成对霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株间同源性的检测,有助于在疫情处理中判断病菌来源和及时采取适当的处理措施.
作者:易鸿;王鸣;刘于飞;莫自耀;李孝权;范健文 刊期: 2005年第01期
目的初步评价心肌肌钙蛋白 I(cTnI)的酶联荧光免疫定量测定方法的临床应用性能.方法依据美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)颁布的<定量临床检验方法的初步评价;批准指南 (EP10-A)>提供的方法,按特定的顺序连续 5d测定高、中、低浓度标准品中的 cTnI,对 MINI VIDAS测定 cTnI的方法进行初步评价.结果当标准品中的 cTnI浓度为 0.602μ g/L、 7.911μ g/L、 15.22μ g/L时, cTnI测定的回归方程为 Y=1.02X-0.12,相关系数 r2=0.9999;绝对偏差分别是-0.06μ g/L、-0.09μ g/L、 0.18μ g/L;总不精密度分别是 7.22%、 2.17%、 1.62%.结论 MINI VIDAS酶联荧光免疫定量测定 cTnI方法的检测性能符合临床应用要求.
作者:刘忠民;高国贞;高月亭;黄慧萍 刊期: 2005年第01期
目的构建包含人乙型肝炎病毒 (HBV)大分子表面蛋白基因的重组载体,以便进一步研究其基因免 疫以及对宿主细胞丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)p38等信号传导通路的影响.方法设计合成 2对寡核苷酸引物,以 adr亚型 HBV质粒 pHBV DNA为模板,采用 PCR法分别扩增 HBV 大分子表面蛋白基因 (preS1/S2/S基因 )片段;用 HindⅢ和 BamH I双酶切后,连接到质粒 pcDNA3.1(+ )相应酶切位点,转化宿主菌 DH5α,分别用上述内切酶双酶切及 DNA测序鉴定重组质粒.结果酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符.测序结果与文献报道序列及预计结果一致.结论成功构建了 HBV 大分子表面蛋白基因的重组载体.
作者:李志刚;杨林;江元森;顾琳;姚集鲁 刊期: 2005年第01期
迄今,许多心血管疾病的发病机制尚未完全阐明,据分子生物学观点,一些基因结构及表达异常是其发病的根本原因.其中基因突变,移位和调控异常是普遍的机制.基因治疗则有可能成为根治这部分心血管病的有效方法.根据心血管病发病机制近年来所取得的进展,应用病毒载体从基因水平治疗心血管病已在动物实验中取得了一些成绩,但是同时也存在着一些目前暂时无法克服的问题.
作者:谢宝丽;张丽娜;夏琦;陈瑛 刊期: 2005年第01期
目的探讨新生儿高胆红素血症 (简称高胆 )时巨细胞病毒及胆汁酸检测在临床的意义.方法对 208例高胆红素血症患儿和 60例正常新生儿,给检测血巨细胞病毒 (CMV)、谷丙转氨酶 (ALT)、间接胆红素 (I-BIL)、直接胆红素 (D-BIL)和胆汁酸 (TBA)等,并分三组进行对比观察. 结果 CMV阳性高胆组血 ALT、 D-BIL及 TBA值显著高于 CMV阴性高胆组 (P< 0.01); CMV阳性高胆组血 I-BIL值与 CMV阴性高胆组比较差异无显著性 (P >0.05).结论 CMV感染的高胆患儿易有肝损害和胆汁淤积,对高胆患儿应检测巨细胞病毒及胆汁酸,及时了解患儿感染 CMV及胆汁淤积状况,对判断病情、指导治疗和估计预后有重要意义.
作者:汤鸣;严越秀;肖力;乔萍 刊期: 2005年第01期
昆虫神经细胞膜离子通道是多种天然毒素及合成杀虫剂的作用靶标.大部分杀虫剂作用于多种神经元受体和离子通道,主要包括钠通道、 GABA受体和 nACh受体.昆虫的击倒抗性与钠通道和 GABA受体某些氨基酸置换有关.本文综述了杀虫剂对神经元离子通道的作用机理及抗药性机理的研究.
作者:王佳;诸葛洪祥;周洪福 刊期: 2005年第01期
目的证明白蚊伊蚊亲代能够经卵传递登革 2型病毒给子代,并且在传递过程中病毒毒力呈逐渐增强趋 势.方法采用套式 PCR分批检测感染雌蚊的子一代至子四代卵内登革病毒结合 C6/36细胞培养分离病毒及 TCID50法滴定病毒滴度.结果白蚊伊蚊能经卵传递 DEN-2, 至少可传四代以上;且在传代中病毒毒力有增强的趋势.结论实验证明白蚊伊蚊对登革 2型病毒有较大的媒介效能,且在维持登革病毒的自然循环中起重要作用.
作者:宋秀玲;黄炯烈;郑小英;吴瑜;王玲;潘实清 刊期: 2005年第01期
目的探讨术中冷冻切片结合印片病理诊断.方法对 168例送检组织在冷冻切片同时,在同一部位印片, HE染色,光镜下观察,并与石蜡切片对照.结果 168例良性冷冻切片 93例,印片 95例;恶性冷冻切片 67例,印片 62例.冷冻切片诊断准确率 95.24%,印片诊断准确率 93.45%.可疑冷冻切片、印片均为 5例,占 2.98%;良恶难定冷冻切片 3例,占 1.78%,印片 6例,占 3.57%.误诊 2例都为印片良性肿瘤,占 1.19%.结论在冷冻切片同时采用印片方法进行病理诊断,有提高对病理诊断的准确性.
作者:雷伟华;刘自光;刘丽萍 刊期: 2005年第01期