学术投稿

果实特异性启动子驱动的含sbr基因植物高效表达载体的构建

赵玮玮;凌均棨;杨国平

关键词:果实特异性启动子, E8, 2A11, 变形链球菌唾液粘附区, 植物表达载体
摘要:目的构建果实特异性启动子驱动的含编码变形链球菌唾液粘附区( sbr)植物表达载体,进一步提高外源目的基因的表达,为研制有效的转基因植物防龋疫苗打下基础.方法提取番茄基因 DNA,利用 PCR 技术扩增果实特异性启动子 E8和 2A11基因,双酶切质粒 PROP及 PROSC,分别与目的基因连接, 构建重组植物表达载体.结果通过双酶切鉴定,目的基因片段已正确整合到植物表达载体中.结论本实验成功构建了果实特异性启动子驱动的含 sbr基因的植物表达载体.
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  • 次氯酸钠消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活效果观察

    观察次氯酸钠消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活效果,采用悬液法进行检测,结果在 20~ 22℃,相对湿度为 54%~ 65%的条件下,次氯酸钠消毒剂有效氯含量为 250.0 mg/L,加入病毒悬液作用 1min后,对脊髓灰质炎病毒平均灭活对数值为 2.89;加入病毒悬液作用 5 min、 10 min后对脊髓灰质炎病毒平均灭活对数值≥ 4.00.

    作者:黄美卿;钟昱文;陈惠珍;王冰姝;郑焕英 刊期: 2005年第02期

  • 耶尔森菌HPI毒力岛全岛缺失突变载体的构建

    目的构建耶尔森菌 HPI毒力岛全岛缺失突变载体, 为进一步构建 HPI全岛缺失株打下基础. 方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌 HPI毒力岛基因序列设计 PCR引物,扩增并克隆 irp8结构基因,作为同源重组的一侧序列, 以 irp5的部分序列作为同源重组的一侧序列, 并将之克隆入同一载体, 中间插入有卡那霉素( Km)基因( kan)抗性标记. 以自杀质粒 pCVD442为载体, 构建了含有 irp8基因和 irp5部分序列的缺失突变载体 pCO85.结果构建的突变载体经酶切及 PCR鉴定克隆片段大小与预期一致.结论成功构建了致耶尔森菌 HPI毒力岛全岛缺失突变载体,这个以小肠结肠炎耶尔森菌为靶序列构建的重组自杀质粒可应用于肠杆菌科及其他菌属 HPI毒力岛全岛缺失株的构建.

    作者:胡静;俞守义;阚飙;刘志华 刊期: 2005年第02期

  • 矮小身材儿童头发中8种微量元素分析

    目的了解矮小身材患儿头发内常用 8种微量元素的含量,结合病史,探讨影响生长发育迟缓的影响因素.方法采用火焰原子吸收法检测了 78例矮小身材儿童的头发锌、铁、铜、钙、镁、硒、锰和铅含量.结果显示大多数儿童发锌含量低于正常 ,半数以上儿童发铁和发钙低于正常 ,约四成儿童发硒和发镁低于正常 ,约 1/3儿童发铜及发锰含量低于正常.发铅含量高于正常者占 46%.结论儿童身材矮小除遗传因素外,可能与营养不良、反复感染及体内多种元素失衡有关.

    作者:蔡虹;翁坤荣 刊期: 2005年第02期

  • 应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原

    目的评价单克隆抗体检测循环抗原 (Cag)诊断脑囊虫病的价值.方法用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体 4B6,以 ELISA方法检测患者和对照者血清和 /或脑脊液中的猪囊虫抗原. 结果 82例脑囊虫病患者血清 Cag阳性率为 79.2% (65/82),脑脊液 Cag阳性率为 100%( 26/26),治疗一个疗程后血清 Cag转阴率为 85%( 17/20).从对照者标本中未检出猪囊虫 Cag. 4B6和包虫抗原有轻微交叉反应.结论 Cag检测,尤其是脑脊液 Cag检测有助于脑囊虫病的诊断,而血清 Cag检测则有助于疗效考核.

    作者:郭增柱;黄敏君;安亦军;黄松;姜洪杰 刊期: 2005年第02期

  • TR/Patoc-Ⅰ株抗原肉眼凝集试验在钩端螺旋体病中的临床意义

    目的探讨血清学 TR/Patoc-Ⅰ株抗原的肉眼凝集试验 (即快速玻片凝集反应 )在钩端螺旋体病中的应用价值.方法对本院 1995年 7月~ 2004年 5月收治的 32例小儿病人进行临床综合分析.血清学检测采用快速玻片凝集反应,并与活抗原显微镜凝集试验相对照.结果快速玻片凝集反应全部阳性.+~++的 16例双份血清 3~ 4周后复查增高++以上的有 13例.+++~++++的 10例 3~ 4周后降为+~++.双份血清升高或降低++以上的有 27例 ,无变化的 5例临床诊断均为闭塞性脑动脉炎.入院后 1周内 SAT和 MAT二者敏感度经统计学卡方检验 ,统计学上有显著差异 (P< 0 01).入院 1周内 SAT+以上的有 32例, MAT抗体滴度 1∶ 100以上的有 24例,两者阳性率经卡方检测 ,统计学上有显著差异 (P< 0 01). 100例非钩体病儿童检验二者的特异性,经卡方检测, 统计学上有显著差异 (P< 0 01). 32例成对标本中 , 入院后 3~ 4周 32例 SAT与 MAT均阳性 ,同时阴性为 0例.入院后 3~ 4周 SAT与 MAT一致率为 100%.两者结果有一致性( P< 0.01).结论快速玻片凝集反应操作简便、快速、无传染性, 并且准确、特异和敏感 , 对钩体病早期诊断有一定的价值, 值得基层医院推广.

    作者:严智先;莫伟雄;葛德珊 刊期: 2005年第02期

  • 2004年广州首例输入性登革热的临床分析

    目的了解 2004年广州首例输入性登革热( DF)病例的流行病学、临床、病原学检查特点.方法对患者流行病学及临床资料进行回顾性分析,并采用酶联免疫吸附试验( ELISA)、免疫印迹法及免疫层析法检验登革病毒 DEV- IgM/IgG抗体,逆转录-聚合酶链反应( RT- PCR)测定 DEV- RNA.结果患者起病前在印尼工作, 回国第 2天( 7月 16日)以发热起病, 伴头痛、肌肉酸痛等症状,白细胞、血小板、 T淋巴细胞计数减少.对多份血清进行平行检测, DEV- IgM持续阳性, DEV- IgG在起病第 3周出现, RT- PCR测定 DEV- RNA呈阳性. 7月 29日确诊为登革热.结论该患者为 2004年广州市首例输入性登革热确诊病例,有流行病学依据,临床表现轻,抗体出现早,病情恢复快.

    作者:陈燕清;张复春;王建;卢业成;陈万山 刊期: 2005年第02期

  • 高州市实施结核病控制项目效果分析

    目的评价高州市实施世界银行贷款结核病控制项目的成效. 方法收集并分析 1992~ 2001年项目季报表及有关资料. 结果 10年间共接诊可疑肺结核症状者 20 124人,可疑者检查率平均为 0.15%;发现活动性肺结核 5 138例,其中涂阳 4 001例,涂阳病人占活动性病人 77.9%;涂阳登记率从 8.14/10万提高到 28.22/10万;初复治涂阳比例 1∶ 0.05,初治涂阳病人治愈率为 97.9%;复治涂阳病人治愈率为 84.4%.结论高州市结控项目取得了满意效果.

    作者:余荣深 刊期: 2005年第02期

  • 河源市7336名小学生视力状况及保护情况分析

    目的了解河源市区小学生视力现状,以科学有效地保护视力.方法视力保护采用自然保护法,并对 7336名小学生视力检查资料进行描述性分析和比较.结果 7336名小学生中正常视力 6364名,占 86.75%,视力低下患病率为 13.25%,五、六年级女生患病率高于男生.结论采取有效措施保护视力取得一定成效,但积极有效地预防和保护视力是一项长期而责任重大的工作.

    作者:李志美 刊期: 2005年第02期

  • AFLP技术及其在寄生虫学上的应用

    扩增片断长度多态性 (amplified fragment length polymorphism, AFLP)是 1993年由 Zabeau和 Vos[1]发明并发展起来的一种检测 DNA多态性的新方法.它克服了限制性片段长度多态性 (RFLP)和 PCR的缺点,结合了 RFLP技术的可靠性和 PCR技术的高效性.该方法问世后很快应用于动物 [2~ 10]、植物 [11~ 14]、微生物 [15~ 19]、寄生虫 [5,16, 18, 20]等生物的遗传育种、构建遗传图谱、遗传多样性分析、基因定位、分类等方面的研究.本文简要介绍了这种技术的原理、特点及在寄生虫学上的应用.

    作者:魏冬霞;邓艳;马妮妮;朱兴全 刊期: 2005年第02期

  • TNF-α在MODS鼠心肌中的表达及p38MAPK的调控作用

    目的探讨肿瘤坏死因子-α( TNF-α)在多器官功能障碍综合症( MODS)鼠心肌损伤中的作用及 p38MAPK的调控机制.方法采用盲肠结扎并穿刺 (CLP)来制作 MODS模型.在不同时相点观察大鼠血清生化指标 (GPT、 BUN、 Cr、 CPK- MB)、 TNF-α浓度及其 mRNA在心肌的表达、心肌 p38MAPK的活性.结果 CLP术后血清 TNF-α浓度进行性升高, CPK- MB显著提高. 正常心肌组织不表达 TNF-α mRNA, MODS时可见大量表达,且 p38MAPK明显激活.血清 TNF-α的水平及其 mRNA在心肌中的表达与 CPK- MB呈显著正相关.应用 p38MAPK抑制剂 SB203580后, p38MAPK激活受抑,血清 TNF-α浓度显著降低, TNF-α在心肌中的表达减少,心肌损害明显减轻.结论 TNF-α的大量释放及其在心肌中显著表达是 MODS鼠心肌损伤的原因之一,通过调控 p38MAPK信号通路可对心肌起保护作用.

    作者:乐胜;马中富;梁艳冰;詹红;唐皓;荆小莉 刊期: 2005年第02期

  • 一株非嗜肺军团菌的分型和定量

    目的对某中央空调冷却塔出水口的水进行军团菌分离培养及分型和定量.方法用分离培养法检测军团菌,再用血清凝集进行分型,然后对军团菌进行定量. 结果成功检测出某中央空调冷却塔出水口的水有博杰曼军团菌存在,这是本实验室检出的首例非嗜肺军团菌,定量结果为 0.11CFU/ml. 结论本方法对冷却塔出水口的水中分离培养出的军团菌分型及定量有较好效果.

    作者:何晖;龚玉姣;马林;冯文如 刊期: 2005年第02期

  • 动态观察哮喘急性发作患儿血清IL-18和TNF-α改变的临床意义

    目的了解哮喘急性发作患儿血清白细胞介素- 18 (IL- 18)和肿瘤坏死因子 (TNF-α )变化的临床意义及与病情的关系. 方法采用 ELISA法动态观察 50例哮喘急性发作患儿及 20例正常患儿血清 IL- 18和 TNF-α的含量. 结果哮喘发作患儿血清 IL- 18水平急性期 [(187.61± 52.04)ng/L] >缓解期 [(105.25± 48.17)ng/L] >对照组 [(58. 42± 21.43)ng/L], P均 < 0.01;哮喘发作患儿急性期血清 TNF-α水平 (103.37± 44.28)ng/L明显高于缓解期血清 TNF-α水平 (41.76± 16.67)ng/L及对照组 (38.51± 21.13)ng/L, P均 < 0.01,而缓解期与对照组之间比较则无显著性差别 (P >0.05).另外,急性期患儿血清 IL- 18含量分别与 TNF-α水平之间呈显著正相关 (r=0.811, P< 0.01), 与动脉血气中 PaO2(5.85± 3.67)kPa和 pH值 (7.28± 0.29)均呈显著负相关 (r分别为- 0.653和- 0.508, P均 < 0.01); 急性期患儿血清 TNF-α含量分别与 PaO2和 pH值均呈显著的负相关 (r分别为- 0.717和- 0.613, P均 < 0.01). 结论 IL- 18和 TNF-α可能参与了哮喘急性发作患儿的发病过程,测定血清 IL- 18和 TNF-α含量,对评估哮喘急性发作患儿的病情变化及严重程度可能有一定的意义,拮抗 IL- 18和 TNF-α的治疗可能有助于缓解患者的病情.

    作者:陈伟宁;曾爱红;马广伟;陈彩凤;邓树棠;刘秀琴 刊期: 2005年第02期

  • 成蚊传播登革病毒媒介效能的研究进展

    登革热( dengue fever ,DF)和登革出血热( dengue hemorrhagic fever,DHF)是由黄病毒科黄病毒属的登革病毒( dengue virus, DV)引起,是我国南方重要的虫媒病.近年全球许多地区发病率也呈明显的上升趋势,已引起国际医学界高度重视 [1].由于 DF/DHF迄今尚无可用疫苗和药物预防或防治其发生和流行,媒介控制在 DF/DHF流行的防治中起着重要作用,因而对媒介效能的研究具有实际的意义.

    作者:宋秀玲;黄炯烈;郑小英;吴瑜 刊期: 2005年第02期

  • 胆道扩张和液电碎石在复杂性肝内胆管结石治疗中的应用

    目的总结胆道镜胆道扩张技术和液电碎石对合并有肝内胆管狭窄、胆道嵌顿结石、巨大结石复杂性肝内胆管结石的治疗效果.方法回顾 41例肝内胆管嵌顿结石和巨大结石合并有肝内胆管狭窄病例,术中或术后应用胆道镜扩张技术和液电碎石进行治疗. 结果 41例中 37例狭窄完全解除,结石完全取净, 3例胆道狭窄在胆道镜下无法解除,结石无法取净, 1例狭窄解除但结石未能取净.总治愈率为 90.24%.结论应用胆道镜胆道扩张技术和液电碎石可有效治疗难治的复杂性肝内胆管石.

    作者:罗云藩;邓予;黄华容;李胜新 刊期: 2005年第02期

  • 冠状位MRI扫描在小儿气管异物中的应用

    目的探讨气管、支气管冠状位 MRI扫描诊断小儿气管异物的临床应用价值. 方法对 33例气管、支气管异物患儿行气管、支气管冠状位 MRI扫描,其中 25例并行摄 X线胸片及胸透检查进行对照.结果 31例 MRI冠状位扫描均清晰显示气管、支气管腔内异物,其中阻塞性肺气肿 9例、阻塞性肺不张 8例、阻塞性肺炎 5例. 2例排除异物.结论气管、支气管冠状位 MRI扫描可以显示小儿气管异物的直接征像和间接征像,显示异物所在的位置对指导手术有重要意义.

    作者:陈振清;梁东炎;莫宋平 刊期: 2005年第02期

  • 梅州市六种疫苗预防接种后相应传染病疫情分析

    目的分析广东省梅州市 1951~ 2003年 53年来六种与预防接种相应的传染病:白喉、麻疹、百日咳、流行性脑脊髓膜炎、流行性乙型脑炎、脊髓灰质炎(以下简称:六病)发病与死亡情况,评价预防接种成效.方法利用 1951~ 2003年梅州市人口及疫情报告资料对以下六病按年份、病种进行分析,并对计划免疫冷链系统实施前( 1951~ 1985年)和实施后( 1986~ 2003年)的情况进行比较.结果自实施计划免疫冷链系统以来,六病发病率与死亡率都大幅下降,年均总发病率从实施前的 624.99/10万,降至实施后的 5.31/10万,下降了 99.16%.死亡率从实施前的 7.21/10万降至实施后的 0.05/10万,下降了 99.31%. 结论实施计划免疫冷链系统是控制和消灭急性传染病有效的措施.目前,仍要警惕麻疹和乙脑爆发流行.

    作者:谢坤清;邹兴梅;林立新 刊期: 2005年第02期

  • 老年人消化性溃疡120例临床分析

    目的探讨老年人消化性溃疡的临床与合并症的特点及治疗.方法对 120例 60岁以上的消化性溃疡临床特点、合并症、内窥镜检查作回顾性分析.结果老年人消化性溃疡较年青人伴发其它疾病多,临床表现不典型,难于治疗,死亡相对增多.结论对 60岁以上的消化性溃疡应尽早确诊,积极治疗伴发疾病,可缩短疗程,降低死亡率.

    作者:李安振 刊期: 2005年第02期

  • 家蝇抗菌肽的诱导提取及筛选

    目的筛选家蝇血淋巴中抑制各种病原体的抗菌肽.方法用多种病原体及药物来刺激家蝇幼虫,诱导其产生抗菌肽, 把其中部分加热,用诱导出的抗菌肽进行抑菌试验.结果所提取的抗菌肽均有抗菌成份,但效果不一.结论诱导源不同可产生不同的抗菌成份, 加热后的抗菌成份有所破坏.

    作者:赵瑞君;刘成芳;董建臻;张亚尼 刊期: 2005年第02期

  • 黄牛与水牛的枯氏肉孢子虫同工酶研究

    目的比较寄生于黄牛和水牛的枯氏肉孢子虫 (Sarcocystis cruzi)乳酸脱氢酶、磷酸葡萄糖变位酶、 6-磷酸葡萄糖脱氢酶、苹果酸酶四种同工酶的酶谱. 方法进行聚丙烯酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法. 结果黄牛与水牛的枯氏肉孢子虫两种酶酶带相似,只在活性上略有差异. 结论同工酶谱分析证明黄牛和水牛都是枯氏肉孢子虫的自然中间宿主.

    作者:梁亦龙;左仰贤;谭德勇;陈新文 刊期: 2005年第02期

  • 低温对家蝇室内种群不同日龄蛹羽化率的影响

    目的探讨低温对家蝇蛹羽化率的影响.方法室内连续饲养的家蝇第 4代 1日龄蛹和 3日龄蛹,分别置于 2℃和 6℃处理 1、 2、 3、 4、 5 d后,取出置于室内羽化,记录不同日龄以及不同时间的低温处理后的羽化率.结果家蝇 1日龄蛹经不同时间 2℃低温处理后的羽化率 (% )依次为: 75.0± 13.54、 51.25± 13.15、 30.0± 15.81、 6.25± 6.29、 6.25± 4.79; 1日龄蛹经不同时间 6℃低温处理后的羽化率依次为: 88.75± 4.79、 66.25± 10.31、 40.0± 12.91、 37.50± 18.48、 12.50± 6.45. 3日龄蛹经不同时间 2℃低温处理后的羽化率依次为: 90.0± 7.07、 78.75± 11.09、 57.50± 9.57、 61.25± 11.09、 32.50± 22.55; 3日龄蛹经不同时间 6℃低温处理后的羽化率依次为: 92.50± 5.0、 90.0± 10.80、 88.75± 2.50、 90.0± 5.77、 66.25± 10.31.结论温度越低,蛹羽化率越低,低温处理时间越长,蛹羽化率越低; 蛹日龄越大,耐受低温能力越强.

    作者:许兵红;董卫华 刊期: 2005年第02期

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