林启平
目的检测混合SAG1和ROP1编码基因真核表达质粒疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法将SAG1和ROP1编码基因片段克隆入pEGFP-N3表达载体,构建重组质粒;RT-PCR体外验证重组质粒在NIH3T3细胞中的表达;通过检测抗体、抗体分型及细胞因子来评价体液免疫和细胞免疫;流式细胞仪测定脾脏淋巴细胞亚群;腹腔内注射毒性株弓性虫速殖子攻击免疫小鼠.结果 RT-PCR结果显示重组质粒能在哺乳动物细胞内表达;SAG1和ROP1混合重组质粒疫苗诱导小鼠产生很强体液免疫和细胞免疫,对于毒性株弓形虫感染攻击具有免疫保护作用.结论不同候选抗原编码基因混合重组质粒能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,提示含有多种成份的混合DNA疫苗的研制可作为核酸免疫研究的策略之一.
作者：陈海峰；郑焕钦；徐劲；高世同；李华文；郭虹；周永安；陈观今 刊期： 2003年第01期
目的克隆并构建编码结核分枝杆菌(MTB)ESAT6,Ag85B和MPT64分泌蛋白的重组表达质粒.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中分别扩增出ESAT6,Ag85B和MPT64基因(288bp,978bp and 687bp),并克隆到T载体,然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pGEX-4T-2连接,转化大肠杆菌E.coli DH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.结果酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道一致,证实符合表达框架.结论成功地克隆并构建了ESAT6,Ag85B和MPT64基因的重组表达质粒pGEX-ESAT6,pGEX-Ag85B和pGEX-MPT64.
作者：陈建波；罗一鲁；谭守勇；冯蝶仪；曹智忠；刘志辉 刊期： 2003年第01期
门脉高压症是各种肝硬变的主要继发症.针对该病的并发症之一的脾脏肿大、脾功能亢进,仍采用外科手术切脾治疗[1].我院在切脾手术中,均常规进行自体脾血回输.在目前日益提倡成份输血,严格输血适应症的医疗模式下,脾切除术中自体脾血回输具有临床应用价值.但如何实现自体脾血回输,怎样提高回输成功率是值得探讨的临床护理问题.现将我院1996年3月～2001年3月在术中护理回输脾血328例总结报告如下.
作者：曹春莲；黄翠云 刊期： 2003年第01期
目的分析异位妊娠(EP)的声像图特征及相关实验室检查,探讨异位妊娠的超声诊断价值.方法对93例疑诊异位妊娠患者进行B超检查,对比超声诊断与术后及病理检查结果.结果 B超诊断异位妊娠55例,术后病理检查确诊52例,B超确诊率为94.5%;误诊3例,误诊率为5.5%;B超诊断非异位妊娠38例,有2例后确诊为异位妊娠,漏诊率3.7%.结论 B超检查可作为目前诊断异位妊娠的有效方法.
作者：林启平 刊期： 2003年第01期
目的调查广东省增城市某学院大学生和某小学小学生共4381人乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)的感染情况.方法采用ELISA方法分别检测HBsAg、HbsAb及HBeAg.结果两所学校HBsAg阳性率7.56%、HBeAg阳性率5.71%(其中HBeAg阳性率75.53%)、抗-HBs阳性率53.14%.男性HBsAg阳性率为8.58%,显著高于女性的6.20%(P＜0.01).大学生及小学生的HBsAg阳性率分别为7.9%及4.9%(P＜0.05),抗-HBs阳性率分别为49.7%及79.0%(P＜0.01).结论被调查的增城市学生HBV感染率低于全国平均数10.30%,男性高于女性,大学生HbsAg高于小学生,而抗-HBs阳性率低于小学生.
作者：阮梨娟 刊期： 2003年第01期
目的了解横琴岛嗜人按蚊盐水耐受特性.方法将蚊卵分别放入不同盐度的水中孵化;观察不同盐度水中卵的孵化率、幼虫成活率及成蛹情况.结果 2‰以下盐水中生长的嗜人按蚊与蒸馏水中的无明显差异;10‰盐水中仍有部分的幼虫可以发育成蛹;一、二龄期的幼虫能适应不同盐度,但三、四龄期的幼虫在10‰和15‰的盐水中出现大量死亡.结论珠海横琴岛嗜人按蚊有一定的盐水耐受力.
作者：吴旭光；潘波；林荣幸；朱泰华；阮峰；吴军 刊期： 2003年第01期
目的了解我国新疆细粒棘球绦虫表膜蛋白Eg95的全长基因结构及尝试其在甲醇酵母中表达.方法PCR从细粒棘球蚴头节DNA中扩增含有全长编码区序列(cds)的基因,克隆到T载体中测序.再亚克隆到pMETαA中,构建不带6个组氨酸标签的重组质粒,转化甲醇酵母,分析Eg95全长基因的表达.结果成功扩增了细粒棘球蚴绦虫1262bp的Eg95全长基因,含有两个内含子,外显子核苷酸序列与Genbank中细粒棘球绦虫Eg95 cds完全一致,但扩增的基因与已知的其他Eg95全长基因存在差别.1μg重组质粒的表达盒转化甲醇酵母PMD16,获得了Eg95基因重组工程酵母10个,其中非同源重组子3个.甲醇诱导非同源重组酵母特异表达出了分子量约为17kDa与Eg95cds编码蛋白接近的蛋白.酵母培养上清SDS-PAGE未见该蛋白条带出现,表达的蛋白可能主要位于酵母表面.结论克隆到Eg95属于一个基因家族的成员之一,其基因编码区高度保守,含有内含子的全长基因同样可在酵母中进行表达.
作者：胡旭初；徐劲；陆家海；陈守义；余新炳 刊期： 2003年第01期
目的了解此次传染性非典型肺炎爆发中家庭聚集病例的发病情况,发现其感染来源及传播途径,为防止家庭聚集病例发生提供参考.方法描述性研究、电话随访.结果家庭聚集病例感染主要来自医院,占家庭聚集总病例的77.78%;与病人只有单纯生活接触的发病较少,占家庭聚集总病例的22.22%.
作者：刘维斯；秦鹏哲；蔡文峰；李泽荣；周端华；王鸣 刊期： 2003年第01期
目的探讨危重型肾综合征出血热并急性肾衰患者行血液透析后的死亡原因及防治对策.方法对148例危重型肾综合征出血热并急性肾衰患者行血液透析和药物等综合治疗,统计死亡比例,观察分析死亡原因.结果死亡24例(占16%).死因主要是:消化道出血9例,占37.5%;肺部感染6例,占25%;心衰肺水肿3例,占12.5%;脑水肿、尿毒症、败血症各2例,各占8.3%.结论早期血液透析是降低死亡率的关键,积极防治消化道出血、感染、心衰肺水肿、脑水肿及血透停止时机的选择均对死亡率有较大影响.
作者：文朝晖；叶正华；吴炳坤 刊期： 2003年第01期
老年人睡眠障碍是加速衰老并直接影响健康的常见病症,药物对症治疗效果多不满意[1].我科采用单盲法观察了低能量氦-氖激光血管内照射治疗老年人睡眠障碍取得了一定效果,现报告如下.
作者：林丽珍 刊期： 2003年第01期
目的观察青蒿琥酯(Artesunate)对食蟹猴疟原虫在大劣按蚊体内发育的影响.方法受疟原虫感染实验猴在肌注和静注青蒿琥酯各60mg之前、之后0h、2h各感染一批大劣按蚊;另取部分药前感染的大劣按蚊在感染后第3天和10.5天吸药血,另设一对照组吸正常猴血.各组实验蚊均在感染后第9天解剖蚊胃和第13天解剖涎腺,观察疟原虫在蚊体内发育情况.结果药前组和药后0h组的蚊胃及唾腺感染阳性率均为100%,两组蚊胃卵囊平均密度、卵囊平均大小、子孢子平均感染度都无显著性差异(P＞0.5);药前组和药后2h组蚊胃卵囊平均密度有显著性差异(P＜0.5);大劣按蚊感染后第3天和10.5天吸药血组和吸正常血组,蚊胃卵囊平均密度、卵囊大小、子孢子平均感染度都无显著性差异(P＞0.1,P＞0.5).结论青蒿琥酯对食蟹猴疟原虫在蚊体内的配子生殖、孢子增殖及子孢子进入唾腺无直接的抑制作用.
作者：李艳文；何登贤 刊期： 2003年第01期
目的探讨49例尿道下裂患儿及其家长心理状态,给予必要的、特殊的心理护理,以满足他们特殊的心理需要,使他们能正确对待疾病,积极配合治疗.方法针对不同类型,不同年龄的患儿及家长的心理反应进行观察和护理.结果 49例尿道下裂患儿及家长都能配合治疗和护理,促进了疾病的康复.结论尿道下裂目前尚未有一种十分完美的手术方法,所以护士要耐心帮助和鼓励患儿及家长正确认识疾病及对待治疗效果,全面配合医生治疗,以获得疾病的痊愈.
作者：曾静 刊期： 2003年第01期
目的采用反向高效液相色谱方法分析SIEA28kDa蛋白分子的氨基酸组成.方法用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法测定SIEA28kDa抗原组分样品中氨基酸成分,并在Expasy中数据分析与比较.结果 SIEA28kDa分子抗原主要由13种氨基酸组成.其中,甘氨酸在其氨基酸组成中比值大,在Expasy中根据其氨基酸组成的比值及其一级属性参数比较发现6种Score值较高的血吸虫蛋白质分子,但SIEA28kDa分子与它们均有不同方面的差别.结论 SIEA28kDa分子可能不是6种Score值较高的血吸虫蛋白质分子中的任何1种,但与它们在氨基酸组成上具有较高的相似性,而与GST相似性较低.
作者：谭耀武；汪世平；刘立鹏；徐绍锐 刊期： 2003年第01期
目前,抗HCV检测已广泛应用于HCV感染的诊断及大规模血液筛查.但由于HCV感染窗口期的存在以及某些耐受人群未发生血清转化等,使抗HCV检测未能准确反映患者体内HCV的感染状态.而用于确诊及定量检测HCV感染的PCR、bDNA和NASBA等技术也有各自的局限性.血清HCV抗原的酶免疫检测技术(HCAg EIA)为HCV 感染的早期诊断、大规模筛查、定量检测等提供了较好的技术路线.本文综述了该技术的原理、流程及其效果评估.
作者：夏虎；黄建生 刊期： 2003年第01期
目的了解开平市城区托幼机构儿童蛲虫感染状况和提供防治对策.方法用肛周拭擦法,每天上午8∶00至10∶00采样镜检.结果共检查34所托幼机构8591名儿童,检出有蛲虫卵1036人,阳性率12.2%;其中私立机构阳性率14.4%(404/2744)显著高于公立机构的11.2%(657/5847);各年龄组儿童的感染率无显著性差异.结论应通过加强健康教育,环境消毒和药物防治的综合措施,控制儿童蛲虫感染.
作者：吴松润；司徒荣阮；梁先进；邝会添；陈缘超；吴丽兰；陈健汉 刊期： 2003年第01期
为探讨肿瘤坏死因子(TNF)与急性血吸虫病的关系,我们采用双抗体夹心法,对66例急性血吸虫病患者血清进行TNF的检测,结果显示急性血吸虫病组TNF含量(12.209±8.491),明显高于正常对照组(3.843±1.112),两者有显著性差异P＜0.001,表明TNF与急性血虫病的发病机制有关.
作者：童巧霞；罗端德 刊期： 2003年第01期
目的构建华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础.方法提取华支睾吸虫囊蚴总RNA;用Clontech公司SMARTTM cDNA文库构建试剂盒并按其操作方法进行,进行反转录合成双链cDNA.PCR产物经蛋白酶K消化、纯化后,进行SfiⅠ酶切;用ChromaSpin 400柱将酶切产物进行分级分离,经1.1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,回收0.4～4kb的组分,并与λTriplEx2载体连接;连接产物经体外蛋白包装,产生未扩增文库;检测未扩增文库滴度和重组效率后,进行文库的扩增,并测定扩增文库的滴度;随机挑取9个噬菌斑,用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建的cDNA文库的质量.结果未扩增文库滴度达7.0×107pfu/ml,扩增文库滴度达2.5×108pfu/ml;用载体两端的引物进行PCR鉴定,结果显示:扩增文库中,含1kb以上的占30%左右,1kb～500bp占69%.结论已成功地获得一高质量的华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库.
作者：陈守义；余新炳；徐劲；虢国泰；蒋忠军；吴德；胡旭初；李军涛 刊期： 2003年第01期
目的对OPTION 4 PLUS血液凝固分析仪在临床应用作初步评价.方法用校正血浆、质控血浆、新鲜血浆对仪器的几项主要参数进行检测.结果准确度测定结果PT、APTT、TT、FIB均在质控血浆靶值范围内;混合新鲜血浆测定PT、APTT、FIB的精密度CV%＜2%;FIB有良好的线性Y=37.134-7.172X;抗干扰试验HGB 5g/L、BIL 15.18μmol/L、脂肪乳0.5%不会影响PT测定结果;肝素0.5μ/ml可使APTT延长.结论仪器具有高灵敏度、高可靠性、高实用性,各项指标均符合设计要求,适合于各种类型医院使用.
作者：魏小平；许建邦 刊期： 2003年第01期
目的了解广东省2002年H3N2亚型流感病毒流行及抗原性变异情况.方法用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离,用交叉血凝抑制实验对毒株进行抗原性分析;提取病毒RNA,用一步法RT-PCR扩增血凝素基因(H3A),产物纯化后,并将其克隆到pMD18-T Vector,进行序列测定和分析.结果 2002年1～10月共获得流感病毒246株,其中H3N2亚型210株,占85.4%,H1N1亚型2株,占0.8%,B型34株,占13.8%;2002年流感流行的高峰是6月;抗原性分析显示,2002年广东省H3N2亚型流感病毒A/粤/236/2002和2001年流行株A/粤/448/2001以及目前国内代表株A/闽/151/2001的抗原比分别是5.6和4.0;其HA1区氨基酸序列和国际代表株A/悉尼/5/97同源性为94.2%,有19个氨基酸差异,其中发生在抗原决定族A、B、E上的有6个,受体结合部有3个.结论 2002年广东省流感病毒以H3N2亚型为主,其流行的分子基础是基因变异导致抗原性发生漂移.
作者：鄢心革；陆家海；张欣；彭国文；万卓越 刊期： 2003年第01期
1 测序计划的现状不同于几年前的情况,许多寄生虫基因组研究工作正在进行中并且大量资料已被收集.获得的序列资料可分为3种基本类型:完成或接近完成的基因组序列,通常被称为‘contigs'重叠序列;基因组序列扫描(GSS)标签,由漂浮基因组序列产生(或随机克隆或人工细菌染色体末端序列);以及表达序列标签(ESTs),由来自寄生虫生活史的一个或多个阶段的mRNAs表达产生.至2001年3月30日,在基因库中共有136214寄生虫ESTs及177172寄生虫GSSs的描述.请注意,这些数字是被低估的,因为在序列产生、登上局域网以及在基因库被正式注册之间有一相当长的滞后期.
作者：袁竹青；吴忠道 刊期： 2003年第01期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
