郑玉明
目的了解反义乙型肝炎病毒(HBV)基因转移、表达的抗HBV作用.方法BamHI酶切HBV质粒获取1504bp前C/C基因片段,将其正、反向插入逆转录病毒载体pDOR构建了正、反义前C/C重组体.将重组体转染逆转录病毒包装细胞PA317,G418筛选获取抗性细胞及假逆转录病毒.RT-PCR检测了反义HBV基因表达的反义RNA.将重组假逆转录病毒感染2.2.15细胞,ELISA及斑点杂交法分别检测被感染细胞培养上清中HBsAg、HBeAg及HBV DNA.结果反义前C/C重组逆转录病毒载体在细胞内能转录HBV反义RNA.反义前C/C重组假病毒感染的2.2.15细胞HBsAg、HBeAg的合成分别降低了55.5%、78%;HBV DNA水平也明显低于空白对照组.该抑制具有一定特异性.增加假病毒感染次数在一定范围内能提高抑制作用.正义假逆转录病毒感染对2.2.15细胞HBV DNA水平及抗原合成无影响.结论逆转录病毒载体介导反义HBV基因转移表达的反义RNA能抑制HBV复制及抗原合成,具有潜在应用价值.
作者：杨林；姚集鲁；林丙亮；李刚；卢建溪；刘淑芳 刊期： 2003年第02期
本文通过对范世强、孙立东等采用蝎毒提取液对肺癌、肝癌、乳腺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的临床观察,表明蝎毒及其纯化组分是一种天然有效的抗肿瘤、增强免疫功能,并具有明显的止痛效果,无成瘾性,能减轻放化疗毒副作用,保护肝肾功能,提高生活质量,是一类具有广阔开发前景的新抗肿瘤药物.
作者：刘玉清；吕增春；范景利 刊期： 2003年第02期
目的构建EBV-LMP1基因的杆状病毒重组供体质粒,包装重组LMP1的杆状病毒,感染昆虫细胞进行表达.方法先将已克隆的LMP1 cDNA与线性化的pFASTBAcHTb进行连接,使pFASTBACHTb-LMP1与DH10BAc感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid/LMP1克隆,提取Bacmid/LMP1转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot检测表达情况.结果获得了重组LMP1的杆状病毒,细胞能表达出与LMP1单抗结合的蛋白,分子量为63kDa左右,细胞可直接分泌LMP1蛋白至上清.结论LMP1能在昆虫细胞中获得良好表达,为研究肿瘤疫苗及LMP1在EBV致瘤分子机理中的作用奠定了基础.
作者：林勇平；吴淑华；杨英；汤郡；马桂璋 刊期： 2003年第02期
本文在多年实践的基础上,对制作寄生虫虫卵永久性玻片标本的方法进行了改进,并详细介绍了两种具体制作方法.用改进方法制作的标本,虫卵能保持原来的形态及色泽,清晰可见,易于辨认,并可永久保存,有效地解决了使用传统方法制作的寄生虫虫卵玻片标本易出现气泡、空隙和发霉,虫卵变形,不便观察和保存的问题.
作者：樊中丽 刊期： 2003年第02期
目的构建恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ琥珀酸-泛醌还原酶辅基铁-硫蛋白(iron-sulfur protein,Ip)基因原核表达质粒pET28α-Ip,测定Ip基因序列,为研究铁-硫蛋白基因功能奠定基础.方法采用PCR技术从恶性疟原虫海南株基因组DNA中扩增出Ip基因,扩增产物经纯化后,用BamHI+XhoI双酶切,定向克隆人pET28α质粒,转化大肠杆菌DH5α,再用BamHI+XhoI酶切及PCR扩增对重组子进行鉴定.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定,并进行同源性比较.结果筛选出编码海南株Ip基因的原核表达质粒pET28α-Ip,海南株Ip基因序列与K1、3D7株高度同源.结论pET28α-Ip重组质粒的构建,为进一步研究铁-硫蛋白基因奠定基础.
作者：马长玲；余新炳；单志新；吴忠道；徐劲 刊期： 2003年第02期
目的了解大专学生的心理健康状况,为学生的健康教育和心理咨询提供合理建议.方法采用症状自评量表(SCL-90)对教育学院102名学生进行问卷调查.结果大专学生除了敌对一项与全国常模相近无差异(P＞0.05)外,躯体化低于全国常模(P＜0.01),其他各项均值高于全国常模(P＜0.01).结论大专学生心理健康状况不容乐观,应加强心理健康教育及心理咨询.
作者：陈旸 刊期： 2003年第02期
葡萄糖酸盐阿奇霉素(Azithromycin)是第一个氮环内酯类半合成抗生素,化学名为9-脱氧-9a-氮杂-9a-甲基-9a-红霉素,它通过红霉素分子结构甙基环的9a位上甲基氮杂环将内酯环扩展为15环,其独特的结构使之具有独特的药代动力学特点及广谱的抗菌活性.本文就其特性、临床应用、药物相互作用作一综述.
作者：梁艳冰；马中富 刊期： 2003年第02期
目的通过分析19例多发性硬化的临床表现及诊断,加深本地区对多发性硬化知识的提高,减少误篌诊、提出诊断该病的几个值得注意的问题.方法对19例多发性硬化病例临床表现及诊断进行回顾分析.结果多发性硬化临床表现复杂、发病快慢不一,病程长短不一,单靠临床表现诊断较为困难,结合脑脊液、免疫学、CT、MRI检查可提高该病的确诊率.结论多发性硬化临床表现复杂,易误诊,结合脑脊液、免疫学、CT、MRI等影像学检查可提高该病的确诊率.
作者：梁可珍；黄燕 刊期： 2003年第02期
目的调查南通市几类人群中输血传播病毒(TTV)、庚型肝炎病毒(HGV)和人巨细胞病毒(HCMV)的感染状况.方法选择献血员、非肝病人群、急性病毒性肝炎(AH)与慢性病毒性肝炎(CH)患者、肝炎肝硬化(LC)以及原发性肝癌(PHC)患者为调查对象.采用半巢式聚合酶链反应检测TTV DNA、巢式聚合酶链反应检测HGVRNA、核酸斑点杂交法检测HCMV DNA.采用微量细胞毒试验方法检测人外周血T细胞亚群.结果义务献血员、非肝病人群、AH、CH、LC和PHC人群的TTV感染率分别为9.2%、24.0%、46.6%、41.6%和63.6%,后三种人群的感染率显著高于义务献血员(P＜0.01).HGV感染率在有偿献血员、AH、CH和LC人群中分别为2.9%、9.6%、17.6%和13.8%,但各组之间无统计学差异(P＞0.05).HCMV在非肝病人群、AH、CH和LC人群中的感染率各为26.7%、38.9%、65.8%和77.8%,CH组与LC组的感染率显著高于非肝病人群(P＜0.01).结论HGV、TTV、HCMV在南通市人群包括献血员中有一定的感染率,在筛选献血员时有必要对此三种病毒进行检测,以防止其经输血途径传播.
作者：汪晓莺；汤伟；张冬雷；季玉红 刊期： 2003年第02期
目的构建PGEX-6P-3-CCT原核表达载体,获得大量纯化的LMP1羧基端蛋白.方法通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBVLMP1 CCT cDNA,克隆至PGEM-T easy载体上并测序.利用引物上的BamH I与EcoRI酶切位点将CCT基因插入PGEX-6P-3,转化大肠杆菌BL21,限制性内切酶消化鉴定.IPTG诱导重组菌株表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定,并用Sepharose 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行解离.结果扩增的LMP1 CCT长度为597bp,测序结果与已知序列吻合.重组子经酶切鉴定,获得PGEX-6P-3-CCT原核表达菌株,Western blot表明重组蛋白能被LMP1单克隆抗体特异结合.获得约51kDa的PGEX-6P-3-CCT融合蛋白,分离纯化出约21kDa的LMP1 CCT蛋白.结论成功获得EBV LM1 CCT蛋白,为研究LMP1致瘤机制,研制生物抗癌药物奠定基础.
作者：张雪雁；汤郡；杨英；马桂璋 刊期： 2003年第02期
目的构建抗腮腺炎病毒抗体Fab段基因重组表达载体.方法从腮腺炎患者和腮腺炎抗体IgG阳性正常人群的淋巴细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA.用相应的引物进行PCR,扩增出轻链和重链Fd段基因,经酶切后分别和噬粒载体pComb3连接,再经电穿孔转化大肠杆菌XL1-blue菌株,将轻链和重链Fd基因先后克隆入pComb3中.结果从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700bD大小的κ、λ和Fd基因.PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5kv,200Ω,25μF的条件下电转化,终转化率为:2.48×107.随机挑取电转化后的10个菌落,经PCR鉴定,共有5个克隆同时含有轻链和重链Fd基因,抗体Fab的重组率为50%.结论获得的抗体Fab重组表达载体是高效、实用的,为下一步构建抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库打下基础.
作者：俞慕华；黄文繁；姜立民；黄锐敏；温群文；戴传文；叶友松 刊期： 2003年第02期
目的评价预防性气管插管在危重中毒病人洗胃时的疗效和价值.方法140例危重中毒患者采用预防性气管插管后洗胃,与100例未采用预防性气管插管洗胃的中毒病人进行对比.结果采用预防性气管插管的140例危重中毒患者均成功洗胃,而未采用预防性气管插管洗胃的100例危重中毒患者中,有24例未成功洗胃,有13例死亡,死亡率为13%.结论对重度中毒患者应采用预防性气管插管后洗胃,可减少死亡率.
作者：梁东良；张平；石金河；杨玉海；杨蕾 刊期： 2003年第02期
目的构建大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因重组质粒.方法从雌性SD大鼠脑组织中提取总RNA,根据OSCP基因已知序列,设计合成1对引物,用PCR方法扩增编码0SCP的基因片段,插入pGEM-T easy质粒,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,经酶切鉴定,而后进行测序.结果OSCP基因体外扩增产物大小为700bp,重组质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子,测序结果与已知序列基本吻合.结论在国内初次克隆了大鼠0SCP基因,为下一步OSCP的表达及功能研究奠定了基础.
作者：王海龙；庞敏；殷国荣；乔中东 刊期： 2003年第02期
目的探讨拉米呋啶联用丹参治疗CHB肝纤维化的效应.方法选择我院住院和门诊确诊为CHB以及肝纤维化血清学指标HA、PCⅢ、Ⅳ-C和LN均升高的患者125例,随机分为拉米呋啶+丹参组(Ⅰ组)50例,单用拉米呋啶组(Ⅱ组),丹参组(Ⅲ组)和对照组(Ⅳ组)各25例.4组的基本护肝治疗相同.拉米呋啶100mg 1次/d;丹参片4片3次/d,对照组仅用基本护肝药,疗程为1年.初治疗3个月每2w检查肝功能,HBV标志物、HBVDNA和HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN 1次,以后每月检查1次.结果ALT复常率各治疗组均明显优于对照组(P＜0.05);Ⅰ组明显优于Ⅱ组、Ⅲ组(P＜0.05),Ⅱ组明显优于Ⅲ组(P＜0.05),Ⅲ组与Ⅳ组无显著性差异(P＞0.05).HBeAg/抗HBe转换率,Ⅰ、Ⅱ组分别是36%和32%,无显著性差异(P＞0.05),Ⅲ组、Ⅳ组无转换者.肝纤维化血清检测4项指标,各治疗组均明显优于对照组(P＜0.05),Ⅰ组明显优于Ⅱ、Ⅲ组(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ组无显著性差异(P＞0.05).结论拉米呋啶联用丹参治疗CHB肝纤维化有协同作用.疗效均优于单用组和对照组.
作者：陈银石 刊期： 2003年第02期
对医学院校寄生虫学教学的改革,认为要从以下四方面入手:更新教育观念;改革教学内容;改革教学方法与手段,加强教学信息的沟通;重视动手能力和创新能力的培养.
作者：翁培兰 刊期： 2003年第02期
目的探讨手指血与静脉血中葡萄糖浓度的关系.方法用血糖仪和全自动生化分析仪测定.结果同一病人的手指血与静脉血葡萄糖浓度在血糖仪上的结果一致(P＞0.05).结论血糖仪检测手指血结果准确可靠.
作者：吴人凤 刊期： 2003年第02期
氧化苦参碱具有抗病毒、免疫调节、保肝、抗炎、抗肝纤维化和抗肿瘤作用,本文对其治疗肝病的作用机理和临床应用作一概述.
作者：李常青；李小翚 刊期： 2003年第02期
目的了解2002年广州市登革热流行的临床特征.方法回顾性分析978例登革热患者的临床特征.结果临床特征为发热(100%),头痛(91.31%),全身肌痛(69.02%),骨痛(49.49%),皮疹(59.2%),白细胞及血小板显著减少分别占62.47%、62.26%;淋巴结肿大、肝肿大及脾肿大较少,分别占9.61%、3.78%、5.21%;而合并肝脏损害多(72.39%),肾脏损害较少(0.2%).结论本次登革热流行规模大,临床表现典型,合并肝脏损害较多.
作者：陈燕清；张复春；王建 刊期： 2003年第02期
目的分析热区抗洪抢险官兵常见疾病种类和发病时间分布规律,为未来抗洪卫勤保障和疾病防治提供依据.方法回顾调查了1061名抗洪官兵发病情况,结合相关历史资料进行分析.结果热区抗洪抢险常见疾病种类包括:皮肤病、上呼吸道感染、腹泻、中暑、外伤和红眼病;疾病发生随洪峰的出现、险情的增加成波状起伏;发病率陡升缓降,于第7～10天达到高峰,第12～15天后下降明显;各种疾病均有50%以上的病例出现在头10d.结论抗洪抢险发病趋势和洪峰、险情关系密切;抗洪早期尤其是头10d,是疾病预防和治疗的重点和难点时期,此阶段卫勤保障工作的成效决定整个抗洪抢险卫勤保障的成败.
作者：王庆；苏大为；姚卫光；敬建军 刊期： 2003年第02期
目的了解贯众(Dryopteris crossirhizomz)不同提取液对革兰氏阳性球菌的抑菌作用.方法分别用水以及3种不同pH值的70%乙醇为溶媒提取贯众干品以制备贯众提取液,利用打孔法和试管稀释法测定提取液对13种微生物的抑制效果.结果每1ml含生药1g的贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,尤其是革兰氏阳性球菌如金黄色葡萄球菌和甲型溶血性链球菌等.对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用较弱,但对普通变形杆菌则有较强的抑制作用.不同pH值的抽提溶剂对药物的有效抑菌成份的提出效果不同,抽提溶剂pH越小,有效成份的提出效果越好.结论贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,尤其是对革兰氏阳性球菌,而对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用则较弱.贯众的抗菌成份易溶于水,抽提效果随pH减小而增加.
作者：罗海华；潘实清；刘长秀；周红；龙启才；周金美 刊期： 2003年第02期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
