学术投稿

大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因的体外扩增及克隆

王海龙;庞敏;殷国荣;乔中东

关键词:寡霉素敏感相关蛋白, 克隆, 重组质粒, 膜受体, ATP合成酶
摘要:目的构建大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因重组质粒.方法从雌性SD大鼠脑组织中提取总RNA,根据OSCP基因已知序列,设计合成1对引物,用PCR方法扩增编码0SCP的基因片段,插入pGEM-T easy质粒,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,经酶切鉴定,而后进行测序.结果OSCP基因体外扩增产物大小为700bp,重组质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子,测序结果与已知序列基本吻合.结论在国内初次克隆了大鼠0SCP基因,为下一步OSCP的表达及功能研究奠定了基础.
热带医学杂志相关文献
  • 兴宁市城乡中小学生视力不良现况调查

    目的了解广东省兴宁市城乡中小学生视力不良现况.方法对市教育局直属城乡20所中小学,其中中学14所,小学6所共36032名学生进行普查,采用统一的灯箱对数视力表,悬挂时5.0行与被检查者双眼同一水平高度;检查距离为5m,检查人员经过统一培训,统一操作方法和程序.判断标准:被检查者单侧裸视力<5.0为视力不良.视力不良分类标准:4.9为轻度视力不良,4.6~4.8为中度视力不良,≤4.5为重度视力不良.结果检查学生36032名,视力不良14543人,视力不良率为40.36%.随年级增高而明显上升,差异有统计学意义(P<0.01),并有逐年递增趋势(P<0.01).城镇学生视力不良率高于乡村学生,差异有统计学意义(P<0.01).结论中小学生视力不良与学生课业负担重、视近时间、坐姿、读写习惯、用眼卫生等因素有关.因此应对师生,特别是小学生进行广泛卫生知识教育,养成良好的用眼卫生习惯,从根本上降低青少年学生视力不良的发生.

    作者:罗国清;黄德恩;吴艳丽 刊期: 2003年第02期

  • EBV-LMP1基因杆状病毒表达载体的构建及其在昆虫细胞中的表达

    目的构建EBV-LMP1基因的杆状病毒重组供体质粒,包装重组LMP1的杆状病毒,感染昆虫细胞进行表达.方法先将已克隆的LMP1 cDNA与线性化的pFASTBAcHTb进行连接,使pFASTBACHTb-LMP1与DH10BAc感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组Bacmid/LMP1克隆,提取Bacmid/LMP1转染昆虫细胞Sf9包装杆状病毒,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot检测表达情况.结果获得了重组LMP1的杆状病毒,细胞能表达出与LMP1单抗结合的蛋白,分子量为63kDa左右,细胞可直接分泌LMP1蛋白至上清.结论LMP1能在昆虫细胞中获得良好表达,为研究肿瘤疫苗及LMP1在EBV致瘤分子机理中的作用奠定了基础.

    作者:林勇平;吴淑华;杨英;汤郡;马桂璋 刊期: 2003年第02期

  • 协同刺激分子B7-1/2对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

    目的观察协同刺激分子B7-1/2(CD80/CD86)对日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的影响,探讨B7-1/2介导Th1/Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用.方法取小鼠感染后6、8、10和12w的脾淋巴细胞用抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后培养72h,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化.结果抗CD80mAb和抗CD86mAb对IFN-γ的抑制作用不明显,但二者均能显著抑制IL-4的表达水平,尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用非常显著.结论通过干预B7:CD28协同刺激途径可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平,而且B7-2分子对Th2反应的影响作用大于B7-1分子.B7:C1D28协同刺激途径可以调节Th1/Th2免疫偏移,为控制日本血吸虫肉芽肿病变提供了一种新途径.

    作者:田芳;夏超明;骆伟;龚唯;周卫芳 刊期: 2003年第02期

  • 儿童肺吸虫病79例临床分析

    目的通过分析儿童肺吸虫病的临床特征,提高对儿童肺吸虫病的认识,减少误诊.方法对79例不同类型儿童肺吸虫病进行回顾性分析.结果治疗后患者自觉症状消失,治愈率较高.结论儿童不同类型肺吸虫病临床表现虽然复杂,但结合流行病学,经临床及血清学检查,就能及时确诊,79例儿童肺吸虫病药物治疗,疗效满意.

    作者:张光玉;黄朝芬;王云甫;宋明华 刊期: 2003年第02期

  • 慢性肺心病急性期患者血浆P-选择素和血栓烷B2含量改变意义的研究

    目的探讨慢性肺心病急性期患者血浆P-选择素和血栓烷B2(TXB2)含量变化及相互关系的意义.方法用ELISA法和放射免疫分析法分别检测了50例慢性肺心病急性期患者和20例正常对照血浆P-选择素和TXB2的含量.结果患者血浆P-选择素含量明显高于正常对照组(42.7±10.3ng/L vs 24.7±8.9ng/L,P<0.01),患者血浆TXB2含量亦明显高于正常对照组(124.3±23.7ng/L vs 67.2±16.7ng/L,P<O.01),且在患者中,血浆P-选择素含量和TXB2含量之间成明显的正相关性(r=0.725,P<0.01).结论慢性肺心病患者在急性期血小板功能处于活跃状态,可能与P-选择素和TXB2升高有关,两者一起可能参与了慢性肺心病急性期的发病过程.这提示在慢性肺心病急性期的治疗中同时使用抗血小板的药物有重要意义.

    作者:黄冠华;马中富;刘秀琴 刊期: 2003年第02期

  • 广州市978例登革热的临床特征分析

    目的了解2002年广州市登革热流行的临床特征.方法回顾性分析978例登革热患者的临床特征.结果临床特征为发热(100%),头痛(91.31%),全身肌痛(69.02%),骨痛(49.49%),皮疹(59.2%),白细胞及血小板显著减少分别占62.47%、62.26%;淋巴结肿大、肝肿大及脾肿大较少,分别占9.61%、3.78%、5.21%;而合并肝脏损害多(72.39%),肾脏损害较少(0.2%).结论本次登革热流行规模大,临床表现典型,合并肝脏损害较多.

    作者:陈燕清;张复春;王建 刊期: 2003年第02期

  • 大专学生心理健康状况调查分析

    目的了解大专学生的心理健康状况,为学生的健康教育和心理咨询提供合理建议.方法采用症状自评量表(SCL-90)对教育学院102名学生进行问卷调查.结果大专学生除了敌对一项与全国常模相近无差异(P>0.05)外,躯体化低于全国常模(P<0.01),其他各项均值高于全国常模(P<0.01).结论大专学生心理健康状况不容乐观,应加强心理健康教育及心理咨询.

    作者:陈旸 刊期: 2003年第02期

  • 浅谈医学院校寄生虫学教学改革

    对医学院校寄生虫学教学的改革,认为要从以下四方面入手:更新教育观念;改革教学内容;改革教学方法与手段,加强教学信息的沟通;重视动手能力和创新能力的培养.

    作者:翁培兰 刊期: 2003年第02期

  • 生命科学研究的重大发现--2002年诺贝尔生理学/医学奖与秀丽新杆线虫介绍

    因在器官发育及细胞程序性死亡的遗传调节方面所作出的突出贡献,Sydney Brenner,H.Robert Horvitz及Joln E.Sulston荣获2002年度诺贝尔生理学/医学奖.本文概要介绍这一生命科学的重大发现,以及这一科学发现和其它生命科学研究所用的优秀模型生物-秀丽新杆线虫.

    作者:林瑞庆;陈红玲;朱兴全;宋慧群 刊期: 2003年第02期

  • 热区抗洪抢险部队发病规律研究

    目的分析热区抗洪抢险官兵常见疾病种类和发病时间分布规律,为未来抗洪卫勤保障和疾病防治提供依据.方法回顾调查了1061名抗洪官兵发病情况,结合相关历史资料进行分析.结果热区抗洪抢险常见疾病种类包括:皮肤病、上呼吸道感染、腹泻、中暑、外伤和红眼病;疾病发生随洪峰的出现、险情的增加成波状起伏;发病率陡升缓降,于第7~10天达到高峰,第12~15天后下降明显;各种疾病均有50%以上的病例出现在头10d.结论抗洪抢险发病趋势和洪峰、险情关系密切;抗洪早期尤其是头10d,是疾病预防和治疗的重点和难点时期,此阶段卫勤保障工作的成效决定整个抗洪抢险卫勤保障的成败.

    作者:王庆;苏大为;姚卫光;敬建军 刊期: 2003年第02期

  • HCV核心蛋白片段的表达、纯化及免疫原性检测

    目的探讨HCV核心蛋白N端119aa片段表达产物的抗原性及用于抗-HCV抗体检测的可能性.方法把HCV C119-pET32a/BL21重组菌进行发酵表达,提取包涵体,并用阳离子柱进一步纯化目的蛋白.用Western blot及ELISA分析该融合蛋白的免疫特异性及敏感性.结果所表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20%,SDS-PAGE结果表明所纯化的目的蛋白纯度大于95%.Western blot及ELISA结果显示该融合蛋白具有良好的免疫特异性,所检测的47份临床HCV感染血清的阳性率为91.5%,而阴性对照及HBV感染血清则未见阳性结果.结论该HCV C119融合蛋白检测HCV感染患者血清具有良好的特异性和敏感性,可望用于HCV抗体检测试剂盒的研制.

    作者:吴娴波;陈白虹;卢建溪;吴英松;张彦明;王萍;董文其;李明 刊期: 2003年第02期

  • ALT测定的比较和实验观察

    目的观察ALT连续监测法不同试剂盒的可比性,规范酶活性浓度测定.方法选用四种方法学相同的试剂盒同时在自动生化分析仪上测定后进行比较.结果台湾元生、北京中生和上海长征公司试剂盒之间在<800U/L内无显著性差异(P>0.05),而标佳产品有差异,但无非常显著性差异(0.01<P<0.05).当ALT>800U/L时,各试剂盒间均有极显著性差异(P<0.01).高活力血清标本经稀释后测定,各试剂盒间无显著性差异(P>0.05).结论酶活力测定时,选择适宜试剂盒,根据酶反应线性期的反应速度计算酶活性浓度,观察试剂空白吸光度、动力学空白、起始吸光度等是检测结果准确性的保证.

    作者:高宪成 刊期: 2003年第02期

  • PCR-SSCP技术及其在寄生虫学上的应用

    聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术是一种简便、快速、灵敏的基因突变分析方法,能有效地检出碱基突变.目前,该方法在寄生虫学领域已得到日益广泛和深人的应用,尤其是近几年来用于寄生虫的分子分类学、分子遗传学、虫种及虫株鉴定等方面的研究已取得了很大的成功.本文综述了该技术的基本原理、影响因素、研究进展及其在寄生虫学方面的应用.

    作者:陈红玲;林瑞庆;朱兴全;李国清 刊期: 2003年第02期

  • 紫外线照射日本血吸虫尾蚴疫苗保护性抗原的筛选

    目的分析经紫外线照射处理后日本血吸虫尾蚴蛋白的差异性表达,并从中筛选出有效的保护性抗原组分.方法收集尾蚴,制备抗原,进行SDS-PAGE电泳后,转印至硝酸纤维素膜上,与照射尾蚴免疫血清和正常感染血清分别进行免疫印渍(Western blot)试验,比较两者反应条带的差异性,筛选出惟有免疫血清所能识别的特有的抗原组分,并测定其分子量.结果在童虫抗原中发现一条能被免疫血清所识别的特异性抗原条带,并测得其分子量为75kDa.结论紫外线照射致弱尾蚴可诱导宿主产生特异性抗体,被该抗体所识别的抗原分子量为75kDa.

    作者:侯红斌;李雍龙 刊期: 2003年第02期

  • 大力开展浙江省结核病控制项目的体会

    目的了解瑞安市大力开展浙江省结核病控制项目,切实有效地预防与控制结核病的传播与流行.方法根据<浙江省结核病控制项目实施方案>的精神,特制订<瑞安市结核病控制项目实施细则>.结果(1)明确项目组织与分工,具体实施市疾控中心对本市贫困肺结核病人抗结核药品及辅助检查费的减、免审核批准,负责全市结核病防治业务的归口管理,落实肺结核病的诊断、治疗、管理及有关技术规范.(2)通过项目宣传及培训,促使医疗单位对病员报告及转诊管理,提高了结防督导员的业务水平和归口管理能力.(3)通过项目督导和督查,提高了肺结核病人的管理率、规则治疗率,且使门诊肺结核病人诊治数大大增加,2001年门诊初诊数为654例,菌阳数124例;2002年同期达到1200例,菌阳数238例.结论结防工作中也反映出我市基层防保队伍力量和人员素质低下,多数医疗单位不重视归口管理工作,痰检阳性率低,为此,完善督导机制,加强随访,努力提高菌阳检出率是非常迫切和必要的.

    作者:郑玉明 刊期: 2003年第02期

  • 白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶检测结合对急性心肌梗死的早期诊断价值

    目的观察白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)检测相结合对急性心肌梗死的早期诊断价值.方法前瞻性研究因胸痛而就诊的病例625例,观测心电图变化及血液肌酸磷酸激酶及其同工酶,白细胞总数及分类,肌钙蛋白T等的变化,后统计并比较各指标尤其是白细胞分类并肌酸磷酸激酶同工酶对急性心肌梗死的早期诊断价值.结果急性心肌梗死胸痛发生后12h内相对淋巴细胞减少的敏感性高(61.3%);肌酸磷酸激酶同工酶并自细胞分类对急性心肌梗死诊断的特异性和诊断有效性,与心电图有诊断意义的ST段抬高相近,而敏感性明显高于后者(46.8%vs38.7%,P<0.05).结论肌酸磷酸激酶同工酶与白细胞分类两个指标相结合,敏感性和特异性均较高,对急性心肌梗死的早期诊断有较大的临床价值.

    作者:马中富;梁艳冰;詹红;叶海宁;曾春;何建桂;马虹 刊期: 2003年第02期

  • 多发性硬化19例临床分析

    目的通过分析19例多发性硬化的临床表现及诊断,加深本地区对多发性硬化知识的提高,减少误篌诊、提出诊断该病的几个值得注意的问题.方法对19例多发性硬化病例临床表现及诊断进行回顾分析.结果多发性硬化临床表现复杂、发病快慢不一,病程长短不一,单靠临床表现诊断较为困难,结合脑脊液、免疫学、CT、MRI检查可提高该病的确诊率.结论多发性硬化临床表现复杂,易误诊,结合脑脊液、免疫学、CT、MRI等影像学检查可提高该病的确诊率.

    作者:梁可珍;黄燕 刊期: 2003年第02期

  • 预防性气管插管在急性中毒病人中的应用研究

    目的评价预防性气管插管在危重中毒病人洗胃时的疗效和价值.方法140例危重中毒患者采用预防性气管插管后洗胃,与100例未采用预防性气管插管洗胃的中毒病人进行对比.结果采用预防性气管插管的140例危重中毒患者均成功洗胃,而未采用预防性气管插管洗胃的100例危重中毒患者中,有24例未成功洗胃,有13例死亡,死亡率为13%.结论对重度中毒患者应采用预防性气管插管后洗胃,可减少死亡率.

    作者:梁东良;张平;石金河;杨玉海;杨蕾 刊期: 2003年第02期

  • 布地奈德混悬液雾化吸入治疗肺炎型哮喘的临床分析

    目的探索布地奈德混悬液雾化吸入治疗儿童肺炎型哮喘的临床疗效.方法随机将60例肺炎型哮喘患儿分为两组,在综合治疗的基础上,观察组30例,给予布地奈德混悬液,加用沙丁胺醇、溴化异丙托品雾化液吸入治疗;对照组30例,给予口服强的松片,加用沙丁胺醇、溴化异丙托品雾化液吸入治疗.观察用药后患儿症状体征(呼吸困难、咳嗽、喘息、肺部喘鸣音及湿哕音)改善情况、消失天数及全身激素(静脉和口服)应用天数.结果用药后观察组患儿临床症状体征改善分数明显优于对照组(P<0.05);观察组临床症状消失天数及全身激素应用天数明显短于对照组(P<0.05).结论布地奈德混悬液雾化吸入治疗儿童肺炎型哮喘临床疗效肯定,可缩短病程,减少全身激素用量.

    作者:滕丽珍;鞠忠玲;许志红 刊期: 2003年第02期

  • 吻合器环形痔切除术(PPH)的围手术期护理

    目的探讨吻合器环形痔切除术围手术期护理的方法.方法对72例重度痔手术患者进行术前心理护理、肠道准备、术后排便护理、饮食指导及并发症的观察.结果72例患者全部止血,70例患者的痔块完全回缩.结论PPH术具有根治性高、并发症少等特点,加强围手术期护理对增加患者手术信心、提高病人舒适度、减少并发症的发生有重要的作用.

    作者:陈晓媛;陈昕 刊期: 2003年第02期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会