钱晓东;姚冲;周桂芬;吕圭源;沈飞;冷华南;李晓红
目的:克隆香叶醇-10羟化酶(geraniol 10-hydroxylase,G10H)基因,进行生物信息学分析,并在不同广藿香栽培种中分析不同时期的茎、叶的表达情况.方法:搜索广藿香转录组数据库,获得G10H基因全长序列,并设计全长引物进行PCR验证;利用生物信息学软件对PcG10H1基因进行生物信息学分析,实时定量PCR法对其进行了时空表达分析.结果:将获得的广藿香香叶醇-10羟化酶基因命名为PcG10H1(GenBank登录号为KF926077),该基因包含一个完整的长1 533 bp的开放阅读编码框,编码510个氨基酸.分析了PcG10H1基因编码蛋白的理化特性.分析发现其有1个跨膜区,无信号肽;PcG10H基因编码的氨基酸序列与胡黄连G10H基因编码的氨基酸序列为接近;PcG10H1在老叶和老茎中表达量高,在老叶中表达量高;从不同栽培种来看,PcG10H1在石牌广藿香和高要广藿香中表达模式相似,在海南广藿香与印尼广藿香中表达相似.结论:成功克隆了广藿香PcG10H1的全长序列且进行了序列分析,并对其在不同栽培种的表达模式进行了探讨,为进一步阐明广藿香萜类代谢途径奠定基础.
作者:欧阳蒲月;李亚萍;梁永枢;夏黎 刊期: 2017年第02期
目的:研究超临界CO2流体提取瓜馥木挥发油的条件,并与水蒸气蒸馏法提取的瓜馥木挥发油化学成分进行比较研究.方法:主要探讨压力、温度、时间、流量等条件对萃取率的影响,确定超临界CO2萃取瓜馥木挥发油的佳条件;采用气相色谱-质谱(GC-MS)法对超临界CO2流体提取和水蒸气蒸馏提取的挥发油进行了化学成分的分析鉴定,用峰面积归一化法计算了各成分的相对百分含量.结果:瓜馥木挥发油的佳萃取压力为30 MPa,温度为55℃,萃取时间4h,CO2流量为30 L/h;解析釜Ⅰ压力为12 MPa,温度为50℃;解析釜Ⅱ压力为5 MPa,温度为40℃.超临界CO2提取的挥发油中,从解析釜Ⅰ提取物中共鉴定出49种化学成分,占总量的84.30%,主要成分为β-石竹烯(34.03%);从解析釜Ⅱ提取物中共鉴定21种化学成分,占总量的87.54%,主要成分为肉豆蔻酸(37.07%);从水蒸气蒸馏法提取的挥发油中共鉴定出41种化学成分,占总量的25.09%,其主要成分为烃类.结论:两种提取方法得到的瓜馥木挥发油组分大致相近,但含量有较大差异,超临界CO2萃取法更适合提取瓜馥木挥发油.
作者:伍艳婷;傅春燕;刘永辉;刘慧;李蓉;陈波 刊期: 2017年第02期
目的:研究悬钩子木的三萜类化学成分及其生物活性.方法:采用ODS中低压制备液相色谱、SephadexLH-20柱、反相制备高效液相色谱等现代色谱技术进行分离纯化.根据理化性质及核磁共振、高分辨质谱等光谱方法进行结构鉴定.采用MTT法测定单体化合物的细胞毒活性.结果:从悬钩子木的乙酸乙酯提取物分离得到12个三萜类化合物,分别鉴定为:2a,3β,19α-三羟基-24-酮-齐墩果-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、2α,3α,19α-三羟基-24-酮-乌苏-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、2α,3β,19α-三羟基-24-酮-乌苏-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、2α,3β,19α-三羟基-24,28-二酸-乌苏-12-烯-28-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、2α,3β,19α,23-四羟基-乌苏-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、2α,3β,19α,24-四羟基-乌苏-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、2α,3β,19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、2α,3β,19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸(8)、2α,3β,19α-三羟基-24-酮-乌苏-12-烯-28-酸(9)、2β,3β,19α-三羟基-乌苏-12-烯-28-酸(10)、2-氧代-坡模酸(11)、坡模酸(12).活性检测表明化合物12在100 μmol/L具有较好的细胞毒活性.结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中,化合物1、3、4、7、9为首次从悬钩子属植物中分离得到.化合物12具有较好的细胞毒活性.
作者:任珊珊;张屏;格根塔娜;布仁;陈建平;包保全 刊期: 2017年第02期
目的:预测竹叶柴胡潜在适生区,对物种保护和资源合理利用提供参考.方法:基于竹叶柴胡134个空间分布点和16个生态因子数据,运用MaxEnt模型和GIS空间分析技术构建竹叶柴胡的潜在分布,并量化其适宜生态因子阈值.结果:竹叶柴胡的高适生区面积占研究区总面积的12.99%,主要分布在鄂西北地区(陕西、河南、重庆和湖北的交界处)、陇南、滇中、两广北部和赣西;较适生区面积占研究区总面积的18.89%,主要分布在高适生区域周围;次适生区和不适生区分布面积分别占研究区总面积的30.97%和37.15%.冷季平均气温、年降水量、气温年较差、生长期降水、平均气温日较差、冷季降水量和等温性是影响竹叶柴胡分布的主要生态因子.因子权重与贡献率之间存在正相关关系.结论:本研究结果为竹叶柴胡的野生资源保护及其相关研究提供了技术手段和数据支持.
作者:王丹;卫海燕;杨洋;尚忠慧;顾蔚 刊期: 2017年第02期
目的:对龙葵及其近缘种进行ITS2分子鉴定,确保药材质量和临床安全用药.方法:收集各产区的不同基原龙葵及其近缘种共61份样品,采用DNA试剂盒提取方法,提取DNA,经PCR扩增后测序,采用CodonCode Aligner V5.1.2对测序序列进行峰图质量分析,基于MEGA5.1中的K2P模型计算龙葵及其近缘种的种内、种间遗传距离及构建系统聚类树.结果:龙葵及近缘种的DNA提取率为100%,龙葵两个基原的ITS2序列长度均为210 bp,ITS2序列变异较小.龙葵与少花龙葵的ITS2序列与其近缘种的大种内距离均小于与其近缘种的小种间距离.基于ITS2序列构建NJ树,龙葵、少花龙葵各自聚为一支,并且与其他近缘种明显分开.同时基于条形码鉴定标准操作流程成功将药材市场购买的龙葵药材进行鉴定,购买的22份龙葵药材样品中只有2份鉴定为龙葵,2份鉴定为少花龙葵,其余均为红果龙葵.结论:药材市场上龙葵药材掺伪情况严重,基于ITS2序列能够准确鉴定龙葵及其近缘种,确保临床安全用药.
作者:陈小露;柏宁宁;向丽;孙伟;梅全喜 刊期: 2017年第02期
目的:利用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用法(UPLC-QQQMS)比较不同种类、不同产地及不同处理下肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的含量.方法:将肉苁蓉干燥品用含内标的甲醇溶液超声提取后,用ZORB-AX Eclipse XDB-C1s柱(50mm×2.1 mm,1.8 μm)分离,以A相(0.1%甲酸水溶液)-B相(甲醇)作为流动相进行梯度洗脱,利用电喷雾离子(ESI)源,在UPLC-QQQMS的动态多反应模式(Dynamic-MRM)下检测.结果:检测结果显示,同一种肉苁蓉经过冷冻干燥处理后,其苯乙醇苷类化合物松果菊苷(echinacoside)和毛蕊花糖苷(acteoside)的总含量显著高于人为烘干及自然风干处理的肉苁蓉样品.而所测定的14种有效成分在自然风干的肉苁蓉中的含量均较人为烘干的肉苁蓉高.不同种肉苁蓉,其松果菊苷和毛蕊花糖苷的总含量顺序为:管花肉苁蓉>盐生肉苁蓉>肉苁蓉.松果菊苷和毛蕊花糖苷在不同产地的盐生肉苁蓉中的测定结果表明,产于新疆塔城的明显高于新疆察布查尔县和新疆布尔津县.结论:不同种类、不同产地及不同处理下肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物含量的差异较大.
作者:王力伟;曹瑞;房永雨;赵邯郸;马超美;何江峰 刊期: 2017年第02期
目的:确定指标权重,优选三七跌打损伤软膏复方提取工艺,为其工业化生产提供参考.方法:以人参皂苷Rb1、川续断皂苷Ⅵ、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1含量和出膏率为评价指标,采用层次分析法(AHP)、CRITIC法及AHP-CRITIC混合加权法确定各指标权重系数,结合正交试验结果优化复方提取工艺参数.结果:AHP-CRITIC混合加权法较AHP法和CRITIC法科学、合理、稳定,按照其确定的权重系数进行综合评价确定复方佳提取工艺条件为:处方药材浸泡2h,分别用8倍量、6倍量、6倍量的水加热回流提取3次,每次1h.结论:AHP-CRITIC混合加权法确定的权重系数客观、真实,可以反映处方配伍信息;优选得到的工艺稳定可行,重复性好,可用于工业化生产.
作者:陈娇;余姣;江敏瑜;闫丹;杨荣平;张传辉 刊期: 2017年第02期
目的:探讨甘草泻心汤与美沙拉嗪联合治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效及对患者血清炎症细胞因子的影响.方法:将88例UC(寒热错杂型)患者随机分为观察组与对照组,每组44例.对照组给予美沙拉嗪缓释颗粒口服,1.0g/次,4次/天;观察组在对照组基础上加用甘草泻心汤.两组疗程均为2个月,比较两组临床疗效及血清炎症指标变化.结果:观察组临床疗效总有效率、中医证候疗效总有效率均显著高于对照组(P<0.05);治疗后观察组中医证候积分、Baron评分及血清TNF-α、IL-8、IL-17、IL-23显著低于对照组(P<0.05),IBDQ评分及血清IL-10显著高于对照组(P<0.05);观察组复发率显著低于对照组(P<0.05).结论:甘草泻心汤联合美沙拉嗪治疗UC能显著改善患者临床症状及体征、提高患者生活质量.调节血清炎症细胞因子水平、参与免疫调节可能是其治疗UC和预防复发的主要机制.
作者:陈浩;张波;徐速;卢芩;钱海华;曾莉 刊期: 2017年第02期
目的:建立测定知母中3种黄酮类成分含量的一测多评法.方法:采用HPLC法,以芒果苷为对照品,同时测定新芒果苷和异芒果苷的相对校正因子,建立一测多评的方法,并将该方法应用于不同主产区春知母饮片质量的评价.结果:“一测多评法”和“外标法”测定结果无明显差异,各相对校正因子准确度、重现性良好.两个主产区春知母饮片的新芒果苷和芒果苷含量存在显著性差异(P<0.01),且河北安国的春知母饮片质量总体上高于安徽亳州.结论:一测多评法的适用性和可行性在知母3种黄酮类成分的含量测定中得到了较好的验证,可用于知母的质量评价.
作者:黄玉瑶;张洪坤;路丽;周劲松;潘林燕;袁宝金 刊期: 2017年第02期
目的:探讨以牛皮替代象皮制备的生肌膏在疮疡治疗过程中对血清游离氨基酸变化的影响.方法:采用家兔制造疮疡模型,以象皮生肌膏、牛皮生肌膏和无皮生肌膏进行分组治疗,于治疗后的第3、6、9、12、15天取血分离血清,测定血清中的游离氨基酸含量,分析用药后血清游离氨基酸的变化情况.结果:以基线血清氨基酸含量为基准,发现血清中Gly、Arg、Pro等17种氨基酸均有变化.各组氨基酸含量变化幅度明显.象皮组的各氨基酸含量始终维持在低,而牛皮组除第3天含量高于无皮组外,其余时间点含量低于无皮组.结论:在创面修复过程中生肌膏有利于促进机体组织对血液中游离氨基酸的利用,象皮促进氨基酸在组织中沉积的效果略优于牛皮.
作者:冯鑫;张杨;房德敏;邢国胜;赵文君;郭悦;赵丽坤 刊期: 2017年第02期
目的:选育茶、药兼用的早花高产型菊花新品系.方法:对经田间初选的茶用菊杂交后代株系的干花进行感官品质评价,进而对其有效成分进行测定,并采用模糊综合评价法对所筛选的杂交后代进行综合分析评价.结果:不同杂交后代各指标有较为明显的差别,以田间性状花期及亩产量、感官品质及化学成分各指标为评价要素,建立了模糊综合评价法模型;构建四组不同权重的模型对结果进行计算分析,发现品种CH1-21、CH1-9、CH1-18及CH7-3的总体得分相对较高,数值都在各项平均值以上,在综合评价中具有较明显的优势,入选为茶、药兼用的早花高产型菊花新品系.结论:通过模糊综合评价法进行评价分析,筛选出了4个茶、药兼用的早花高产型菊花新品系.
作者:冯晓燕;房伟民;陈发棣;管志勇;蒋甲福 刊期: 2017年第02期
目的:探讨补肾通关颗粒辅助治疗良性前列腺增生(BPH)患者的临床疗效.方法:选取2014年1月~2015年12月中南大学湘雅三医院泌尿外科和益阳市第三人民医院收治的120例BPH患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组各60例,两组均服用坦索罗辛治疗,观察组加用补肾通关颗粒辅助治疗,疗程均为4周,对比两组临床疗效.结果:治疗后两组患者IPSS、QOL评分及RUV较治疗前均显著降低,Qmax较治疗前显著升高(P<0.05),观察组患者IPSS、QOL评分及RUV均显著低于对照组,Qmax显著高于对照组(P<0.05);治疗后两组患者夜尿次数、排尿困难、尿线情况、腰膝酸软、少腹胀痛积分均较治疗前显著降低(P<0.05),观察组患者夜尿次数、排尿困难、尿线情况、腰膝酸软、少腹胀痛积分均显著低于对照组(P<0.05);治疗前治疗后两组间、组内前列腺体积、PSA水平差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者治疗愈显率63.33%显著高于对照组的45.00% (P <0.05).结论:补肾通关颗粒辅助治疗BPH患者较单纯西医治疗具有更好的临床疗效.
作者:童亮;汤进;阳辉辉;周益红;刘旺;戴英波 刊期: 2017年第02期
目的:观察竹节参总皂苷对自然衰老大鼠结肠炎症反应的影响,并从内质网应激反应研究其可能机制.方法:将SD雄性大鼠分为5组:青年组(6月龄)、自然衰老组(24月龄)及竹节参总皂苷低、中、高剂量组.采用D-乳酸试剂盒检测大鼠血清D-乳酸水平,RT-PCR法检测各组结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA表达,Western blot法检测各组结肠COX-2和内质网应激反应标志蛋白GRP78、CHOP和p-eIF2α的表达.结果:与青年组比较,自然衰老大鼠血清D-乳酸水平,结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA水平,COX-2蛋白表达水平,内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP、p-eIF2α表达均显著增高,给予竹节参总皂苷干预后大鼠血清D-乳酸水平,结肠炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA水平,COX-2和内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP、p-eIF2α表达与自然衰老组比较均显著降低.结论:自然衰老大鼠肠黏膜屏障功能发生障碍,结肠存在炎症反应和内质网应激反应,而竹节参总皂苷可降低肠道炎症,其机制可能与降低内质网应激反应相关.
作者:刘敏;顿耀艳;彭丹丽;郭煜晖;袁丁;张长城 刊期: 2017年第02期
目的:研究不同规格肾茶插穗与遮荫度对肾茶扦插苗质量的影响,为其制定种苗繁育技术规程提供依据.方法:从插穗的粗度、长度、带叶与否、切口形状与不同遮荫度条件下对扦插苗的新枝数、新技高、叶数、新枝粗、根长、根冠、生根率等七项指标的影响进行比较研究.结果:粗插穗(6 mm以上)的扦插苗的新枝数显著低于中粗(4 ~6 mm)与细插穗(2~4 mm);30 cm插穗的扦插苗的新枝数显著高于15 cm与20 cm的插穗,而根长、生根率显著低于后两者;带叶插穗的新枝高显著高于无叶插穗;斜口插穗的生根率显著高于平口插穗;不同遮荫度对扦插苗无显著影响.结论:粗度在4~6mm、长度在15 cm、带叶且斜面切口插穗是繁殖肾茶扦插苗的佳选择.
作者:唐玲;王艳芳;李荣英;杨春勇;李学兰;李戈 刊期: 2017年第02期
目的:探讨黄连素对脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW264.7细胞炎症因子的影响及其内在机制.方法:通过磺酰罗丹明B(SRB)法检测黄连素对RAW264.7细胞的毒性;通过实时定量PCR检测环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达变化;通过Western blot检测P65蛋白表达变化;分别通过放射免疫法和硝酸还原酶法检测前列腺素E2(PGE2)及NO含量;通过实时定量PCR检测线粒体生物合成相关基因TRAM、Cytochrome bmRNA表达变化.结果:黄连素能显著降低LPS诱导RAW264.7细胞COX-2、iNOS mRNA表达水平,对磷酸化P65表达则无明显影响;黄连素能显著降低LPS诱导下RAW264.7细胞炎症因子PGE2及NO含量,并显著提高其线粒体生物合成相关基因TRAM、Cytochrome b mRNA表达.结论:黄连素可通过改善线粒体生物合成功能,抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应.
作者:毛秋娴;龙启才 刊期: 2017年第02期
目的:探讨补中益气汤及其配伍对脾虚模型大鼠免疫器官及小肠黏膜中葡萄糖及肽转运体蛋白表达的影响.方法:建立脾虚大鼠模型,成模动物随机分模型组、补中益气汤组及补中益气汤去“升-柴”组和倍“升-柴”组,另设正常对照组,比较各组大鼠体质量及脏器指数,采用Western blot法检测大鼠小肠黏膜中钠依赖性葡萄糖糖转运体(SGLTI)、葡萄糖转运体2(GLUT2)、肽转运体1(PepT1)的表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量及脾脏指数和胸腺指数均显著降低(P<0.05),补中益气汤各组大鼠脾脏指数显著升高(P<0.05);补中益气汤组和去“升-柴”组大鼠体质量及胸腺指数显著升高(P<0.05).模型组大鼠小肠黏膜中SGLT1、GLUT2蛋白表达较正常对照组显著降低(P<0.05);与模型组比较,补中益气汤组SGLT1蛋白表达显著升高(P<0.05),补中益气汤各组GLUT2蛋白水平显著升高(P<0.05),各组PepT1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:补中益气汤及其配伍对脾虚大鼠体质量及免疫器官脏器指数降低和葡萄糖转运蛋白表达低下的异常改变有较好的改善作用,补中益气汤原方的效果优于其配伍方.
作者:刘海涛;施家希;黄张杰;吴美音;施旭光 刊期: 2017年第02期
目的:研究紫藤瘤的化学成分.方法:利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20等多种色谱法对其化学成分进行研究,根据波谱数据对所得化合物进行结构鉴定.结果:从紫藤瘤中分离并鉴定了10个化合物,分别为:豆甾醇(1)、7,4'-二羟基-二氢黄酮(2)、3',7-二羟基-4'-甲氧基-二氢黄酮醇(3)、2',4'-二羟基-4-甲氧基查尔酮(4)、4,4'-二羟基-2'-甲氧基查尔酮(5)、3,4,5-三甲氧基-苯甲酸(6)、表丁香脂素(7)、丁香酸(8)、对羟基苯酚(9)、间二苯酚(10).结论:其中,化合物3为新天然产物,所有化合物均为首次从紫藤瘤中分离得到.
作者:吴培云;蔡百祥;王国凯;刘劲松;周忠玉;王刚 刊期: 2017年第02期
目的:研究寿胎丸对肾虚-黄体功能不全性流产大鼠模型Kiss-1基因中Kisspeptin-10的影响.方法:对妊娠SD大鼠用羟基脲和米非司酮建立肾虚-黄体功能不全性流产动物模型,分别用寿胎丸水提液和地屈孕酮进行治疗,另设正常对照组.比较各组大鼠子宫和卵巢组织形态学变化、流产率、血清孕酮(P)及卵巢中Kisspeptin-10和Erk1/2的表达.结果:与模型组比较,寿胎丸能够明显改善孕鼠的一般情况、降低流产率,提高孕酮水平;改善子宫内膜及卵巢黄体的形态和功能;免疫荧光显示寿胎丸能提高黄体颗粒细胞Kisspeptin-10的表达;RT-PCR及Western blot结果显示寿胎丸能有效提高卵巢Kisspeptin-10和Erk1/2基因及蛋白水平的表达;同时寿胎丸能提高Erk1/2蛋白磷酸化,使其活性增强.结论:寿胎丸的保胎机制可能与提高大鼠卵巢组织中Erk1/2、Kisspeptin-10的表达,以影响孕酮的变化,改善黄体功能有关.
作者:陈阳;李丹阳;李晓鹏;吕艳伟;洪蕾 刊期: 2017年第02期
目的:研究赤芍抗流感病毒的作用机制与分子基础,为利用中药赤芍开发出安全有效的抗流感药物提供理论依据.方法:基于计算机虚拟筛选的方法,以单味中药赤芍的119个化学成分为对象,选取5个目前与流感治疗密切相关的靶点蛋白作为受体,采用SYBYL分子对接的方法,以Total Score结合打分为标准筛选出得分高的分子并观察其MOLCAD展示的与5个流感病毒靶蛋白的表面疏水性和氢键供体与受体区域,借助Discovery Stu-dio 2016软件对其进行相互作用的分析,预测其结合模式及亲和力.结果:通过SYBYL分子对接的方法,观察到赤芍119个成分与流感相关受体分子结合Total Score打分普遍较高,并均超过其与自身配体结合打分,且发现小分子与受体分子结合,可产生多种分子间作用力,使小分子牢固地结合在活性位点.结论:基于计算机虚拟筛选方法中的分子对接技术,发现赤芍具有很好地发挥多靶点抗流感病毒的优势,是一种具有开发潜能的抗流感中药.
作者:严一文;徐培平;黄新安;赖艳妮;李向阳;符林春 刊期: 2017年第02期
目的:探讨白及干物质累积和氮、磷、钾吸收与分配的特点,以期为白及的施肥提供科学依据.方法:采用田间小区试验和室内测定相结合的方法,在白及不同生育期采集植株样品,测定植株的干物质和氮、磷、钾的含量,分析氮、磷、钾吸收累积与分配特点.结果:白及植株干物质累积与生育进程呈“S”型曲线增长,不同生育期氮、磷、钾的含量均呈现缓慢上升趋势,采收期含量高.不同器官氮、磷、钾含量均随生育期进程而降低,叶片中氮含量高,而假鳞茎中磷、钾含量高.植株对氮、磷、钾的累积吸收的特点相似,从苗期到采收期一直呈增加趋势,高值分别为15.03 kg/hm2、8.70 kg/hm2和11.24 kg/hm2,对三种养分的吸收量的顺序是氮>钾>磷;白及假鳞茎中多糖含量在植株整个生育期中呈先下降后升高的趋势.结论:白及栽培时应在种植前施足底肥,生育期内施足氮肥,并在蕾期和果期追施磷、钾肥,以促进假鳞茎的生长发育.
作者:林茂祥;韩凤;刘杰;罗川;韩如刚;裴丽容;肖忠 刊期: 2017年第02期