韩晶岩
目的：探究补体C1q／肿瘤坏死因子相关蛋白6（CTRP6）对大鼠心肌梗死后心功能和心室重塑的影响及可能的分子机制。方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支构建心肌梗死模型；天狼星红染色检测心肌纤维化水平；免疫印迹和免疫组化等方法检测CTRP6及纤维化相关分子的表达变化；采用腺病毒注射的方法过表达心肌局部CTRP6；原代培养成年大鼠心脏成纤维细胞，探究可能的分子机制。结果：CTRP6主要表达于心肌细胞胞浆中，心肌梗死后CTRP6表达显著降低。过表达CTRP6可缓解大鼠心肌梗死后心功能障碍和心室重塑；外源性CTRP6可抑制转化生长因子（ TGF－β1）诱导的肌成纤维细胞转化；CTRP6可抑制TGF－β1诱导的RhoA活化及心肌素相关转录因子－A（ MRTF－A）的核转位，预孵育RhoA抑制剂可逆转TGF－β1诱导的MRTF－A核转位及肌成纤维细胞转化。结论：CTRP6通过抑制TGF－β1诱导的RhoA活化及MRTF－A核转位，进而发挥抑制肌成纤维细胞转化及减轻心肌梗死后的心肌纤维化的作用。
作者：张城林 刊期： 2015年第10期
目的：探讨白藜芦醇（ resveratrol，Res）对异丙肾上腺素（ isoproterenol，ISO）诱导的大鼠肥大心肌细胞的保护作用及机制。方法：ISO建立乳鼠心肌肥大细胞模型，分为control组、ISO组、Res干预组和Res对照组。检测心肌细胞表面积和ANP基因表达；流式细胞仪检测细胞凋亡率；电镜观察心肌细胞超微结构；检测培养液中乳酸脱氢酶（ LDH）和丙二醛（ MDA）含量；RT－PCR和Western blot分析GRP78、CHOP、Bcl－2和Bax的mRNA和蛋白表达。结果：Res有效抑制ISO诱导的心肌细胞表面积和ANP基因表达，心肌细胞凋亡率减少，同时下调GRP78、CHOP和Bax的mRNA和蛋白表达，上调Bcl－2 mRNA和蛋白表达，降低培养液中LDH和MDA含量。结论：Res明显减轻ISO诱导的心肌细胞肥大和凋亡，其机制可能通过抑制内质网应激因子GRP78和CHOP表达，逆转凋亡因子Bcl－2和Bax蛋白表达有关。
作者：林岩；王国忠；金莉；肖薇；李波；王珺 刊期： 2015年第10期
目的：β－肾上腺素受体（β－ARs）介导的心脏炎症反应是导致心脏损伤重要原因，但机制不明。本研究观察了β－ARs激动后心脏炎症反应和细胞因子的动态变化，并明确了启动炎症反应的关键因子。方法：雄性10周龄C57BL／6野生型小鼠皮下注射β－ARs非选择性激动剂异丙基肾上腺素（ isoprotenerol， ISO；5 mg? kg－1? d－1），于不同时点进行心脏取材。利用组织化学染色等方法评价心脏炎症反应及纤维化情况。利用细胞因子芯片分析细胞因子动态变化情况。结果：心脏炎性细胞浸润开始于给ISO后24 h，3 d达高峰。7 d后出现明显纤维化。给予ISO后12 h和24 h，心脏细胞因子增加以趋化因子为主。给予ISO后1 h，白细胞介素18（IL－18）及炎性小体就被激活。利用IL－18及炎性小体NLRP3基因敲除小鼠，证明了IL－18和炎性小体的激活介导了ISO引起的趋化因子增加和炎性细胞浸润。给予ISO后1 h再给予IL－18中和抗体，可阻断ISO引起的趋化因子增加、炎性细胞浸润及纤维化。结论：IL－18是急性β－ARs激动引起心脏炎症反应及纤维化的关键启动因子。
作者：肖晗；李昊；安祥博；王晶晶；张幼怡 刊期： 2015年第10期
目的：胰高血糖素样肽（ GLP－1）在餐后具有重要的刺激胰岛素分泌、降糖效应。 L细胞如何感受机体能量状态从而调控GLP－1合成分泌尚不清楚。哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）是细胞内重要的能量感受分子。本研究发现肠道mTOR 调节L细胞合成分泌GLP－1。方法：在对照组小鼠，高脂饲料诱导的糖尿病小鼠、db／db和Neurog3－Tsc1－／－小鼠，以及 STC－1细胞模型上采用实时荧光PCR和Western blot观察GLP－1表达。酶联和放免方法观察血浆、培养基中GLP－1和胰岛素分泌。结果：饥饿抑制回肠mTOR活性同时抑制了肠道GLP－1的表达和释放。而饥饿后重饲具有显著翻转效应。高脂喂养可显著抑制小鼠肠道mTOR活性同时抑制了肠道GLP－1的合成。雷帕霉素在正常、糖尿病小鼠模型上均具有抑制回肠mTOR活性同时抑制了肠道GLP－1的表达和释放功能，而亮氨酸灌胃和Tsc1基因敲除具有显著刺激肠道GLP－1合成效应。过表达mTOR质粒刺激GLP－1启动子活性以及生成。结论：肠道mTOR活性通过感受机体能量调节GLP－1生成。
作者：许戈阳；张炜真 刊期： 2015年第10期
目的：探讨雌马酚对大鼠脑基底动脉的舒张作用与机制。方法：应用微血管张力仪和全细胞膜片钳技术，分别观察无或有钾通道阻滞剂时，雌马酚对5－HT诱导的脑基底动脉收缩和血管平滑肌大电导钙激活钾通道（ BKCa ）电流的影响，并比较雌马酚对转染人BKCa α亚单位或α与β1亚单位共转染的HEK293细胞电流的作用。结果：雌马酚以非内皮依赖的方式，浓度依赖性（10－10 mol／L～10－5 mol／L）舒张大鼠脑基底动脉，其作用被BKCa阻断剂paxilline和iberiotoxin明显减弱，而不受电压依赖性钾通道阻断剂4－AP或ATP敏感性钾通道阻断剂格列苯脲的影响。10－6 mol／L雌马酚明显增加脑基底动脉平滑肌细胞BKCa电流，此作用因同时应用iberiotoxin而逆转。10－6 mol／L雌马酚对仅表达BKCa α亚单位的HEK293细胞电流无影响，但小于10－6 mol／L可激活稳定表达BKCa α与β1亚单位的细胞电流，同时应用paxilline可使增加的电流完全抑制。结论：雌马酚通过作用于β1亚单位激活BKCa ，舒张大鼠脑基底动脉。
作者：于玮；王燕；宋征；邓秀玲 刊期： 2015年第10期
目的：探讨硫化氢在低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）自噬障碍中的作用。方法：HUVECs经培养传代分为3组：对照组、低剪切应力组（5 dyn／cm2）和正常剪切应力组（15 dyn／cm2）。在平板流动腔上对内皮细胞进行剪切应力处理，Western blot检测CSE蛋白水平，RT－PCR检测CSE的mRNA含量，荧光显微镜MDC染色观察自噬表泡，免疫荧光检测LC3表达，Western blot检测Beclin1＼LC3＼p62蛋白水平，以评估不同剪切应力下，诱导HUVECs自噬障碍过程中内源性H2 S生成的变化。接下来用CSE干扰siRNA及CSE过表达质粒分别转染HUVECs后，再分别用5／15 dyne／cm2处理1 h，测自噬表达情况。结果：WB结果显示，与正常剪切应力组相比，低剪切应力组CSE表达明显减少。 Beclin1及LC3表达减少，p62表达增高，免疫荧光结果显示低剪切应力组LC3表达减少。提示低剪切应力组自噬障碍。结论：低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞存在自噬障碍，其与CSE表达降低相关。
作者：唐蕙；唐志晗；任重；彭娟；危当恒；任晓晴；肖卫晋；刘录山；姜志胜 刊期： 2015年第10期
目的：小檗碱（ berberine， BBR）是一种异喹啉类生物碱，是中药黄连有效成分之一。研究发现BBR调节血脂代谢、降低糖尿病心血管功能异常，其机制与激活AMPK有关。氧位β－N－乙酰葡萄糖胺（ O－linkedβ－N－acetylglucosamine， O－GlcNAc）修饰是一种重要的翻译后蛋白修饰，调控多种信号途径的蛋白磷酸化。 BBR对糖尿病心血管系统的保护作用是否与O－GlcNAc修饰有关尚不清楚。本研究探讨BBR是否减少高糖诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs） O－GlcNAc修饰及其机制。方法：正常糖（ NG，5 mmol／L）与高糖（ HG，25 mmol／L）培养HUVECs给予BBR。结果：BBR呈时间、剂量依赖性减少HG诱导的HUVECs蛋白O－GlcNAc修饰。 BBR（50μmol／L）上调HG诱导HUVECs的OGA而非OGT的mRNA及蛋白表达。使用OGA抑制剂PUGNAc（100μmol／L）可逆转BBR对O－GlcNAc修饰的降低，进一步使用AMPK抑制剂Compound C （CC；100μmol／L），BBR对O－GlcNAc修饰的降低明显逆转。分别使用DHE、MitoSOX和JC－1、Rhodamine 123检测ROS和线粒体膜电位（ mitochondrial membrane potential，MMP）。 BBR显著降低HG诱导的HUVECs线粒体来源ROS（P＜0．01），升高MMP （P＜0．01）。使用CC和PUGNAc，BBR作用被逆转。结论：上述结果提示BBR通过激活AMPK减少O－GlcNAc修饰，从而降低高糖诱导的HUVECs氧化应激，调节线粒体功能。
作者：杨红燕；秦兴华；杨兴斌；董玲 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
研究黄芪甲苷（ AS－IV）对小鼠心梗后左室功能的影响及可能机制。分离冠脉左前降支（ LAD）与伴行静脉并于左心耳下缘2 mm处结扎制备心梗模型（手术组），结扎后小鼠每日腹腔注射10 mg／kg AS－IV（治疗组）；以分离LAD后不结扎小鼠为对照。术后2周，心超检测小鼠左心室功能，观察小鼠心脏病理改变、梗死边缘区血管数目、SOD2及NOX4表达。与对照小鼠相比，术后小鼠射血分数显著降低，左室扩张伴心室前壁变薄，心室前壁变薄处纤维增生，心梗边缘区血管数目明显减少，SOD2表达显著降低，NOX4表达明显增多。 AS－IV干预可显著提高小鼠左心室射血分数，明显增加心肌梗死边缘区血管数目和SOD2表达，降低NOX4表达，未能减少心梗区面积。本研究提示黄芪甲苷能改善心梗小鼠左室功能，增加心肌梗死边缘区血管数目及降低该区域氧化应激水平可能是其机制之一。
作者：李苏；陈相建；吴恒芳；杨笛 刊期： 2015年第10期
高同型半胱氨酸血症（ HHcy）是心脑血管疾病的独立危险因素，已有报道Hcy可以升高AT1受体的mRNA和蛋白表达水平。本研究主要运用了Ca2＋成像、双萤光素酶报告基因、激光共聚焦显微镜等方法。我们首先发现Hcy体外刺激小鼠血管环可引起白细胞介素6（IL－6）及单核细胞趋化蛋白1（MCP－1）的释放增加，在AT1受体敲除小鼠的血管环中被明显抑制。 Hcy可激活AT1受体经典的Gq信号通路及β－arrestin－2信号通路，并引起AT1受体内化。本文找出了Hcy在心血管系统内的受体，并发现Hcy可通过AT1受体加重血管炎症损害。
作者：李拓圯；孙金鹏；孔炜 刊期： 2015年第10期
目的：检测肝细胞肝癌组织中Ebp1与P53蛋白的表达情况，并探讨肝细胞肝癌组织中P53与Ebp1的表达与临床病理特征之间的关系，为肝细胞肝癌的靶向基因治疗提供有利的客观实验依据。方法：应用免疫组织化学方法（ SP法）检测66例肝细胞肝癌组织及其癌旁正常组织中P53蛋白与Ebp1蛋白的表达。结果：肝细胞肝癌组织中P53和Ebp1蛋白的阳性率（48．5％和42．4％）与癌旁正常组织中P53和Ebp1蛋白的阳性率（4．5％和7．6％）比较差异具有统计学意义（P＜0．05）。肝细胞肝癌组织中P53和Ebp1蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、性别、家族史无关，但与肿瘤的临床分期以及淋巴结转移密切相关。结论：P53与Ebp1蛋白在肝细胞肝癌组织中表达明显高于癌旁正常组织；P53与Ebp1蛋白的高表达与肝细胞肝癌的临床分期及淋巴结转移呈正相关。
作者：陈海月；朴水莲；杨莎莎；李香丹；刘兰 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：明确二甲双胍是否通过腺苷酸活化蛋白激酶（ AMPK）依赖的方式抑制单侧输尿管梗阻（ UUO）诱导的肾间质纤维化。方法：采用WT及AMPKα2－／－小鼠， UUO手术制备肾间质纤维化模型。手术组术前3 d及术后7 d皮下注射二甲双胍0．2 g? kg－1? d－1。利用组化染色、肾功能检测、Western blot、ELISA等方法评价模型。结果：（1）WT小鼠，二甲双胍能够抑制UUO诱导的肾间质纤维化（P＜0．01），其机制是通过抑制TGF－β1－Smad3信号通路。（2）AMPKα2－／－小鼠，二甲双胍仍有部分抑制UUO诱导的肾间质纤维化的作用，但差异不显著。（3）二甲双胍不能抑制AMPKα2－／－小鼠肾脏组织中TGF－β1的产生。（4）二甲双胍有抑制UUO诱导的TGF－β1下游Smad3磷酸化的趋势。结论：二甲双胍通过AMPK依赖及非依赖的途径抑制UUO诱导的肾脏纤维化。
作者：冯晔囡；张幼怡；肖晗 刊期： 2015年第10期
合成了两亲性壳聚糖衍生物（ Chit－DC）和偶联小肠靶向因子VB12的两亲性壳聚糖衍生物（ Chit－DC－VB12），检测其生物相容性、负载灯盏花乙素（ Scu）后的缓释效果、对Scu生物利用度及对糖尿病视网膜病变疗效的影响。通过FTIR分析和H－NMR谱图分析，证实了Chit－DC和Chit－DC－VB12的合成。 CCK－8分析显示Chit－DC和Chit－DC－VB12的毒性较小。发现两种纳米载药胶束在各种模拟胃肠液中经过10 h累计释放基本达到平衡。通过Transwell模型发现，Chit－DC－Scu和Chit－DC－VB12－Scu在Caco－2细胞的转运效率要高于Scu；发现Caco－2细胞对Chit－DC和Chit－DC－VB12的胞吞量增加；检测不同时点Scu的血药浓度发现，Chit－DC－Scu和Chit－DC－VB12－Scu的Scu峰值出现时间往后推移，Scu的生物利用度有所提高；建立II型糖尿病大鼠模型并给药后发现，Scu的应用提高了视网膜血管血流的流速，减弱了视网膜组织VEGF，VEGFR2，vWF蛋白的表达，而Chit－DC负载Scu后增强了Scu的药效。
作者：邓宇斌；王竟男 刊期： 2015年第10期
目的：探讨胆固醇线粒体转运蛋白对脂肪肝细胞模型糖脂代谢、炎症反应及其胰岛素敏感性的作用及其机制。方法：1．32 mmol／L油酸＋0．66 mmol／L软脂酸共同作用小鼠原代肝细胞建立脂肪肝细胞模型，携带StAR基因的腺病毒转染细胞得到StAR高表达组。 Real－time PCR和Western blot检测糖脂代谢、炎症反应相关分子的变化；相关试剂盒检测肝细胞内甘油三酯、胆固醇及糖原水平；Western blot检测胰岛素信号转导通路上关键蛋白的表达，并用PI3K抑制剂抑制该通路后观察StAR的作用。结果：StAR过表达降低脂肪酸合成关键分子、炎症因子（ TNF－α、MCP1）及糖异生关键分子的表达，升高糖原合成关键分子的表达，且减少脂肪肝细胞模型内甘油三酯和胆固醇的水平，提高该模型的糖原合成能力及葡萄糖利用能力；StAR过表达降低细胞内二酰基甘油含量，减少PKCε的磷酸化，从而升高胰岛素受体底物1及Akt的磷酸化；PI3K被阻断后，StAR对糖脂代谢的作用消失。结论：StAR对脂肪酸引起的脂质沉积及胰岛素抵抗的肝细胞有保护作用，且该作用通过胰岛素信号转导通路介导。
作者：邱燕燕；詹永坤；李晓波；支秀玲；宁艳霞；殷莲华 刊期： 2015年第10期
目的：PPARγ激动剂被证实可限制动脉粥样硬化的进展，然而其潜在的病理机制仍不清楚。我们通过研究PPARγ下游AMPK分子对ox－LDL诱导的内皮细胞损伤和功能障碍的保护作用。方法：取4周龄SD大鼠心肌左室组织，分离微血管内皮细胞。 DMEM培养24 h后，再经ox－LDL刺激24 h，检测细胞eNOS蛋白、NO释放以及AMPK磷酸化变化，并比较GW9662或PPARγ－siRNA预处理前后的差异。通过细胞成管实验，检测抑制AMPK或PPARγ对于血管新生的影响。结果：ox－LDL诱导24 h后，eNOS、NO和磷酸化AMPK水平明显下调，抑制PPARγ有类似结果。 ox－LDL刺激血管内皮细胞24 h后，细胞凋亡和老化加重，血管新生减弱。在环格列酮预处理后，eNOS、NO和磷酸化AMPK的水平都明显上调，血管新生能力增强，然而此效应可以被PPARγ－siRNA或GW9662逆转。结论：我们的结果提示环格列酮等PPARγ激动剂有效拮抗ox－LDL诱导的血管内皮细胞损伤，其分子机制是通过AMPK磷酸化激活，进一步上调eNOS和VEGF表达，NO释放，从而减少内皮细胞凋亡和老化，促进血管新生和内皮舒张功能。
作者：王时俊 刊期： 2015年第10期
目的：基于复杂适应系统（ complex adaptive systems，CAS）理论，探讨中医学理论模式及其科学内涵。方法：CAS理论同阴阳五行理论和中医学理论的比较。结果：（1） CAS理论认为生态系统和生物体都是CAS。阴阳五行理论初是古人对生态现象描述而形成的古代生态系统理论，进而升华到一般方法与哲学层面，并作为对系统性事件认识的一般性模式和范式，而中医学理论体系是以阴阳五行理论为框架而建构的。因此，CAS理论可以用于阴阳五行理论和中医学理论科学内涵的研究和认识。（2）CAS理论对系统的描述思想、理论及方法与阴阳五行理论和中医学理论对系统的描述思想、理论及方法存在某些相似之处。（3）CAS理论对系统描述的某些概念，如主体、标识等与阴阳五行理论和中医学理论对系统描述的某些概念，如阴阳理论中的阴阳属性、五行理论中的五行属性，中医藏象理论中的脏腑属性等均存在一定相似之处。结论：（1） CAS理论建构系统及系统某些要素的特征与阴阳五行理论和中医学理论建构及其某些要素的特征存在一定的共性。（2） CAS理论为中医学理论科学内涵的研究和认识提供了一种重要的系统思想、理论与方法。
作者：蔡子微 刊期： 2015年第10期
医学留学生教育已成为我国高等医学教育的重要组成部分，如何提高留学生教育教学质量的改革是当前形势所需，病理生理实验教学评价体系是实验教学改革的重要内容之一。目前对留学生病理生理实验教学的评价方式仅限于单一、主观的终极性评价，这不符合留学生积极主动、思维活跃的特点，使学生忽视实验课的学习，纵容了学生懒惰、被动学习的不良情绪，压抑了他们探求知识的欲望和能力，而且评价范围窄，代表性差，难以客观、全面地评价教学效果和学生的学习质量，使能力培养这一环节的作用不能充分发挥出来。新评价体系的构建与实施，强化形成性评价在整个评价体系中的比重，不但使实验课程的评价更加科学、客观，而且对于培养学生的知识应用能力、信息获取和选择能力、动手实践能力、创新能力，都起到了积极的促进作用，是监督和检查学生学习效果及应用能力，提高实验教学质量的有效手段，值得全面推广。
作者：张彩华；邢嵘 刊期： 2015年第10期
目的：本研究旨在探讨细胞间黏附分子1（ICAM－1）在小鼠间充质干细胞（MSC）体外迁移中的作用及其相关机制。方法：采用Transwell法研究小鼠MSC（C3H10T1／2）、转染空载体的小鼠 MSC（C3H10T1／2－MIGR1）和转染了 ICAM－1的小鼠 MSC （ C2H10T1／2－ICAM－1）的体外迁移能力，即将各组MSC种植在孔径为8μm 的通透膜上面，以胎牛血清作为趋化物质诱导MSC迁移；分别在迁移8 h和12 h后对膜下的MSC进行结晶紫和荧光染料DAPI染色，然后统计各组MSC的细胞数和迁移率。结果：3种细胞8 h和12 h的Transwell体外迁移结果显示，转染了ICAM－1的MSC组迁移的细胞数和迁移率均显著高于未转染组MSC和转染空载体组MSC（P＜0．05），未转染组MSC 和转染空载体组MSC 之间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：ICAM－1可增强小鼠MSC的体外迁移能力。
作者：王艳国 刊期： 2015年第10期
目的：观察过表达人全长tau蛋白对原代海马神经元胞内钙信号和神经元形态的影响及其机制。方法：通过钙成像观察过表达人全长tau蛋白的神经元胞内钙离子浓度的变化。采用免疫荧光染色观察过表达tau蛋白的神经元树突及树突棘的变化。免疫印迹观察过表达tau蛋白的神经元内钙神经素的蛋白变化。结果：过表达人全长tau蛋白的神经元胞内基础钙水平显著高于对照组（P＜0．05），神经元树突棘数量明显较少，树突生长减慢。同时，钙神经素蛋白含量增加，钙神经素酶活性升高。使用钙神经素阻断剂FK506或CsA作用于神经元，可逆转过表达tau蛋白对神经元树突棘的损伤作用。结论：过表达人全长tau蛋白通过增加胞内钙信号而激活钙神经素，导致海马神经元树突棘的丢失。
作者：尹雅玲；高笛；王建枝 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
