类巨噬细胞增强 5’-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性

摘要：目的探讨类巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶( dThdPase)能否增强细胞内激活抗癌药物 5′-脱氧氟尿苷( 5′-DFUR)抗结直肠癌细胞作用.方法应用 ELISA法分别检测结直肠癌细胞系 LS174T、 Clone A、 Colo320、 CX-1、 LOVO、 MIP101和类巨噬细胞系 THP-1、 U937的 dThdPase蛋白含量.采用 MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶( 5-FU)和 5′-DFUR在 6株结直肠癌细胞的半数有效浓度( IC50).把 5-FU或 5′-DFUR同 THP-1或 U937细胞一起培养 24 h,其上清液 2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行 MTT分析,测定 IC50有无改变.并在培养 THP-1或 U937的培养基中加入定量 5′-DFUR后检测 5-FU的生成量.结果 6株结直肠癌细胞中仅 LS174T检出 0.5 U/mg、 LOVO检出 8.9 U/mg的 dThdPase蛋白,其他 4株未检出.而 THP-1和 U937的 dThdPase蛋白含量则分别为 18.2 U/mg和 19.3 U/mg. 5′-DFUR对全部癌细胞的 IC50高于 5-FU的 14.5～ 94.4倍( P< 0.01). 5-FU和 5′-DFUR同 THP-1(或 U937)细胞一起培养 24 h后, 5-FU对 6种癌细胞的 IC50无明显改变( P >0.05),而 5′-DFUR的 IC50则分别下降到原来的 5.4%～ 41.8%( P< 0.001).并从加入 400 μ mol 5′-DFUR的 THP-1和 U937的培养液中分别检出 40.2 μ mol和 32.9 μ mol的 5-FU.结论 6株结直肠癌细胞基本无 dThdPase活性,不能在细胞内转化 5′-DFUR为 5-FU.类巨噬细胞表达的 dThdPase可以转化 5′-DFUR为 5-FU并释放到培养基中抑制癌细胞生长.