学术投稿

日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位

夏丹;邓淦明;滕萍英;谢郁;李耀民;王春梅;陈淑洁;陈敏芳;麦荣嘉;廖海燕;石玲玉;欧丽妍;陈启伟;陈晓光;周晓红

关键词:日本血吸虫, 血吸虫病, Sjp40, 虫卵肉芽肿, 免疫荧光定位
摘要:目的:观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,Taqman探针qRT-PCR检测Sjp40 mRNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-McAb 9G7和抗弓形虫tSAG1-McAb Y3A8(对照抗体),western blot检测Sjp40蛋白的表达;制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿组织中的定位。结果日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 mRNA水平显著高于29 dpi尚未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵(P<0.05),westernb blot证实了Sjp40蛋白在29 dpi和45 dpi兔肝脏中的表达。免疫荧光显示:Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论 Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增加,在感染兔急性肉芽肿病变期(45dpi)呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过程中具有重要作用。
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 玻璃酸钠在兔膝关节腔内分布的示踪模型的建立

    目的:运用双源CT扫描及X线透视技术建立玻璃酸钠(HA)在兔膝关节腔内分布的示踪模型,并观察给药位点差异对HA在兔膝关节腔内分布范围的影响。方法以碘海醇为示踪剂,分别配制碘海醇浓度为2.5%、5%、10%、20%、40%的玻璃酸钠-碘海醇(HA-I)混合制剂各0.5 ml,注入兔膝关节腔后,运用双源CT进行平扫和三维重建,筛选能够有效区分药物和周边组织的佳示踪剂浓度。随后,分别从髌骨下和关节线两种给药位点向兔膝关节腔注射佳碘海醇浓度的HA-I制剂0.5 ml,应用双源CT及X线透视观察药物在膝关节腔内分布特征的差异,确认该药物示踪模型的有效性。结果 HA-I混合制剂的CT值随着碘海醇浓度增加而递增,碘海醇浓度分别为2.5%、5%、10%、20%、40%时,膝关节软组织、HA-I制剂及骨组织三者的平均CT值比值分别为2∶7∶46,2∶14∶44,2∶28∶44,2∶60∶46,2∶98∶45,证实5%~10%碘海醇浓度的HA-I混合制剂可有效区分药物和周边组织,获得理想的药物分布范围三维重建效果。取5%碘海醇浓度的HA-I制剂进行CT扫描和X线透视示踪观察,结果提示给药位点差异与药物分布范围存在相关性,髌骨下给药的HA主要分布于髌股关节,关节线给药的HA则主要分布于胫股关节。结论5%碘海醇浓度的HA-I制剂配合CT扫描及X线透视技术,可有效区分药物和周边组织,直观显示药物在关节腔的分布范围,是一种可靠的HA药物示踪模型。

    作者:罗裕强;林炳权;肖军;史占军 刊期: 2015年第06期

  • 恶性肿瘤术后合并不孕症患者经体外受精-胚胎移植治疗获妊娠3例报道并文献复习

    探讨恶性肿瘤术后合并不孕症患者经体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer, IVF-ET)治疗的可行性及治疗结局。3例妇科恶性肿瘤术后合并不孕症患者行超促排卵周期IVF-ET,治疗后3例患者均成功获得临床妊娠,无肿瘤复发。由于妇科恶性肿瘤治疗可对女性患者的卵巢储备功能造成严重影响,因此对于恶性肿瘤术后合并不孕症患者,应采取积极助孕治疗。

    作者:王楠;陈薪;叶德盛;许丽娟;田小龙;陶婷;陈士岭 刊期: 2015年第06期

  • 运动负荷对正常腰椎间盘MR扩散张量成像表现弥散系数和各向异性分数的影响

    目的:探讨运动负荷对正常腰椎间盘MR扩散张量成像(DTI)中表观弥散系数(ADC)和部分各向异性(FA)的影响。方法对30例健康志愿者行常规矢状位FSE/T2WI成像及运动负荷前后DTI成像,其中男性24名,女性6名,年龄19~25岁。在MR常规T2WI序列上对腰椎间盘按Pfirrmann标准进行退变分级,利用DTI原始数据重组b0图、ADC图及FA图,测量并比较运动负荷前后ADC值、FA值的变化。统计方法使用重复测量数据的方差分析,P<0.05具有统计学意义。结果30名志愿者,观测L1~S1共计150个椎间盘,将其中27例腰椎间盘Pfirrminn分级均为Ⅱ级的受试者纳入研究。腰椎间盘平均ADC值运动负荷前为(1.99±0.18)×10-3 mm2/s,运动负荷后为(1.93±0.17)×10-3 mm2/s,较运动负荷前下降,差异具有统计学意义(P<0.05);腰椎间盘平均FA值运动负荷前为0.155±0.059,运动负荷后为0.163±0.017,较运动负荷前升高,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论磁共振DTI成像可以定量分析运动负荷后腰椎间盘水分子扩散能力及各向异性程度的变化。运动负荷后,腰椎间盘ADC值下降,FA值升高,其中ADC值的变化更为敏感。

    作者:钟秀;邱士军 刊期: 2015年第06期

  • 肠道病毒71型对Vero细胞线粒体的损伤作用及机制

    目的:探讨肠道病毒71型(EV71)对Vero细胞的损伤作用及机制,为分析EV71的致病机制提供新思路。方法将临床分离的一株EV71接种于Vero细胞,观察细胞的形态改变,用免疫荧光方法检测EV71抗原在Vero细胞中的表达,用透射电镜观察Vero细胞超微结构的改变,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测试分析病毒颗粒直径和面积密度以及空泡化线粒体的比例和面积密度。结果 EV71感染后Vero细胞形态发生改变,由梭形变为圆形或死亡,免疫荧光检测显示EV71抗原定位于胞质,超微结构观察可见胞质中有大量呈团块状分布、晶格状排列的高电子密度病毒颗粒,颗粒平均直径为16.3 nm,平均面积密度为38.3%;线粒体肿胀、变性并空泡化、崩解,空泡化线粒体数量约占90.9%,平均面积密度为89.2%;部分线粒体内可见EV71病毒颗粒。结论 EV71感染Vero细胞后在其胞质中增殖,并可侵入线粒体,导致线粒体直接损伤并致细胞死亡;线粒体是EV71在Vero细胞内的作用靶标。

    作者:林佩欣;申洪;高璐璐;黄业恩;张耀忠;陈清 刊期: 2015年第06期

  • 载siRNA微泡实现肿瘤治疗与疗效评估一体化的可行性分析

    目的:探讨利用载小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的脂质微泡超声造影剂实现恶性肿瘤基因治疗与疗效评估一体化的可行性。方法以异质性组装法制备载siRNA的脂质微泡,并用动态光散射法检测其直径大小和表面电位。通过激光共聚焦显微镜观察红色荧光标记的siRNA在瘤内的分布。针对抗凋亡基因sirtuin 2(SIRT2)设计siRNA,通过在体实验研究载siRNA微泡在超声辐照下的肿瘤基因沉默效果。在用载siRNA微泡治疗肿瘤的同时,以超声造影技术观察肿瘤治疗效果。结果 siRNA微泡的直径为400.7±30.5 nm,表面带弱正电(+8.8±0.8 mV)。siRNA微泡协同超声辐照能高效地将siRNA递送到肿瘤细胞胞浆内,有效沉默肿瘤组织中的SIRT2基因,诱导肿瘤凋亡,明显减缓肿瘤的生长速度。超声造影检查结果提示,载siRNA微泡具有良好的超声显像效果,能在治疗过程中实时评估肿瘤的血供情况。结论新型载siRNA的脂质微泡超声造影剂在活体上能对肿瘤进行基因沉默治疗,同时观察肿瘤治疗效果,实现恶性肿瘤基因治疗与疗效评估的一体化。

    作者:李硕阳;尹庭辉;李景果;郑博文;邱晨;王平 刊期: 2015年第06期

  • RNA干扰抑制CD59对非小细胞肺癌GLC-P细胞株增殖的影响

    目的:运用RNAi技术抑制CD59基因的表达,观察其对非小细胞肺癌细胞株GLC-P增值、凋亡的影响。方法合成可抑制CD59基因的片段,并运用RNA干扰技术,构建重组质粒,通过脂质体转染法将重组质粒转染至非小细胞肺癌细胞株GLC-P,并筛选出稳定表达细胞后,采用PCR、MTT、ELISA法检测该稳定表达细胞株的增值、凋亡所受到的影响。结果干扰后的GLC-P细胞株中CD59 mRNA表达量较未干扰组显著降低(P<0.05),同时MTT、ELISA实验检测显示肺癌GLC-P细胞增殖能力降低,可诱导肺癌细胞的凋亡。结论肺癌患者肿瘤细胞中存在CD59高表达,抑制CD59基因表达的同时可抑制GLC-P细胞的增殖能力并诱导细胞凋亡,为非小细胞肺癌的靶向治疗提供了新靶点、新思路。

    作者:吴伟东;刘丹;侯文进;易永盛;王跃军;林苇嘉 刊期: 2015年第06期

  • 二甲双胍对糖基化终末产物诱导的成纤维细胞凋亡及相关蛋白caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响

    目的:探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对原代人皮肤成纤维细胞凋亡的影响,以及二甲双胍(Metformin)对原代皮肤成纤维细胞凋亡是否存在保护作用。方法取对数生长期的皮肤成纤维细胞,分为空白组,BSA对照组(300μg/mL),AGEs刺激组(100、200、300μg/mL),药物组(AGEs 300μg/mL+Metformin 1 mmol/L),采用CCK-8检测24、48、72 h细胞凋亡情况;Western Blot检测细胞培养72 h后凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2表达情况。结果 CCK-8结果显示AGEs诱导皮肤成纤维细胞凋亡呈浓度及时间依赖性,AGEs 300μg/mL诱导72 h后可见细胞凋亡明显增多(0.72±0.02 vs 1±0.04,P<0.05),加入二甲双胍后可对成纤维细胞起一定保护作用(0.98±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.05)。Western Blot显示AGEs 300μg/mL刺激成纤维细胞72 h后, caspase-3、Bax蛋白表达增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),二甲双胍作用后caspase-3、Bax蛋白表达水平较刺激组明显下降(P<0.05),而Bcl-2及Bcl-2/Bax比值则明显上升(P<0.05)。结论 AGEs可诱导人皮肤成纤维细胞凋亡增加,二甲双胍可以通过调控caspase-3、Bax及Bcl-2表达,从而起到抗凋亡作用。

    作者:庞若宇;关美萍;郑宗基;薛耀明 刊期: 2015年第06期

  • HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者干扰素治疗24周应答不佳时的治疗方案

    目的:对干扰素单药治疗24周应答不佳的HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者采用不同的治疗方案进行后续治疗,分析比较其疗效和安全性。方法回顾性分析2010年9月~2013年1月南方医科大学南方医院193例干扰素治疗24周时应答不佳的HBeAg阳性的CHB患者,根据不同后续治疗方案分成:联用恩替卡韦(ETV)或阿德福韦(ADV)治疗(A组),继续干扰素单药治疗(B组),换为NAs治疗(C组),直接停止治疗(D组)。观察比较第24、48、72周时各组患者的临床疗效与安全性。结果继续治疗至疗程48周时,A组和C组HBV DNA转阴率、ALT复常率均高于B组(A组:χ2=26.808,P<0.001和χ2=5.485,P=0.017;C组:χ2=21.257,P<0.001和χ2=5.369,P=0.018);同时发现,加ETV组HBV DNA转阴率高于加ADV组(χ2=8.255,P=0.004)。疗程72周时,A组患者有27例(39.7%)发生HBeAg血清学转换,明显高于B、C两组(χ2=4.238,P=0.04和χ2=7.681,P=0.006);58例(85.3%)获得HBV DNA转阴,59例(86.8%)ALT恢复正常,均高于B组(χ2=23.018,P<0.001和χ2=5.987,P=0.014),但与C组比较差异无统计学意义(P>0.05);同时发现,联合ETV组HBV DNA转阴率和HBeAg血清学转换率均高于加ADV组(χ2=9.823,P=0.002和χ2=5.450,P=0.020)。D组,28例患者的HBV DNA均持续较高水平复制,HBeAg水平升高,ALT反复波动。结论对于干扰素单药治疗24周时应答不佳的CHB患者,联用NAs并延长疗程可明显提高HBeAg血清学转换率、HBV DNA转阴率及ALT复常率,特别是联用ETV并延长疗程时。

    作者:王欣欣;袁国盛;赖静兰;杨年欢;张浩;王俊洁;周元平 刊期: 2015年第06期

  • 载普伐他汀钠的壳聚糖微球的制备及性能评价

    目的:制备一种包载普伐他汀钠,以获得长效释放的载药微球。方法以京尼平为交联剂制备载普伐他汀钠的壳聚糖微球,考察壳聚糖相对分子质量、油相水相比、反应温度、搅拌速度等对壳聚糖微球形成的影响,通过扫描电镜观察其微观形貌,测定微球的包封率以及不同pH条件下的溶胀度,并考察了普伐他汀钠的体外累积释药情况。结果载普伐他汀钠药微球体外释放时间长达31 d以上,反应条件不同,药物释放速度不同,普伐他汀的包封率可达54.7%。佳制备条件为:壳聚糖的粘度为200~400 mPa.s,油水比10∶1,搅拌速度850 r/min,温度40℃。结论京尼平交联载普伐他汀钠的壳聚糖微球具有较好的长效缓释能力,并且可通过调节交联时间控制其对药物的释放速度。

    作者:冯婕;刘中秋;严轶琛;胡明;卢玲;游文玮 刊期: 2015年第06期

  • 基于千人基因组谱系数据的拷贝数变异识别与分析

    拷贝数变异(copy number variation, CNV)是基因组结构变异中的一个重要类型,它在人类很多复杂疾病的发生和发展过程中扮演着重要角色。当前CNV的识别研究,主要集中在单一样本相对于参考序列的CNV识别,以及针对成对样本的CNV识别。然而,这种单纯基于个体水平的CNV分析,只能局限于个体之间而无法进行亲本到子代的遗传学分析。本文基于千人基因组计划中三样本父-母-子代的家系数据,寻找子代相对于父、母的变异区域,不仅识别出子女继承自父母的CNV,并通过分层聚类分析推断出这些CNV的生成方式,同时还检测出少量疑似子代相对于父母的纯合CNV变异。

    作者:赵辉;赵方庆 刊期: 2015年第06期

  • 谷胱甘肽过氧化物酶2干涉慢病毒系统构建及对人肝癌细胞凋亡的影响

    目的:构建人谷胱甘肽过氧化物酶2(Glutathione peroxidase 2, GPX2)慢病毒干涉载体,获得稳定下调GPX2的高滴度慢病毒,检测敲低GPX2对细胞凋亡的影响。方法通过筛选具有显著干涉效果的siRNA序列,构建pSicoR-GPX2慢病毒干涉载体,包装病毒并感染人肝癌HepG2细胞,分别用Western-blot和RT-PCR方法检测GPX2表达情况,应用流式细胞术分析敲低GPX2对人肝癌细胞凋亡的影响。结果成功构建pSicoR-GPX2干涉慢病毒载体并获得高滴度慢病毒颗粒,GPX2蛋白表达水平和RNA表达水平均有显著下调,且人肝癌细胞感染GPX2干涉慢病毒后对凋亡更加敏感,其原因可能是促凋亡蛋白Bax的活化和抗凋亡蛋白Bcl-2活性的抑制。结论成功构建人GPX2基因干涉慢病毒,为肝癌靶标治疗提供新的线索,为后续GPX2功能研究奠定基础。

    作者:曹江平;唐刘君;张建宏;詹轶群;杨晓明;葛常辉 刊期: 2015年第06期

  • 功能性消化不良临床数据库的建立

    目的:建立完整、规范的功能性消化不良(FD)临床研究数据库。方法依据罗马Ⅲ标准和FD的发病因素、症状、治疗方法等制定病例报告表(CRF),收集FD病例,由相关专家设计,应用Visual Studio建立FD临床病例资料数据库管理系统,录入自2013年7月起门诊和病房FD的病例资料,剔除不合格病例,终形成可通过网站呈现并可录入资料、查询病例、分析与统计有关临床数据的在线临床数据库。结果建立了FD在线临床数据库,通过软件平台可录入包括患者一般信息、临床症状、心理状态、生活与饮食习惯、既往病史、胃镜等检查结果、临床诊断、治疗方法及疗程、治疗效果等各种信息的FD临床数据库,并具有统计分析功能。结论 FD临床数据库功能完善,信息资料丰富、完整、规范,统计分析方便,具有临床研究价值。

    作者:黄载伟;陈丽萍;肖冰 刊期: 2015年第06期

  • 细胞凋亡信号调节蛋白1对大鼠脊髓损伤后GFAP、vimentin表达及后肢运动功能的影响

    目的:探讨细胞凋亡信号调节蛋白1(ASK1)对大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质瘢痕中中间丝蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(vimentin)的表达及损伤大鼠后肢行为学和电生理变化的影响。方法采用大鼠脊髓夹伤模型,设ASK1特异性抑制剂Thioredoxin组(Trx组)、ASK1单克隆抗体组(Anti-ASK1组)、生理盐水对照组(Model组)及假手术组(Sham组),于损伤即刻在损伤局部分别给予Thioredoxin、ASK1单克隆抗体、生理盐水各10μl,Sham组大鼠仅打开椎板暴露脊髓,不造成SCI。各组大鼠定期(SCI后1、7、14、28 d)应用Western blot和免疫荧光法检测GFAP、vimentin的表达,BBB评分检测大鼠后肢行为学变化,体感诱发电位及运动诱发电位检测电生理的变化。结果 SCI后1 d各组GFAP、vimentin的表达无明显差异,7、14、28 d Trx组、Anti-ASK1组GFAP、vimentin的表达较Model组明显下降(P<0.01);SCI后1、7、14 d各组BBB评分及体感诱发电位、运动诱发电位无明显差异,SCI后28 d,Trx组、Anti-ASK1组BBB评分较Model组明显升高(P<0.01),体感诱发电位及运动诱发电位潜伏期明显缩短,波峰值明显升高(P<0.01或P<0.01)。结论抑制ASK1可减弱大鼠SCI胶质瘢痕局部GFAP、vimentin的表达,并可促进大鼠后肢运动功能的恢复和电生理的改善。

    作者:黎天尊;晏怡;刘强;夏永智 刊期: 2015年第06期

  • MASP2在小儿上呼吸道感染中的意义

    目的:探讨血浆甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)水平在儿童上呼吸道感染(上感)中的意义。方法取103例上感患儿和35例健康体检儿童作为研究对象,测定其血浆MASP2和C反应蛋白(CRP)浓度并进行白细胞计数(WBC)。根据CRP和WBC值、感染不同时期及有无治疗,上感儿童分为CRP升高组(n=48)与正常组(n=54)、WBC升高组(n=61)与正常组(n=40)、感染早期未用药组(n=68)与感染中后期已用药组(n=35),对各组资料进行统计学分析。结果上感组MASP2浓度显著高于对照组(P<0.001),CRP升高组血浆MASP2浓度与CRP值正相关(r=0.310,P<0.05),WBC升高组MASP2水平与WBC值显著正相关(r=0.392,P<0.01),感染早期未用药组MASP2浓度显著高于感染中后期已用药组(P<0.01), MASP2、CRP、MBL2基因具有共同的转录因子HNF-4α结合位点。结论 MASP2蛋白可能为急性期蛋白,血浆MASP2水平可作为辅助诊断小儿上感的一个参考指标。

    作者:熊思敏;赵娜;裘宇容;张丽芸;左大明;陈政良 刊期: 2015年第06期

  • 马铃薯三糖熊果酸衍生物抑制H5N1流感病毒进入靶细胞

    目的:研究马铃薯三糖熊果酸衍生物能否通过抑制H5N1流感病毒进入靶细胞,作为潜在的新型抗流感药物进行研发。方法以马铃薯三糖熊果酸甲酯1为先导化合物,设计并合成4个目标化合物,利用建立的H5N1假病毒活性检测方法,测试化合物的抑制活性。结果化合物1b,1c和1d对源自A/Thailand/Kan353/2004的H5N1假病毒毒株有明显的抑制作用且化合物1 d的活性好,其IC50达到0.96±0.10μmol/L。结论初步构效关系研究表明,熊果酸的C-17位羧基被酯化后可显著提高其抗病毒活性;将羧基转化成酰胺后可提高抗病毒活性并降低对靶细胞MDCK的细胞毒性。

    作者:宋高鹏;申新田;黎奕斌;郑宇珊;熊平;刘叔文 刊期: 2015年第06期

  • 以不明原因发热为主要表现的横纹肌淋巴瘤1例报告并文献回顾

    淋巴瘤是免疫系统恶性肿瘤之一,其中结外淋巴瘤患者常缺乏典型症状及阳性的辅助检查结果,部分病例仅以发热为主要表现。对于表现为长期发热(病程>3周)的淋巴瘤患者,其发热症状的特点可以为疾病的诊断提供线索,如起热时间、热型、药物反应等特异性表现对于明确诊断具有重要作用,尤其早期、罕见病例。应用不明原因发热的诊断思维,可以提高此类淋巴瘤患者的诊断效率,值得深入探讨。

    作者:申晓东;陈歆;肖红菊;刘刚;翟永志;徐白萱;石怀银;黎檀实;朱海燕 刊期: 2015年第06期

  • 丙泊酚对肿瘤细胞肺转移及E钙粘蛋白、β-连环蛋白表达的影响

    目的:探讨不同剂量丙泊酚对大鼠MADB106细胞肺转移和肿瘤组织中E钙粘蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)的影响。方法 Fischer344雄性大鼠40只,随机分为4组(每组10只):生理盐水组(S组)、脂肪乳剂组(F组)、丙泊酚30㎎/㎎组(P1组)和50 mg/kg组(P2组)。1%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射后行股静脉置管,分别泵入等容量的生理盐水、脂肪乳剂和丙泊酚,1 h后静注0.5 ml MADB106肿瘤细胞(2×105个)。3周后处死,计数肺表面转移瘤数目及转移抑制率;采用免疫组化法检测肿瘤组织中E-cadherin和β-catenin的表达,用IPP图像分析系统对结果进行半定量分析。结果 S组与F组肺转移瘤数目、转移抑制率和肿瘤组织中E-cadherin、β-catenin的表达均无显著差异(P>0.05)。与S组和F组相比,P1组和P2组的肺转移瘤数目减少(P<0.01),转移抑制率增加(P<0.01),E-cadherin和β-catenin蛋白的表达减少(P<0.05);肺转移瘤数目及E-cadherin和β-catenin蛋白的表达与丙泊酚剂量负相关,Pearson相关系数分别为-0.879、-0.755、-0.693(P<0.01)。结论丙泊酚可通过抑制Wnt/β-catenin通路,下调转移瘤组织中E-cadherin和β-catenin的表达,从而抑制MADB106细胞肺转移,呈剂量依赖性。

    作者:汪威;林春水;张雅静;陈莺;郭培培 刊期: 2015年第06期

  • 日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位

    目的:观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,Taqman探针qRT-PCR检测Sjp40 mRNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-McAb 9G7和抗弓形虫tSAG1-McAb Y3A8(对照抗体),western blot检测Sjp40蛋白的表达;制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿组织中的定位。结果日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 mRNA水平显著高于29 dpi尚未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵(P<0.05),westernb blot证实了Sjp40蛋白在29 dpi和45 dpi兔肝脏中的表达。免疫荧光显示:Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论 Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增加,在感染兔急性肉芽肿病变期(45dpi)呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过程中具有重要作用。

    作者:夏丹;邓淦明;滕萍英;谢郁;李耀民;王春梅;陈淑洁;陈敏芳;麦荣嘉;廖海燕;石玲玉;欧丽妍;陈启伟;陈晓光;周晓红 刊期: 2015年第06期

  • 京大戟对紫杉醇口服生物利用度的影响

    目的:评价合用京大戟提取物对紫杉醇经大鼠不同肠段透过性和口服生物利用度的影响。方法分别采用体外Ussing Chamber实验和大鼠in vivo实验,选用P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米为阳性对照,对比京大戟提取物对紫杉醇经不同肠段透过的差异性和口服生物利用度评价。紫杉醇的体外透过液和血药浓度分别用HPLC方法和LC-MS/MS方法进行测定。结果Ussing Chamber实验中,京大戟组紫杉醇经空肠、回肠粘膜透过时,吸收方向转运(M-S)和分泌方向转运(S-M)与阳性对照组和空白组比较,表观渗透系数(Papp)均有显著性差异(P<0.05),但在结肠S-M组与空白组相比没有显著性差异(P>0.05)。表明京大戟提取物能提高紫杉醇经肠粘膜的透过性,其作用主要发生在空肠、回肠段。大鼠in vivo实验结果显示,合用京大戟提取物后,紫杉醇的药时曲线下面积(AUC)和高血浆浓度(Cmax)的平均值显著大于空白组,明显大于阳性对照组。京大戟组紫杉醇的绝对生物利用度(AB%)为7.63%,是空白对照组的2.7倍,阳性对照组的1.8倍。结论合用京大戟提取物,能显著提高紫杉醇经肠道的吸收,在一定程度上能促进紫杉醇的口服生物利用度。

    作者:李明华;彭丽;杨富恒;刘思佳;王胜奇 刊期: 2015年第06期

  • 碱性亮氨酸拉链转录因子ATF样蛋白在狼疮小鼠肾脏组织中的表达及意义

    目的:探讨碱性亮氨酸拉链转录因子ATF样蛋白(basic leucine zipper transcription factor, ATF-like, BATF)在狼疮鼠肾脏组织中的表达及临床意义。方法以24周龄雌性MRL/lpr小鼠作为狼疮肾炎模型组,同龄C57BL/6雌性小鼠作为正常对照组。采用Western blot检测肾脏组织BATF的蛋白表达,采用RT-PCR检测肾脏组织中BATF、RORγt及IL-17 mRNA的表达水平,同时检测小鼠尿蛋白、血清抗ds-DNA抗体以及肾脏组织病理的表现,并对BATFmRNA及RORγt、IL-17 mRNA相关性进行分析。结果狼疮小鼠尿蛋白、血清抗ds-DNA抗体水平均高于正常小鼠(P<0.05)。狼疮小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾间质大量炎细胞浸润,而正常小鼠无明显异常。狼疮小鼠肾脏组织BATF mRNA和蛋白的表达量均较正常小鼠升高(P<0.05)。狼疮小鼠肾脏组织RORγt、IL-17 mRNA表达量增多,且BATF mRNA的表达量与RORγt、IL-17 mRNA表达量呈正相关(r=0.945,0.876,P均<0.05)。结论在狼疮小鼠肾脏组织中BATF mRNA和蛋白的表达均高于对照组,BATF可能通过上调Thl7免疫反应参与狼疮性肾炎的发病。

    作者:彭宇声;黎倩;王梦蕾;曹灿;赖宽;曾抗 刊期: 2015年第06期

南方医科大学学报杂志

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