学术投稿

加味四逆散对慢性身心应激模型大鼠胃粘膜超微结构及脑肠轴的影响

谢慧臣;刘芬;杨强;熊常初

关键词:加味四逆散, 应激, 胃粘膜, 脑肠轴, 促肾上腺皮质激素, 皮质醇, 胃泌素受体, 血管活性肠肽Ⅱ型受体
摘要:目的 建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散对模型大鼠胃粘膜超微结构、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)含量、胃组织胃泌素受体(GASR)、空肠组织血管活性肠肽Ⅱ型受体(VIPR2)mRNA表达的影响,阐明加味四逆散干预应激性胃肠功能障碍的机制.方法 大鼠随机分为正常组,模型组,加味四逆散大、中、小剂量组,奥美拉唑组,采用慢性身心应激方法建立大鼠应激模型,经加味四逆散等干预后透射电镜法观察腺胃区胃粘膜组织细胞及细胞间连接的超微结构改变,放免法测定血浆ACTH和血清CORT的变化,并用RT-PCR法检测胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达变化.结果 电镜观察显示正常组大鼠胃粘膜上皮细胞形态及大小正常;模型组大鼠胃粘膜上皮细胞细胞器及胞核受损严重;其余治疗组均较模型组不同程度好转.与模型组比较,加味四逆散方各给药组、奥美拉唑组大鼠血中ACTH和CORT含量不同程度降低;而胃组织GASR mRNA表达均升高,空肠组织VIPR2 mRNA表达则降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 加味四逆散可显著改善慢性身心应激模型大鼠胃粘膜组织细胞的微观病理形态,调节脑肠轴状态并可改善胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 常温非体外循环进行弓部优先重建在A型夹层全弓置换中的应用

    目的 探讨在常温非体外循环情况下优先完成主动脉弓部分支重建在全弓置换术中的应用效果.方法 回顾性分析2006年1月~2011年11月期间,使用常温非体外循环进行弓部优先重建术式治疗的A型夹层患者23例.建立体外管道:将四分叉人工血管单分支侧与体外循环动脉管连接,并通过Y型管连接股动脉插管.重建弓部血管:依次行弓上三血管与人工血管三分支吻合,并由股动脉供血.完成分支重建后,插二级管,开始体外循环.阻闭升主动脉后,完成人工血管与主动脉弓部吻合,后完成人工血管近心端与升主动脉根部吻合.结果 23例患者手术均获成功.总循环时间187±60 min,升主动脉阻断时间35±8 min,平均鼻咽温22±2℃.死亡1例(43%),术后暂时性神经系统并发症2例(8.7%),术后意识恢复时间6~48h,呼吸机辅助通气时间短18h,11(48%)名患者在48 h内脱离呼吸机,ICU停留时间3~7 d.结论 常温非体外循环进行弓部优先重建术式可明显缩短复杂弓部手术体外循环时间及主动脉阻闭时间,具有较好的脑保护作用,降低术后并发症率.

    作者:陆华;张卫达;马涛;王晓武;王俊;于浩;杨博;徐宇 刊期: 2013年第01期

  • 年龄对正常人脑边缘区功能连接的影响

    目的 采用静息态功能磁共振成像研究年龄对正常人脑边缘区功能连接的影响.方法 对64名健康志愿者进行常规MRI、三维结构像及静息态脑功能成像扫描.将受试者分为年轻组及年老组,并手工勾画边缘区蒙片,进行全脑基于感兴趣区的功能连接计算.单组数据采用单样本t检验,成组数据采用协方差分析,性别为协变量.结果 年轻组边缘区相关的功能连接位于双侧中扣带回、壳核、丘脑及杏仁核;年老组边缘区相关的功能连接脑区位于双侧壳核、丘脑、杏仁核、岛叶、岛盖及右侧缘上回.年老组较年轻组边缘区相关的功能连接减少脑区主要位于双侧中扣带回、海马旁回及左侧海马.结论 年龄增加可致边缘区功能连接改变.

    作者:陈志晔;李金锋;刘梦雨;马林 刊期: 2013年第01期

  • 左肾上腺囊性成熟性畸胎瘤1例报告

    目的 探讨肾上腺畸胎瘤的诊断、鉴别诊断、临床表现及治疗方法.方法 分析1例老年女性合并糖尿病患者,体检时B超发现左肾多发囊性占位,腹部CT平扫及增强检查显示左侧肾上腺区混杂密度肿块影,直径约9.0 cm,密度欠均匀,遂待血糖水平控制尚可后行手术切除,术后病理报告可见肿物呈多房性,囊内有少量油脂样,囊壁厚0.2~0.4 cm,切面见骨骼,表面有脂肪组织,考虑为囊性成熟性畸胎瘤.临床表现及治疗方法通过查询国内外文献获得.结果 终诊断为左侧囊性成熟性畸胎瘤,手术切除后随访半年,效果良好,未见局部复发及转移.结论 肾上腺成熟畸胎瘤是较为罕见的一种生殖细胞来源肿瘤,有恶变风险,可通过B超及CT检查特点初步诊断,应注意与其它肾上腺源性肿瘤的鉴别,及早诊断及手术切除是治疗关键,不能手术切除或潜在恶性者则行联合化疗,病理检查确定诊断,需要终身随访.

    作者:黄东方;王云炎 刊期: 2013年第01期

  • IFN-γ增强人γδ T细胞杀伤骨肉瘤细胞的研究

    目的 研究干扰素-γ(IFN-γ)增强骨肉瘤患者γδ T细胞对骨肉瘤杀伤作用的影响.方法 以唑来磷酸法扩增骨肉瘤患者外周血γδT细胞.分别使用实时荧光定量聚合酶链反应和流式细胞术检测IFN-γ处理前后骨肉瘤细胞Fas的表达情况;LDH法检测骨肉瘤患者γδ T细胞对骨肉瘤细胞的杀伤活性.结果 IFN-γ对骨肉瘤细胞Fas的表达明显提高(P<0.01),骨肉瘤患者γδ T细胞对骨肉瘤细胞的杀伤作用显著增强(P<0.01).抗人FasL抗体对γδ T细胞杀伤OS细胞作用影响较小(P>0.05);但能显著阻断γδ T细胞杀伤IFN-γ预处理OS细胞的作用,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 IFN-γ可增强骨肉瘤患者γδ T细胞的抗骨肉瘤作用.

    作者:李朝旭;唐际存;叶招明 刊期: 2013年第01期

  • 原发性腹膜前间隙巨大畸胎瘤的诊治并文献复习

    原发于腹膜前间隙的巨大畸胎瘤极为罕见,临床极易误诊为盆、腹腔肿瘤.通过对1例原发于腹膜前间隙巨大成熟性畸胎瘤老年女性患者的临床资料、诊治经过、结合相关文献进行分析讨论,总结腹膜前间隙畸胎瘤的诊治经验,对临床工作提供借鉴.手术完全切除是该肿瘤治疗的佳手段,随访至今无复发,预后良好.

    作者:雷瑞霖;肖松舒;薛敏 刊期: 2013年第01期

  • HPLC测定唾液、龈沟液和血清中甲磺酸帕珠沙星药物浓度

    目的 建立一种快速灵敏检测甲磺酸帕珠沙星在血清、龈沟液和唾液中药物浓度的HPLC方法.方法 色普柱为AgilentZorbax SB-C18(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈-磷酸三乙胺溶液(0.5%磷酸,1%三乙胺)=(155∶850),紫外检测波长为245 nm,流速为1.0 ml/min.样本处理采用甲醇沉淀蛋白,上清吹干,流动相复溶残渣,离心后上清20μl进样检测.结果 样品中帕珠沙星色谱分离完全,无内源性物质干扰,在25~10 000 ng/ml内呈现良好的线性回归,线性方程为Area=0.10837903*Amt+0(r=0.99953).检测灵敏度高,低检测浓度可达到10 ng/ml,回收率,在91%以上.结论 HPLC可以迅速、准确地检测出甲磺酸帕珠沙星在血清、龈沟液和唾液样本中的含量.

    作者:蒋一;李鸿波;鄂玲玲;吴霞;刘洪臣 刊期: 2013年第01期

  • MRI斜矢状位T1W黑血序列测量颈动脉分叉角的可行性研究

    目的 评价斜矢状位T1W(QIR-FSE)黑血序列测量颈动脉分叉角的可行性及测量方法.方法 23例行颈动脉MRI扫描患者,分为正常组及斑块组,分别使用2D-TOF及斜矢状位T1W黑血序列测量颈动脉分叉角,3月后重复测量.分析两种序列前后两次测量的重复性,评价两种序列测量结果一致性.采用不同点连线以确定测量方法.结果 排除不符合标准病例后共有20例进行分析,两种序列两次测量结果均有较好的重复性.两种序列测量结果配对,无论是正常组还是斑块组,t检验显示两种序列测量结果有显著统计学差异(P<0.05),但是对于两侧颈动脉分叉角比值,两种序列比较无统计学意义(P>0.05).正常组及斑块组两侧颈动脉角度比值方差分析结果显示,斜矢状位T1W序列4组不同点连线夹角的4组数据间无差异.结论 采用我们测量颈动脉分叉角的方法,斜矢状位T1W(QIR-FSE)序列可用来测量颈动脉分叉角.

    作者:王勇;王庆军;蔡剑鸣;马林;陈为军;刘丹青;韩旭 刊期: 2013年第01期

  • 转录因子SOX2在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中的表达及临床意义

    目的 研究SOX2在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌组织中的表达,探讨其与CIN疾病及宫颈癌临床特征的相关性.方法 应用免疫组化SP法,检测10例正常宫颈、36例不同级别CIN(Ⅰ级10例,Ⅱ级12例,Ⅲ级14例)、40例宫颈癌组织(Ⅰ期21例,Ⅱ期19例)中SOX2蛋白的表达情况,分析比较其表达与临床特征的关系.结果 (1)SOx2蛋白在正常宫颈组织中表达率均为0%,在36例C1N组织中阳性表达率为41.6%(15/36),其中GIN Ⅰ级10.0%,CINⅡ级41.7%,CINⅢ级64.3%;而40例宫颈癌组织SOX2蛋白阳性表达率为82.5%(33/40),其中宫颈癌Ⅰ期78.2%,Ⅱ期88.2%.随着宫颈病变进展,SOX2的阳性表达率呈递增趋势.(2)SOX2蛋白表达与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移相关(P<0.05),与宫颈癌患者的年龄、临床分期无明显相关关系(P>0.05).结论 SOX2蛋白表达水平与CIN疾病及宫颈癌恶性度及淋巴结转移呈正相关,检测SOX2对了解CIN及宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的临床价值.

    作者:蔡春芳;谭国胜;俞奇;栾峰;余雷;王莹 刊期: 2013年第01期

  • 异丙酚和白藜芦醇预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响及机制

    目的 探讨异丙酚与白藜芦醇单独应用及联合应用预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及可能的作用机制.方法 144只健康成年雄性SD大鼠随机分为8组,18只/组,分别为:假手术组(SO组)、生理盐水预处理组(NS组)、Tween80预处理组(TW组)、低剂量异丙酚预处理组(PRO Ⅰ组)、高剂量异丙酚预处理组(PROⅡ组)、低剂量白藜芦醇预处理组(RES Ⅰ组)、高剂量白藜芦醇预处理组(RESⅡ组)、异丙酚联合白藜芦醇预处理组(PRO+RES组).参照Pringle法建立大鼠全肝缺血再灌注模型.SO组仅游离肝门,不作肝门阻断,经股静脉输注生理盐水(2ml/kg);NS组、TW组分别于肝门阻断前10 min经股静脉输注生理盐水(2ml/kg)、Tween80(2 ml/kg);PRO Ⅰ组、PROⅡ组、RES Ⅰ组、RESⅡ组及PRO+RES组分别于肝门阻断前10 min经股静脉输注异丙酚10 mg-kg-1·h-1、异丙酚20 mg· kg-1·h-、白藜芦醇10 mg/kg、白藜芦醇20 mg/kg、异丙酚10 mg-kg-1·h-1+白藜芦醇10 mg/kg.各实验组均于再灌注后1、3、6h分别处死6只动物,留取肝组织标本,常规石蜡包埋后切片.HE染色观察肝组织形态学改变,原位细胞凋亡检测技术(TUNEL法)检测肝组织细胞凋亡情况;免疫组织化学技术检测肝组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3蛋白的表达.结果 与NS组、TW组比较,PRO Ⅰ组、PROⅡ组、RES Ⅰ组、RESⅡ组及PRO+RES组肝组织病理损害减轻,细胞凋亡指数降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达增多(P<0.05),Bax及caspase-3蛋白表达减少(P<0.05).相较于PRO Ⅰ组及RES Ⅰ组,PRO+RES组肝组织病理损伤减轻,细胞凋亡指数降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达增多(P<0.05),Bax蛋白及caspase-3蛋白表达减少(P<0.05).PROⅡ组、RESⅡ组与PRO+RES组间肝组织病理损伤程度、细胞凋亡指数及细胞凋亡相关蛋白表达无显著差异.结论 异丙酚与白藜芦醇通过上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax及caspase-3蛋白的表达,抑制细胞凋亡,对HIRI产生一定的保护作用.异丙酚与白藜芦醇联合应用可以明显减少用药剂量.

    作者:申新;赵鸽;王瑞;刘婷婷;刘琳 刊期: 2013年第01期

  • 术前血小板与淋巴细胞比值对结直肠癌预后的影响

    目的 探讨术前外周血血小板/淋巴细胞比值(PLR)对结直肠癌患者预后的影响.方法 回顾性分析解放军总医院普通外科140例行结直肠癌根治术患者的临床资料,根据患者术前外周血血小板/淋巴细胞比值分为低PLR组(PLR<250)和高PLR组(PLR≥250),采用单因素和COX回归模型分析两组患者的PLR及其它临床病理因素与5年生存率的关系.结果 低PLR组的5年生存率明显高于高PLR组(71.4%vs51.5%;P=0.045);单因素分析显示肿瘤位置,肿瘤浸润深度,淋巴结转移,肿瘤分期,PLR对结直肠癌患者5年生存率有影响;多因素分析显示PLR是影响结直肠癌预后的独立危险因素(RR:2.213; 95% CI:1.007-4.863;P=0.0048).结论 术前PLR对结直肠癌预后评估有临床价值.

    作者:刘海亮;杜晓辉;孙培鸣;肖春红;徐迎新;李荣 刊期: 2013年第01期

  • 18F-FDG PET/CT显像对孤立结节型细支气管肺泡癌的诊断价值

    目的 探讨18F-FDG PET/CT显像诊断孤立结节型细支气管肺泡癌的价值.方法 采用回顾性分析,研究对象为2005年8月~2009年12月在广州军区广州总医院行18F-FDG PET/CT显像并经手术病理确诊为细支气管肺泡癌的患者30例.分别记录其形态学表现及放射性分布,同时测量其大SUV值(SUVmax),并分析PET、PET/CT和HRCT三者的确诊率.结果 PET显示30例缅支气管肺泡癌病例中有19例SUVmax≥2.5,呈阳性改变,占63%.5例表现为磨玻璃样改变,另外还有3例为混合性结节(实变结节周围伴有磨玻璃影),22例为实变结节.HRCT显示这类病灶多位于双肺上叶,大多位于肺野外围胸膜下,病灶呈小斑片状或结节状,形态不规则,有分叶征22例,毛刺征15例,胸膜凹陷征21例,空泡征4例.PET、PET/CT和HRCT三者的确诊率分别为36.67%、93.33%和93.33%.结论 细支气管肺泡癌的SUVmax值对判断病变的良恶性价值有限,对病变活性程度可作一般性参考.在诊断时应充分发挥PET/CT影像与功能融合的作用,多从影像学角度进行判断(特别是HRCT的BAC征象),以减少误诊率.

    作者:柳伟坤;李向东;全江涛;欧阳习;郑辉 刊期: 2013年第01期

  • 小视野四翻转恢复成像技术在颈动脉粥样硬化高分辨MRI增强扫描中的应用

    目的 为缩短扫描时间,在颈动脉高分辨磁共振对比增强中使用小视野四翻转恢复成像技术(SF-QIR),并评价其成像质量.方法 24例颈动脉斑块患者在同一台3.0T磁共振仪上进行颈动脉高分辨SF-QIR和常规矩形相位编码四翻转恢复(SrF-QIR)增强扫描.两种扫描序列间,除相位编码数量及射频脉冲激励方式不同外,其他扫描参数均一致.由3名独立的评价人对两种序列图像分别进行定性及定量评价.定性评价指标为颈动脉外部管壁轮廓、纤维帽及富脂质坏死核轮廓、诊断信心.定量评价指标为大狭窄程度、管壁面积、富脂质坏死核面积、信噪比、对比噪声比.结果 相对于SrF-QIR,使用正交射频脉冲技术的SF-QIR缩短近一半的扫描时间.除了信噪比与对比噪声比外,两种序列图像间各种定性及定量评价指标均无统计学差异(P>0.05).相对于SrF-QIR,SF-QIR损伤了37.7%的信噪比(P<0.001).结论 颈动脉高分辨小视野QIR增强扫描技术可以有效评价颈动脉斑块形态学特征,并且能够明显缩短扫描时间及减少运动伪影.

    作者:王庆军;王勇;蔡剑鸣;蔡幼铨;刘丹青;韩旭 刊期: 2013年第01期

  • 种植自体尿路上皮细胞的包膜化输尿管组织工程支架的构建

    目的 探讨应用组织工程技术体外构建种植自体尿路上皮细胞的包膜化聚乳酸输尿管支架的可行性.方法 将聚乳酸输尿管支架于比格犬皮下包埋3周,在其表面诱导形成一层结缔组织薄膜,获得包膜化聚乳酸输尿管支架.经脱细胞处理后,将体外扩增培养的自体尿路上皮细胞种植于包膜输尿管支架表面.采用常规HE染色组织切片、扫描电镜和免疫组化法对包膜输尿管支架及尿路上皮附着情况进行观察;应用MTT比色法比较尿路上皮细胞在包膜化聚乳酸输尿管支架组和管状小肠粘膜下基质组的生长差异.结果 HE染色及Ⅷ因子免疫组化染色结果显示结缔组织层内含有大量毛细血管,但无明显局部炎症反应;扫描电镜和免疫组化染色提示包膜含有丰富的胶原纤维构成、表面呈现三维立体结构,尿路上皮细胞能在支架包膜表面粘附,形成连续的上皮层;MTT检测显示包膜化聚乳酸输尿管支架组和管状小肠粘膜下基质组组吸光光度值比较无明显差异(P>0.05),说明尿路上皮细胞在包膜化输尿管支架上能连续增殖.结论 包膜化聚乳酸输尿管支架适合尿路上皮细胞黏附和增殖,体外构建的包膜化组织工程输尿管有潜在的临床应用价值.

    作者:谭海颂;符伟军;李健强;王忠新;李钢;马鑫;董隽;高江平;王晓雄;张旭 刊期: 2013年第01期

  • 菝葜治疗慢性盆腔炎有效部位的药效学筛选研究

    目的 通过对菝葜各化学部位的药效学筛选,确定其治疗慢性盆腔炎疾病(CPID)的有效部位,为菝葜制剂的二次开发提供科学依据.方法 采用苯酚胶浆注入大鼠子宫造成大鼠CPID模型,观察菝葜各化学部位对CPID模型大鼠的治疗作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和大鼠棉球肉芽肿法,探讨菝葜各化学部位的抗炎作用.结果 菝葜乙酸乙酯部位的高剂量组能显著降低CPID模型大鼠的子宫炎症反应,对小鼠耳肿胀和大鼠棉球肉芽肿的抗炎作用与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.01);中剂量组也能明显改善炎症程度.总体抗炎作用优于总提液组.正丁醇部位作用不明显.结论 菝葜的乙酸乙酯部位为菝葜抗炎及抗慢性盆腔炎的有效部位.

    作者:马云;罗艳琴;宋路遥;秦飞;侯连兵 刊期: 2013年第01期

  • NADPH氧化酶p22phox与非瓣膜性心衰左室重量指数的相关性分析

    目的 研究非瓣膜性慢性心衰患者吞噬细胞NADPH氧化酶p22phox表达与左室重量指数的相关性,初步探讨该途径导致的氧化应激在非瓣膜性慢性心衰左室重构中的作用.方法 收集59例非瓣膜性慢性心衰患者作为心衰组,20例健康体检者为健康对照组.心衰组(HF)患者根据有无左室肥厚(LVM),分为单纯心衰组和心衰合并左室肥厚组.计算其体表面积(BSA)及体质指数(BMI),抽取其空腹外周静脉血,收集吞噬细胞,提取总RNA,进行RT-PCR反应,得到p22phox的终表达量.同时进行血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、尿酸(UA)测定.测量并记录左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVEDs)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、EF值等参数,计算左室质量指数(LVMI).结果 心衰组p22phox表达水平(0.91±0.37)较对照组(0.68±0.33)表达增高,差别有统计学意义(P=0.039,P<0.05);心衰合并左室肥厚组(1.58±0.20)较单纯心衰组p22phox水平(0.71±0.24)增高,差别有统计学意义(P=0.026,P<0.05);p22phox与LVMI呈正相关关系(r=0.508,P<0.05).结论 NADPH氧化酶p22phox与非瓣膜性心衰左室质量指数呈正相关性,在一定程度上可提示左室重构的水平.

    作者:杨树国;姚宗芹;李敏;尤润生;王爱红;赵洪进 刊期: 2013年第01期

  • MCP-3对人脐静脉内皮细胞表达ICAM-1,VCAM-1、TF/TFPI及其凋亡的影响

    目的 研究单核细胞趋化因子-3(MCP-3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达ICAM-1、VCAM-1、TF、TFPI及其凋亡的影响.方法 分离、培养人脐静脉内皮细胞,分别给予0~3.0 ng/ml的MCP-3进行干预,确定MCP-3对HUVECs的适作用浓度,以此浓度干预HUVECs,在MCP-3加药之前1h分别给予MCP-3抗体(20 ng/ml)、PI3K抑制剂LY-294002(5 mmol/ml)处理细胞,MCP-3作用24 h后提取各组总RNA、总蛋白,用RT-PCR、Western blot分别检测干预后的ICAM-1、VCAM-1 、TF、TFPI的表达.模拟病理状态,用ox-LDL干预HUVECs与空白组对照,24 h后提取各组总RNA、总蛋白,用RT-PCR、Western Blot分别检测各组MCP-3表达情况.后,用MCP-3及MCP-3+CCR2拮抗剂RS102895 (6μmol/L)分别干预HUVECs,作用24、48 h分别检测HUVECs凋亡率及caspase3的表达,并与空白对照组比较.结果 MCP-3对HUVECs的适作用浓度为0.3 ng/ml (P<0.05);MCP-3可诱导HUVECs细胞中ICAM-1、VCAM-1、TF表达的增加,同时可抑制TFPI表达(P<0.05);MCP-3抗体和LY-294002可分别拮抗、抑制此作用(P<0.05);ox-LDL可上调HUVECs表达MCP-3 (P<0.05);作用24、48 h后MCP-3可明显诱导HUVECs凋亡,CCR2抑制剂可拮抗此作用.结论 ox-LDL可诱导HUVECs表达MCP-3,MCP-3可诱导HUVECs凋亡,且可能部分通过PI3K信号通路影响HUVECs功能.

    作者:陈劲松;张波;潘从泽;任磊;陈韵岱 刊期: 2013年第01期

  • 小鼠VEGFR2胞外1-4IgG样结构域的原核表达、纯化及活性鉴定

    目的 获得小鼠血管内皮生长因子Ⅱ型受体(mVEGFR2)胞外1-4IgG样结构域融合蛋白并验证其免疫原性及生物活性.方法 利用RT-PCR法从孕龄14d的Balb/c小鼠胚胎组织中扩增mVEGFR2D1-4基因,测序正确后将其克隆至原核表达载体pET-42a,构建重组质粒pET-42a-mVEGFR2D 1-4.将其转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,目的蛋白用Western blotting鉴定后,亲和层析法纯化融合蛋白,ELISA法检测纯化蛋白的抗原活性,并通过体外细胞培养检测该融合蛋白对血管内皮生长因子(VEGF)促人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的阻断作用.结果 测序结果证实成功扩增出目的基因mVEGFR2D1-4;酶切和测序结果证实pET-42a-mVEGFR2D 1-4原核表达载体构建成功;转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;Western blotting证实纯化的蛋白能与特异性抗体发生反应;ELISA检测显示纯化后的mVEGFR2D1-4融合蛋白具有免疫原性,并且体外细胞培养试验证实其能阻断VEGF对HUVEC的促增殖作用.结论 成功获得mVEGFR2D1-4/GST融合蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性及生物活性,为进一步研究以VEGFR2为靶点的抗肿瘤主动免疫治疗奠定了基础.

    作者:王伟;殷小涛;李云奇;田仁礼;阎瑾琦;高江平;于继云 刊期: 2013年第01期

  • MAP-2和巢蛋白在人胚胎舌肌组织发育过程中的表达

    目的 探讨微管相关蛋白2(MAP-2)和巢蛋白与人胚胎舌肌组织的发育关系.方法 应用免疫组织化学PV法检测第2~4三个月龄段,共16例人胚胎,舌肌组织内MAP-2和巢蛋白的表达规律.结果 第2~4个月龄段,MAP-2和巢蛋白在人胚胎舌肌组织内均呈阳性表达.第2个月龄段未见明显MAP-2阳性表达细胞,第3~4个月MAP-2在舌肌内阳性表达细胞数依次为24.14±8.28、15.86±3.89,阳性表达强度依次为109.42±11.62、124.27±8.73.第2~4个月巢蛋白在舌肌组织内阳性细胞数量依次为12.50±3.17、19.00±7.63、22.80±6.91,阳性细胞表达强度依次为为119.99±24.02、102.20±11.76、98.24±10.66.随着胎龄增大,MAP-2在肌组织内阳性细胞表达数量呈先增高再降低趋势,阳性细胞表达强度呈逐渐增高趋势;巢蛋白在肌组织内阳性细胞表达数量呈逐渐增高趋势,阳性细胞表达强度呈逐渐降低趋势.结论 MAP-2和巢蛋白参与调节人胚胎舌肌组织的发育过程.

    作者:刘学红;张泳 刊期: 2013年第01期

  • 相关函数法用于监控脉冲高强度聚焦超声治疗的准确性研究

    目的 探讨脉冲高强度聚焦超声(PHIFU)治疗过程中超声监控的准确性,提高PHIFU治疗中超声判断组织坏死的灵敏度.方法 采用定点辐照牛肝组织的方法,按治疗剂量设定为A组(2000 J)和B组(1440 J),A、B两组再根据占空比不同分为A1组:100W连续波辐照20 s,A2组:100W占空比50%的脉冲波辐照40 s,A3组:100W占空比40%的脉冲波辐照50 s;B1组:120W连续波辐照12s,B2组:120W占空比50%的脉冲波辐照24 s,B3组:120W占空比40%的脉冲波辐照30 s.观察各组辐照后超声图像出现灰度变化,并对辐照前后图像进行相关函数分析,比较灰度变化与相关函数二者对坏死判断的准确性.结果 超声图像灰度增强用于判断PHIFU辐照后损伤的判对率仅为51%,相关函数法判对率可达到85%,明显高于超声灰度增强的方法.结论 PHIFU辐照损伤的监控不能仅依赖于超声图像灰度变化,相关函数法能够更为准确、灵敏的判断PHIFU所致的组织损伤.

    作者:赵欣;邹建中;伍烽;刘芳;焦娇 刊期: 2013年第01期

  • 加味四逆散对慢性身心应激模型大鼠胃粘膜超微结构及脑肠轴的影响

    目的 建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散对模型大鼠胃粘膜超微结构、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)含量、胃组织胃泌素受体(GASR)、空肠组织血管活性肠肽Ⅱ型受体(VIPR2)mRNA表达的影响,阐明加味四逆散干预应激性胃肠功能障碍的机制.方法 大鼠随机分为正常组,模型组,加味四逆散大、中、小剂量组,奥美拉唑组,采用慢性身心应激方法建立大鼠应激模型,经加味四逆散等干预后透射电镜法观察腺胃区胃粘膜组织细胞及细胞间连接的超微结构改变,放免法测定血浆ACTH和血清CORT的变化,并用RT-PCR法检测胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达变化.结果 电镜观察显示正常组大鼠胃粘膜上皮细胞形态及大小正常;模型组大鼠胃粘膜上皮细胞细胞器及胞核受损严重;其余治疗组均较模型组不同程度好转.与模型组比较,加味四逆散方各给药组、奥美拉唑组大鼠血中ACTH和CORT含量不同程度降低;而胃组织GASR mRNA表达均升高,空肠组织VIPR2 mRNA表达则降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 加味四逆散可显著改善慢性身心应激模型大鼠胃粘膜组织细胞的微观病理形态,调节脑肠轴状态并可改善胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达.

    作者:谢慧臣;刘芬;杨强;熊常初 刊期: 2013年第01期

南方医科大学学报杂志

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