李含；孙竞；周璇；刘阳；宋晓玲；马庆辉
目的 探讨山楂酸预处理对大鼠大脑皮层神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的影响.方法 原代培养SD大鼠15～17d胎鼠皮层神经元,预先用不同浓度的山楂酸(0.1、1、10 μmol/L)预处理,观察在OGD培养状态下细胞的功能状态和损伤情况.以四甲基偶氮唑盐还原试验检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标,以Western blot检测凋亡相关蛋白Bax的表达.结果 OGD引起细胞活力下降,LDH漏出率增高,与正常组细胞相比均有非常显著意义;两组细胞经不同浓度山楂酸(0.1、1、10 μmol/L)预处理后,分别与未经山楂酸预处理的细胞比较结果显示:OGD组细胞LDH漏出率在山楂酸浓度为1、10 μmol/L时降低,而正常组细胞LDH漏出率在山楂酸浓度为10 μmol/L明显降低;两组细胞的存活率均在给予山楂酸预处理浓度为1、10 μmol/L时明显升高.Western blot结果显示凋亡相关蛋白Bax的表达随着山楂酸的浓度增加而下降,以山楂酸浓度为10 μmol/L时更明显.结论 山楂酸对体外培养的大鼠大脑皮层神经元OGD损伤有保护作用,可能与凋亡相关蛋白Bax表达降低有关.
作者：黄柏胜；罗洁；韩仰；李思敏；刘发益；邬力祥 刊期： 2013年第03期
目的 调查Y-filer检测系统中17个Y-STR基因座在广东汉族中的多态性及遗传稳定性,研究其法医学应用效能.方法 应用Y-filer检验体系对广东汉族1000个男性无关个体及1000对确定亲子关系的父子进行Y-STR分型,计算17个Y-STR基因座的的单倍型频率,对发生突变的基因座进行单基因座扩增和测序验证后计算突变率.结果 1000个广东男性无关个体中没有发现相同的单倍型,单倍型多样性达到1.0000,17个Y-STR基因座的基因多样性值在0.4285(DYS391)～0.9654(DYS385a/b)之间.1000对父子17个基因座共观察17 000次减数分裂,共发现46次突变,平均突变率为0.0027(95％ CI,0.0020～0.0036).结论 Y-filer检测系统在广东汉族人群中具有高度多态性,在父权鉴定、个体识别等法医学应用中具有重要价值.
作者：翁玮霞；刘宏；刘超；李双琳；刘长晖；王慧君 刊期： 2013年第03期
目的 探讨抑癌基因WTX启动子区域甲基化水平及其在胃癌中的作用.方法 运用MassARRAY定量分析系统分析20例胃癌及配对正常组织和3种胃癌细胞株(MGC803、SCG7901和BGC823)中WTX基因启动子区域甲基化水平.应用5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)对胃癌细胞BGC823进行去甲基化处理,分析其对WTX基因启动子区域甲基化水平的影响.结果 在胃癌及其配对正常组织和胃癌细胞株中,WTX基因启动子区域甲基化水平普遍较低,并且3组之间无统计学差异.用5-aza-dC处理后并不能改变胃癌细胞株中WTX基因启动子区域的甲基化水平.结论 胃癌中基本不存在WTX基因启动子区域高甲基化状态.
作者：刘霞；王启明；牛会林；杨学习；孙静哲；张庆玲；丁彦青 刊期： 2013年第03期
目的 探索正常成人视觉与听觉皮层间结构的连通性.方法 对21例健康成年人进行脑部扩散张量成像(DTI)扫描,并对DTI数据进行视觉皮层和听觉皮层间结构连通性分析及纤维束示踪成像.结果 双侧视觉皮层之间及双侧听觉皮层之间均存在正性结构连接.同侧初级听觉皮层区与同侧视觉皮层存在负性连接,与对侧视觉皮层间存在正性连接.次级听觉皮层与双侧视觉皮层间存在正性结构连接.纤维示踪成像显示双侧视觉皮层之间、同侧视觉皮层与听觉皮层之间存在纤维束连接.结论 双侧视觉皮层与听觉皮层之间存在内在的结构连通性.
作者：陈志晔；李金锋；刘梦雨；马林 刊期： 2013年第03期
目的 生物信息学分析发现CITED1 63-84氨基酸片段为其重要的功能片段,进一步研究CITED1 63-84氨基酸片段突变(丝氨酸突变为丙氨酸)是否影响其进核及成骨分化,探讨其在成骨分化过程中的生物学调控功能.方法 CITED1 63-84突变质粒(9S＞A),CITED1质粒及空白质粒分别转染MC3T3-E1细胞,培养2d,用100 nmol/LPTH (1-34)刺激细胞,行细胞免疫荧光实验,共聚焦镜下观察细胞内CITED1位置变化.将CITED1 63-84突变质粒(9S＞A),CITED1质粒及空白质粒按相应体系转染MC3T3-E1细胞,分为两组,一组成骨诱导4周,另一组成骨诱导基础上进行10 nmol/L PTH(1-34)间歇刺激(每48h刺激4 h)4周,测ALP酶活性及Ca离子浓度并进行ALP及茜素红染色.行RT-PCR实验分析成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC的表达量.结果 PTH(1-34)可促进CITED1进核,将CITED1氨基酸63-84片段突变后,可明显抑制该反应.4周成骨诱导后,CITED1过表达明显抑制成骨细胞分化,ALP及Ca离子浓度明显低于对照组,而CITED1突变质粒(9S＞A)过表达ALP及Ca离子浓度明显高于CITED1组,与对照组基本相同.进一步研究表明,CITED1过表达抑制PTH(1-34)诱导的成骨细胞分化,而CITEDl突变质粒(9S＞A)可逆转该反应.ALP染色及茜素红染色也验证了以上结论.RT-PCR结果提示:CITED1突变质粒(9S＞A)过表达成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC明显高于CITED1质粒过表达.结论 CITED1 63-84片段丝氨酸为其重要的功能位点,可影响其细胞进核及成骨分化.
作者：林振；袁亮；孟越；冯瑞强；付兆宗；杨德鸿 刊期： 2013年第03期
目的 探讨计算机辅助精液分析(CASA)相关运动参数与行IVF治疗后正常受精率、卵裂率及优良胚胎率的关系.方法 288例患者按受精情况分为正常受精率≥50％组,正常受精率＜50％组;根据卵裂情况分为卵裂率≥90％组及卵裂率＜90％组;根据优良胚胎形成情况分为优良胚胎形成率≥50％组,优良胚胎形成率＜50％组,记录取卵前男方2次精液检查精子运动相关参数的均值,用t检验法确定各组间相关参数的均值是否存在统计学差异,从而判定与试管婴儿正常受精率、卵裂率及优良胚胎形成率相关的精子运动参数.结果 正常受精率≥50％组VCL、VAP、ALH值明显高于正常受精率＜50％组,差异具有统计学意义(P＜0.05);卵裂率≥90％组VCL、VAP值明显高于卵裂率＜90％组,差异具有统计学意义(P＜0.05);优良胚胎形成率≥50％组与优良胚胎形成率＜50％组间VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF均无统计学差异(P＞0.05).结论 正常受精率、卵裂率与精子运动能力有关;试管婴儿优良胚胎形成率的大小与精子运动参数无关.
作者：袁平庆；张哲欢；罗琛；全松；褚庆军；赵善超 刊期： 2013年第03期
目的 观察淤血/再灌注损伤(CRI)与缺血/再灌注损伤(IRI)对术后剩余肝脏的影响.方法 将雄性SD大鼠分为3组,IRI组:预先对肝左叶进行30 min入肝血流阻断,然后切除除左叶以外的其他肝叶(切除部分约占全肝重的70％);CRI组:预先对肝左叶进行30 min出肝血流阻断,然后切除除左叶以外的其他肝叶;对照组:单纯切除除肝左叶以外的其他肝叶.记录各组大鼠死亡率,分别于术后1、3、7d处死实验大鼠检测各组的ICG血浆消除率(ICG-PDR)、ALT、AST、肝再生度、Ki-67标记指数等变化.结果 CRI组术后死亡率高于IRI组(34.3％vs8％,P＜0.05)以及对照组(34.3％vs4％,P＜0.01);与对照组相比较,CRI组术后第1天转氨酶明显升高、肝功能显著降低(P＜0.05),而同等时间的IRI无统计学差异(P＞0.05);与对照组相比,CRI组的术后第1天的Ki-67标记指数明显降低(P＜0.01),甚至低于IRI组(P＜0.01);CRI组的Ki-67标记指数峰值延迟出现,峰值的高度低于对照组.相比对照组,CRI组术后第3天的肝再生度也受到抑制(P＜0.01),亦低于IRI组(P＜0.05).结论 与IRI相比,CRI能引起更严重的肝损伤同时抑制肝切除术后早期的肝再生.
作者：谭晓宇；许文犁；葛新兰；李崇辉；张爱群；董家鸿 刊期： 2013年第03期
目的 系统评价磺达肝癸钠与依诺肝素在预防骨科大手术后静脉血栓栓塞症(VTE)方面的疗效与安全性.方法 计算机检索MEDLINE、EMbase、Cochrance图书馆、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库及万方资源数据系统,并手工检索相关杂志、会议论文等.检索无语种限制,时间均从建库至2012年10月.按特定的纳入排除标准,筛选出符合标准的关于磺达肝癸钠与依诺肝素预防骨科大手术后VTE发生的随机对照试验.评价指标为总VTE、深静脉血栓(DVT)、症状性VTE、肺栓塞、大出血事件和各种不良事件等的发生率.进行质量评价和数据提取后,采用RevMan 5.1.7软件进行Meta分析.结果 共纳入随机对照研究文献5篇,均为英文文献,研究对象有1篇为膝关节大手术患者,1篇髋部骨折手术患者,其余3篇为全髋关节置换术患者,病例数为7611例.Meta分析结果显示:磺达肝癸钠组的总VTE发生率低于依诺肝素组[RR=0.52,95％ CI(0.40,0.67),P＜0.00001];磺达肝癸钠组DVT发生率低于依诺肝素组[RR=0.49,95％CI(0.42,0.58),P＜0.00001];磺达肝癸钠组症状性VTE发生率与依诺肝素组无统计学差异[RR=1.52,95％CI(0.80,2.88),P=-0.20];磺达肝癸钠组大出血发生率高于依诺肝素组[RR=1.55,95％ CI(1.14,2.12)),P=-0.006];磺达肝癸钠组总死亡率与依诺肝素组无统计学差异[RR=0.93,95％ CI(0.63,1.37),P=-0.72].结论 磺达肝癸钠预防骨科大手术后VTE的疗效优于依诺肝素,虽然大出血风险较依诺肝素高,但并不增加总死亡率.
作者：李虎；王健；肖军；史占军 刊期： 2013年第03期
目的 探讨弹性应变率中的ROIA值在鉴别诊断甲状腺良恶性结节的价值,并与弹性评分作对比.方法 对124例患者共166个甲状腺结节术前均行弹性成像检查,获得弹性评分与弹性应变率中的ROIA值,采用ROC曲线评价ROI A值对甲状腺结节的诊断价值并寻找其佳诊断界点,将ROI A值、弹性评分及两者联合诊断结果分别与病理结果对照.结果 ROI A值在鉴别甲状腺良恶性结节的ROC曲线下面积(Az)为0.825,ROIA值佳诊断界点为0.00165,ROIA值、弹性评分、两者联合诊断甲状腺结节的敏感性、特异性、准确性、比数比分别为82.93％、72.80％、75.30％、13.0;87.80％、80.00％、81.93％、28.8;73.17％、91.20％、86.75％、32.1.联合诊断的比数比高,联合诊断准确性显著高于ROIA值(x2=19.31,P＜0.05)及弹性评分(x2=12.03,P＜0.05).结论 ROIA值在鉴别甲状腺良恶性结节上有中等诊断价值,有一定临床实用性,与弹性评分联合诊断有助于提高诊断准确性.
作者：安秀艳；丛淑珍；钱隽；郭玉萍；周立峰；梁婷 刊期： 2013年第03期
目的 探讨下肢深静脉血栓形成(DVT)的患者,在彩色多普勒超声(CDFI)引导下将下腔静脉滤器(IVCF)从右颈内静脉置入下腔静脉预防肺栓塞的可行性、安全性和临床应用价值.方法 对38例经临床和CDFI检查证实为下肢深静脉血栓的患者,经右颈内静脉置入IVCF,定期超声监测IVCF的形态与位置.临时性IVCF在放置32～45 d后在超声引导下经右颈内静脉取出.随访观察有无PE及滤器并发症.结果 38例患者术前均经CDFI检查,右颈内静脉、下腔静脉、髂总静脉分叉、双侧肾静脉开口位置显示均清晰,所有静脉无变异,无血栓,显示率100％.在CDFI引导下,经右颈内静脉置入临时性IVCF 23个,永久性IVCF 15个,技术成功率100％.术后CDFI和X线腹部平片均证实滤器置入位置正确,展开完全.23个临时性IVCF 32～45 d后均经右颈内静脉取出.随访栓子捕获率36.5％,滤器无错位、移位、断裂,患者没有出现腔静脉穿孔、肺栓塞等并发症.结论 CDFI引导经右颈内静脉置入IVCF术是一种安全、可靠的方法;相对于X线引导,CDFI引导IVCF置入术具有简便、易行、无放射线、费用低廉等优点.
作者：陈莉蓉；周平；姚凯；田双明；钱滢；张萍 刊期： 2013年第03期
目的 建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法.方法 利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值.结果 成功建立一种检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100％(121/121),检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显提高灵敏度,达到93.3％(14/15).结论 双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率.
作者：王艳芳；曾磊；陈学东；郝卫；杨梅；蔡建飘；王压娣；袁国勇；车小燕 刊期： 2013年第03期
目的 探讨肺通气功能正常与慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人肺内小动脉对血管活性物质(如:血栓素A2、内皮素等)的反应性及其可能的机制.方法 分离人肺内小动脉,制备血管条,采用微血管张力测定技术,分别比较肺通气功能正常与COPD病人肺内小动脉对60 mmol/L高钾溶液、血栓素A2类似物U46619(100 nmmol/L)、内皮素(ET-1) (30 nmol/L)诱导反应的张力变化;观察用非特异性环氧化酶抑制剂吲哚美辛孵育后肺内小动脉张力变化幅度的差异.结果 与肺通气功能正常病人相比,COPD病人肺内小动脉对U46619(对照组:7.68±2.31mN,COPD组:5.89±2.43mN,P＜0.05)和ET-1(对照组:5.97±2.08mN,COPD组:3.99+2.15 mN,P＜0.01)引起的张力明显下降,而两组对高钾溶液引起的张力变化无明显差异(对照组:5.65±1.70mN,COPD组:5.02±1.38mN,P＞0.05);吲哚美辛孵育后,对照组肺血管张力下降(对照组:孵育前平均张力比孵育后平均下降39％,P＜0.01;COPD组:孵育前平均张力比孵育后平均上升5％,P＞0.05).结论 慢性阻塞性肺疾病病人对血栓素类似物U46619、内皮素ET-1反应性降低.
作者：陈怡静；邓春玉；邝素娟；马珏；赵国栋；张光燕；崔建修 刊期： 2013年第03期
目的 研究表面喷砂处理及不同正畸粘结剂对氧化锆陶瓷与牙釉质间剪切粘结强度的影响.方法 40颗离体上颌第一前磨牙,应用计算机辅助设计与计算机辅助制作系统设计和制作粘结面与牙面紧密贴合的个性化氧化锆陶瓷试件.将试件随机分为4组,分别选择粘结面喷砂处理和粘结面无处理,选择京津釉质粘结剂和3M Transbond XT光固化粘结剂.按要求粘结24 h后,万能材料试验机测定剪切粘结强度,并进行统计学分析.结果 喷砂组剪切粘结强度显著高于未喷砂组(P＜0.05),两种粘结剂的剪切粘结强度无显著差异(P＞0.05).结论 表面喷砂处理后,无论使用京津釉质粘结剂或是3M Transbond XT光固化粘结剂,氧化锆陶瓷与牙釉质间均可获得足够的剪切粘结强度.
作者：李颖慧；吴补领；孙风阳 刊期： 2013年第03期
目的 研究晚期氧化蛋白产物(AOPP)对大鼠成骨细胞增殖、分化及氧化应激的影响及作用机制.方法 新生大鼠颅骨酶解法培养成骨细胞,用CCK-8试剂盒和碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测不同浓度AOPP(50、100、200、400 μg/ml)对成骨细胞增殖和分化的影响;以2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯为荧光探针检测不同浓度AOPP对成骨细胞OB活性氧含量的影响;实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测成骨细胞ALP、I型胶原蛋白、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA表达水平.结果 与对照组相比,AOPP能够显著抑制成骨细胞OB增殖(P＜0.01),降低其ALP活性(P＜0.01),增加成骨细胞中活性氧的生成(P＜0.01),下调ALP、Ⅰ型胶原蛋白mRNA的转录(P＜0.05),并增加RAGE mRNA的表达(P＜0.05).结论 AOPP可抑制成骨细胞增殖及分化,可能与上调RAGE mRNA表达,诱导成骨细胞产生活性氧有关.
作者：孙楠；杨力；李英彬；程彦臻；张振；蔡德鸿 刊期： 2013年第03期
目的 通过与高分辨2D黑血磁共振成像技术比较,评价3D黑血磁共振成像(3D-BB-MRI)对颈动脉粥样硬化斑块定量分析的价值.方法 40例患者进行颈动脉常规轴位2D-BB-MRI及斜矢状位3D-BB-MRI扫描.对斜矢状位3D-BB-MRI原始图像进行轴位重建.对于每个测量对象(单侧颈动脉),由两名有经验的放射科医师在2D-BB-MRI图像上共同找出其斑块测量的兴趣层面,以此进行3D-BB-MRI轴位重建图像与2D-BB-MRI图像的匹配.对该侧颈动脉分别进行斑块厚度、管腔狭窄程度、管腔面积、总血管面积的测量及管壁面积和标准化管壁指数的计算,并分析所有数据.结果 在评估斑块厚度、管腔狭窄程度、管腔面积、总血管面积、管壁面积及标准化管壁指数方面,2D-BB-MRI与3D-BB-MRI轴位重建图像的测量差异无统计学意义(P＞0.05),两者呈较强的相关性(r＞0.9).Bland-Altman图显示对于测量斑块厚度、管腔面积、总血管面积,2D-BB-MRI与3D-BB-MRI两种方法具有良好的一致性.结论 3D-BB-MRI和2D-BB-MRI对于定量评价颈动脉粥样硬化斑块方面无明显差异;3D-BB-MRI具有任意角度重建图像、灵活显示管壁及斑块情况的特点,我们认为3D-BB-MRI对于颈动脉粥样硬化成像较2D-BB-MRI具有更好的发展前景.
作者：刘丹青；王庆军；蔡剑鸣；蔡幼铨；王勇；韩旭 刊期： 2013年第03期
目的 研究中国重型血友病A患者临床表现异质性特点,分析早期预测指标.方法 收集223例重型血友病A患者(FⅧ:C≤2％)首次出血年龄、首次关节出血年龄、出血频率、关节畸形数目、体质量指数(BMI)等资料进行分析.结果 重型血友病患者首次出血年龄中位数1岁(0～35岁);首次出血＜1岁、≥2岁和≥6岁者分别为94/212 (44.3％)、73/212(34.4％)和23/212(10.8％);首次关节出血年龄中位数2.25岁,首次关节出血年龄≤1岁、≥2岁和≥6岁者分别为24/94(25.5％)、54/94(57.4％)和17/94(18.1％),出生至今未发生过关节出血的7例,占7.4％;年出血频率中位数24次/年(1～120次/年),年出血频率≤6次/年的例数为27例(12.9％);但我国目前无关节畸形的重型患者仅24.7％.分析显示,临床表现较轻者(年出血≤6次/年)和临床表现较重者(年出血＞6次/年)的首次出血年龄中位数分别为2岁和1岁(P=0.002),首次关节出血年龄中位数分别为3岁和2岁(P=0.014),BMI分别为(16.63±2.67)kg/m2和(18.82±4.21)kg/m2(P=0.001).结论 首次出血年龄、首次关节出血年龄和BMI可能是中国人重型血友病A临床表现异质性的早期预测指标.
作者：李含；孙竞；周璇；刘阳；宋晓玲；马庆辉 刊期： 2013年第03期
目的 探讨TRB3在非诺贝特抑制高糖诱导下肾小球系膜细胞增殖中的作用及作用其机制.方法 将细胞分为正常对照组(N,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(H,25 mmom/L葡萄糖)、高糖+不同浓度的非诺贝特组(FN,10、50、100 μmol/L).采用CCK-8法检测细胞增殖率,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测细胞周期改变,免疫细胞化学染色观察TRB3表达,Western Blot检测细胞中TRB3、P-AKT蛋白的表达.结果 高糖能够诱导肾小球系膜细胞增殖(P＜0.001);非诺贝特能够抑制肾小球系膜细胞增殖(P＜0.001),且具有浓度依赖性.非诺贝特干预后细胞出现凋亡形态学改变;非诺贝特可以使系膜细胞发生G1/S期阻滞;正常组、高糖组胞浆有少量TRB3蛋白表达,但高糖不能促进TRB3表达增多,随着非诺贝特浓度的增加TRB3表达量增多,P-AKT表达逐渐降低.结论 非诺贝特可以促进TRB3的表达;TRB3可能通过抑制AKt的磷酸化使肾小球系膜细胞发生G1/S期阻滞从而抑制其增殖.
作者：宋青青；孙嘉；王娇；杨锐；陈容平；张振；罗海钊；蔡德鸿 刊期： 2013年第03期
目的 筛选登革Ⅱ病毒(DENV-2)识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子.方法 提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总蛋白,用SDS-12％ PAGE进行分析,用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接DENV-2分子.结果 VOPBA检测不同发育时期白纹伊蚊显示:幼虫样品的泳道可见到25 000、35 000、50 000的DEN-2结合分子,蛹样品的泳道可见到35 000、50 000分子,雄蚊样品可见到50 000分子,雌蚊样品中可见到35 000、50 000分子.DEN-2结合蚊35 000分子在白纹伊蚊幼虫、蛹及成蚊的雌蚊的三个阶段均存在,而雄蚊的成蚊则缺少这一分子.VOPBA检测不同发育时期致倦库蚊:幼虫样品可见100 000分子,蛹样品可见40、100 000分子,另外在50 000位置上下亦可见48 000、60 000左右的多个条带,雄蚊与雌蚊样品均见40 000、100 000分子.结论 35 000大小的蛋白分子分布与白纹伊蚊感染组织向性相关.
作者：付宇姣；郑学礼；潘京 刊期： 2013年第03期
目的 比较“酶解+差速贴壁”法和“酶解+差速贴壁+5-溴脱氧尿嘧啶核苷(常规培养)”法体外分离培养乳鼠窦房结细胞,寻找可行的用于膜片钳实验的分离方法.方法 取Wistar乳鼠的窦房结组织,分别采用“酶解+差速贴壁”和常规培养法分离培养窦房结细胞,观察细胞形态结构、搏动频率、膜片钳实验难易程度及成功率.同样方法分离培养心房肌细胞作为对照.结果 培养的窦房结细胞中梭形细胞多、心房肌细胞中三角形细胞多.两种方法分离的窦房结细胞中均为梭形细胞多并均可记录到自发性动作电位,其中“酶解+差速贴壁”法分离的细胞活性更好,进行膜片钳实验的成功率更高.结论 “酶解+差速贴壁”法能成功分离出乳鼠窦房结细胞,操作步骤简单,细胞损伤小、活性好,能更好地进行膜片钳实验研究.
作者：汪艳丽；刘如秀；刘宇；李泱 刊期： 2013年第03期
目的 探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/Smad通路在雷奈酸锶(Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞过程中的作用.方法 体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA(SiRNA).酶标法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红染色检测钙结节,Western blotting法检测磷酸化Smadl/5/8及Runt 相关转录因子-2(Runx2)蛋白的表达.结果 应用0.1～10 mmol/L Sr处理BMSCs细胞1h后,细胞内磷酸化Smad1/5/8表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用BMP-2拮抗剂noggm预处理细胞2h能抑制Sr对磷酸化Smadl/5/8表达的上调作用;应用0.1～5 mmol/L Sr处理细胞6h后,细胞内Rtmx2表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用Smadl SiRNA转染细胞后能下调Smadl/5/8、磷酸化Smadl/5/8的表达,并抑制Sr对Runx2表达的上调作用,还拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用.结论 BMP-2/Smad通路参与了Sr促进BMSCs成骨分化.
作者：吕辉珍；黄晓丹；靳思思；郭润民；吴文 刊期： 2013年第03期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
