陈志晔；李金锋；刘梦雨；马林
目的 研究高糖环境对肝星状细胞Toll样受体4(TLR4)表达及脂多糖(LPS)诱导的炎症因子表达的影响.方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,采用高糖刺激,Western blot及RT-PCR检测细胞TLR4蛋白及mRNA表达;低糖或高糖培养基预处理肝星状细胞24 h后采用LPS(100 ng/ml)刺激,2h后Western blot检测NF-rB核转位,24 h后RT-PCR检测MCP-1和IL-6mRNA表达,ELISA检测细胞上清两种炎症因子的浓度.结果 高糖环境可上调肝星状细胞TLR4蛋白及mRNA表达(均为P＜0.01),且呈明显的时效-量效关系.高糖可促进肝星状细胞NF-κB核转位(P＜0.01),并促进MCP-1和IL-6表达及分泌(均为P＜0.01).高糖预处理可增强LPS诱导的肝星状细胞NF-κB核转位(P＜0.01)、MCP-1和IL-6表达及分泌(均为P＜0.01).结论 高糖可上调肝星状细胞TLR4的表达,并可促进脂多糖激活NF-κB而增加炎症因子表达及分泌.
作者：史海涛；董蕾；刘亚萍；贾淼；赵刚；赵菊辉；鲁晓岚 刊期： 2013年第03期
目的 筛选登革Ⅱ病毒(DENV-2)识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子.方法 提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总蛋白,用SDS-12％ PAGE进行分析,用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接DENV-2分子.结果 VOPBA检测不同发育时期白纹伊蚊显示:幼虫样品的泳道可见到25 000、35 000、50 000的DEN-2结合分子,蛹样品的泳道可见到35 000、50 000分子,雄蚊样品可见到50 000分子,雌蚊样品中可见到35 000、50 000分子.DEN-2结合蚊35 000分子在白纹伊蚊幼虫、蛹及成蚊的雌蚊的三个阶段均存在,而雄蚊的成蚊则缺少这一分子.VOPBA检测不同发育时期致倦库蚊:幼虫样品可见100 000分子,蛹样品可见40、100 000分子,另外在50 000位置上下亦可见48 000、60 000左右的多个条带,雄蚊与雌蚊样品均见40 000、100 000分子.结论 35 000大小的蛋白分子分布与白纹伊蚊感染组织向性相关.
作者：付宇姣；郑学礼；潘京 刊期： 2013年第03期
目的 初步探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)短期重复暴露对大鼠神经行为的影响.方法 SD雄性大鼠用0、150、450、1350 mg/(kg·d) DEHP连续灌胃染毒28 d.利用旷场(OFT)和高架十字迷宫(EPM)动态测试染毒前后大鼠行为学变化,并称量肝、肾和睾丸.结果 染毒前各组大鼠在OFT和EPM测试中均无显著性差异.染毒组与对照组相比体质量无统计学意义(P＞0.05);从染毒第3周开始,各组大鼠每周食物利用率有统计学意义(P＜0.05),总食物利用率有统计学意义(P＜0.01).与对照组相比,各染毒组肝脏、睾丸脏器系数差异有统计学意义(P＜0.0l),肾脏脏器系数差异则无统计学意义(P＞0.05),肾脏系数指标则无统计学意义(P＞0.05);高剂量组与对照组OFT运动总距离有统计学意义(P＜0.05);高剂量组与对照组、低、中剂量组OFT中央区活动时间均有统计学意义(P均＜0.05);中央区进入次数无统计学意义(P＞0.05);各组大鼠在EPM进臂总次数、开臂停留时间占总进臂时间百分比及开臂次数占总进臂次数百分比上差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DEHP对大鼠有一定毒性作用,影响自发活动和探索行为,使其对危险的预判能力下降,对人类可能产生潜在危害.
作者：梁添；欧阳俊彦；羿利华；褚玥；柳春红 刊期： 2013年第03期
目的 探讨山楂酸预处理对大鼠大脑皮层神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的影响.方法 原代培养SD大鼠15～17d胎鼠皮层神经元,预先用不同浓度的山楂酸(0.1、1、10 μmol/L)预处理,观察在OGD培养状态下细胞的功能状态和损伤情况.以四甲基偶氮唑盐还原试验检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标,以Western blot检测凋亡相关蛋白Bax的表达.结果 OGD引起细胞活力下降,LDH漏出率增高,与正常组细胞相比均有非常显著意义;两组细胞经不同浓度山楂酸(0.1、1、10 μmol/L)预处理后,分别与未经山楂酸预处理的细胞比较结果显示:OGD组细胞LDH漏出率在山楂酸浓度为1、10 μmol/L时降低,而正常组细胞LDH漏出率在山楂酸浓度为10 μmol/L明显降低;两组细胞的存活率均在给予山楂酸预处理浓度为1、10 μmol/L时明显升高.Western blot结果显示凋亡相关蛋白Bax的表达随着山楂酸的浓度增加而下降,以山楂酸浓度为10 μmol/L时更明显.结论 山楂酸对体外培养的大鼠大脑皮层神经元OGD损伤有保护作用,可能与凋亡相关蛋白Bax表达降低有关.
作者：黄柏胜；罗洁；韩仰；李思敏；刘发益；邬力祥 刊期： 2013年第03期
目的 分析原发性骨淋巴瘤(PBL)的临床特点、治疗效果及影响预后的因素.方法 回顾性分析1992～2010年南方医院收治的31例PBL患者的临床资料,采用Kaplan-Meier法及Cox比例风险模型进行生存及预后因素分析.结果 中位年龄46岁,常见的发病部位为股骨(29％)和脊柱(29％).16例(52％)化疗联合放疗治疗,15例(48％)单独化疗,中位随访49个月,总体有效率为94％(完全缓解68％;部分缓解26％).中位总生存期(OS)为71(95％CI:36～106)月,中位无进展生存期(PFS)为47(95％CI:30～64)月.单因素分析提示使用美罗华、放疗及国际淋巴瘤预后指数(IPI)0-2分提高OS与PFS,多因素分析提示是否使用美罗华、IPI评分为OS的独立预后因素,是否使用美罗华、IPI评分、是否联合放疗为PFS的独立预后因素.结论 使用美罗华显著提高PBL患者的OS及PFS,放疗对PBL患者OS无显著影响,但提高PFS.
作者：朱阳敏；岳春燕；吴彬；平宝红 刊期： 2013年第03期
目的 系统评价磺达肝癸钠与依诺肝素在预防骨科大手术后静脉血栓栓塞症(VTE)方面的疗效与安全性.方法 计算机检索MEDLINE、EMbase、Cochrance图书馆、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普数据库及万方资源数据系统,并手工检索相关杂志、会议论文等.检索无语种限制,时间均从建库至2012年10月.按特定的纳入排除标准,筛选出符合标准的关于磺达肝癸钠与依诺肝素预防骨科大手术后VTE发生的随机对照试验.评价指标为总VTE、深静脉血栓(DVT)、症状性VTE、肺栓塞、大出血事件和各种不良事件等的发生率.进行质量评价和数据提取后,采用RevMan 5.1.7软件进行Meta分析.结果 共纳入随机对照研究文献5篇,均为英文文献,研究对象有1篇为膝关节大手术患者,1篇髋部骨折手术患者,其余3篇为全髋关节置换术患者,病例数为7611例.Meta分析结果显示:磺达肝癸钠组的总VTE发生率低于依诺肝素组[RR=0.52,95％ CI(0.40,0.67),P＜0.00001];磺达肝癸钠组DVT发生率低于依诺肝素组[RR=0.49,95％CI(0.42,0.58),P＜0.00001];磺达肝癸钠组症状性VTE发生率与依诺肝素组无统计学差异[RR=1.52,95％CI(0.80,2.88),P=-0.20];磺达肝癸钠组大出血发生率高于依诺肝素组[RR=1.55,95％ CI(1.14,2.12)),P=-0.006];磺达肝癸钠组总死亡率与依诺肝素组无统计学差异[RR=0.93,95％ CI(0.63,1.37),P=-0.72].结论 磺达肝癸钠预防骨科大手术后VTE的疗效优于依诺肝素,虽然大出血风险较依诺肝素高,但并不增加总死亡率.
作者：李虎；王健；肖军；史占军 刊期： 2013年第03期
目的 观察硝基酪氨酸(NT)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏核因子-κB (NF-κB)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和转化生长因子-β1 (TGF-β1)表达的影响,探讨其在DN发生发展中的作用机制.方法 用链脲佐菌素腹腔注射法建立DN大鼠模型,造模成功的大鼠随机分3组:DN模型组、DN+NT组和DN+NT+Ebselen组(NT抑制剂),另设正常对照组.各组分别干预8周后,观察24 h尿蛋白定量变化,采用免疫组织化学染色检测肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测肾组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 mRNA表达,光镜观察肾脏病理改变.结果 与DN模型组比较,DN+NT组大鼠24 h尿蛋白定量、肾脏组织中NF-κB、MCP-1和TGF-β1的蛋白及mRNA水平均显著增加,肾脏病理改变加重;NT抑制剂Ebselen可明显减轻这些变化.结论 硝基酪氨酸可上调DN大鼠肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1蛋白及其mRNA的表达,加重炎性反应,促进DN的进展.
作者：许兆忠；王明；王艳靖；牛红心；李小云；周伟东；朱艳；龙海波 刊期： 2013年第03期
目的 分析单脐动脉是否合并其他异常时与胎儿染色体疾病的关系及新生儿预后.方法 对本院产前诊断中心2008年1月～2012年6月通过彩色多普勒超声诊断为单纯性单脐动脉及单脐动脉合并其他异常的胎儿,行羊膜腔穿刺取羊水及脐静脉穿刺取脐带血,常规进行染色体核型分析并对出生后的婴儿追踪随访观察.结果 经超声诊断为单脐动脉进行染色体检查的孕妇共44名,其中单纯性单脐动脉24例;单脐动脉合并其他异常20例,其中单脐动脉合并超声软指标异常8例,单脐动脉合并胎儿发育异常12例.单纯性单脐动脉组(n=24)与单脐动脉合并其他异常组(n=20)间分娩孕周和胎儿染色体异常的发生率有显著性差异.胎儿出生体质量,出生后APGAR评分及胎盘质量间,两组无明显差异.结论 对超声检查诊断为单脐动脉的胎儿,特别合并其他器官发育异常,有必要进行胎儿染色体产前诊断.单纯性单脐动脉的胎儿,需严密行超声检查,避免器官畸形的漏诊.
作者：常清贤；陈翠华；钟梅；裘毓雯；肖超群；黄启涛；余艳红 刊期： 2013年第03期
目的 研究中国重型血友病A患者临床表现异质性特点,分析早期预测指标.方法 收集223例重型血友病A患者(FⅧ:C≤2％)首次出血年龄、首次关节出血年龄、出血频率、关节畸形数目、体质量指数(BMI)等资料进行分析.结果 重型血友病患者首次出血年龄中位数1岁(0～35岁);首次出血＜1岁、≥2岁和≥6岁者分别为94/212 (44.3％)、73/212(34.4％)和23/212(10.8％);首次关节出血年龄中位数2.25岁,首次关节出血年龄≤1岁、≥2岁和≥6岁者分别为24/94(25.5％)、54/94(57.4％)和17/94(18.1％),出生至今未发生过关节出血的7例,占7.4％;年出血频率中位数24次/年(1～120次/年),年出血频率≤6次/年的例数为27例(12.9％);但我国目前无关节畸形的重型患者仅24.7％.分析显示,临床表现较轻者(年出血≤6次/年)和临床表现较重者(年出血＞6次/年)的首次出血年龄中位数分别为2岁和1岁(P=0.002),首次关节出血年龄中位数分别为3岁和2岁(P=0.014),BMI分别为(16.63±2.67)kg/m2和(18.82±4.21)kg/m2(P=0.001).结论 首次出血年龄、首次关节出血年龄和BMI可能是中国人重型血友病A临床表现异质性的早期预测指标.
作者：李含；孙竞；周璇；刘阳；宋晓玲；马庆辉 刊期： 2013年第03期
目的 探索正常成人视觉与听觉皮层间结构的连通性.方法 对21例健康成年人进行脑部扩散张量成像(DTI)扫描,并对DTI数据进行视觉皮层和听觉皮层间结构连通性分析及纤维束示踪成像.结果 双侧视觉皮层之间及双侧听觉皮层之间均存在正性结构连接.同侧初级听觉皮层区与同侧视觉皮层存在负性连接,与对侧视觉皮层间存在正性连接.次级听觉皮层与双侧视觉皮层间存在正性结构连接.纤维示踪成像显示双侧视觉皮层之间、同侧视觉皮层与听觉皮层之间存在纤维束连接.结论 双侧视觉皮层与听觉皮层之间存在内在的结构连通性.
作者：陈志晔；李金锋；刘梦雨；马林 刊期： 2013年第03期
目的 报告陈旧性宫外孕表现为无痛性巨大盆腔包块并影像学误诊1例,并分析该病例影像学误诊的原因.方法 36岁女性,主诉停经71d,阴道流血38 d,加重伴腹胀10 d,妇科检查子宫明显大于孕周,无压痛,人绒毛膜促性腺激素明显增高,CT误诊为滋养细胞肿瘤并左侧髂血管旁淋巴结转移.结果 完善相关准备后行剖腹探查术,术中发现盆腔内一巨大血肿,大直径达20 cm,行左侧输卵管切除及血肿清除术,术后病检符合输卵管妊娠.结论 陈旧性宫外孕表现为无痛性巨大盆腔包块实属少见,该病例影像学表现特殊,易误诊.
作者：蒋建发；肖松舒；薛敏 刊期： 2013年第03期
目的 探讨弹性应变率中的ROIA值在鉴别诊断甲状腺良恶性结节的价值,并与弹性评分作对比.方法 对124例患者共166个甲状腺结节术前均行弹性成像检查,获得弹性评分与弹性应变率中的ROIA值,采用ROC曲线评价ROI A值对甲状腺结节的诊断价值并寻找其佳诊断界点,将ROI A值、弹性评分及两者联合诊断结果分别与病理结果对照.结果 ROI A值在鉴别甲状腺良恶性结节的ROC曲线下面积(Az)为0.825,ROIA值佳诊断界点为0.00165,ROIA值、弹性评分、两者联合诊断甲状腺结节的敏感性、特异性、准确性、比数比分别为82.93％、72.80％、75.30％、13.0;87.80％、80.00％、81.93％、28.8;73.17％、91.20％、86.75％、32.1.联合诊断的比数比高,联合诊断准确性显著高于ROIA值(x2=19.31,P＜0.05)及弹性评分(x2=12.03,P＜0.05).结论 ROIA值在鉴别甲状腺良恶性结节上有中等诊断价值,有一定临床实用性,与弹性评分联合诊断有助于提高诊断准确性.
作者：安秀艳；丛淑珍；钱隽；郭玉萍；周立峰；梁婷 刊期： 2013年第03期
目的 探讨血同型半胱氨酸(HCY)与急诊PCI出现冠状动脉慢血流现象(CSF)的相关性,以及血Hcy高低对CSF患者预后的影响.方法 入选138例接受急诊PCI患者,根据术中是否出现CSF分为CSF组及对照组,比较两组患者HCY水平;然后对CSF进行亚组分析,根据HCY水平将CSF组分为HCY轻度升高组和HCY中度升高组,比较2组患者住院期间以及3个月随访的左室射血分数(LVEF)、主要不良心血管事件(MACE)及与HCY水平的相关性.结果 与对照组比较,CSF组患者患者血HCY水平明显升高,差异具有统计学意义(P=0.001);对CSF组进行亚组分析,与HCY轻度升高组相比,HCY中度升高组术后3个月LVEF值明显降低(P=0.031),主要心血管事件MACE发生率明显升高(P=0.019);HCY水平与术后3个月LVEF值呈负相关(r=-0.310,P=0.036),与术后3个月MACE(r=0.342,P=0.02)呈正相关,差异均具有统计学意义.结论 血HCY水平与急诊经皮冠状动脉介入治疗PCI出现CSF情况密切相关,同时HCY水平升高,将影响患者的左室射血分数的恢复及增加MACE发生率.
作者：吴焱贤；钟建开；陈玉映；陈盈文；黎文生；吴赛珠 刊期： 2013年第03期
目的 观察淤血/再灌注损伤(CRI)与缺血/再灌注损伤(IRI)对术后剩余肝脏的影响.方法 将雄性SD大鼠分为3组,IRI组:预先对肝左叶进行30 min入肝血流阻断,然后切除除左叶以外的其他肝叶(切除部分约占全肝重的70％);CRI组:预先对肝左叶进行30 min出肝血流阻断,然后切除除左叶以外的其他肝叶;对照组:单纯切除除肝左叶以外的其他肝叶.记录各组大鼠死亡率,分别于术后1、3、7d处死实验大鼠检测各组的ICG血浆消除率(ICG-PDR)、ALT、AST、肝再生度、Ki-67标记指数等变化.结果 CRI组术后死亡率高于IRI组(34.3％vs8％,P＜0.05)以及对照组(34.3％vs4％,P＜0.01);与对照组相比较,CRI组术后第1天转氨酶明显升高、肝功能显著降低(P＜0.05),而同等时间的IRI无统计学差异(P＞0.05);与对照组相比,CRI组的术后第1天的Ki-67标记指数明显降低(P＜0.01),甚至低于IRI组(P＜0.01);CRI组的Ki-67标记指数峰值延迟出现,峰值的高度低于对照组.相比对照组,CRI组术后第3天的肝再生度也受到抑制(P＜0.01),亦低于IRI组(P＜0.05).结论 与IRI相比,CRI能引起更严重的肝损伤同时抑制肝切除术后早期的肝再生.
作者：谭晓宇；许文犁；葛新兰；李崇辉；张爱群；董家鸿 刊期： 2013年第03期
目的 探讨下肢深静脉血栓形成(DVT)的患者,在彩色多普勒超声(CDFI)引导下将下腔静脉滤器(IVCF)从右颈内静脉置入下腔静脉预防肺栓塞的可行性、安全性和临床应用价值.方法 对38例经临床和CDFI检查证实为下肢深静脉血栓的患者,经右颈内静脉置入IVCF,定期超声监测IVCF的形态与位置.临时性IVCF在放置32～45 d后在超声引导下经右颈内静脉取出.随访观察有无PE及滤器并发症.结果 38例患者术前均经CDFI检查,右颈内静脉、下腔静脉、髂总静脉分叉、双侧肾静脉开口位置显示均清晰,所有静脉无变异,无血栓,显示率100％.在CDFI引导下,经右颈内静脉置入临时性IVCF 23个,永久性IVCF 15个,技术成功率100％.术后CDFI和X线腹部平片均证实滤器置入位置正确,展开完全.23个临时性IVCF 32～45 d后均经右颈内静脉取出.随访栓子捕获率36.5％,滤器无错位、移位、断裂,患者没有出现腔静脉穿孔、肺栓塞等并发症.结论 CDFI引导经右颈内静脉置入IVCF术是一种安全、可靠的方法;相对于X线引导,CDFI引导IVCF置入术具有简便、易行、无放射线、费用低廉等优点.
作者：陈莉蓉；周平；姚凯；田双明；钱滢；张萍 刊期： 2013年第03期
目的 调查Y-filer检测系统中17个Y-STR基因座在广东汉族中的多态性及遗传稳定性,研究其法医学应用效能.方法 应用Y-filer检验体系对广东汉族1000个男性无关个体及1000对确定亲子关系的父子进行Y-STR分型,计算17个Y-STR基因座的的单倍型频率,对发生突变的基因座进行单基因座扩增和测序验证后计算突变率.结果 1000个广东男性无关个体中没有发现相同的单倍型,单倍型多样性达到1.0000,17个Y-STR基因座的基因多样性值在0.4285(DYS391)～0.9654(DYS385a/b)之间.1000对父子17个基因座共观察17 000次减数分裂,共发现46次突变,平均突变率为0.0027(95％ CI,0.0020～0.0036).结论 Y-filer检测系统在广东汉族人群中具有高度多态性,在父权鉴定、个体识别等法医学应用中具有重要价值.
作者：翁玮霞；刘宏；刘超；李双琳；刘长晖；王慧君 刊期： 2013年第03期
目的 探讨TRB3在非诺贝特抑制高糖诱导下肾小球系膜细胞增殖中的作用及作用其机制.方法 将细胞分为正常对照组(N,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(H,25 mmom/L葡萄糖)、高糖+不同浓度的非诺贝特组(FN,10、50、100 μmol/L).采用CCK-8法检测细胞增殖率,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测细胞周期改变,免疫细胞化学染色观察TRB3表达,Western Blot检测细胞中TRB3、P-AKT蛋白的表达.结果 高糖能够诱导肾小球系膜细胞增殖(P＜0.001);非诺贝特能够抑制肾小球系膜细胞增殖(P＜0.001),且具有浓度依赖性.非诺贝特干预后细胞出现凋亡形态学改变;非诺贝特可以使系膜细胞发生G1/S期阻滞;正常组、高糖组胞浆有少量TRB3蛋白表达,但高糖不能促进TRB3表达增多,随着非诺贝特浓度的增加TRB3表达量增多,P-AKT表达逐渐降低.结论 非诺贝特可以促进TRB3的表达;TRB3可能通过抑制AKt的磷酸化使肾小球系膜细胞发生G1/S期阻滞从而抑制其增殖.
作者：宋青青；孙嘉；王娇；杨锐；陈容平；张振；罗海钊；蔡德鸿 刊期： 2013年第03期
目的 比较“酶解+差速贴壁”法和“酶解+差速贴壁+5-溴脱氧尿嘧啶核苷(常规培养)”法体外分离培养乳鼠窦房结细胞,寻找可行的用于膜片钳实验的分离方法.方法 取Wistar乳鼠的窦房结组织,分别采用“酶解+差速贴壁”和常规培养法分离培养窦房结细胞,观察细胞形态结构、搏动频率、膜片钳实验难易程度及成功率.同样方法分离培养心房肌细胞作为对照.结果 培养的窦房结细胞中梭形细胞多、心房肌细胞中三角形细胞多.两种方法分离的窦房结细胞中均为梭形细胞多并均可记录到自发性动作电位,其中“酶解+差速贴壁”法分离的细胞活性更好,进行膜片钳实验的成功率更高.结论 “酶解+差速贴壁”法能成功分离出乳鼠窦房结细胞,操作步骤简单,细胞损伤小、活性好,能更好地进行膜片钳实验研究.
作者：汪艳丽；刘如秀；刘宇；李泱 刊期： 2013年第03期
目的 探讨抑癌基因WTX启动子区域甲基化水平及其在胃癌中的作用.方法 运用MassARRAY定量分析系统分析20例胃癌及配对正常组织和3种胃癌细胞株(MGC803、SCG7901和BGC823)中WTX基因启动子区域甲基化水平.应用5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)对胃癌细胞BGC823进行去甲基化处理,分析其对WTX基因启动子区域甲基化水平的影响.结果 在胃癌及其配对正常组织和胃癌细胞株中,WTX基因启动子区域甲基化水平普遍较低,并且3组之间无统计学差异.用5-aza-dC处理后并不能改变胃癌细胞株中WTX基因启动子区域的甲基化水平.结论 胃癌中基本不存在WTX基因启动子区域高甲基化状态.
作者：刘霞；王启明；牛会林；杨学习；孙静哲；张庆玲；丁彦青 刊期： 2013年第03期
目的 生物信息学分析发现CITED1 63-84氨基酸片段为其重要的功能片段,进一步研究CITED1 63-84氨基酸片段突变(丝氨酸突变为丙氨酸)是否影响其进核及成骨分化,探讨其在成骨分化过程中的生物学调控功能.方法 CITED1 63-84突变质粒(9S＞A),CITED1质粒及空白质粒分别转染MC3T3-E1细胞,培养2d,用100 nmol/LPTH (1-34)刺激细胞,行细胞免疫荧光实验,共聚焦镜下观察细胞内CITED1位置变化.将CITED1 63-84突变质粒(9S＞A),CITED1质粒及空白质粒按相应体系转染MC3T3-E1细胞,分为两组,一组成骨诱导4周,另一组成骨诱导基础上进行10 nmol/L PTH(1-34)间歇刺激(每48h刺激4 h)4周,测ALP酶活性及Ca离子浓度并进行ALP及茜素红染色.行RT-PCR实验分析成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC的表达量.结果 PTH(1-34)可促进CITED1进核,将CITED1氨基酸63-84片段突变后,可明显抑制该反应.4周成骨诱导后,CITED1过表达明显抑制成骨细胞分化,ALP及Ca离子浓度明显低于对照组,而CITED1突变质粒(9S＞A)过表达ALP及Ca离子浓度明显高于CITED1组,与对照组基本相同.进一步研究表明,CITED1过表达抑制PTH(1-34)诱导的成骨细胞分化,而CITEDl突变质粒(9S＞A)可逆转该反应.ALP染色及茜素红染色也验证了以上结论.RT-PCR结果提示:CITED1突变质粒(9S＞A)过表达成骨相关基因ALP2,RUNX2,OC明显高于CITED1质粒过表达.结论 CITED1 63-84片段丝氨酸为其重要的功能位点,可影响其细胞进核及成骨分化.
作者：林振；袁亮；孟越；冯瑞强；付兆宗；杨德鸿 刊期： 2013年第03期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
