余克强；毕建璐；黄颖；李斐；程静茹；王天；吴六国；陈洁瑜；肖雅
目的 检测MicroRNA-218(miR-218)在肝细胞癌中的表达情况并研究其在肝癌中的功能.方法 收集46例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-218在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况；应用miR-218 mimic转染人肝癌细胞系HepG2,MTT和流式细胞术检测转染后细胞活力和凋亡变化,qRT-PCR和Western blot检测miR-218潜在靶点的表达变化.结果 miR-218在肝癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织(P＜0.05);miR-218低表达与肿瘤大小(＞5cm)和高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ)具有显著相关性(P＜o.05)；在HepG2细胞中,miR-218抑制细胞增殖和诱导凋亡,并下调Bmi-1和CDK6 mRNA及蛋白表达(P＜0.05).结论 miR-218低表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,miR-218可能通过下调Bmi-1和CDK6表达抑制肝癌细胞增殖和促进凋亡.
作者：李超；涂康生；郑鑫；张竞；拓航；高洁；姚英民；刘青光 刊期： 2013年第08期
目的 探讨埋藏式心脏复律除颤器(ICD)在心脏性猝死(SCD)一级预防中的作用.方法 对35例在2006～2009年根据2005年ACC/AHC指南植入ICD进行SCD一级预防的患者,进行平均2年的临床随访数据分析.结果 (1)平均2年随访过程中,共11例患者(31.43％)发生室性心律失常事件,室颤除颤16阵次、室速启动抗心动过速起搏(ATP)79阵次,无误放电,无一例死亡；(2)室性心律失常事件,心肌致密化不全(NVM)发生率为100％、特发性室性心动过速(PVT) 66.67％、Brugada综合征50％、肥厚型心肌病(HCM)25％和(DCM) 16.67％；其中室颤PVT占87.5％(14阵次),DCM及Brugada综合征各1阵次；室速PVT占82.28％(65阵次)、NVM5阵次、HCM和Brugada综合征各4阵次和DCM患者1阵次,致心律失常右室心肌病未见室性心律失常事件；(3)术中术后未见植入ICD相关并发症,术后均未出现恶性室性心律失常所致晕厥,生活质量明显改善.结论 本组SCD高危患者中,平均ICD植入两年即在31.43％的患者中及时发现和纠正95次的恶性室性心率失常事件,其中对预防PVT、NVM和Brugada综合征的SCD为明显,提示SCD高危人群中植入ICD进行一级预防有重要的临床价值.
作者：刘烈；陈东骊；陈泗林；林纯莹；梁远红；费洪文 刊期： 2013年第08期
目的 比较研究经典血压下降反射性引起呼吸功能改变与高胆汁酸血症引起呼吸功能改变是否特性相同,为认识胆汁酸调节呼吸功能提供实验依据.方法 70只新西兰雄性大白兔,20％乌拉坦以5nl/kg体质量耳缘静脉注射麻醉,颈部正中切开,气管插管、颈总动脉插管,与呼吸、血压换能器相连,生物信号通过BL-420生物信号采集系统采集,显示记录.观察刺激迷走神经、耳缘静脉注射稀释胆汁液、5种不同游离胆汁酸单品水溶液后血压、呼吸变化的特性.结果 刺激迷走神经与注射稀释胆汁液均可降低血压,两者在血压总的反应时间方面差异不大,但呼吸反应时间RT(胆汁)远远长于自身血压总反应时间T(胆汁),有9～10倍的差异(P＜0.001),呼吸幅度峰峰值RR(胆汁)明显大于经典反射性活动引起的RR(迷走神经)变化(P＜0.001).在RT1(胆汁)区间,RR(胆汁)值显著高于RT2(胆汁)区间的RR(胆汁)值(P＜0.001)；熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有明显影响(P＞0.05)；其他4种游离胆汁酸单品对呼吸、血压有影响(P＜0.001).结论 高胆汁酸血症引起的呼吸功能变化有反射性的因素,也有对呼吸功能直接的调节作用；在我们的实验条件下,熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有影响；其他4种单品均具有降低血压的能力,并且具有剂量依赖性；其他4种游离胆汁酸单品对呼吸功能都有明显影响.
作者：王斐；赵丛；田映红；尹艳茹 刊期： 2013年第08期
目的 研究脂多糖(LPS)诱导胰岛微血管内皮细胞(IMECs)炎症损伤的相关信号通路及采用普伐他汀干预后的作用机制.方法 以IMECs为实验材料,分为空白对照组、LPS组、SB203580组、普伐他汀组、SB203580+普伐他汀组.以Hoechst凋亡染色及Annexin V/PI双染色法对不同条件下IMECs的凋亡进行定性定量检测,Western blot法检测总P38MAPK(total-p38)、磷酸化P38MAPK(p-p38)蛋白及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达水平.结果 LPS组IMECs较对照组凋亡率升高,total-p38、p-p38、iNOS蛋白的表达水平上调.与LPS组比较,SB203580组、普伐他汀组与SB203580+普伐他汀组均有凋亡率降低,total-p38、p-p38、iNOS蛋白表达水平下调.结论 LPS诱导的IMECs炎症损伤与P38MAPK及iNOS/NO炎症通路的激活有关,普伐他汀可阻断以上通路,起到抑制IMECs凋亡、坏死,改善炎症损伤的保护作用.
作者：胡南；孙嘉；康远程；陈建生；罗丽珊；张菊嫦；陈松源；蔡德鸿 刊期： 2013年第08期
目的 建立一种简单方便的血浆中辣椒素浓度的液质联用检测方法(HPLC-MS/MS).方法 血浆样本100 μl加入终浓度为50 ng/ml的维拉帕米(内标),用混合溶剂乙酸乙酯∶丙酮(85∶15)萃取后用安捷伦6460三重四级杆质谱系统进行分析.采用多反应监测(MRM)扫描方式,在ESI源正离子模式下,选择m/z 306→137作为辣椒素监测离子,m/z455→165为内标物监测离子.结果 样品分析时间仅需1.5 min,方法线性范围在1.85～370 ng/ml (r=0.9997),低检测限为1.85 ng/ml.辣椒素在三个质控浓度(3.7、37、370 ng/ml)检测下的提取回收率为77.34％,70.64％及78.02％.结论 HPLC-MS/MS灵敏、快速、准确,可应用于检测血浆中存在的微量辣椒素.
作者：段炼；晏媛；刘媛；刘思佳；李国锋 刊期： 2013年第08期
目的 探讨经脐单孔腹腔镜胆囊切除的安全性与有效性.方法 回顾性分析本院2011年4月～2012年10月开展单孔腹腔镜胆囊切除,简志祥主任单人完成的141例单孔腹腔镜胆囊切除病例患者,并与同期进行的传统腹腔镜胆囊切除的患者进行对比分析.结果 在141例单孔腹腔镜胆囊切除病例中,3例因胆囊三角显露不清改行多孔腹腔镜胆囊切除术,2例中转开腹行传统胆囊切除,术后发生1例不明原因的肠穿孔,发现脐部脂肪液化2例,与同期传统腹腔镜胆囊切除的306例患者对比分析发现,两组患者年龄、性别、BMI及腹部手术史等未见统计学差异(P＞0.05),两组患者手术时间(28.5±19.3 min vs 33.4±14.2 min,p=o.oo1)、术中出血量(6.4±18.9 ml vs 9.8±20.6 ml,P=0.06)、关腹所需时间(5.1±3.8 min vs 5.8±4.3 min,P=0.06)及术后并发症(3/141 vs 5/306,P=1.oo)未见明显统计学差异,但TSPLC组中转开腹率(2/141 vs 25/306,P=0.001)及术后住院天数(1.2±1.4 d vs 2.6±1.7 d,P＜0.01)均相对于传统腹腔镜少,术后患者满意程度两组比较亦有显著统计学差异(8.5±1.1分 vs 7.9±0.7分,P＜0.01).结论 经脐单孔腹腔镜胆囊切除术安全有效,且术后患者满意程度普遍较高,值得有条件的医院采用.
作者：林叶；金浩生；简志祥 刊期： 2013年第08期
通过对1例罕见的经腹腔镜检查确诊的自然妊娠合并重度卵巢过度刺激综合征终成功分娩患者的临床资料结合相关文献进行分析讨论,总结其诊治经验,为临床工作提供借鉴.维持患者内环境的稳定是治疗的关键也是成功分娩的基础,有多囊卵巢综合征病史的患者保胎需慎重；在与妊娠合并卵巢肿瘤难以鉴别时,腹腔镜检查不失为重度卵巢过度刺激综合征确诊及辅助治疗的有效、微创手段之一.患者随访至今,预后良好.
作者：雷瑞霖；肖松舒；薛敏；邓新粮 刊期： 2013年第08期
目的 探讨交替性霍纳氏综合征(AHS)患者脑部度中心性功能连通性变化.方法 对1例AHS患者及8名健康受试者进行脑部结构像及静息态脑功能成像扫描.采用度中心性(DC)方法评价AHS患者脑部静息态默认网络结点的中心性度量变化.统计学采用单样本t检验及双样本t检验,采用假阳性率(FDR)校正,P＜0.05有统计学意义.结果 AHS患者左眼发病时DC主要为双侧额中回前部及额盖和岛盖,高于全脑均值的脑区主要为双侧枕叶、颞叶及扣带回,低于正常被试的脑区主要位于左侧颞下回、中央后回,右侧颞上回,枕外侧回及双侧旁中央小叶.右眼发病时DC主要为双侧额上回及额中回前部、顶叶、中扣带回及枕内侧回,高于全脑均值的脑区主要位于双侧枕叶、颞叶及扣带回及双侧额叶眶回、直回,低于正常被试的脑区主要位于左侧缘上回、右侧枕外侧回、旁中央小叶及双侧颞上回.结论 AHS患者脑部改变可表现为多个脑区度中心性功能连接减低.
作者：陈志晔；范寅泰；李金锋；马林 刊期： 2013年第08期
目的 探讨截肢术后大鼠肾脏损伤的机制,探索外源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠(NaHS)的应用对肾脏结构和功能的影响,并了解硫化氢在防治肾脏损伤中的作用机制.方法 实验分为两部分.第1部分:将雄性Wistar大鼠按手术时间随机分为正常对照、手术后6h、NaHS干预、炔丙基甘氨酸(PPG)干预组,每组7只.测定血浆H2S、肾组织肾损伤分子-1(KIM-1)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、一氧化氮、尿素氮、肌酐浓度和肾组织胱硫醚β-裂解酶(CSE)活性、MPO、MDA、KIM-1水平；光镜观察肾组织形态学变化,电镜观察线粒体结构变化.第2部分:将雄性SD大鼠随机分为4组,每组大鼠8只.提取各组肾线粒体后测定呼吸控制率、膜电位及ATP酶活性.结果 截肢后6h大鼠肾脏细胞和线粒体结构出现了损伤性变化,血浆及肾脏KIM-1含量明显增加(P＜0.01),而H2S/CSE水平明显下降(P＜0.01),NaHS干预后血浆H2S/肾脏CSE水平明显升高(P＜0.01),而肾组织损伤减轻,血浆及肾脏KIM-1含量明显降低(P＜0.01).与正常对照组相比,手术后大鼠肾脏线粒体呼吸控制率、膜电位及ATP酶活性显著降低(P＜0.01),应用NaHS后以上指标出现明显升高,而应用PPG后无明显改善.结论 截肢创伤可导致大鼠肾脏结构和功能的损害,并导致线粒体的损伤,H2S供体NaHS的应用可使线粒体功能明显改善,并进一步减轻肾脏结构和功能的损害,表明H2S作为是一种新的内源性介质,可能通过多条途径作用于线粒体,调节能量代谢途径,参与组织了损伤与修复的一系列病理生理过程.
作者：张颖；刘宁；任青爱；张海峰；谢晓华 刊期： 2013年第08期
目的 了解中国大学生自杀死亡接触流行现况及其与自杀风险的关系,检验自杀死亡接触史在生活事件与自杀风险之间的调节效应.方法 采用自杀行为问卷-修订版(SBQ-R)、青少年生活事件量表(ASLEC)、自编自杀死亡接触及基本情况问卷对全国6个地区的8202名在校大学生进行问卷调查.结果 ①中国大学生近亲自杀死亡史和熟人自杀死亡史的发生率分别为3.9％和11.8％；②有近亲自杀死亡史大学生的SBQ-R总分显著高于无近亲自杀死亡史大学生的得分(5.51±2.44 vs 4.68±2.11,P＜0.01)；有熟人自杀死亡史大学生的SBQ-R总分显著高于无熟人自杀死亡史大学生的得分(5.23±2.48 vs 4.64±2.07,P＜0.01)；具有自杀死亡接触史的大学生的自杀意念、自杀计划和自杀未遂行为率显著高于无相应经历者(P＜0.05)；③生活事件及其各因子与自杀风险呈显著正相关(0.11≤r≤0.26,P＜0.01)；④近亲自杀死亡史×熟人自杀死亡史交互项、生活事件×近亲自杀死亡史交互项对自杀风险的作用不显著(P＞0.05),生活事件×熟人自杀死亡史交互项对自杀风险的交互作用具有统计学意义(P＜0.01),高生活事件水平且具有熟人自杀死亡史者自杀风险相对高.结论 中国大学生的自杀死亡接触史、生活事件与自杀风险关系密切,有近亲自杀死亡史、熟人自杀史、生活事件水平越高,自杀风险越大；熟人自杀死亡史在生活事件与自杀风险的关系中存在调节效应.
作者：赵久波；赵静波；肖蓉；杨雪岭；张小远 刊期： 2013年第08期
目的 探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学分布特点.方法 采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽(cNGQGEQc),纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相血液放射性清除曲线；分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织百分注射剂量率(％ID/g)；经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布变化.结果 99mTc标记多肽的标记率＞90％,室温下和血清中37℃下放置12h放化纯度分别为91％和85％；半胱氨酸置换率＜7％；血清蛋白结合率＜5％.99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速；在小鼠体内清除较陕,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低(P＜0.05).结论 99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有比较理想的体内分布动力学特性.
作者：李贵平；黄宝丹；杜丽；黄凯；刘峰；汪兵；张辉 刊期： 2013年第08期
目的 建立小鼠脂肪间充质于细胞(ADSCs)分离培养的方法,并将ADSCs移植于体内,观察其致瘤性及肝脏归巢情况.方法 取皮下脂肪用0.075％Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获取小鼠ADSCs,通过流式细胞技术检测其表面分子、细胞周期；并将ADSCs注射到小鼠皮下观察其致瘤性,及尾静脉注射观察其肝脏的归巢.结果 分离培养的细胞高表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45、CD11b、CD14;细胞周期显示G0/G1、S、G2/M的细胞所占的比例分别为80.1％、7.9％、12％；ADSCs具有低免疫原性,不表达CD40、CD80、CD86、MHCⅠ、MHCⅡ以及PDL-1.在IFN-作用下,可轻度上调CD40、CD80以及PDL-1.ADSCs移植后未见成瘤,且可在肝脏实质内多处定居.结论 胶原酶消化、贴壁培养可以从小鼠脂肪中分离出高纯度的间充质干细胞,且ADSCs移植后能在肝内定居.
作者：赵文秀；张磊；刘建明；尹震宇；王效民 刊期： 2013年第08期
目的 分析下咽癌患者与健康人血浆中差异表达的蛋白质组,筛选潜在的与下咽癌诊断密切相关的血浆肿瘤标志物.方法 取下咽癌患者与健康人空腹血浆标本各6例分别等量混合成2组样本,去除血浆高丰度蛋白后,利用双向电泳(2-DE)进行分离,经软件分析后找出表达量变化2倍以上的差异蛋白点,接着利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)进行差异蛋白质鉴定,然后利用Western blotting对α2-HS-糖蛋白的表达量进行验证.结果 下咽癌患者与健康人血浆相比较,筛选出表达量差异2倍以上的差异蛋白点共11个,其中表达上调的有5个,表达下调的有6个,进行质谱分析后,表达上调的蛋白有α2-HS-糖蛋白、结合珠蛋白；表达下调的蛋白有免疫球蛋白1链C结构域、载脂蛋白A1.Western blotting结果表明,α-2-HS-糖蛋白的表达上调,与双向电泳结果一致.结论 下咽癌患者与健康人血浆的蛋白质表达谱表现出一定差异,这些差异蛋白有可能成为下咽癌患者早期诊断的特异性血浆肿瘤标志物.
作者：李军政；田文栋；刘雄；胡水旺；张宝；李湘平 刊期： 2013年第08期
目的 分析健康促进生活方式与亚健康状态的相关性,为企业人群的亚健康状态及不良的生活方式的干预提供依据.方法 某企业共5316名员工作为被调查对象,使用《亚健康评定量表》(SHMS V1.0)与《健康促进生活方式量表》(HPLP-Ⅱ)进行问卷调查,对所回收的调查问卷进行数据分析和统计学处理.结果 健康者643人,占12.86％,亚健康者3838人,占76.76％,疾病患者519人,占10.4％.HPLP-Ⅱ为115.95±21.468分,其中健康人群的HPLP-Ⅱ为134.23±24.72分,亚健康人群的HPLP-Ⅱ为114.69±19.25分.健康与亚健康人群的健康促进生活方式等级比较有显著性差异(x2=498.593,P=0.000).亚健康人群的HPLP-Ⅱ总分及各维度得分与健康人群有明显差异(P＜0.05).提示亚健康与健康促进生活方式相关.其中自我实现、运动锻炼、压力管理与亚健康呈负相关关系,为保护因素.结论 亚健康与健康促进生活方式相关,其中自我实现、运动锻炼、压力管理是影响亚健康的保护因素.
作者：余克强；毕建璐；黄颖；李斐；程静茹；王天；吴六国；陈洁瑜；肖雅 刊期： 2013年第08期
目的 探讨β淀粉样蛋白(Aβ)调控海马晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达及其机制.方法 通过脑立体定向仪及微量注射器于大鼠海马内注射Aβ1～40,注射3周后,利用Western blot检测海马组织RAGE、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶(gp91phox及p47phox亚基)、核因子-κb(NF-1κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)的表达变化,利用流式细胞仅检测大鼠海马组织活性氧(ROS)的变化.结果 海马注射Aβ1～403周后,海马组织的RAGE的表达显著升高(P＜0.01),同时检测到注射Aβ1～40引起海马组织内ROS水平明显增高(P＜0.01),gp91phox、p47phox的表达及p47phox的磷酸化水平均显著升高(P＜0.01),IκBα的表达显著降低(P＜0.01),IκBα的磷酸化水平显著增加(P＜0.01),NF-κB的表达及NF-κB的磷酸化水平均显著升高(P＜0.01).结论 Aβ阿引起海马组织RAGE的表达升高,NADPH氧化酶/ROS/NF-κB信号通路可能在Aβ秀导海马神经元RAGE的表达过程中发挥重要作用.
作者：孔卫娜；张佳；高维娟；刘清涛；周利明；柴锡庆 刊期： 2013年第08期
目的 研究芹菜素对人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响.方法 应用10～80 μmol/L芹菜素处理NCI-H460细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率；Hoechst 33258细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变；流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率；Western blotting检测凋亡相关信号分子Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达水平.结果 芹菜素对NCI-H460细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性；芹菜素处理组细胞出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征；NCI-H460细胞凋亡率随着芹菜素浓度增加逐渐增高；芹菜素处理组细胞Bax和caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低.结论 芹菜素能够抑制人肺癌NCI-H460细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降,caspase-3活化有关.
作者：潘雪刁；杨周萍；杨志英；周四桂；张海涛；臧林泉 刊期： 2013年第08期
目的 探讨慢性海洛因成瘾者眶额叶皮层(OFC)功能连接的变化及其与慢性海洛因成瘾者冲动性决策行为的关系.方法 慢性海洛因成瘾男性患者14例,与之年龄、受教育程度和尼古丁依赖水平匹配的健康被试14例参加本研究.采用1.5 T磁共振扫描仪,16通道神经血管线圈,对被试分别进行头颅结构和静息态功能磁共振扫描,后利用SPM8软件以双侧眶额叶皮层为感兴趣区,分别进行组内和组间眶额叶皮层静息态功能网络分析.采用爱荷华赌博任务(IGT)对两组被试进行决策能力评估.结果 与对照组比较,慢性海洛因成瘾组眶额叶皮层与右侧顶下小叶(rIPL)之间功能连接显著下降(t=3.5,P＜0.05,多重比较校正).IGT的行为学结果发现,随决策次数递增,两组被试的净分数均逐渐提高(P＜0.001),但正常对照组的净分数明显高于海洛因成瘾组(P＜0.001).海洛因成瘾患者OFC-rIPL功能连接与IGT评分呈明显负相关性(r=-0.550,P=0.041).结论 慢性海洛因成瘾者OFC-rIPL脑网络存在异常,而这种异常可能是其在行为学上存在冲动性决策障碍的神经基础,也可能是其成瘾行为的产生、维持和复吸的原因之一.
作者：邱迎伟；江桂华；苏欢欢；马晓芬；李黎明；田军章；张雪林 刊期： 2013年第08期
目的 探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制.方法 分别用不同浓度的TGF-βl或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein,CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应；培养的A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1 (20 ng/ml)和环己亚胺(30 μg/ml)作用下处理24h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基因的表达是否需要新蛋白的合成；后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照.血清饥饿后,进行有无TGF-β1 (20 ng/ml)处理24h,Western blot确定外源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响.结果 TGF-β1以浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1基因的表达,并需要新的蛋白合成.SMAD3的过表达增加TGF-β1诱导的CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达.结论 肿瘤细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达.
作者：邓凡；李松玉；许万福；邹志鹏；柯志勇；曾方银 刊期： 2013年第08期
目的 构建人nestin基因表达载体,制备nestin过表达转基因小鼠.方法 以人神经胶质瘤细胞株U251的cDNA为模板,分3段扩增出nestin基因eDNA全序列,并将其克隆入含有强启动子ROSA26的pBROAD3载体,酶切鉴定、测序,除去原核序列,纯化.显微原核注射建立转基因小鼠.PCR验证nestin基因整合,确定建立首建者.将阳性鼠传代.Westemblot方法检测F3代转基因小鼠与野生型小鼠主要器官(心、肺、脑、肾)的nestin表达.结果 测序结果证明成功构建了受ROSA26启动子调控的nestin转基因载体.出生34只小鼠,PCR检测证实存在首建者2只.Westemblot方法证实,与野生型小鼠相比,F3代转基因小鼠脑、肺组织存在较高水平nestin表达.结论 首次成功建立nestin过表达转基因小鼠,外源基因可遗传到子代并在脑和肺组织中稳定表达,为深入研究nestin在肿瘤转移、细胞“干性”的维持和细胞的分化等功能提供了良好的实验动物模型.
作者：郑文宏；李振林；贾俊双；安靓 刊期： 2013年第08期
目的 建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型；鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制.方法 分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组学分析成骨分化组与对照组差异表达的蛋白质,对感兴趣的蛋白质LASP1、ferritin轻链和重链表达情况用Q-PCR、Western blot进行验证.结果 成功诱导比格犬BMSCs成骨分化；蛋白质组学分析获得rhBMP-2诱导上调的蛋白质9个,下调的蛋白质11个.荧光定量PCR技术和Western blot对LASP1和ferritin表达情况进行了验证,发现rhBMP-2诱导7d后,LASP1显著下调而ferritin显著上调,与蛋白质组学结果一致.结论 LASP1在调节细胞骨架活性方面发挥重要功能,而ferritin是细胞铁离子稳态维持的重要分子,提示这两种蛋白质在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化过程中发挥重要作用.
作者：胡稷杰；刘亚伟；何敏毅；余斌；王钢 刊期： 2013年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
