丛璐;蒲传强;毛燕玲;刘洁晓;鲁向辉;汪茜
目的 探究血清miR-103在乳腺浸润性癌患者中表达的诊断价值及其与乳腺癌临床病理特征的关系.方法 搜集50例首治的乳腺癌患者的血清及相应的石蜡包埋组织和50例正常女性的血清作为对照,从血清中提取总RNA,运用荧光定量PCR的技术检测miR-103在乳腺癌和正常人血清中的表达情况 运用SPSS16.0软件行检验.ANOVA、x2检验、秩相检验及MedCalc 软件进行受试者工作特征曲线(ROC)分析 结果 与对照组相比,miR-103在乳腺癌患者血清中表达量显著上调(P<0.01),血清中 miR-103 上调的相对表达量与乳腺癌临术分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)相关.miR-103所得ROC曲线下面积为84.3%,区别乳腺癌和正常人的敏感性和特异性分别为84%、70%.结论 血清miR-103可作为乳腺癌一项潜在的诊断标记物,并对乳腺癌的临床病理特征具有提示作用.
作者:王小拍;吴兴平;颜黎栩;邵建永 刊期: 2012年第05期
目的 评价弓形束导航技术临床应用的准确性与可靠性.方法 43例语言区病变,分别于手术前后重建弓形束并评价语言功能.术前记录病变至弓形束的短距离D1与术前失语指数AQ1,术后记录残腔至弓形束的短距离D2与术后失语指数AQ2,分析D1与AQ1以及D2与AQ2的相关关系.术后随访时,评价患者语言功能.结果 43例患者的弓形束均得到重建,不同操作者重建的同一患者的弓形束重复性良好.D1与AQ1(P<0.001),D2与AQ2(P=0.001)均呈正的直线相关关系.术后随访,仅2例(4.7%)存在语言功能障碍.结论 弓形束导航技术能够准确、可靠地重建和定位弓形束纤维,有助于保护语言功能.
作者:张家墅;陈晓雷;赵岩;李昉晔;郑刚;李晋江;张挺;胡深;许百男 刊期: 2012年第05期
目的 比较腹腔镜及同期开腹直肠癌切除术术后的长期肿瘤学结果.方法 回顾性分析南方医院自2003年1月~2008年12月收治的514例病人的临床随访资料,对186例腹腔镜组和328例开腹组病人术后复发类型及长期生存结果进行了比较.结果 两组病人的中位随访时间为(48.54±28.76)月,两组间远处转移(3.9%vs 5.5%;P=0.284)、5年累积总生存率(69.5%vs 61.7%;P=0.085)和5年无病生存率(67.7%vs 60.7%;P=0.110)的差异无统计学意义.Ⅳ期病例中腹腔镜组5年累计总生存率和5年无进展生存率均高于开腹组(P<0.05).结论 腹腔镜直肠癌切除术可以获得不劣于开腹手术的长期肿瘤学结果.
作者:钟秉政;刘峰;余江;梁耀泽;赵丽瑛;牟廷裕;胡彦锋;李国新 刊期: 2012年第05期
目的 构建人甘油激酶( GK)基因 RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,获得稳定下凋GK表达的慢病毒.方法 将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并应用FACS测定病毒滴度.以GK 干涉慢病毒感染人肝细胞系L02细胞后,应用Western blotting方法检测GK的表达 结果 成功构建GK干涉慢病毒pSicoR-GK载体并获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达3×10 pfu/ml,GK蛋白质表达水平下调至对照的约20%.结论 成功构建人GK基因RNAi慢病毒,为后续GK生物学功能研究奠定基础.
作者:刘悦;郝玉娥;詹轶群;许望翔;杨永升;葛常辉 刊期: 2012年第05期
目的 探讨杏仁中央核中的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)型谷氨酸受体对食物和水摄取的影响.方法 不锈钢套管植入雄性Sprague-Dawley大鼠一侧杏仁中央核内,NMDA型谷氨酸受体激动剂原型物NMDA,或选择性NMDA受体拮抗剂D(-)-2-氨基-5-磷酰基戊酸(D-AP-5)微量注射入饱食和含水度正常的大鼠的杏仁中央核内.结果 杏仁中央核内注射入8.50,17.00,或34.00 nmol NMDA不改变大鼠摄食量,但是增加注射后0~1h内不依赣于食物摄取的摄水量(F3.32=3.191,P=0.037).杏仁中央核内注射人6.34,12.70,或25.40 nmol D-AP-5也不影响大鼠摄食量,但是减少了注射后0~1 h内不依赖于食物摄取的摄水量(F3.28=3.118,P=0.042).结论 杏仁中央核中的NMDA受体可能参与了对摄水而不是摄食的调控.
作者:闫君宝;闫剑群;李金容;陈坷;孙慧玲;张嫄;赵小林;孙波;赵师儒;宋琳;魏晓静 刊期: 2012年第05期
目的 研究碱性环境对饥饿期炎肠球菌表而疏水性的影响,了解氢氧化钙影响细菌粘附的机制.方法 收集饥饿期粪肠球菌,在pH值为7.3、8.3、9.3、10.3的氢氧化钙溶液中分别孵育15 min和1h,采用微生物粘着碳氢化合物法(MATH)检测细菌表面疏水率;扫描电镜观测不同pH值的碱性环境中粪肠球菌对人牙本质片粘附量的变化 结果 随着氢氧化钙溶液pH值上升,饥饿期炎肠球菌表面疏水率逐渐升高(P<0.01);相同pH值条件下,1 h细菌表面的疏水率高于 15 min(P<0.05);电镜下细菌对牙本质粘附量随溶液pH值上升而增多 结论 碱性环境可提高饥饿期粪肠球菌表面疏水性,促进细菌初始粘附.
作者:卢婷;徐琼 刊期: 2012年第05期
目的 探讨不同桩核材料背景色对Vita In-Ceram AL2色瓷沉积氧化铝、Z21色瓷沉积氧化锆、Cercon base color氧化锆及Cercon base氧化锆全瓷材料饰瓷后颜色的影响 方法 采用分光测色计测量各组试样在贵金属、镍铬合金、银汞合金和树脂背景下的色度值并计算组间色差值.结果 Z21色瓷沉积氧化锆饰瓷后在银汞合金背景下与贵金属合金、复合树脂背景下之间的色差值大,但4种全瓷底层材料饰瓷后在不同背景下的色差值均不能够为人眼所识别(△E<1.5).结论 4种全瓷底层材料饰瓷后,受背景颜色的影响均较小,不遮蔽背景色时,修复体可达到较好的美学修复效果.
作者:刘一涵;刘洪臣;邵龙泉;温宁;伊元夫 刊期: 2012年第05期
目的 探讨腹膜外途径机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术的初步经验.方法 前列腺腺癌患者20例,平均年龄65.6(50~75)岁.患者全部是在B超引导下经直肠前列腺穿刺活检病理证实为前列腺癌Gleason评分≤6分7例,7分10例,8分2例,9分1例.影像学检查未见淋巴结及远处转移.病例均采用机器人辅助腹腔镜腹膜外顺行根治性前列腺切除术治疗.结果 本组病例均顺利完成,未因任何原因更改术式.4例病例术后4周PSA>0.2 ng/ml,提示术后肿瘤残留,先行雄激素上除治疗,择期再行外放射治疗.16例随访时间平均15.5( 10~37)月.20例中机器人安装时间]平均48.5( 40~60) min,手术平均时间180( 150~230) min,患者术中平均失血量298(80~800) ml,术后恢复进食时间平均1.7(1~3)d,留胃尿管时间平均10.7(7~14)d,住院时间平均10.7(7~14)d.无手术并发症发生.术后病理Gleason评分≤6分6例,7分5例,≥8分9例.结论 机器人辅助腹腔镜根治性前列腺研除术使腹腔镜易于被术者掌握,尤其在盆腔复杂手术方面的优点十分突出.
作者:王威;高江平;徐阿祥;朱捷;陈文政;卢锦山;张旭 刊期: 2012年第05期
目的 评价巢式PCR联合焦磷酸测序法在乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因检测中的敏感与特异性.方法 选取rtM204I(ATT)突变型和rtM204(ATG)未突变型质粒,按照不同比例混合后,采用巢式PCR联合焦磷酸测序法对突变位点进行检测,并与常规PCR焦磷酸测序法进行比较,对两种方法的线性及一致性进行分析;选取不同病毒载量临床标本,采用巢式PCR焦磷酸测序法检测耐药突变位点,并与巢式PCR Sanger测序法进行比较,对两种方法的敏感性及特异性进行分析.结果 常规PCR焦磷酸测序和巢式PCR焦磷酸测序结果拟合曲线R2>0.99,P<0.05,线性模型有显著性意义.分别将常规PCR焦磷酸测序和巢式PCR焦磷酸测序结果与预测值的差值进行分析,巢式PCR能够较常规PCR更好的反映实际值,在90%比例处优于常规PCR.临床75例患者标本巢式PCR Sanger测序与巢式PCR联合焦磷酸测序结果灵敏性比较提示,Sanger测序的灵敏性为92%,巢式PCR联合焦磷酸测序的灵敏性达到100%,差异有统计学意义(P<0.01).对于不同病毒拷贝数标本的灵敏性不同,其差异主要表现在低浓度组(HBV DNA≤3log10 copies/ml),Sanger测序的灵敏性为78%,而焦磷酸测序的灵敏性可以达到100%,差异有统计学意义(P<0.01).阴性对照,两种方法均末检出 HBV病毒,两种方法的特异性均较好.结论 巢式PCR联合焦磷酸测序的方法监测乙肝病毒变异同巢式PCR联合sanger测序相比,有更好的灵敏性,尤其是在低病毒拷贝数时,差异明显,这对于临床提早发现耐药突变株,指导临床及时更换用药有重要意义.
作者:孙树梅;周浩;周彬;胡子有;侯金林;孙剑 刊期: 2012年第05期
目的 应用八探针间期荧光原位杂交技术(FISH)联合染色体核型分析观察急性淋巴细胞白血病(ALL)成人患者与儿童患者的细胞遗传学差异.方法 对125例ALL患者(成人86例、儿童39例)全部行八探针FISH(MYC、P16、E2A、TEL/AML1、BCR/ABL、MLL、IGH、多倍体的DNA探针)检测并染色体核型分析.结果 八探针FISH检测结果显示,成人ALL患者与儿童ALL患者的TEL/AML1融合基因、BCR/ABL融合基因与多倍体阳性率之间的差异有统计学意义(P<0.05);染色体核型分析成人ALL患著与儿童ALL患者的t(9;22)易位、多倍体阳性率之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 成人ALL患者与儿童ALL患者融合基因表达各有侧重,不同的细胞遗传学特征与其预后密切相关.FISH多探针诊断系统检测ALL患者常见遗传学异常省时、准确、高效,与染色体核型分析形成很好的互补.
作者:左媛;杜庆锋;李荣;许娜;曹睿;廖立斌;许露露;张晋芳;黄彬涛;骆许静;肖晓珍;刘晓力 刊期: 2012年第05期
目的 采用高效液相色谱法(HPLC)测量结核性胸膜炎患者胸腔积液和血浆中异烟肼浓度,并评价异烟肼从血液经胸膜的透过性、方法 收集15名结核性胸膜炎患者第1天晨服300 mg异烟肼后2h的胸腔积液,并采集笫3天服药后2h的血样和胸腔积液,建立HPLC方法进行样品检测,并计算异烟肼的胸膜透过率.结果 第1天异烟肼在胸腔积液中的平均浓度是(1.156±1.190) μg/ml;第3天异烟肼在胸腔积液中的平均浓度是(1.920±1.294) μg/ml,在血浆中的平均浓度是(2.445±1.463) μg/ml;异烟肼从血浆进入胸腔积液的平均透过率是86.0% 结论 大多数初治患者异烟肼的胸腔积液透过性较高,连续口服异烟肼可以达到有效治疗浓度,对于非耐药结核性胸膜炎不需要胸腔内单独注射异烟肼.
作者:刘媛;张庆;张军峰;黄国华;朱顺芳;刘思佳;李国锋 刊期: 2012年第05期
目的 制备针对西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体,并分析其在临床检测中的应用价值.方法 采用原核表达系统表达西尼罗河病毒preM/E融合蛋白,作为抗原、免疫BALB/c小鼠,按常规单克隆抗体技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,采用有限稀释法筛选能稳定分泌抗preM/EⅢ单抗的杂交瘤细胞株.接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,抽取腹水纯化单克降抗体.采用间接ELISA和Western blotting对抗体特异性和效价进行分析,并对临床样本进行检测.结果 获得了 1株能稳定分泌preM/E Ⅲ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为ME1.纯化后抗体效价为10-6、其亚类为IgG1、ME1单抗能与西尼罗病毒preM/EⅢ蛋白以及西尼罗病毒发生特异性反应,而与日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)、黄热病毒(YFV)和登革热病毒(DENV)无交义反应.临床诊断准确率为97.78%.结论 ME1单克降机体具有较高的特异性,临床诊断准确性较高,具有临床应用价值.
作者:李林海;陈丽丹;廖杨;陈建芸;石玉玲 刊期: 2012年第05期
目的 分析假性甲状旁腺功能减退症(PHP)的临床特点、诊断及治疗.方法 回顾性分析解放军总医院1990年1月~2011年7月入院的15例PHP患者(男/女:9/6)的临床资料 结果 15例患者诊时病程长短不一(3 d~21年),均有手足抽搐、乏力等症状,并多有癫痫发作病史.实验室检查常提示低血钙,高血磷、甲状旁腺激素升高等.9例头颅CT提示多发颅内钙化灶,4例合并甲状腺功能异常.本病需终生补充钙及维生素D制剂以防止急性发作和病情进展 结论 PHP为罕见遗传病,首诊误诊率高,对反复手足抽搐,药物控制不良的癫痫样发作及儿童先天性发育缺陷的患者应尽早行血钙、血磷、血甲状旁腺激素及头颅CT等检查 长期治疗包括钙剂和维生素D或其衍生物,患者若同时合并甲状腺功能异常或性腺功能减退,应予以相应治疗.
作者:曲玲;张婷婷;母义明 刊期: 2012年第05期
目的 探讨孕激素膜受体1(PGRMC1)在乳腺癌中的表达状况及与临床病理指标的可能关系.方法 采用免疫组织化学方法回顾性分析检测60例乳腺癌PGRMC1的表达,并评价其与病理分级,临术分期、转移,化疗敏感性以及预后之间的关系.结果 60例乳腺癌组织PGRMC1表达阳性37例,阴性23例PGRMC1的表达与乳腺癌淋巴结转移(P=0.004)、肿瘤大小(P=0.03)和临床分期(P=0.039)密切相关;与年龄(P=0.196)和肿瘤病理分级(=0.526)无关.PGRMC1的表达与乳腺癌患者的总体生存率( Log-rank=15.638; P=0.0001) 和无瘤生存率(Log-rank=4.443; P=0.035)有关.多因素分析结果提示PGRMC1是乳腺癌独立的预后因子(P=0.002)结论 PGRMC1的表达乳腺癌随转移和临术分期升高而增强,可能是乳腺癌的预后因素之一.
作者:纪术峰;吴爱国;杨华峰 刊期: 2012年第05期
目的 建立Wister大鼠的深Ⅱ°烫伤创面模型,外用瘦索来观察和研究瘦素在Waster大鼠烫伤创面愈合中的作用和意义,探讨瘦素在创伤修复过程中的作用及其机制 方法 选用清洁级Wistar大鼠18只,建立深Ⅱ度烫伤模型,将创面分为实验组(创面涂400 ng/ml的瘦素溶液,用PBS释稀)和对照组(外涂PBS).观察创面愈合时间;在烫伤后第3,7,11,15,19天5个时相点测量创面的上皮化率;于伤后第7,14 和21天用手术刀切取各组的伤口及周边皮肤,做HE及免疫组化染色(PCNA),以观察创面的愈合时间和组织形态以及角质形成细胞在烫伤创面愈合过程增殖和迁移情况.结果 实验组创面愈合时间快于对照组2~3 d左右,实验组愈合天数与对照组相比,差异具有显著性(P<0.05).在伤后7、14和21d创缘组织HE和PCNA染色见实验组创周表皮反应性性增生快,表皮层明显厚于对照组,实验组创面上皮化过程短于对照组 实验组PCNA表达与对照组在7 d和14 d,时有明显差异(P<0.05),在21d时没有显著差别(P>0.05).结论 局部外用瘦素能提高深Ⅱ烫伤创面的愈合率,加快创面愈合时间,瘦素能加快深Ⅱ烫伤创面的愈合.
作者:文辉才;巫国辉;陈雯;杨红华;付建华 刊期: 2012年第05期
目的 获得人骨肉瘤细胞MG63特异性结合肽,为骨肉瘤靶向治疗奠定基础.方法 应用噬菌体展示技术,以人骨肉瘤细胞作为靶细胞,293T细胞为差减细胞,筛选获得MG-63细胞特异性结合肽.酶联免疫法进行靶向性验证.应用荧光染色技术初步探讨短肽细胞受体位置.制作人骨肉瘤模型,尾静脉注射目标噬菌体,免疫组化检测其靶向性.结果 经过四轮一步有机相离心分离方法,获得了与骨肉瘤细胞特异性结合的短肽,并测序获得其中出现次数多的序列SLTNLSK,靶向验证结果显示该短肽有较强的特异性.结论 应用噬菌体展示技术,获得了与人骨肉瘤细胞特异性结合的短肽,序列为SLTNLSK,并验证了其靶向性.可以作为骨肉瘤靶向治疗的导向性化合物.
作者:卢坤;姜勇;管明强;肖军;王健;李郅涵;史占军 刊期: 2012年第05期
目的 应用超声监测内毒素休克新西兰免肾血流,观察聚环氧乙烷(PEO)对内毒素休克免肾血流的影响和肾脏的保护作用.方法 健康新西兰白兔20只,随机分成两组,生理盐水组(NS)和溶于生理盐水的减阻剂组(PEO),每组10只每只兔静脉注射内毒素0.6 mg/kg造内毒素休克免模型.待血压下降≥30%时开始复苏,NS组使用生理盐水复苏,5 ml·h-1·kg-1),PEO组使用等剂量含20 ng/g PEO的生理盐水复苏.分别于休克前,休克期、复苏1h后经超声观察肾血流动力学指标并抽血查肾功能试验全程监测心率和动脉血压 结果 两组兔各级肾动脉休克期流速明显低于休克前(P<0.05),动脉搏动指数(PI)和阻力指数( RI)明显增高;复苏1h后,NS组各级肾动脉血流流速下降,三级肾静脉流速减慢,PI 、RI无明显降低;而PEO组肾段动脉及叶间动脉流速较休克前明显增快(P<0.05),三级动脉PI、RI较之NS组相比明显下降(P<0.05).肾功能指标:两组免休克期BUN、Cr均升高,复苏1h后PEO组各项指标明显低于NS组(P<0.05).结论 小剂量聚环氧乙烷能够有效增加感染性体克肾脏的血流灌注,对脓毒血症及感染性休克所致的早期肾脏损害有明显改善作用.
作者:方琴;胡振华;陈仲清;段星星;陈辉;傅卫军;魏红云 刊期: 2012年第05期
目的 观察2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏沉默调节蛋白1(SIRT1)、线粒体脱偶连蛋白2(UCP2)表达的情况,探讨T2DM合并NAFLD的可能发病机制.方法 雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组(NC组,12只)和T2DM合并NAFLD模型组(MC组,12只)NC组喂以常规饲料,MC组喂以高脂高糖饲料,12周未隔夜空腹给予MC组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)1次,破坏部分胰岛,NC组注射相应体积的柠檬酸缓冲液14周未测定两组大鼠体质量、空腹血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,极低密度脂蛋白、游离脂肪酸、空腹胰岛素、计算胰岛素抵抗指数、并观察肝脏组织的病理变化,免疫组化法及Real-time PCR法测定肝脏组织中SIRT1、UCP2的表达情况 结果 14周时MC组大鼠空腹血糖、谷内转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、游离脂防酸、空腹胰岛素、计算胰岛素抵抗指数均较NC+组大鼠升高(P<0.05),高密度脂蛋白较NC组减低(P<0.05)病理组织学结果表明NC组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列紧密成肝索,细胞质丰富,细胞核圆形;MC组大鼠肝细胞高度气球样变,胞质中有大量脂滴空泡、肝组织均可见中至重度脂肪肝在免疫组化和mRNA水平上表明、MC组肝脏SIRT1表达较NC组明显降低(P<0.05).而UCP2表达较NC组明显升高(P<0.05).结论 在T2DM合并NAFLD大鼠肝脏组织中SORT1表达显著降低,UCP2表达显著升高
作者:徐静;李楠;王俊红;张春虹;丁石梅;焦杨 刊期: 2012年第05期
目的 研究1,25-二羟维生素D5[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-αmRNA及蛋白表达的影响.方法 用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期;RT-PCR和 Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况 结果 1,25(OH)2D,对胃癌SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),并呈时间剂量依赖性.经1,25(OH)2D,处理72 h后细胞周期出现向 G0/G1期移行的动力学改变(F=9.81,P<0.05).TNF-α mRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少(P<0.05).结论 1,25(OH)2D3可抑制胃癌细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性.
作者:张莉;王璐璐;吴小翎 刊期: 2012年第05期
目的 观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)Syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响.方法 分别用20 ng/ml TNF-α、20 μmol/L姜黄素、20 ng/ml TNF-α联合20μmol/L姜黄素作用于体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24 h,MTS/PMS法检测VSMCs的增殖状态,Westem blot蛋白免疫印迹法分别测定VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达,结果 (1)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α能显著刺激大鼠VSMCs的增殖(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs增殖无显著作用(P>0.05).与TNF-α组比较,姜黄素能显著抑制TNF-α所诱导的大鼠VSMCs的增殖(P<0.01);(2)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达(P<0.01),TNF-α的这一作用能被姜黄素所抑制(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达无显著作用(P>0.05).结论一定剂量的姜黄素可显著抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达.
作者:罗烨;欧阳平;赖文岩;许顶立 刊期: 2012年第05期