马骥;赵庆丽;任晖;刘文超;薛妍
目的 回顾性分析近20年烧伤总面积≥50%成人烧伤患者早期液体复苏资料,探讨适合广州地区严重烧伤休克期补液方案.方法 选择1991年~2010年本院收治的烧伤面积≥50%烧伤总面积(TBSA)94例患者临床资料.根据入院时间顺序,分为前10年(1991年~1999年,A组)和后10年(2000年-2010年,B组)2组,比较两组休克期补液总量及晶体、胶体和水分各成份补液量,尿量,以及伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率.结果 B组患者伤后第1个24 h晶体、胶体、水分补液量、补液总量、尿量及伤后第2个24 h晶体补液量、补液总量、尿量均较A组患者显著增多.B组患者伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率分别为7.69%及2.56%,较A组(27.3%,18.18%)均显著降低(P<0.05).结论 对于地处广州地区大面积烧伤患者,休克期补液治疗需结合地区气候特点,强调个体化补液方案,适当增加烧伤休克期内胶体、晶体和水分补液量和比例,以降低内脏器并发症发生率和死亡率.
作者:黄磊;王甲汉;李志清;邱学文;刘亮;吴起;马军 刊期: 2012年第06期
目的 研究MnSOD单核苷酸多态性位点rs4880与广东鼻咽癌发生风险的关系.方法 选择105例经病理证实的鼻咽癌患者为病例组,136例同期经南方医院查体中心证实的健康体检者为对照组,应用PCR法检测MnSOD基因Ala-9Val的多态性分布,比较不同基因型与鼻咽癌的相关关系.结果 中国汉族广东人Ala携带者占19.1%.病例组和对照组3种基因型Val/Val、Val/Ala、Ala/Ala的频率分别为83.8%、14.3%、1.9%和80.9%、16.9%、2.2%,各基因型在两组间分布无显著性差异.基因型Val/Ala与鼻咽癌的淋巴结转移显著相关(OR=0.308,95%CI=0.095-0.996),进一步年龄分层,这种杂合子与肿瘤淋巴结转移的关系在年长人群(>30岁)中同样存在(OR=0.227,95%C1=0.064-0.804),但在年青人群(≤30岁)中不存在,然而等位基因Ala的分布与淋巴结转移无显著关系(OR=1.987,95%CI=0.707-5.583).各基因型在不同T、M、临床分期和病理分型的鼻咽癌患者的等位基因表达频率均无明显差异.结论 MnSOD基因Ma-9Val多态性可能与地域、种族相关;基因型Val/Ala可能与鼻咽癌淋巴结转移有关,各基因型与广东地区鼻咽癌易感性无明显相关.
作者:叶尔佳;张应蒙;王宏梅;石玉生;陈龙华 刊期: 2012年第06期
目的 筛选慢性髓系白血病急性变相关关键基因,探寻疾病进展机制及潜在的生物标志物.方法 应用基因芯片技术筛选与慢性髓系白血病急变期相关基因,采用生物信息学方法对这些差异表达基因进行基因本体分类,亚细胞定位以及组织选择性分析,结合转录因子预测和网络谱图构建,找出差异表达基因中的关键分子并进行初步验证.结果 得到一组定位于白细胞膜的基因集,在整个调控网络中,CD40、CCR3、LGALS3、RGS3、CEACAM3及转录因子RAC1、CTNNB1、TP53、NF-kB处于网络节点位置,可能是疾病进展的关键调控基因,采用RT-PCR方法初步证实CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1在急变期患者表达显著增高.结论 CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1可能是慢性髓系白血病由慢性期向急变期转变的关键基因和生物标志物.
作者:骆许静;张进芳;刘晓力;杜庆锋;许娜;许露露;黄彬涛;肖小珍 刊期: 2012年第06期
目的 探讨体外冲击波碎石(ESWL)治疗肾结石疗效的影响因素,并建立预测模型.方法 2008年1月~2010年2月接受 ESWL治疗的肾结石患者325例,长随访3个月,用x2检验或t检验进行单因素分析患者年龄、性别、体重指数、病程时间、治疗前肾绞痛、血尿、尿路刺激症状、结石位置、惠侧、结石长径、宽径等因素与疗效的关系,筛选出有统计学意义的因素后,再利用Logistic逐步回归多因素分析并建立预测模型.结果 ESWL治疗肾结石成功率76.9%(250/325).单因素分析发现年龄、结石患侧、结石位置、病程时间、治疗前血尿、结石长、宽径对疗效均有影响.Logistic回归分析则显示病程时间、治疗前血尿、结石长、宽径决定治疗的成功率.预测模型拟合优度好(x2=18.144,df=8,P=0.168),总体准确率为87.4%.结论 病程时间、治疗前血尿、结石长、短径是ESWL单次治疗单发肾结石成功率的独立影响因素.
作者:张鹏;吴芃;杜跃军;张辉见;魏强;侯祺;古迪;郑少斌;刘成山 刊期: 2012年第06期
目的 观察重组腺病毒三突变型低氧诱导因子-1cα(HIF-1α)对人微血管内皮细胞(hMVECs)增殖及VEGF蛋白表达的影响.方法 三突变型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1α564/402/803)、野生型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1αnature)、Ad-LacZ及空载腺病毒载体(Ad-Null)分别在HEK293A细胞大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,终点稀释法测定病毒滴度;双荧光素酶报告系统检测三突变型HIF-1α与野生型HIF-1α的转录活性;各重组腺病毒载体以佳转染复数转染体外培养的hMVECs,Westem blotting测定HIF-1α和VEGF蛋白表达;MTS检测Ad-HIF-1α564/402/803对细胞增殖的影响.结果 三突变型HIF-1α转录活性显著高于野生型HIF-1α(P<0.001):Ad-HIF-1α564/402/803组HIF-1α和VEGF蛋白表达量高于Ad-HIF-1αnature及其他组;VEGF蛋白表达水平与HIF-1α呈剂量依赖关系.Ad-HIF-1α564/402/803组第3、5天吸光度值均显著高于Ad-HIF-1αnature及其他组(P<0.01).结论 三突变型HIF-1α在体外常氧条件下稳定高效表达,可诱导hMVECs VEGF蛋白表达上调,促进hMVECs增殖.
作者:裴静娴;王月刚;刘城;魏璇;李明琰;陈建威;吴平生 刊期: 2012年第06期
目的 为了准确地识别肝脏移植物的植入状态,探讨多聚酶链反应-短串联重复序列(PCR-STR)技术在肝移植后移植物抗宿主病中的预测和诊断意义.方法 建立荧光标记PCR-STR等位基因分析技术,采用单克隆磁珠提取DNA,四色荧光标记,于移植前和移植后1周内,采集供、受血液DNA作PCR-STR分析.结果 23例患者中,5例患者供受者HLA完全嵌合表达,其中2例发生移植物抗宿主病(GVHD),均治疗无效死亡,另外3例未发生GVHD,顺利恢复出院,GVHD发生率40%.18例患者术后未发生嵌合表达,其中1例发生GVHD,家属放弃治疗出院,GVHD发生率5.6%,两组有显著差别.结论 基于分子水平的多位点PCR-STR可以提供肝脏移植后供体植入信息,在肝移植后移植物抗宿主病的诊断中具有一定的预测意义.
作者:陈小平;骆利敏;罗敏;肖露露 刊期: 2012年第06期
目的 探索人胚胎肺组织中是否存在一种新的血管内皮生长因子(VEGF)基因可变剪切形式.方法 对1例4月龄引产胎儿肺组织的总RNA进行逆转录聚合酶链反应、克隆并测定扩增片段的序列.结果 用一对引物(引物5’端-21~7 bp,3’端554~576 bp)可扩增出3条片段,一条为长度正常的VEGF165(619 bp)全长序列,另一条为长度正常的VEGF121(487bp)全长序列,第三条为新的VEGF mRNA异常剪切片段.测序检测显示,此扩增片段长度为639 bp,同样为VEGF165全长核苷酸序列,但在VEGF165的第3和第4外显子之间插入了长度为20bp的碱基片段.序列分析显示此插入序列为滞留的第Ⅲ内含子终末序列,含内含子剪切信号.上述移码突变导致VEGF基因阅读框架发生改变,在第4外显子中游出现终止密码,故仅含-VEGF165外显子l~3及4部分序列,在蛋白水平上可能编码含97个氨基酸的新肽链.结论 在一引产胎儿的肺组织中发现了新的VEGF mRNA可变剪切形式,其生物学意义有待进一步研究.
作者:周忠江;叶海燕;崔凯;陈向辉;刘伊丽 刊期: 2012年第06期
目的 建立荧光定量PCR和环介导等温扩增技术(LAMP)检测隐球菌荚膜相关蛋白基因(CAP10)的方法,并比较和评价两种方法的优缺点.方法 针对新型隐球菌CAP10基因序列,使用在线软件设计引物,并构建质粒标准品,优化反应条件后用荧光定量PCR和LAMP两种方法检测定量的质粒,分析其敏感性和特异性,并检测临床标本.结果 荧光定量PCR检测CAP10质粒的敏感性为6.8×101拷贝,LAMP方法的敏感性为6.8×103拷贝,PCR检测阳性率比LAMP方法高.两种方法特异性好,对脑膜炎奈瑟菌、白色念珠菌、热带念珠菌、黄曲霉、黑曲霉和大肠埃希菌的检测结果均为阴性.结论 成功建立了检测CAP10基因的荧光定量PCR方法敏感性和特异性高,但是需要特殊仪器;LAMP方法敏感性较低,但其操作简单,无需特殊仪器和设备,加入核酸染料即能观察结果.两者均适用于新型隐球菌感染的检测.
作者:韩慧;胡子有;吴炳义 刊期: 2012年第06期
目的 探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达.方法 以18周龄雌性MRL/Ipr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组.分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,司时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现.结果 MRL/Ipr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05).MRL/Ipr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常.MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别.结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组.
作者:杨荟;徐安平;吕军;刘亚 刊期: 2012年第06期
目的 探讨阿西替尼联合5-FU对肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其毒性作用.方法 肠癌LoVo细胞移植瘤裸鼠随机分为5组:空白对照组、溶剂对照组、阿西替尼组、5 -FU组和联合用药组,分别给予处理.观察各组裸鼠肿瘤大体形态,并测定裸鼠体质量、肿瘤大小及计算瘤质量、完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、T2(治疗后肿瘤增长至治疗前瘤体积2倍所需的时间)和肿瘤生长延迟时间(TGD),记录动物死亡率.结果 联合用药组疗效优于阿西替尼及5-FU单药组.治疗后第30天联合用药组瘤质量小于对照组及阿西替尼和5-FU单药组(P<0.01).联合用药组T2(29.05 d)长于阿西替尼(19.31 d)和5-FU组(21.22 d).联合用药组的TGD达16.73 d,较阿西替尼单药组和5-FU单药组的8.53 d和9.72 d,明显延长.除了空白对照组没有裸鼠死亡之外,其余4组均有1只死亡,死亡率未超过20%.此外,各组裸鼠的体质量下降也均未超过20%.阿西替尼组及联合组中各有1例获得部分缓解(PR).阿西替尼组及联合用药组的瘤组织ABCG2蛋白水平较对照组表达显著下降(P<0.05),而5-FU组的ABCG2表达水平则较对照组无显著差异(P>0.05).结论 在人肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤模型中,阿西替尼和5-FU单药均能抑制肿瘤生长,两者联合使用显示出更强的抗肿瘤作用.两药剂量范围内的联合具有较佳的耐受性和安全性.
作者:赵佳;招婷;谢锋伟;何本夫 刊期: 2012年第06期
对1例病因不明的“广泛皮疹、皮肤剥脱、无尿、全身浮肿、呼吸困难”患者行持续血液净化治疗,动态观察各器官损伤情况的变化,之后在患者病变部位行组织活检.患者病理结果为多发性肌炎/皮肌炎,持续性血液净化治疗开始后心、肝、肾、肺各项指标快速好转,表现为尿量快速增加,肺部炎症逐渐减轻,血肌酐、尿素、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶和乳酸脱氧酶水平快速回落,治疗结束后各项生化指标仍保持下降趋势,患者顺利出院.持续性血液净化在本例重症多发性肌炎/皮肌炎的治疗中疗效显著,在自身免疫性疾病,尤其是全身性炎症疾病的急性期可以作为一种治疗选择.
作者:刘占国;周健;岑仲然;唐颖;杨祥锐;常平 刊期: 2012年第06期
目的 构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系.方法 优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况.结果 烟草无土培育的佳条件为:光照强度9000LX层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%.侵染工程菌的佳D600为0.8;叶片采收佳时间为侵染后4d;本明烟和豫烟5号佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟.结论 基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达.
作者:莫倩珍;麦荣嘉;杨志晓;陈敏芳;杨铁钊;赖华芳;杨培梁;陈强;周晓红 刊期: 2012年第06期
目的 通过组织病理学观察联合应用乌司他丁和胸腺肽α1治疗严重脓毒症的效果.方法 采用经典大鼠CLP脓毒症模型,全部动物随机分为对照组、联合治疗组(乌司他丁+胸腺肽α1)、乌司他丁治疗组和胸腺肽α1治疗组.制模成功后分别于6、24、48和72 h经尾静脉或皮下注射给药,记录每天死亡数.制模后24、48、72和96h处死动物,留取心、肝、脾、肺、肾、小肠标本,以光镜进行病理学检查,脾脏标本行凋亡检测.结果 联合治疗组死亡率显著降低(P=0.0325);组织病理学显示,对照组各脏器损害严重,单药组其次,联合用药组轻;此外,对照组脾脏细胞大量凋亡,联合用药组凋亡程度显著下降[ (47.4±10.9)%vs(39.3±11.4)%,P=0.0000].结论 乌司他丁和胸腺肽α1联合用药可以显著减轻脓毒症大鼠脏器损害,抑制脾脏细胞凋亡,提高脓毒症大鼠存活率.
作者:郭剑颖;邓群;郭旭升;刘双庆;张玉红;何忠杰;林洪远 刊期: 2012年第06期
目的 通过非介入式的生理参数的监测,评估精神疲劳.方法 根据实验对象的反应时间在反应时测试实验过程中伴随疲劳而发生的变化,记录14例实验对象疲劳过程前后的皮肤电活动、心率、心率变异性3组生理参数,并进行统计分析.结果 人体清醒和精神疲劳状态下的平均皮肤电导水平、平均心率、总功率密度、极低频功率密度占总功率密度百分比、高频功率密度占总功率密度百分比均有显著性差异.结论 通过监测皮肤电活动、心率和心率变异性等生理参数对人体精神疲劳进行评估的方法具有无创、有效和实用的特点,有较好的运用前景.
作者:夏岚;王见荣;梁妃学;李伟龙;郭劲松;邓亲恺 刊期: 2012年第06期
目的 探讨2VO大鼠脑组织中甲状腺激素转运体MCT8在不同缺血时间点基因水平的变化规律.方法 25只成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组、2VO 3 d组、2VO 2周组和2VO 5周组.采用免疫荧光法观察MCT8在正常大鼠侧脑室中的表达;采用双侧颈总动脉永久性结扎术制备脑缺血模型,术后各组大鼠于实验终点采用荧光定量PCR法测定脑组织中甲状腺激素转运体MCT8 mRNA的表达水平.结果 免疫荧光法观察到MCT8在正常大鼠侧脑室的血管内皮细胞膜上表达丰富;中枢甲状腺激素转运体MCT8 mRNA水平在2VO 3 d组及2VO 2周组与正常组相比较差异无统计学意义(P=-0.909,P=0.694);MCT8 mRNA水平在2VO 5周组较正常组及2VO 3 d组明显增高(P=0.029,P=0.023),与2VO 2周组相比较差异无统计学意义(P=0.065).结论 中枢甲状腺激素转运体MCT8基因水平在脑缺血后呈逐渐代偿性增高趋势.
作者:崔丹;管玉青;蒋海山;汪槿;席蕾;王群 刊期: 2012年第06期
目的 比较阿德福韦酯(ADV)及替比夫定(L-DT)单药治疗慢性乙型肝炎和肝硬化患者对肾脏功能的影响.方法 回顾性分析接受ADV(n=46)及L-DT(n-55)单药治疗的101名慢性乙型肝炎和肝硬化患者,比较治疗52周的血清肌酐(CR)、估算肾小球滤过率(eGFR)较基线的变化情况及eGFR≥90 ml· min-l·1.73 m-2患者的比例.结果 52周时,ADV和L-DT组患者CR较基线变化平均值分别为+0.05和-0.12 mg/dl (ADVvsL-DT,P-0.000),未观察到CR较基线升高>0.50 mg/dl患者;eGFR较基线变化中位数分别为-4.09和+18.32 ml·min-1· 1.73 m-2(ADV vs L-DT,P=0.000);基线肾功能轻度受损(eGFR <90 ml·min-1· 1.73 m-2)的患者中,ADV组有37.50% (3/8)在52周时上升至大于90 ml-min-1· 1.73m-2,L-DT组有92.31%(12/13)上升至大于90 ml·min-1· 1.73 m-2;ADV组eGFR≥90 ml·min· 1.73 m-2患者比例由基线的82.61%降至52周的78.26%,而L-DT组eGFR≥90 ml.min-1· 1.73 m-2患者比例由基线的76.36%升至52周的94.55%;两组不同eGFR水平患者的构成比在基线时无统计学差异(P=0.443),52周时有统计学差异(P=0.015).结论 L-DT抗病毒治疗对于肾脏功能具有一定的保护作用,但具体机制不明,需要进一步研究.
作者:李小溪;钟春秀;杨淑玲;樊蓉;彭劼;郭亚兵;孙剑;侯金林 刊期: 2012年第06期
目的 制备白细胞介素21(IL-21)膜表面修饰的小鼠膀胱癌MB49细胞疫苗,评价其在小鼠膀胱癌皮下转移模型中诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL s)的效应和治疗作用.方法 将SA-IL-21锚定在经30%酒精灭活后的MB49细胞膜表面而制成IL-21膜表面修饰疫苗.建立C57BL/6小鼠皮下MB49膀胱癌模型,将荷瘤小鼠随机分为5组:IL-21膜表面修饰疫苗组、单纯游离IL-21组、GFP膜表面修饰疫苗组、单独灭活MB49肿瘤疫苗组、PBS组.利用上述制备的疫苗进行治疗,通过检测各组小鼠肿瘤体积变化及CTL来评价疫苗的抗肿瘤功能.结果 成功制备了IL-21膜表面修饰MB49疫苗.IL-21/MB49疫苗可显著抑制肿瘤生长并产生长期特异性免疫反应(P<0.05).在同一效靶比下IL-21/MB49疫苗组的CTL杀伤活性显著高于其他组(P<0.05).结论 采用蛋白膜锚定技术可将IL-21高效锚定于MB49细胞膜表面制备成IL-21膜表面修饰膀胱癌肿瘤疫苗,该疫苗既可保持IL-21生物学活性又可明显增强CTL杀伤Bca肿瘤活性.
作者:彭俊铭;石小军;陈定南;梁中锟;蓝开健;高基民;谭万龙 刊期: 2012年第06期
目的 利用细胞电融合技术制备外周血来源树突状细胞(DC)和三阴乳腺癌细胞(MDA-MB-231)全抗原肿瘤疫苗,观察其特异性抗肿瘤免疫效应.方法 从健康人外周血中分离培养DC,利用电融合技术,将DC和三阴乳腺癌细胞融合;荧光显微镜观察融合疫苗的形态;流式细胞仪进行融合疫苗的表型鉴定;ELlSA试剂盒检测IL-12、IFN-y的分泌情况;CCK-8试剂盒测定融合疫苗刺激同源异体T淋巴细胞增殖和细胞毒性效应.结果 成功分离培养DC,其表面高表达DC的分子标记CD83、CD11c、CD86、HLA-DR;融合疫苗形态不规则,其表面共同表达DC和三阴乳腺癌的标记分子;T淋巴细胞增殖实验证明融合疫苗有很强的免疫刺激活性;细胞毒性实验证明融合疫苗具有比对照组更强的杀伤肿瘤细胞作用.结论 电融合技术成功诱导DC和三阴乳腺癌细胞融合,全抗原融合疫苗体外实验可显著增强抗肿瘤免疫效应.
作者:张鹏;刘瑞磊;姜华;刘宇;张翘楚;黄勇 刊期: 2012年第06期
目的 探讨B7-H1在同种异体小鼠角膜移植术后眼球组织表达情况,及其对角膜免疫赦免的影响.方法 建立同种异体小鼠角膜移植实验模型.按Sonoda方法对角膜混浊及新生血管指数进行评分,8周后将实验小鼠分为存活组和排斥组,并取8只正常小鼠为对照组.取3组小鼠眼球组织行免疫组化检测B7-H1表达情况.结果 正常小鼠角膜及虹膜睫状体表达B7-H1,移植术后存活小鼠角膜及虹膜睫状体高度表达B7-H1,而移植术后排斥的小鼠角膜及虹膜睫状体未见明显表达B7-H1.结论 B7-H1可能参与了同种异体小鼠角膜移植术后的免疫反应,可能在免疫赦免现象中发挥重要作用.
作者:黄晓环;吴京;于健;熊柯;马明 刊期: 2012年第06期
目的 探讨食管癌切除食管胃颈部机械吻合及手工吻合两种手术方式的并发症及防治.方法 2004年9月~2008年6月,将颈段及胸中、上段食管癌并具有手术适应症的患者随机分为两组即手工吻合组(手工组)和圆形吻合器机械吻合组(机械组),比较两组吻合口瘘、狭窄等的并发症.结果 手工组125例,机械组102例,吻合瘘发生率分别为14.4%(18/125)、2.9%(3/102),狭窄需扩张分别为8.8.%(11/125),3.9%(4/102).颈部吻合时间分别为(52±12)min和(25±5)rn in,差别显著(P<0.01).结论 食管癌切除食管胃颈部采用圆形吻合器端侧吻合吻合口瘘发生率低,手术时间缩短,操作简便,易于掌握及标准化,有利于降低吻合口的并发症.
作者:蔡瑞君;李梅;熊刚;蔡开灿;王武军 刊期: 2012年第06期