陈晖；汤平；欧汝彪；邓向荣；谢克基
目的 筛选慢性髓系白血病急性变相关关键基因,探寻疾病进展机制及潜在的生物标志物.方法 应用基因芯片技术筛选与慢性髓系白血病急变期相关基因,采用生物信息学方法对这些差异表达基因进行基因本体分类,亚细胞定位以及组织选择性分析,结合转录因子预测和网络谱图构建,找出差异表达基因中的关键分子并进行初步验证.结果 得到一组定位于白细胞膜的基因集,在整个调控网络中,CD40、CCR3、LGALS3、RGS3、CEACAM3及转录因子RAC1、CTNNB1、TP53、NF-kB处于网络节点位置,可能是疾病进展的关键调控基因,采用RT-PCR方法初步证实CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1在急变期患者表达显著增高.结论 CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1可能是慢性髓系白血病由慢性期向急变期转变的关键基因和生物标志物.
作者：骆许静；张进芳；刘晓力；杜庆锋；许娜；许露露；黄彬涛；肖小珍 刊期： 2012年第06期
目的 探讨糖基化抑制剂衣霉素联合顺铂对人鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其相关的分子机制.方法 MTT法检测药物对细胞增殖抑制的影响；集落克隆形成法检测药物对细胞集落克隆形成的影响；碘化丙啶单染流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡率的变化；caspase-3活性检测试剂盒检测药物作用后24 h caspase-3的活性变化；Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白的表达及葡萄糖调节蛋白78的表达.结果 不同浓度衣霉素和/或顺铂对人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞具有显著的增殖抑制作用,3 μmol/L衣霉素处理人鼻咽癌细胞的24、36、48 h后细胞的存活率分别为72.13％、51.97％、37.56％和85.61％、56.95％、43.66％,3 μmol/L衣霉素与6μmol/L顺铂对人鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2 24、36、48 h的存活率低于单用衣霉素、顺铂组,分别为67.97％、47.76％、34.68％和56.89％、37.05％、29.30％.0.3 μnol/L衣霉素可增强0.6 μmol/L顺铂抑制人鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2的集落克隆形成的作用.3 μmol/L衣霉素诱导CNE-l、CNE-2细胞48 h的凋亡率分别为8.89％、8.67％.3μmol/L衣霉素与6μmol/L顺铂联合刺激人鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2 48 h的凋亡率分别为37.02％、32.25％,分别高于顺铂本身诱导的凋亡率7.25％、6.36％.促进凋亡蛋白Bax的表达联合用药组高于单独用药组,抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达联合用药组低于单独用药组.衣霉素上调GRP-78的表达以及增强联合用药组caspase-3的活性.结论 衣霉素增强顺铂对人鼻咽癌细胞的增殖抑制作用,衣霉素增强顺铂诱导人鼻咽癌细胞的凋亡作用,其机制可能是通过引起过度的内质网应激反应以及增加caspase-3的活性.
作者：宋乐乐；马琳艳；张旭东；蒋志文；刘浩；蒋琛琛 刊期： 2012年第06期
目的 为了准确地识别肝脏移植物的植入状态,探讨多聚酶链反应-短串联重复序列(PCR-STR)技术在肝移植后移植物抗宿主病中的预测和诊断意义.方法 建立荧光标记PCR-STR等位基因分析技术,采用单克隆磁珠提取DNA,四色荧光标记,于移植前和移植后1周内,采集供、受血液DNA作PCR-STR分析.结果 23例患者中,5例患者供受者HLA完全嵌合表达,其中2例发生移植物抗宿主病(GVHD),均治疗无效死亡,另外3例未发生GVHD,顺利恢复出院,GVHD发生率40％.18例患者术后未发生嵌合表达,其中1例发生GVHD,家属放弃治疗出院,GVHD发生率5.6％,两组有显著差别.结论 基于分子水平的多位点PCR-STR可以提供肝脏移植后供体植入信息,在肝移植后移植物抗宿主病的诊断中具有一定的预测意义.
作者：陈小平；骆利敏；罗敏；肖露露 刊期： 2012年第06期
目的 建立一套简单有效的单个肿瘤干细胞分离及培养方法,提高研究的效率与质量.方法 在火焰上轻烤拉伸后的毛细管,与无菌塑料管连接建立口控毛细管单细胞分离装置.分离单个SW480细胞无血清培养筛选出克隆球,CD133、CK7荧光标记鉴定；消化克隆球吸取单个肿瘤干细胞并移至石蜡油封闭的微滴及96孔板中培养对比观察.结果 SW480细胞克隆形成率约为1.04％,其CD133表达强CK7表达弱；口控毛细管单细胞分离装置分离单个肿瘤干细胞的有效率可高达98.99％;单个肿瘤干细胞在微滴中培养与在96孔板中培养的比较:在分裂时间点上,前两次分裂时间相差无几(P＞0.05),在微滴中培养的细胞后续分裂需时较长；在持续扩增的数量上,微滴培养为11.5％(22/192)而96孔板为9.2％(17/184),两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单个SW480细胞无血清培养可形成肿瘤干细胞球,口控单细胞分离装置能够有效分离单个肿瘤干细胞,石蜡油封闭微滴培养法和96孔板培养法均能够有效扩增单个肿瘤干细胞.但石蜡油封闭微滴培养法操作灵活、观察便捷、环境稳定,可作为培养单个肿瘤干细胞的首选.
作者：邓永键；蒋强；于莉娜；王红霞；胡纯婷；刘超；丁彦青 刊期： 2012年第06期
目的 探索人胚胎肺组织中是否存在一种新的血管内皮生长因子(VEGF)基因可变剪切形式.方法 对1例4月龄引产胎儿肺组织的总RNA进行逆转录聚合酶链反应、克隆并测定扩增片段的序列.结果 用一对引物(引物5’端-21～7 bp,3’端554～576 bp)可扩增出3条片段,一条为长度正常的VEGF165(619 bp)全长序列,另一条为长度正常的VEGF121(487bp)全长序列,第三条为新的VEGF mRNA异常剪切片段.测序检测显示,此扩增片段长度为639 bp,同样为VEGF165全长核苷酸序列,但在VEGF165的第3和第4外显子之间插入了长度为20bp的碱基片段.序列分析显示此插入序列为滞留的第Ⅲ内含子终末序列,含内含子剪切信号.上述移码突变导致VEGF基因阅读框架发生改变,在第4外显子中游出现终止密码,故仅含-VEGF165外显子l～3及4部分序列,在蛋白水平上可能编码含97个氨基酸的新肽链.结论 在一引产胎儿的肺组织中发现了新的VEGF mRNA可变剪切形式,其生物学意义有待进一步研究.
作者：周忠江；叶海燕；崔凯；陈向辉；刘伊丽 刊期： 2012年第06期
目的 研究MnSOD单核苷酸多态性位点rs4880与广东鼻咽癌发生风险的关系.方法 选择105例经病理证实的鼻咽癌患者为病例组,136例同期经南方医院查体中心证实的健康体检者为对照组,应用PCR法检测MnSOD基因Ala-9Val的多态性分布,比较不同基因型与鼻咽癌的相关关系.结果 中国汉族广东人Ala携带者占19.1％.病例组和对照组3种基因型Val/Val、Val/Ala、Ala/Ala的频率分别为83.8％、14.3％、1.9％和80.9％、16.9％、2.2％,各基因型在两组间分布无显著性差异.基因型Val/Ala与鼻咽癌的淋巴结转移显著相关(OR=0.308,95％CI=0.095-0.996),进一步年龄分层,这种杂合子与肿瘤淋巴结转移的关系在年长人群(＞30岁)中同样存在(OR=0.227,95％C1=0.064-0.804),但在年青人群(≤30岁)中不存在,然而等位基因Ala的分布与淋巴结转移无显著关系(OR=1.987,95％CI=0.707-5.583).各基因型在不同T、M、临床分期和病理分型的鼻咽癌患者的等位基因表达频率均无明显差异.结论 MnSOD基因Ma-9Val多态性可能与地域、种族相关；基因型Val/Ala可能与鼻咽癌淋巴结转移有关,各基因型与广东地区鼻咽癌易感性无明显相关.
作者：叶尔佳；张应蒙；王宏梅；石玉生；陈龙华 刊期： 2012年第06期
目的 评价基于三维技术的保护性肝切除治疗肝胆管结石的临床应用价值.方法 采用MI-3DVS软件对21例肝胆管结石患者上腹部64排多层螺旋CT薄层图像进行三维重建及可视化仿真手术,制定手术规划,指导临床施行保护性肝切除术.观察实际肝切除方式与仿真手术符合情况,平均手术时间及住院日,术中出血量,结石取尽情况及术中术后并发症发生情况等.结果 21例患者实际肝切除方式与仿真手术一致,与常规的规则性肝切除术相比,均不同程度的保留功能正常的肝脏组织,平均手术时间(215.2±51.3)min,住院时间(10.7±4.3)d,术中出血量(301.4±60.7)ml,结石取尽率为95.2％(20/21),手术并发症发生率为19.0％(4/21).结论 基于三维技术的保护性肝切除治疗肝胆管结石,在实现取尽结石、祛除病灶、解除狭窄、通畅引流的同时,能大程度保留残肝体积,并降低肝切除相关并发症的发生.
作者：方驰华；陈建新；范应方；杨剑；项楠；游锦华 刊期： 2012年第06期
目的 观察RhoA在缺氧诱导下对乳腺癌细胞MCF-7分泌VEGF水平的影响,以及对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖、迁移和管腔形成的作用.方法 ELISA检测缺氧条件下MCF-7细胞中RhoA的活化与失活对VEGF分泌水平的影响；建立MCF-7/HUVEC共培养模型,观察在缺氧刺激下MCF-7细胞中RhoA活性的变化对HUVEC增殖、迁移和管腔形成的影响.结果 缺氧条件下,活性RhoA可以促进MCF-7细胞VEGF分泌,沉默RhoA可以抑制VEGF分泌；在共培养模型中,当MCF-7细胞中RhoA活化时,可以促进HUVEC增殖、迁移和管腔形成,而MCF-7细胞中RhoA沉默时,则HUVEC的上述生物学行为受到抑制.结论 在缺氧刺激下,RhoA可能通过调控肿瘤细胞VEGF的表达水平,间接影响HUVEC的增殖、迁移和管腔形成能力,从而参与肿瘤新生血管的形成过程.
作者：马骥；赵庆丽；任晖；刘文超；薛妍 刊期： 2012年第06期
目的 观察利拉鲁肽对糖耐量异常大鼠胰岛炎症因子白细胞介素-1β(IL-1p)和凋亡基因caspase3表达的影响.方法 12周龄糖耐量异常OLETF大鼠分为生理盐水组和不同剂量利拉鲁肽干预组(50、100、200μg/kg),8只LETO作为正常对照组.实验12周结束时,所有大鼠均检测糖耐量试验空腹及服糖后30 ruin胰岛素,并检测胰岛IL-1β和caspase3mRNA和蛋白水平.结果 利拉鲁肽干预的糖耐量异常大鼠和生理盐水干预组相比,胰岛IL-1p和caspase3表达显著降低,血糖、胰岛β细胞功能及早期胰岛素分泌指数明显改善.结论 利拉鲁肽可能通过抑制胰岛IL-1β炎症因子表达,从而改善胰岛功能及糖代谢,延缓或阻止糖尿病发生发展.
作者：郭南京；孙嘉；陈宏；徐艳花；高飞；张桦；张振；蔡德鸿 刊期： 2012年第06期
目的 回顾性分析近20年烧伤总面积≥50％成人烧伤患者早期液体复苏资料,探讨适合广州地区严重烧伤休克期补液方案.方法 选择1991年～2010年本院收治的烧伤面积≥50％烧伤总面积(TBSA)94例患者临床资料.根据入院时间顺序,分为前10年(1991年～1999年,A组)和后10年(2000年-2010年,B组)2组,比较两组休克期补液总量及晶体、胶体和水分各成份补液量,尿量,以及伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率.结果 B组患者伤后第1个24 h晶体、胶体、水分补液量、补液总量、尿量及伤后第2个24 h晶体补液量、补液总量、尿量均较A组患者显著增多.B组患者伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率分别为7.69％及2.56％,较A组(27.3％,18.18％)均显著降低(P＜0.05).结论 对于地处广州地区大面积烧伤患者,休克期补液治疗需结合地区气候特点,强调个体化补液方案,适当增加烧伤休克期内胶体、晶体和水分补液量和比例,以降低内脏器并发症发生率和死亡率.
作者：黄磊；王甲汉；李志清；邱学文；刘亮；吴起；马军 刊期： 2012年第06期
目的 探讨Treg细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及与病情活动度、RA相关抗体的关系.方法 流式细胞仪技术检测40例RA患者和40例健康对照者外周血Treg占CD4+T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验检测血清IL-10及TGF-β1,实时荧光定量PCR法检测Foxp3mRNA,分析Treg细胞百分率与病情活动度及RA相关抗体的相关性.结果 RA患者外周血中Treg细胞(CD4+CD25+FOXP3+T细胞)的百分率显著低于健康对照组[(5.36±1.55)％vs(7.49±1.46)％,P＜0.01],Foxp3mRNA表达也较对照组显著减少(P＜0.01);RA组IL-10水平低于健康对照组(P=0.000),而TGF-β1则显著高于健康对照组(P=0.000)；相关性分析显示IL-10水平与Treg细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量正相关；RA患者外周血中Treg细胞百分率与关节压痛数、关节肿胀数、患者疼痛模拟视觉评分、健康评估问卷、DAS28评分、红细胞沉降率、C反应蛋白等临床和实验室病情活动指标无明显相关性(P＞0.05),与RF、抗CCP抗体滴度也无相关性(P＞0.05).结论 RA患者中Treg细胞数量减少并存在功能异常,疾病活动度越高的患者可能Treg细胞数量减少越明显.
作者：陈瑞林；陶怡；邱可为；黄文辉；黄成辉；李娟 刊期： 2012年第06期
目的 研究低分子肝素(LMWH)对子痫前期样大鼠胎盘组织的抗细胞凋亡作用.方法 将孕鼠随机分为正常孕组、子痫前期组(PE组)及LMWH治疗组,每组10只.PE组及LMWH治疗组孕鼠均于妊娠第13天开始给予左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)200 mg/(kg·d)皮下注射,共4d,建立子痫前期样孕鼠模型.PE组于妊娠第15～20天给予生理盐水0.5 ml皮下注射,LMWH治疗组于妊娠第15～20天给予LMWH 40 μl/(kg,d)皮下注射.检测各组血压、尿蛋白、鼠胎数、鼠胎质量及胎盘质量,对LMWH疗效进行评价；采用TUNEL法检测胎盘细胞凋亡率,Westem blotting法检测胎盘组织中活化caspase-3、Bel-2及Bax蛋白表达.结果 PE组大鼠血压及尿蛋白均显著高于正常孕组(P＜0.05),鼠胎数及鼠胎质量显著降低(P＜0.05).LMWH治疗组血压及尿蛋白较PE组明显降低(P＜0.05),但仍显著高于正常孕组(P＜0.05),鼠胎数及鼠胎质量较PE组显著增高(P＜0.05),鼠胎质量显著低于正常孕组(P＜0 05),而鼠胎数与正常孕组无显著差异(P＞0.05).与正常孕组相比,PE组胎盘组织细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),活化caspase-3及Bax蛋白表达显著升高(P＜0.05),而Bcl-2蛋白表达则显著降低(P＜0.05);LMWH治疗组胎盘凋亡率及活化caspase-3蛋白表达较PE组显著降低(P＜0.05),Bcl-2显著升高,而Bax则显著降低(P＜0.05),与正常孕组比均无显著差异(P＞0.05).结论 LMWH可以有效改善子痫前期样症状,减少子痫前期样大鼠胎盘细胞凋亡,这一作用可能通过调节Bcl-2/Bax平衡抑制细胞凋亡.
作者：张园；钟梅；刘凤岩 刊期： 2012年第06期
目的 探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达.方法 以18周龄雌性MRL/Ipr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组.分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,司时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现.结果 MRL/Ipr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P＜0.05).MRL/Ipr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常.MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P＜0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P＜0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别.结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组.
作者：杨荟；徐安平；吕军；刘亚 刊期： 2012年第06期
目的 观察重组腺病毒三突变型低氧诱导因子-1cα(HIF-1α)对人微血管内皮细胞(hMVECs)增殖及VEGF蛋白表达的影响.方法 三突变型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1α564/402/803)、野生型HIF-1α腺病毒载体(Ad-HIF-1αnature)、Ad-LacZ及空载腺病毒载体(Ad-Null)分别在HEK293A细胞大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,终点稀释法测定病毒滴度；双荧光素酶报告系统检测三突变型HIF-1α与野生型HIF-1α的转录活性；各重组腺病毒载体以佳转染复数转染体外培养的hMVECs,Westem blotting测定HIF-1α和VEGF蛋白表达；MTS检测Ad-HIF-1α564/402/803对细胞增殖的影响.结果 三突变型HIF-1α转录活性显著高于野生型HIF-1α(P＜0.001):Ad-HIF-1α564/402/803组HIF-1α和VEGF蛋白表达量高于Ad-HIF-1αnature及其他组；VEGF蛋白表达水平与HIF-1α呈剂量依赖关系.Ad-HIF-1α564/402/803组第3、5天吸光度值均显著高于Ad-HIF-1αnature及其他组(P＜0.01).结论 三突变型HIF-1α在体外常氧条件下稳定高效表达,可诱导hMVECs VEGF蛋白表达上调,促进hMVECs增殖.
作者：裴静娴；王月刚；刘城；魏璇；李明琰；陈建威；吴平生 刊期： 2012年第06期
目的 探讨B7-H1在同种异体小鼠角膜移植术后眼球组织表达情况,及其对角膜免疫赦免的影响.方法 建立同种异体小鼠角膜移植实验模型.按Sonoda方法对角膜混浊及新生血管指数进行评分,8周后将实验小鼠分为存活组和排斥组,并取8只正常小鼠为对照组.取3组小鼠眼球组织行免疫组化检测B7-H1表达情况.结果 正常小鼠角膜及虹膜睫状体表达B7-H1,移植术后存活小鼠角膜及虹膜睫状体高度表达B7-H1,而移植术后排斥的小鼠角膜及虹膜睫状体未见明显表达B7-H1.结论 B7-H1可能参与了同种异体小鼠角膜移植术后的免疫反应,可能在免疫赦免现象中发挥重要作用.
作者：黄晓环；吴京；于健；熊柯；马明 刊期： 2012年第06期
对1例病因不明的“广泛皮疹、皮肤剥脱、无尿、全身浮肿、呼吸困难”患者行持续血液净化治疗,动态观察各器官损伤情况的变化,之后在患者病变部位行组织活检.患者病理结果为多发性肌炎/皮肌炎,持续性血液净化治疗开始后心、肝、肾、肺各项指标快速好转,表现为尿量快速增加,肺部炎症逐渐减轻,血肌酐、尿素、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶和乳酸脱氧酶水平快速回落,治疗结束后各项生化指标仍保持下降趋势,患者顺利出院.持续性血液净化在本例重症多发性肌炎/皮肌炎的治疗中疗效显著,在自身免疫性疾病,尤其是全身性炎症疾病的急性期可以作为一种治疗选择.
作者：刘占国；周健；岑仲然；唐颖；杨祥锐；常平 刊期： 2012年第06期
目的 比较钬激光前列腺剜除术(HoLEP)和开放前列腺切除术(OP)治疗大体积良性前列腺增生(BPH)的疗效和安全性.方法 检索Medline、Embase中HoLEP和OP治疗大体积BPH的随机对照试验文献.Revman5.0进行Meta分析.结果 纳入文献3篇.术后HoLEP组和OP组患者国际前列腺症状评分(IPSS)、大尿流率(Qmax)较术前明显改善,但两组间IPSS、Qmax比较无统计学差异(P＞0.05).两组手术时间、前列腺切除重量、术后停留尿管时间和住院时间、术中输血率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组间尿道狭窄、尿失禁及二次手术发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HoLEP和OP对大体积BPH有相同的近期疗效.HoLEP组手术时间长、切除前列腺组织少,但是术中出血量少,术后留置尿管时间、住院时间短.
作者：陈晖；汤平；欧汝彪；邓向荣；谢克基 刊期： 2012年第06期
目的 制备白细胞介素21(IL-21)膜表面修饰的小鼠膀胱癌MB49细胞疫苗,评价其在小鼠膀胱癌皮下转移模型中诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL s)的效应和治疗作用.方法 将SA-IL-21锚定在经30％酒精灭活后的MB49细胞膜表面而制成IL-21膜表面修饰疫苗.建立C57BL/6小鼠皮下MB49膀胱癌模型,将荷瘤小鼠随机分为5组:IL-21膜表面修饰疫苗组、单纯游离IL-21组、GFP膜表面修饰疫苗组、单独灭活MB49肿瘤疫苗组、PBS组.利用上述制备的疫苗进行治疗,通过检测各组小鼠肿瘤体积变化及CTL来评价疫苗的抗肿瘤功能.结果 成功制备了IL-21膜表面修饰MB49疫苗.IL-21/MB49疫苗可显著抑制肿瘤生长并产生长期特异性免疫反应(P＜0.05).在同一效靶比下IL-21/MB49疫苗组的CTL杀伤活性显著高于其他组(P＜0.05).结论 采用蛋白膜锚定技术可将IL-21高效锚定于MB49细胞膜表面制备成IL-21膜表面修饰膀胱癌肿瘤疫苗,该疫苗既可保持IL-21生物学活性又可明显增强CTL杀伤Bca肿瘤活性.
作者：彭俊铭；石小军；陈定南；梁中锟；蓝开健；高基民；谭万龙 刊期： 2012年第06期
目的 通过非介入式的生理参数的监测,评估精神疲劳.方法 根据实验对象的反应时间在反应时测试实验过程中伴随疲劳而发生的变化,记录14例实验对象疲劳过程前后的皮肤电活动、心率、心率变异性3组生理参数,并进行统计分析.结果 人体清醒和精神疲劳状态下的平均皮肤电导水平、平均心率、总功率密度、极低频功率密度占总功率密度百分比、高频功率密度占总功率密度百分比均有显著性差异.结论 通过监测皮肤电活动、心率和心率变异性等生理参数对人体精神疲劳进行评估的方法具有无创、有效和实用的特点,有较好的运用前景.
作者：夏岚；王见荣；梁妃学；李伟龙；郭劲松；邓亲恺 刊期： 2012年第06期
目的 建立荧光定量PCR和环介导等温扩增技术(LAMP)检测隐球菌荚膜相关蛋白基因(CAP10)的方法,并比较和评价两种方法的优缺点.方法 针对新型隐球菌CAP10基因序列,使用在线软件设计引物,并构建质粒标准品,优化反应条件后用荧光定量PCR和LAMP两种方法检测定量的质粒,分析其敏感性和特异性,并检测临床标本.结果 荧光定量PCR检测CAP10质粒的敏感性为6.8×101拷贝,LAMP方法的敏感性为6.8×103拷贝,PCR检测阳性率比LAMP方法高.两种方法特异性好,对脑膜炎奈瑟菌、白色念珠菌、热带念珠菌、黄曲霉、黑曲霉和大肠埃希菌的检测结果均为阴性.结论 成功建立了检测CAP10基因的荧光定量PCR方法敏感性和特异性高,但是需要特殊仪器；LAMP方法敏感性较低,但其操作简单,无需特殊仪器和设备,加入核酸染料即能观察结果.两者均适用于新型隐球菌感染的检测.
作者：韩慧；胡子有；吴炳义 刊期： 2012年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
