裴静娴；王月刚；刘城；魏璇；李明琰；陈建威；吴平生
目的 比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率.方法 原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度；同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的毒性.结果 腺相关病毒AAV2-EGFP对PFF的转染效率随MOI值的增加而增高,MOI为103、1 04、105时,转染效率分别为(33.68±1.18)％、(50.80±2.59)％和(60.08±1.08)％,而其他两种血清型病毒感染效率均低于AAV2-EGFP.3种病毒转染PFF过程中,细胞生长正常,MTT显示各个转染组与对照组(未转染组)在D570处吸光度无显著差异.结论 AAV2血清型载体对体外培养的猪胚胎成纤维细胞的感染效率显著高于其他几种血清型,AAV8和AAV9对PFF感染能力极差,筛选AAV2作为西藏小型猪基因打靶的适病毒载体；同时,3类血清型病毒载体对猪胚胎成纤维细胞均无明显细胞毒性.
作者：黄威；毛莹莹；刘薇；唐华；揭飞龙；李红卫；顾为望 刊期： 2012年第06期
目的 观察RhoA在缺氧诱导下对乳腺癌细胞MCF-7分泌VEGF水平的影响,以及对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖、迁移和管腔形成的作用.方法 ELISA检测缺氧条件下MCF-7细胞中RhoA的活化与失活对VEGF分泌水平的影响；建立MCF-7/HUVEC共培养模型,观察在缺氧刺激下MCF-7细胞中RhoA活性的变化对HUVEC增殖、迁移和管腔形成的影响.结果 缺氧条件下,活性RhoA可以促进MCF-7细胞VEGF分泌,沉默RhoA可以抑制VEGF分泌；在共培养模型中,当MCF-7细胞中RhoA活化时,可以促进HUVEC增殖、迁移和管腔形成,而MCF-7细胞中RhoA沉默时,则HUVEC的上述生物学行为受到抑制.结论 在缺氧刺激下,RhoA可能通过调控肿瘤细胞VEGF的表达水平,间接影响HUVEC的增殖、迁移和管腔形成能力,从而参与肿瘤新生血管的形成过程.
作者：马骥；赵庆丽；任晖；刘文超；薛妍 刊期： 2012年第06期
目的 探讨2VO大鼠脑组织中甲状腺激素转运体MCT8在不同缺血时间点基因水平的变化规律.方法 25只成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组、2VO 3 d组、2VO 2周组和2VO 5周组.采用免疫荧光法观察MCT8在正常大鼠侧脑室中的表达；采用双侧颈总动脉永久性结扎术制备脑缺血模型,术后各组大鼠于实验终点采用荧光定量PCR法测定脑组织中甲状腺激素转运体MCT8 mRNA的表达水平.结果 免疫荧光法观察到MCT8在正常大鼠侧脑室的血管内皮细胞膜上表达丰富；中枢甲状腺激素转运体MCT8 mRNA水平在2VO 3 d组及2VO 2周组与正常组相比较差异无统计学意义(P=-0.909,P=0.694)；MCT8 mRNA水平在2VO 5周组较正常组及2VO 3 d组明显增高(P＝0.029,P=0.023),与2VO 2周组相比较差异无统计学意义(P=0.065).结论 中枢甲状腺激素转运体MCT8基因水平在脑缺血后呈逐渐代偿性增高趋势.
作者：崔丹；管玉青；蒋海山；汪槿；席蕾；王群 刊期： 2012年第06期
目的 探讨体外冲击波碎石(ESWL)治疗肾结石疗效的影响因素,并建立预测模型.方法 2008年1月～2010年2月接受 ESWL治疗的肾结石患者325例,长随访3个月,用x2检验或t检验进行单因素分析患者年龄、性别、体重指数、病程时间、治疗前肾绞痛、血尿、尿路刺激症状、结石位置、惠侧、结石长径、宽径等因素与疗效的关系,筛选出有统计学意义的因素后,再利用Logistic逐步回归多因素分析并建立预测模型.结果 ESWL治疗肾结石成功率76.9％(250/325).单因素分析发现年龄、结石患侧、结石位置、病程时间、治疗前血尿、结石长、宽径对疗效均有影响.Logistic回归分析则显示病程时间、治疗前血尿、结石长、宽径决定治疗的成功率.预测模型拟合优度好(x2=18.144,df=8,P=0.168),总体准确率为87.4％.结论 病程时间、治疗前血尿、结石长、短径是ESWL单次治疗单发肾结石成功率的独立影响因素.
作者：张鹏；吴芃；杜跃军；张辉见；魏强；侯祺；古迪；郑少斌；刘成山 刊期： 2012年第06期
目的 评估若干分子标志物及临床特征对恶性黑色素瘤(MM)预后的影响.方法 回顾性分析127例MM患者的临床资料；对127例MM标本以免疫组化法检测HMB45、S-100以及Vimentin蛋白的表达；COX比例风险回归模型对各临床病理指标进行单因素和多因素生存分析.结果 HMB45、S-100以及Vimentin在MM中的阳性表达率分别为89.8％、92.1％和78.0％；单因素分析提示影响MM预后的因素包括年龄、原发病灶是否溃疡、Clark分级、术后病灶切缘情况、AJCC分期、治疗方法及疗效、S-100蛋白(P＜0.05)；多因素分析发现年龄、术后切缘情况、Clark分级、S-100蛋白以及疗效是影响MM预后的独立因素.结论 年龄、术后切缘情况、Clark分级、S-100蛋白与疗效是影响MM预后的独立危险因素,HMB45和Vimentin蛋白表达水平与MM预后不相关.
作者：刘静；李荣；周小平；张军一；罗荣城 刊期： 2012年第06期
目的 筛选慢性髓系白血病急性变相关关键基因,探寻疾病进展机制及潜在的生物标志物.方法 应用基因芯片技术筛选与慢性髓系白血病急变期相关基因,采用生物信息学方法对这些差异表达基因进行基因本体分类,亚细胞定位以及组织选择性分析,结合转录因子预测和网络谱图构建,找出差异表达基因中的关键分子并进行初步验证.结果 得到一组定位于白细胞膜的基因集,在整个调控网络中,CD40、CCR3、LGALS3、RGS3、CEACAM3及转录因子RAC1、CTNNB1、TP53、NF-kB处于网络节点位置,可能是疾病进展的关键调控基因,采用RT-PCR方法初步证实CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1在急变期患者表达显著增高.结论 CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1可能是慢性髓系白血病由慢性期向急变期转变的关键基因和生物标志物.
作者：骆许静；张进芳；刘晓力；杜庆锋；许娜；许露露；黄彬涛；肖小珍 刊期： 2012年第06期
目的 探讨B7-H1在同种异体小鼠角膜移植术后眼球组织表达情况,及其对角膜免疫赦免的影响.方法 建立同种异体小鼠角膜移植实验模型.按Sonoda方法对角膜混浊及新生血管指数进行评分,8周后将实验小鼠分为存活组和排斥组,并取8只正常小鼠为对照组.取3组小鼠眼球组织行免疫组化检测B7-H1表达情况.结果 正常小鼠角膜及虹膜睫状体表达B7-H1,移植术后存活小鼠角膜及虹膜睫状体高度表达B7-H1,而移植术后排斥的小鼠角膜及虹膜睫状体未见明显表达B7-H1.结论 B7-H1可能参与了同种异体小鼠角膜移植术后的免疫反应,可能在免疫赦免现象中发挥重要作用.
作者：黄晓环；吴京；于健；熊柯；马明 刊期： 2012年第06期
目的 通过非介入式的生理参数的监测,评估精神疲劳.方法 根据实验对象的反应时间在反应时测试实验过程中伴随疲劳而发生的变化,记录14例实验对象疲劳过程前后的皮肤电活动、心率、心率变异性3组生理参数,并进行统计分析.结果 人体清醒和精神疲劳状态下的平均皮肤电导水平、平均心率、总功率密度、极低频功率密度占总功率密度百分比、高频功率密度占总功率密度百分比均有显著性差异.结论 通过监测皮肤电活动、心率和心率变异性等生理参数对人体精神疲劳进行评估的方法具有无创、有效和实用的特点,有较好的运用前景.
作者：夏岚；王见荣；梁妃学；李伟龙；郭劲松；邓亲恺 刊期： 2012年第06期
目的 评价基于三维技术的保护性肝切除治疗肝胆管结石的临床应用价值.方法 采用MI-3DVS软件对21例肝胆管结石患者上腹部64排多层螺旋CT薄层图像进行三维重建及可视化仿真手术,制定手术规划,指导临床施行保护性肝切除术.观察实际肝切除方式与仿真手术符合情况,平均手术时间及住院日,术中出血量,结石取尽情况及术中术后并发症发生情况等.结果 21例患者实际肝切除方式与仿真手术一致,与常规的规则性肝切除术相比,均不同程度的保留功能正常的肝脏组织,平均手术时间(215.2±51.3)min,住院时间(10.7±4.3)d,术中出血量(301.4±60.7)ml,结石取尽率为95.2％(20/21),手术并发症发生率为19.0％(4/21).结论 基于三维技术的保护性肝切除治疗肝胆管结石,在实现取尽结石、祛除病灶、解除狭窄、通畅引流的同时,能大程度保留残肝体积,并降低肝切除相关并发症的发生.
作者：方驰华；陈建新；范应方；杨剑；项楠；游锦华 刊期： 2012年第06期
目的 探讨退变椎间盘分型中转化生长因子(TGF-β1)表达的意义.方法 收集正常与退变椎间盘组织,并根据病理改变把退变椎间盘组织分为Ⅳ级,采用HE染色,Western bloting和RT-PCR方法分析TGF-β1的表达情况.结果 HE染色、Westernbloting和RT-PCR均显示:在正常组织中TGF-β1有表达；在病变组织中并随病理分型增加TGF-β1随之增加,退变与正常组比较以及IV型与I型比较具有及显著差异(P＜0.01).结论 TGF-β1是引起椎间盘退变的重要原因,并且与病理的形态学分型密切相关.
作者：杨旸；何晓峰；李彦豪；冯建宇；庞桦进；王江云；刘庆 刊期： 2012年第06期
目的 研究MnSOD单核苷酸多态性位点rs4880与广东鼻咽癌发生风险的关系.方法 选择105例经病理证实的鼻咽癌患者为病例组,136例同期经南方医院查体中心证实的健康体检者为对照组,应用PCR法检测MnSOD基因Ala-9Val的多态性分布,比较不同基因型与鼻咽癌的相关关系.结果 中国汉族广东人Ala携带者占19.1％.病例组和对照组3种基因型Val/Val、Val/Ala、Ala/Ala的频率分别为83.8％、14.3％、1.9％和80.9％、16.9％、2.2％,各基因型在两组间分布无显著性差异.基因型Val/Ala与鼻咽癌的淋巴结转移显著相关(OR=0.308,95％CI=0.095-0.996),进一步年龄分层,这种杂合子与肿瘤淋巴结转移的关系在年长人群(＞30岁)中同样存在(OR=0.227,95％C1=0.064-0.804),但在年青人群(≤30岁)中不存在,然而等位基因Ala的分布与淋巴结转移无显著关系(OR=1.987,95％CI=0.707-5.583).各基因型在不同T、M、临床分期和病理分型的鼻咽癌患者的等位基因表达频率均无明显差异.结论 MnSOD基因Ma-9Val多态性可能与地域、种族相关；基因型Val/Ala可能与鼻咽癌淋巴结转移有关,各基因型与广东地区鼻咽癌易感性无明显相关.
作者：叶尔佳；张应蒙；王宏梅；石玉生；陈龙华 刊期： 2012年第06期
目的 观察野百合碱诱导小型猪肺动脉高压模型不同时期心肺组织的病理变化.方法 12头雄性西藏小型猪,4.0～4.5月龄,体质量15.0～18.0 kg.测定12头小型猪平均肺动脉压作为基础值；然后选择10头小型猪腹腔注射野百合碱(MCT)10.0 mg/kg;给药4周和8周后再分别测定小型猪平均肺动脉压.分别于4、8周处死两头小型猪,采样观察小型猪心肺组织病理改变情况.结果 给药4周和8周后,西藏小型猪的肺动脉压力与人体相近,正常平均肺动脉压约为(15.19±0.70) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa);给药4周后平均肺动脉压升至(19.69±2.47) mmHg;给药8周后升至(25.62±4.88) mmHg,与基础压相比均有显著差异(P＜0.01).组织病理学分析显示,给药4周后即可形成有意义的病理改变,右心室肥厚；8周后有明显的病理学改变,如右心室纤维化和肺动脉中层增厚.结论 MCT给药8周后,造成肺动脉压力升高和肺血管重构,可以诱导西藏小型猪形成慢性肺动脉高压模型.
作者：赵瑾；刘蓉；李洪涛；张新凤；刘宝骅；吴清洪；钱元新；顾为望 刊期： 2012年第06期
目的 探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV C)是否通过调控转录因子NFAT1的表达参与肝内胆管癌的发展及恶性生物学行为.方法 构建表达HCV C核心蛋白的真核表达质粒pEGFP-N3-HCV C,通过瞬时转染pEGFP-N3-HCV C质粒,RT-PCR检测肝内胆管癌RBE细胞中NFATl mRNA的表达情况,Western blot检测NFAT1蛋白的表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化情况.结果 转染HCV C后胆管癌细胞NFAT1基因的mRNA及蛋白表达明显上升,差异具有显著性(P＜0.05)；HCV C能够促进细胞向G2/M期进展及使细胞增殖能力增加.结论 HCV C可上调胆管癌细胞中NFAT1基因的表达,促进细胞周期进展及胆管癌细胞增殖,可能与肝内胆管癌的发展有关.
作者：廖巧芳；李志花；陈汝福；郭宁；曾兵；程帝；郑礼平 刊期： 2012年第06期
目的 探讨阿西替尼联合5-FU对肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其毒性作用.方法 肠癌LoVo细胞移植瘤裸鼠随机分为5组:空白对照组、溶剂对照组、阿西替尼组、5 -FU组和联合用药组,分别给予处理.观察各组裸鼠肿瘤大体形态,并测定裸鼠体质量、肿瘤大小及计算瘤质量、完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、T2(治疗后肿瘤增长至治疗前瘤体积2倍所需的时间)和肿瘤生长延迟时间(TGD),记录动物死亡率.结果 联合用药组疗效优于阿西替尼及5-FU单药组.治疗后第30天联合用药组瘤质量小于对照组及阿西替尼和5-FU单药组(P＜0.01).联合用药组T2(29.05 d)长于阿西替尼(19.31 d)和5-FU组(21.22 d).联合用药组的TGD达16.73 d,较阿西替尼单药组和5-FU单药组的8.53 d和9.72 d,明显延长.除了空白对照组没有裸鼠死亡之外,其余4组均有1只死亡,死亡率未超过20％.此外,各组裸鼠的体质量下降也均未超过20％.阿西替尼组及联合组中各有1例获得部分缓解(PR).阿西替尼组及联合用药组的瘤组织ABCG2蛋白水平较对照组表达显著下降(P＜0.05),而5-FU组的ABCG2表达水平则较对照组无显著差异(P＞0.05).结论 在人肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤模型中,阿西替尼和5-FU单药均能抑制肿瘤生长,两者联合使用显示出更强的抗肿瘤作用.两药剂量范围内的联合具有较佳的耐受性和安全性.
作者：赵佳；招婷；谢锋伟；何本夫 刊期： 2012年第06期
目的 比较钬激光前列腺剜除术(HoLEP)和开放前列腺切除术(OP)治疗大体积良性前列腺增生(BPH)的疗效和安全性.方法 检索Medline、Embase中HoLEP和OP治疗大体积BPH的随机对照试验文献.Revman5.0进行Meta分析.结果 纳入文献3篇.术后HoLEP组和OP组患者国际前列腺症状评分(IPSS)、大尿流率(Qmax)较术前明显改善,但两组间IPSS、Qmax比较无统计学差异(P＞0.05).两组手术时间、前列腺切除重量、术后停留尿管时间和住院时间、术中输血率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组间尿道狭窄、尿失禁及二次手术发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HoLEP和OP对大体积BPH有相同的近期疗效.HoLEP组手术时间长、切除前列腺组织少,但是术中出血量少,术后留置尿管时间、住院时间短.
作者：陈晖；汤平；欧汝彪；邓向荣；谢克基 刊期： 2012年第06期
目的 探讨Ca2+激活的氯离子通道(CaCC)蛋白TMEM16A在胃癌中的表达和意义.方法 收集72例胃癌标本,采用免疫组织化学SP法检测TMEM 16A的表达,以癌旁胃粘膜组织和非肿瘤胃粘膜组织作为对照,胃间质瘤组织作为阳性对照.结果 TMEM 16A表达于胃癌细胞胞膜和胞质内,在72例胃癌中TMEM 16A呈不同程度阳性表达,在胃癌组织中TMEM 16A表达的总阳性率(“阳性”和“强阳性”)为80.56％(58/72)；而在相应的癌旁组织中TMEM 16A表达的总阳性率(“阳性”和“强阳性”)仅为4.17％ (3/72),两者之间差异显著(P＜0.005).结论 TMEM16A高表达于胃癌组织,可作为胃癌的分子诊断和靶向治疗的一个新的候选靶点.
作者：杨军；刘妮；康安静；靳耀锋；王军宁；苏宝山；陈晓黎；李宗芳 刊期： 2012年第06期
目的 探讨Treg细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及与病情活动度、RA相关抗体的关系.方法 流式细胞仪技术检测40例RA患者和40例健康对照者外周血Treg占CD4+T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验检测血清IL-10及TGF-β1,实时荧光定量PCR法检测Foxp3mRNA,分析Treg细胞百分率与病情活动度及RA相关抗体的相关性.结果 RA患者外周血中Treg细胞(CD4+CD25+FOXP3+T细胞)的百分率显著低于健康对照组[(5.36±1.55)％vs(7.49±1.46)％,P＜0.01],Foxp3mRNA表达也较对照组显著减少(P＜0.01);RA组IL-10水平低于健康对照组(P=0.000),而TGF-β1则显著高于健康对照组(P=0.000)；相关性分析显示IL-10水平与Treg细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量正相关；RA患者外周血中Treg细胞百分率与关节压痛数、关节肿胀数、患者疼痛模拟视觉评分、健康评估问卷、DAS28评分、红细胞沉降率、C反应蛋白等临床和实验室病情活动指标无明显相关性(P＞0.05),与RF、抗CCP抗体滴度也无相关性(P＞0.05).结论 RA患者中Treg细胞数量减少并存在功能异常,疾病活动度越高的患者可能Treg细胞数量减少越明显.
作者：陈瑞林；陶怡；邱可为；黄文辉；黄成辉；李娟 刊期： 2012年第06期
目的 回顾性分析近20年烧伤总面积≥50％成人烧伤患者早期液体复苏资料,探讨适合广州地区严重烧伤休克期补液方案.方法 选择1991年～2010年本院收治的烧伤面积≥50％烧伤总面积(TBSA)94例患者临床资料.根据入院时间顺序,分为前10年(1991年～1999年,A组)和后10年(2000年-2010年,B组)2组,比较两组休克期补液总量及晶体、胶体和水分各成份补液量,尿量,以及伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率.结果 B组患者伤后第1个24 h晶体、胶体、水分补液量、补液总量、尿量及伤后第2个24 h晶体补液量、补液总量、尿量均较A组患者显著增多.B组患者伤后10d内脏器并发症发生率和死亡率分别为7.69％及2.56％,较A组(27.3％,18.18％)均显著降低(P＜0.05).结论 对于地处广州地区大面积烧伤患者,休克期补液治疗需结合地区气候特点,强调个体化补液方案,适当增加烧伤休克期内胶体、晶体和水分补液量和比例,以降低内脏器并发症发生率和死亡率.
作者：黄磊；王甲汉；李志清；邱学文；刘亮；吴起；马军 刊期： 2012年第06期
目的 通过对人工耳蜗植入手术相关的后鼓室及上鼓室解剖结构进行观察、测量,为人工耳蜗植入手术中顺利找到并准确定位鼓阶入口提供理论参考.方法 对20侧成人颞骨标本进行解剖,模拟人工耳蜗植入术,在手术显微镜下观察、测量与人工耳蜗植入手术相关的解剖数据.结果 砧骨短脚至圆窗龛之间的距离为(5.91±0.29) mm;镫骨头至圆窗龛之间的距离为(2.11±0.18) mm；面神经垂直段至圆窗龛之间的距离为(6.70±0.1 9)mm;锥隆起至圆窗膜前缘之间的距离为(2.22±0.21)mm；镫骨头至圆窗膜下缘之间的距离为(2.16±0.14) mm；鼓阶入口与卵圆窗近距离为(2.12±0.1 9)mm;匙状突至圆窗龛之间的距离为(3.79±0.17)mm;镫骨头至耳蜗第二回切开点之间距离为(2.25±0.13)nn；锥隆起至耳蜗第二回转切开点之间距离为(2.28±0.20) mm.结论 人工耳蜗植入手术中切开耳蜗底回的位置位于锥隆起前下方约2.22 mm处；切开耳蜗第二回的位置位于锥隆起前上方约2.28 mm处；根据病人不同情况,为术中选择不同的鼓阶切开点提供了参考.
作者：邹团明；郭梦和；张宏征；舒繁；谢南屏 刊期： 2012年第06期
目的 构建能够同时表达人免疫调节因子IL-12,GM-CSF和B7.1的新型抗肿瘤免疫基因治疗剂pVAX-1L- 12-GB,验证以上免疫调节因子基因在293T细胞的表达以及IL-12基因在活体内的表达.方法 将人1L-12基因克隆到早期构建好的pVAX-IRES-GM-CSF-B7.1真核表达质粒的上游,将其构建成为pVAX-IL-12-GB重组质粒:利用脂质体法瞬时转染293T细胞,RT-PCR检测IL-12和GM-CSF-B7,1基因的转录,ELISA法检测细胞上清中上游IL-12基因和下游GM-CSF基因的蛋白表达,流式细胞术及免疫荧光检测下游B7.1基因的表达；利用电穿孔方法递送质粒进入小鼠股四头肌,免疫组化法检测IL-12基因在小鼠活体内的表达情况.结果 双酶切以及PCR鉴定获得的片段均与预期的片段大小一致,测序分析证实IL-12基因序列完全正确；瞬时转染293T细胞后,分别验证了人IL-12,GM-CSF和B7.1基因的mRNA转录和蛋白表达；电穿孔递送质粒后,活体肌肉组织内同样可以检测到IL-12基因的表达.结论 成功构建了可以同时表达人IL-12,GM-CSF和B7.1的新型抗肿瘤免疫基因治疗剂,为下一步开展肿瘤免疫基因治疗研究奠定了坚实的基础.
作者：董金凯；高江平；阎瑾琦；张亮；肖毅；王伟；王晓雄；于继云 刊期： 2012年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
