张清；杨斌；王农荣；段林建；何士勤；孙坚
目的 研究慢病毒介导生存素基因特异性短发夹状RNA(shRNA)对子官内膜异位症异位内膜生长及新生血管形成的影响.方法 建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)子宫内膜异位症模型,随机分成单纯接种组、shRNA慢病毒组、空载慢病毒组和空白载体组,每组30只.通过Image-proplus软件测量新生血管面积与鸡胚尿囊膜面积比(VA/CAM)评价沉默survivin基因对CAM血管生成的影响,TUNEL检测异位内膜细胞凋亡,组织病理学观察异位内膜病灶生长行为.结果 shRNA慢病毒处理组种植内膜存活率低,该组VA/CAM明显低于单纯接种组、空载慢病毒组和空白载体组(P＜0.001),后3组间比较无显著性差异(P＞0.05).shRNA慢病毒处理组种植内膜细胞凋亡率明显高于其他3组(P＜0.05),另3组间比较无显著性差异(P＞005).shRNA慢病毒处理组病灶在光镜下可见腺体结构不完整,间质伴有不同程度的坏死.结论 慢病毒介导survivin基因特异性shRNA能够显著抑制人子宫内膜异位症种植CAM模型的新生血管形成,抑制子官内膜在CAM上的种植生长.
作者：彭冬先；何援利；丘立文 刊期： 2012年第07期
从大量的胶囊内窥图像中人工寻找出病变图片是一件非常费时费力的事情,因此利用计算机进行胶囊内窥病变图像智能识别研究具有重要意义.在对大量胶囊内窥正常图像和肿物图像的分析基础上,本文提出在图像的各个分量上将纹理和颜色相结合提取图像特征向量,分别输入BP(back propagation,后向传播)神经网络进行训练和识别,对不同分量图像的识别结果采用投票原则确定终识别结果.实验表明该方法可以有效地区分内窥图片中的正常图片和肿物图片,有效减少了医生的判读时间,辅助临床医生快速筛查出病变图片.
作者：李凯旋；刘哲星；刘思德；何丽君；罗志冲；王华峰 刊期： 2012年第07期
目的 探讨携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥诱导体外培养的原代人卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用.方法 利用分子生物学技术,成功构建携带Bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒体外感染人卵巢原代颗粒细胞,再加入浓度30 μmol/L的磷酰胺氮芥诱导细胞凋亡.分为4组进行实验:(a)实验组:pGC-FU-Bcl-2+酰胺氮芥(PM)；(b)空载对照组:pGC-FU-EGFP+ PM;(c)实验对照组:只加PM；(d)空白对照组:不加PM及病毒.采用流式细胞仪、Hoechst 33258染色检测卵巢颗粒细胞凋亡情况；利用Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果 空白对照组(GCs),凋亡峰不明显,颗粒细胞凋亡率为(1.93±0.28)％,实验组(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)出现微弱的凋亡峰,颗粒细胞凋亡率为(6.99±0.55)％,比实验对照组(GCs+PM)及空载对照组(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)显著低,但显著高于空白对照组(P＜0.05).实验组Bcl-2蛋白的表达明显增高,显著高于其余各对照组(P＜0.05).结论 携带Bcl-2基因的慢病毒感染靶细胞后可以过度分泌Bcl-2蛋白,显著抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,保护PM对颗粒细胞的理化损伤.
作者：王雪峰；何援利；付霞霏；彭冬先 刊期： 2012年第07期
目的 探讨超声刺激“关元穴”对围绝经期大鼠卵泡发育的影响.方法 采用阴道涂片法筛选围绝经期雌性SD大鼠.选用输出声功率0.1W,工作频率9 MHz,焦距4.5～5 mm,给予大鼠关元穴超声刺激.采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌激素(E)水平,组织学方法观察卵巢组织学结构变化,计数卵巢各级卵泡数.结果 与对照组比较,超声刺激关元10 min/d、5min/d连续刺激10d后显著提高围绝经期大鼠血中E水平(P＜0.05),卵巢初级卵泡数、次级卵泡数增多,闭锁卵泡数减少(P＜0.05).结论 超声刺激关无能改变围绝经期大鼠分泌雌激素的功能,影响卵巢卵泡发育.
作者：欧洪琼；方廖琼；白晋；刁庆春；翟蓓 刊期： 2012年第07期
目的 通过对慢性微量铬(Ⅵ)染毒动物模型的制备,探讨金属对金属髋关节置换术后铬(Ⅵ)的释放对肝脏氧化应激的影响.方法 80只NIH小鼠随机分为4组,对照组及低、中及高剂量组.隔日1次分别给0、5、0、20 mg/kg体质量的三氧化铬腹腔注射.分别于染毒4、8、12、16周用颈椎脱位法各处死小鼠5只,检测血铬含量、肝细胞活性氧自由基水平(ROS)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及谷氢酸半胱氨酸连接酶(GCL)的表达,并对小鼠肝细胞进行透射电镜观察.结果 与对照组比,5 mg/kg组及10 mg/kg组血铬浓度、ROS升高并在第8周以后趋于稳定；20 mg/kg组血铬浓度及ROS持续升高,呈一定的时间依赖性.各实验组MDA未见明显升高.各实验组GSH含量及GR活性随着染毒时间的延长均下降；5 mg/kg组及10 mg/kg组在各个时间点中GCL表达增加,20 mg/kg组GCL表达随逐渐降低.透射电镜显示20 mg/kg组肝细胞均出现凋亡性改变.结论 金属对金属髋关节置换术后微量铬(Ⅵ)的缓慢蓄积可能会引起肝细胞氧化应激以及抗氧化应激系统的改变.
作者：张西旗；李奇；林荔军；刘成龙；李干 刊期： 2012年第07期
目的 探讨创面坏死组织分解物对机体炎症因子的影响并分析其与内毒素的异同.方法 30只成年新西兰兔随机分成生理盐水组、坏死组织匀浆液组和内毒素组,于注射前及注射后2、6、12、24、30、36、48、60 h于兔耳朵中央动脉抽取血液标本2 ml,酶联免疫法动态观察血清标本炎症因子TNF-α、IL-1、IL-6的浓度变化,对比分析3组的差异.结果 (1)坏死组织匀浆液组腹腔注射后很快可见血清TNF-α、IL-1、IL-6含量升高,12h后达到高峰期,36h后开始出现回落.生理盐水组炎症因子浓度在观察期间无明显变化(p＜0.01)；(2)坏死组织匀浆液组中炎症因子的上升时间早于内毒素组(2～4 hvs 5～6 h),并且部分炎症因子在峰值期间(30 h)较内毒素组明显增高(P＜0 05)；(3)曲线拟合中匀浆液组中炎症因子浓度变化曲线明显有别于内毒素组.结论 创面坏死组织分解物中含有不同于甚至强于单纯内毒素毒性的能引起机体炎症反应的有害物质.
作者：樊桂成；荣新洲；王学敏；李庆辉；刘思容；周岳平；张涛 刊期： 2012年第07期
目的 探讨内囊后肢梗死后中央后回皮质下白质纤维的各向异性分数(FA)与体感诱发电位(SEP)的关系.方法 31例累及内囊后肢梗死的患者,通过放置兴趣区(ROI)的方式获得定量部分各向异性分数(FA).ROI放置区为:中央后回皮质下白质区.通过对患者行SEP及感觉功能检测并进行分级.结果 SEP分组后各组患侧中央后回皮质下白质纤维FA值显著低于健侧FA值(P＜0.05),患侧SEP分.组后的各组FA值差异具有显著性(P＜0.05),SEP异常程度越高,FA值越低；感觉功能程度与SEP的分级呈正相关(r=0.520,P＜0.05).结论 急性内囊后肢梗死后患者患侧中央后回质下白质区FA值变化在评价患者预后方面与SEP具有相关性,一致性和互补性.
作者：王齐琦；宋志彬；周雁玲；董延江；梁海毛 刊期： 2012年第07期
目的 研究SATB1在不同侵袭潜能的人肝癌细胞株表达状况.方法 分别用荧光定量PCR,RT-PCR,Western blotting及免疫荧光方法,检测人永生化肝细胞株HL-7702及肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3中SATB1的表达.结果 相对于HL-7702,SATB1 mRNA在其余5种肝癌细胞株中都有较高程度的表达,其中高侵袭性HCCLM3、MHCC97H表达高,MHCC97L次之,SMMC-7721、HepG2低(P＜0.001)；Western blotting分析HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3肝癌细胞株的蛋白相对表达量分别为0.271±0.002;0.351±0.023；0.621±0.026;0.878±0.026;1.236±0.006,高侵袭性HCCLM3相当于HepG2的4.6倍(P＜0.001)；免疫荧光显示SATB1在5种肝癌细胞株的胞浆和胞核内均有分布,高侵袭性细胞株HCCLM3、MHCC97H表现强阳性染色.结论 SATB1在不同侵袭潜能肝癌细胞株中的表达有差异,与肝癌转移密切相关.
作者：李光辉；杨定华；李湘竑；钟克波；刘萧；毕民平；刘延；廖晓明；林梁 刊期： 2012年第07期
目的 观察并探讨阻断p38通路激活对大鼠脑创伤后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化及脑水肿形成的影响及意义.方法 健康成年雄性SD大鼠130只,随机分为正常组10只,对照组40只:假手术处理；脑创伤组40只:制作改进式Feeney's脑创伤模型；p38抑制组40只:脑创伤前15 min股静脉注射p38抑制剂(SB203580,400 μg/kg).分别在脑创伤后2 h、2 d时断头取脑,采用RT-PCR法和Western blotting法检测脑组织P38磷酸化水平及MMP-9 mRNA及蛋白表达水平,Evans Blue法测定血脑屏障通透性变化；干湿比重法测定脑组织含水量.结果 (1)与对照组相比,脑创伤组磷酸化p38的水平在伤后2 h明显上升；MMP-9 mRNA和蛋白在脑创伤后2 h未见明显差异(P＞0.05),但2d时表达均显著增高(P＜0.01).与脑创伤组相比,p38抑制组伤后2 h时p38磷酸化水平明显降低(P＜0.01),MMP-9 mRNA和蛋白在创伤后2d时的高表达也均有明显下降(P＜0.05)；(2)与对照组比较,脑创伤组血脑屏障通透性在创伤后2h明显增加(P＜0.05),2d时出现继续升高(P＜0 01)；脑含水量存创伤后2 h无明显变化(P＞0.05),在2d时显著增加(P＜0.01).与脑创伤组相比,p38抑制组血脑屏障通透性及脑含水量在创伤后均有明显降低(P＜0.05).结论 阻断p38通路激活可下调大鼠脑创伤后MMP-9高表达,减轻血脑屏障破坏及创伤性脑水肿,提示p38信号通路可通过调节MMP-9的表达变化在创伤性脑水肿中发挥重要作用.
作者：唐兆华；廖正步；石全红；谢延风；何朝晖；詹彦 刊期： 2012年第07期
目的 利用TiO2的抗菌特性,开发一种能够应用于口腔的无机抗菌材料.方法 采用射频磁控溅射法在医用不锈钢表面制备TiO2xNx薄膜,用XRD、SEM、EDS等测试手段表征薄膜的结构、形貌、组成,并通过覆膜法利用口腔常见致病菌考察TiO2-xNx薄膜的抗菌性能.结果 纳米TiO22-xNx抗菌薄膜为锐钛矿相结构,氮元素质量比为0.13％,表面结构均匀致密,对变形链球菌、粘性放线菌及白色念珠菌的抗菌率分别为97.79％、49.42％和96.84％.结论 纳米TiO2-xNx抗菌薄膜对口腔常见致病菌具有较强的抗菌效果,可作为一种新型抗菌剂应用于口腔临床.
作者：李娜；曹宝成；王育华；刘斌 刊期： 2012年第07期
目的 探讨CASP8在鼻咽癌中的表达及临床意义.方法 利用基因芯片比较了8组鼻咽癌组织与混合的非癌鼻咽组织之间的差异表达基因.荧光定量PCR和免疫组化鉴定CASP8基因表达结果的可靠性,并分析CASP8在鼻咽癌中的表达与临床参数之间的相关性.结果 荧光定量PCR确证CASP8 mRNA在鼻咽癌组织中表达下调(P＜0.0001),与芯片结果相一致.免疫组化结果显示,与非癌鼻咽组织相比,CASP8蛋白在鼻咽癌组织中表达明显下调(P=0.02),且下凋的表达与淋巴结转移(P=0.002)及临床分期(P=0.026)呈负相关.结论 CASP8表达下调作为不利因素促进了鼻咽癌的发生发展.
作者：方唯意；张千兵；刘真；江庆萍 刊期： 2012年第07期
目的 回顾性分析210例行腹腔镜下扩大淋巴结清扫的根治性膀胱切除术中位数48个月并发症及控瘤效果,证实该技术的安全性和可行性.方法 收集并分析2003年1月～2010年3月210例因膀胱尿路上皮癌行腹腔镜下扩大淋巴结清扫的根治性膀胱切除术患者的并发症及肿瘤控制情况,术中及术后提示淋巴结阳性或T3a期的患者给予辅助化疗.结果 平均手术时间为105min,平均出血量为220ml,围手术前输血率为20.5％,术中平均清扫淋巴结17.6个,淋巴结阳性病例数为42例(20％).围手术期轻度及重度并发症分别为19.0％及5.3％,5年总生存率、肿瘤特异性生存率、未复发生存率及未转移生存率分别为73.8％,83.3％,81.8％及90.5％.结论 腹腔镜下扩大淋巴结清扫的根治性膀胱切除术治疗膀胱尿路上皮癌安全可行,具有满意的控瘤效果.
作者：许凯；刘春晓 刊期： 2012年第07期
目的 探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCRα、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析.结果 刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链 CDR3序列.结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定.将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础.
作者：罗微；温茜；周明乾；马骊 刊期： 2012年第07期
目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC) O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较.方法 针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR榆测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果.结果 成功建立了LAMP和PCR榆测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfi/ml,PCR检测限为102 cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高.对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性.结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段.
作者：姜容；龙北国；曾桂芬；王丹；范宏英；吴娴波 刊期： 2012年第07期
目的 在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)阳性细胞的作用.方法 采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TUNEL法分析其对KDR阳性细胞的影响.结果 工程化化双歧杆菌培养物的上清和菌体中均有重组产物,重组人GrB-VRB能有效抑制KDR阳性如人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC、小鼠结肠癌细胞株CT-26细胞增殖、细胞死亡,这种死亡的机制是细胞凋亡；但对KDR阴性细胞则无这些作用.结论 工程化双歧杆菌能分泌性表达重组GrB-VRB融合蛋白,其在VRB的靶向作用下,GrB可有效地诱导KDR阳性细胞凋亡.
作者：陈蕾；曾位森；郑航 刊期： 2012年第07期
目的 探讨C-IAP2 mRNA和蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系.方法 采用荧光定量PCR和免疫组化方法检测肝细胞癌组织及对应的非癌组织中C-IAP2 mRNA和蛋白的表达水平并分析肝癌组织中C-IAP2的表达和临床病理特征之间的关系.结果 肝细胞肝癌中C-IAP2 mRNA的表达是非癌组织的2.70倍(P＜0.001).C-IAP2蛋白在肝癌组织阳性表达率为70.8％,显著高于非癌组织中的阳性表达率27.8％(P=0.001).C-IAP2 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与术前有无癌栓、有无淋巴结转移、甲胎蛋白水平、肿瘤病理分化类型、TNM分期以及术后复发转移时间有关(P＜0.05),而与患者性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化以及包膜完整性无关(P＞0.05).结论 C-IAP2表达水平与原发性肝癌的转移、复发有关,可作为原发性肝细胞癌预后的新生物学指标.
作者：毕民平；杨定华；李湘竑；钟克波；刘延；李光辉；廖晓明；刘萧 刊期： 2012年第07期
目的 探讨巨细胞病毒(CMV)对儿童重型β-地中海贫血(地贫)儿童异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后180d外周血T细胞亚群的变化.方法 对我院儿科造血干细胞移植中心2010年1月～2011年1月儿童重型地贫Allo-HSCT 35例病例半年后的T细胞亚群进行分析,比较有CMV(13例)和无CMV感染组(22例)在造血干细胞移植后早期T细胞的变化.结果 半年内有CMV组CD8+比率高于无CMV感染组,但CD4+比率低.在CMV感染组伴随CD8+CD28+细胞比率降低,CD8+CD28细胞比率和CD8+比率升高,同时发现CD8+与CD8+CD28+细胞比率呈线性相关性.结论 重型β-地中海贫血儿童在异基因造血干细胞移植后,CMV感染后会导致CD8+CD28细胞堆积,是构成CD8_细胞升高的主因,且两者比率呈线性相关.
作者：王彦华；吴学东；冯晓勤；何岳林；裴夫瑜；李春富 刊期： 2012年第07期
目的 评估将支气管内超声(EBUS)两种简易的回声特征应用于判断肺周围型病灶良恶性的可行性.方法 分析102名接受EBUS检查的肺周围型病变患者的EBUS图像,了解这两种回声特征对周围型肺癌诊断的敏感性和特异性.结果 晕环征,实性低回声是提示周围型病灶为恶性的两种同声特征.实性低回声在诊断恶性病变时敏感性较高(89.46％),特异性也较高(83％),晕环征的敏感性为69.51％,特异性为65％.只要存在任何一种回声特征,诊断恶性的敏感性可达94.6％；两种回声特征同时存在时,诊断恶性的特异性可达93％.结论 对于常规支气管镜检查未能显示的周围型病灶,我们通过EBUS的这两种回声特征可较为快速、准确的诊断周围型肺癌.
作者：黄禹；陈正贤；任红岩；何碧芳；黎秀玉 刊期： 2012年第07期
目的 探索官颈癌患者亚毫米CT静脉扫描的佳显影时间,建立活人体官颈癌患者女性盆腔的三维可视化数字模型,探讨三维可视化技术在宫颈癌诊治中的应用价值.方法 30例不同分期的宫颈癌患者行动脉期及分别延时70、90、120 s的静脉期进行亚毫米CT扫描,由影像诊断科医师对各期图像进行判读,确定佳静脉显影时间并进行影像学诊断,应用女性盆腔CT薄层扫描数据,在腹部医学三维可视化系统进行图像分割及三维重建,然后将重建模型导入FreeForm Modeling System平台进行平滑、上色、透明化、旋转等操作,获得三维可视化模型.结果 确定自注射造影剂后90 s行静脉期扫描可获得佳显影效果图像.亚毫米CT对≤I B1期的官颈癌诊断率并不高(1/5),对≥I B2期的诊断率较高,本研究25例均诊断出,分期判断准确率达64％.以CT动脉期及90 s静脉期数据为基础成功重建出宫颈癌患者女性盆腔的三维图像,包括盆腔主要脏器、血管、官颈癌肿块,肿瘤供血血管等,并可从任意角度观察子宫与毗邻主要脏器空间立体位置关系.结论 恰当扫描条件的亚毫米CT扫描对中晚期宫颈癌的诊断及分期有重要的帮助.基于亚毫米CT数据重建的三维可视化女性宫颈癌盆腔数字模型,能够为官颈癌患者的临床诊治提供一定的参考依据,并可为进一步的仿真手术研究提供基础.
作者：朱洪磊；何援利；王显龙；李湘元；彭冬先；王雪峰；江永焰；李静 刊期： 2012年第07期
目的 探讨KCa3.1通道对增殖表型大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响.方法 组织贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞,采用光学显微镜、电镜和免疫细胞化学染色法观察初代和9代平滑肌细胞形态学特征.RT-PCR和免疫细胞化学染色法检测初代和9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA和蛋白表达.MTT和Transwell法观察KCa3.1通道对平滑肌细胞增殖和迁移的影响.结果 初代和9代平滑肌细胞分别表现出收缩表型和增殖表型特征,9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA、蛋白表达水平、增殖和迁移能力显著高于初代细胞(P＜0.01),KCa3.1通道阻断剂TRAM-34可显著抑制9代细胞的增殖和迁移(P＜0.01),对初代细胞无明显影响.结论 增殖表型血管平滑肌细胞KCa3.1通道表达增加可能促进了细胞的增殖和迁移.
作者：苏兴利；张鸿；于玮；霍健；郭玉芳；王爽；王湘 刊期： 2012年第07期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
