曾平；龙梅菁；周颖玲；陈勇驰；张璐；卓胜青；田相亭；杨辉剑；连环；靖林林
目的 探讨经口腔超声检测烟雾病患者颈内动脉颅外远段血流变化的应用价值.方法 14例经DSA证实为烟雾病患者,用经颈超声检测颈内动脉近段和颈总动脉、经口腔超声检测颈内动脉颅外远段,检测指标包括内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度.结果 14例均为单侧烟雾病患者.患侧颈内动脉颅外远段内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度均低于对侧,且差异有统计学意义(P＜0.05).患侧颈内动脉近段与远段相比,内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度均无显著差异.患侧颈总动脉内径与对侧相比差异无统计学意义,但收缩期峰值流速、舒张末期血流速度显著低于对侧,且有统计学意义(P＜0.05).结论 经口腔超声能够获得颈内动脉颅外远段血流信息,有助于烟雾病的准确诊断.
作者：王宝平；吴凤林；罗利红 刊期： 2012年第10期
目的 分析过表达疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)潜伏相关转录子LAT后vero细胞microRNA表达谱的表达变化.方法 通过化学合成的方法获得LAT基因的全长序列.构建HSV-2 LAT逆转录病毒表达载体pRetroQ-AcGFP1-C1,包装获得HSV-2 LAT基因过表达的逆转录病毒.利用microRNA芯片技术,分析感染逆转录病毒HSV-2 LAT后vero细胞microRNA表达谱的变化,得到因LAT基因过表达而产生变化的microRNA.结果 通过microRNA芯片分析,逆转录病毒HSV-2 LAT感染vero细胞后,可引起hsa-miR-23a*、kshv-miR-K12-3、hsa-miR-943、hsa-miR-634、hsa-miR-1270 5种microRNA2倍以上上调；使hsa-miR-181a-2* 、hsa-miR-450b-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-24、kshv-miR-K12-12* 5种microRNA2倍以上下调.结论 LAT基因过表达后可引起vero细胞microRNA表达谱的变化.
作者：王颖；樊建勇；杨慧兰；陈剑云 刊期： 2012年第10期
目的 探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制.方法 用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome；采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响；Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化；RT-PCR和Western blotting检测CyclinD1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达；Western blotting检测p-Akt、p-ERK1/2的变化.结果 成功使用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome.exosome可促进肾癌ACHN细胞增殖,抑制其凋亡；在此过程中,CyclinD1 mRNA和蛋白的表达均上调,而caspase-3 mRNA表达无明显变化,caspase-3蛋白表达下调；同时p-Akt和p-ERK 1/2的表达也上调.结论 exosome 可促进肾癌ACHN细胞生长和增殖,抑制细胞凋亡.筛除肾癌微环境中的exosome或抑制其功能,可能成为肾癌治疗的有效新方法.
作者：杨林；吴小候；罗春丽；何云锋；张尧；陈雄；张龙；陈力学 刊期： 2012年第10期
目的 探讨功能磁共振成像对Leigh综合征患者脑部病变进行序贯评价的价值.方法 对2例诊断为Leigh综合征的患者脑部病变进行基线及随访水平的扩散加权成像(DWI),脑灌注成像及氢质子磁共振波谱(1H-MRS)分析.结果 Leigh综合征患者脑部病变DWI为高信号,灌注主要表现为高灌注,MRS主要表现为乳酸双峰.1年后2例患者的脑部病变DWI仍为高信号,1例患者脑部病变仍为高灌注,MRS表现为乳酸峰消失.2年后1例患者的脑部病灶DWI仍为高信号.结论 功能磁共振成像可以敏感地凸显Leigh综合征患者脑部病变的特点,可以评价Leigh综合征患者脑部病变的序贯变化.
作者：陈志晔；李金锋；娄昕；马林 刊期： 2012年第10期
目的 Framingham计分是公认的估计心血管风险的方法,但是其预测的准确性一直有争论.冠脉CT诊断斑块有很高的准确性,本研究拟将冠脉CT斑块与Framingham危险因素进行对照研究,分析各危险因素预测冠脉斑块的准确性.方法 连续入选核医学科2008年6月～2011年4月行64排螺旋CT的门诊和住院病人共706例.冠脉CT病变严重程度分为正常、轻度、中度、重度、支架或搭桥术后5类,将冠心病危险因素与冠脉CT进行相关分析,包括方差分析,Pearson相关和ROC曲线分析.结果 正常冠脉CT占40.37％,异常冠脉CT占58.63％.高龄,高血压、高血脂症、糖尿病、临床诊断脑梗死、冠心病,心肌梗死患者冠脉CT斑块的比率明显高于正常冠脉CT组,差异显著,而且发生率随着病变程度加重而升高(P＜0.05).临床诊断为冠心病的患者,冠脉CT正常22.5％,而冠脉CT异常77.5,差异显著(P＜0.05).总胆同醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、尿素、肌酐与冠脉CT斑块明显相关,差异显著(P＜0.05).甘油三酯,尿素氮,尿蛋白,尿酸,空腹血糖,全血糖化血红蛋白,血红蛋白,血清肌钙蛋白T,左室舒张末内径,左室射血分数等危险因素与冠脉斑块不相关(P＞0.05).Pearson相关显示,危险因素与斑块相关.ROC曲线可见Framingham计分,肌酐,同型半胱氨酸和颈动脉内膜厚度预测冠脉斑块的准确性较高(P＜0.05).结论 冠心病危险因素与冠脉CT斑块明显相关,其中Framingham积分、肌酐、同型半胱氨酸和颈动脉内膜厚度相关为密切,可以作为冠心病的一般筛查.
作者：何斌；盖鲁粤；盖兢泾；乔怀宇；张朔阳；关志伟 刊期： 2012年第10期
目的 探讨不同剂量丙泊酚恒速静注50 min时对犬脑不同区域γ-氨基丁酸浆膜转运体1(GAT-1)及谷氨酸脱羧酶65(GAD65)mRNA的影响.方法 18只12～18月健康杂种犬,雌雄不限,体质量10～12 kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只.L组和H组分别以丙泊酚5.5 mg/kg和7.0 mg/kg静脉注射,续以55 mg/(kg.h)和70 mg/(kg.h)恒速静脉输注50 min,分别取颈内动、静脉血各2ml后,快速静脉注射10％ KC1注射液2mg/kg处死；采用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)测动、静脉血浆丙泊酚浓度.C组不给予任何干预措施,快速静脉注射10％ KC1注射液2 mg/kg处死.3组均解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶、额叶组织,采用实时荧光定量PCR技术测脑组织中GAT-1 mRNA和GAD65mRNA的表达水平.结果 丙泊酚静脉输注50 min时,L组和H组丙泊酚血浆浓度(动脉-动脉,静脉-静脉比较)差异显著(P＜0.01),而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义(P＞0.05).L组和H组下丘脑和海马GAT-1 mRNA的相对表达量均明显高于C组(P＜0.05,P＜0.01),两组之间差异无统计学意义(P＞0.05)；其他脑区GAT-1 mRNA的相对表达量3组均无显著差异.下丘脑和海马GAT-1 mRNA相对表达量的变化率,L组分别为(61.26±7.17)％和(79.34±39.95)％,差异无统计学意义(P＞0.05)；H组分别为(74.64±19.63)％和(97.12±32.31)％,差异无统计学意义(P＞0.05).背侧丘脑GAD65 mRNA的相对表达量,L组和H组均明显高于C组(P＜0.01)；其他脑区GAD65 mRNA的相对表达量3组均无显著差异.结论 丙泊酚恒速静注50 min,犬脑对丙泊酚的摄取处于平衡状态,此时,丙泊酚可明显上调下丘脑和海马GAT-1 mRNA以及背侧丘脑GAD65mRNA的表达,呈非剂量依赖性.
作者：杨晶晶；林春水；古妙宁；李洋；刘亚伟；范钦；陈莺 刊期： 2012年第10期
目的 研究C-jun和雄激素受体(AR)在多西他赛处理的前列腺癌LNCaP细胞及其非雄激素依赖亚型LNCaP-bic细胞中的相互作用.方法 采用多西紫杉醇处理雄激素依赖型LNCaP的列腺癌细胞及其亚型雄激素非依赖型LNCaP-bic细胞,采用荧光素酶分析检测AR及AP-1基因的表达,利用Western blotting,免疫沉淀方法分析C-jun以及AR的蛋白表达和相互作用.结果 经多西他赛处理后,LNCaP-bic以及其父代LNCaP细胞AR和C-jun在基因表达水平均得到增强.Western blotting提示LNCaP-bic细胞中C-jun的磷酸化水平高于LNCaP细胞,同时其PSA蛋白表达也更强.免疫沉淀结果提示多西他赛使LNCaP-bic细胞株中的AR和C-jun有更高的相关作用.结论 多西他赛可以激活AR非配体依赖的转录功能,AR和C-jun之间的相互作用可能影响多西他赛对前列腺癌的化疗结果.
作者：陈玢屾；徐亚文；徐啊白；刘春晓；郑少波；李虎林；许凯 刊期： 2012年第10期
目的 了解大学生自杀态度的现状,应用结构方程模型分析生命意义感、生活目的在大学生自杀态度形成中的作用.方法 采用自杀态度问卷、生活目的量表、生命意义感问卷对1050名大学生进行测评,并对变量间的关系进行结构方程模型分析.结果 大学生对自杀总体持否定和排斥态度.男生比女生更能客观理性地看待自杀行为,农村生源大学生比城镇生源学生对安乐死更持排斥态度.大学生自杀态度四个维度与生活目的、生命意义感总分及各因子分存在不同程度的显著相关.结构模型拟合指数良好(x2/df=1.924,GFI=0.936,AGFI=0.915,NFI=0.937,CFI=0.940,RMSEA=0.045).生命意义感和生活目的对大学生自杀态度具有直接预测作用,多因素影响假设得到结构方程模型的有力支持.结论 生活目的和生命意义感对大学生自杀态度产生重要影响,应开展有针对性的生命教育对大学生自杀态度进行引导.
作者：谢杏利；邹兵；黄中岩 刊期： 2012年第10期
目的 研究星形胶质细胞中缝隙连接蛋白connexin 43 (Cx43)的表达及由其形成的缝隙连接通讯功能的药物调控.方法 实验分为正常对照组、全反式维甲酸组(10 μmol/L全反式维甲酸作用24 h)及油酸酰胺组(25 μmol/L油酸酰胺作用2 h).western blotting法检测各组星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达；细胞免疫荧光法检测各组星形胶质细胞Cx43胞膜蛋白的表达；荧光示踪法检测各组星形胶质细胞的缝隙连接通讯功能.结果 与正常对照组相比,全反式维甲酸能增强星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达(P＜0.01),油酸酰胺则能减弱其表达(P＜0.01)；全反式维甲酸能增强Cx43胞膜蛋白表达,油酸酰胺能减弱其表达；全反式维甲酸能增强星形胶质细胞缝隙连接通讯功能(P＜0.01),而油酸酰胺则可显著降低该功能(P＜0.01).结论 药物全反式维甲酸及油酸酰胺可以对星形胶质细胞缝隙连接通讯功能进行调控,其机制可能与其影响星形胶质细胞Cx43总蛋白和胞膜蛋白的表达有关.
作者：董淑英；童旭辉；蒋国君；谷昱琛；焦浩；李俊 刊期： 2012年第10期
本文对2例表型女性、染色体核型为45,X/46,XY的Turner综合征患者进行报道,并从发生率、发生机理、临床表现及治疗等方面进行相关文献的复习,以引起临床对此类患儿更多了解和关注.
作者：毛晓健；刘丽 刊期： 2012年第10期
目的 探讨18F-FDG PET/CT对喉癌的诊断价值.方法 47例喉癌或喉癌疑似患者治疗前一周内接受18F-FDG PET/CT检查,比较18F-FDG PET/CT及同机平扫CT对喉癌诊断、分期的临床价值.结果 47例患者中,43例经病理学检查确诊为喉癌.PET/CT与同机平扫CT诊断喉癌原发灶的灵敏度分别为95.3％、74.4％,特异性分别为75％、50％,准确性分别为93.6％ 、72.3％、其中灵敏度及准确性的差异有统计学意义(x2=7.340,P=0.007；x2=7.532,P=0.006).43例喉癌患者中,以患者为单位计算,26例伴区域淋巴结转移,PET/CT与同机平扫CT的灵敏度分别为92.3％、61.5％,两者的差异有统计学意义(x2=6.933,P=0.008);以淋巴结分区为单位计算,19例手术患者共切除46组区域淋巴结,病理学检查证实为淋巴结转移25组,PET/CT与同机平扫CT的灵敏度分别为92％ 、64％,两者的差异有统计学意义(x2=5.71,P=0.017).PET/CT发现了1例双重癌,改变了治疗方案.依据18F-FDG PET/CT显像结果,34.9％患者改变了临床分期,其中14例提高了临床分期、1例降低了临床分期.结论 18F-FDG PET/CT不仅可以对绝大多数喉癌做出明确诊断,而且可以清楚显示肿瘤的侵犯范围、检岀肿瘤转移灶,对喉癌的诊断及临床分期均具有重要的应用价值.
作者：吕茵；郑航；王全师；吴湖炳；李洪生；周文兰；田颖 刊期： 2012年第10期
目的 鉴定重组葎草花粉主要变应原pTSX2的免疫特性,并初步评价其安全性.方法 应用Western blotting鉴定pTSX2的免疫特性；ELISA法检测经pTSX2免疫的小鼠血清sIgE、sIgG水平；pTSX2免疫治疗小鼠哮喘模型后:ELISA法测定小鼠血清sIgE、sIgG水平；计数小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞(Eos)比值；ELISA法检测小鼠BALF中及脾组织匀浆中细胞因子(IL-4、IFN-γ)水平；评价小鼠肺组织炎症程度.结果 Western blotting结果显示重组表达的pTSX2可与70％的葎草花粉特异性过敏的变应性哮喘患者血清发生抗原抗体反应；pTSX2免疫正常小鼠后主要诱导产生血清sIgG;pTSX2免疫治疗小鼠哮喘模型后:血清中sIgE、sIgG的抗体水平分别为(146.74±28.57)和(548.76±11.98)μg/ml,与哮喘模型组的(603.06±10.00)和(260.32±6.40)μg/ml相比差异有统计学意义(P＜0.05);BALF中细胞总数及Eos百分比与哮喘模型组相比明显下降(P＜0.05)；BALF中IL-4、IFN-γ水平分别为(56.74±28.57)和(49.7±11.98)pg/ml,与哮喘模型组的(89.03± 10.00)和(23.10±6.40)pg/ml相比差异有统计学意义(P＜0.05)；脾组织匀浆中IL-4、IFN-γ水平分别为(126.24±37.00)和(1547.72±490.43)pg/ml,与哮喘模型组的(457.95±70.06)和(720.34±93.96)pg/ml相比差异有统计学意义(P＜0.05)；肺组织炎症程度减轻.结论 重组葎草花粉主要变应原pTSX2具有较好的免疫治疗作用,且安全性较高,其机制可能是抑制变应原sIgE抗体、诱导变应原sIgG抗体产生,降低气道炎症细胞浸润,调节Th1/Ih2平衡.
作者：吴媛媛；孙秀珍；李满祥；刘昀；王贵佐；卢家美 刊期： 2012年第10期
目的 结合听觉生理刺激产生的机制,把经典的神经元漏积分放电模型运用于人工耳蜗信息处理编码,以期获得更好的听觉效果.方法 用数字信号处理器(DSP)进行算法仿真,并把结果输入到Matlab中进行分析对比.结果 在与CIS编码算法对比中,膜电位积分放电(MPIF)编码算法发放脉冲更自然,而且是伪随机的,更符合生理的结构特点.结论 MPIF方案能够有效的解决听觉信息发放序列的动态结构在听觉中枢的作用问题,使得刺激脉冲和时间编码有机的结合起来,有效的保证刺激脉冲时间的相干性和相关性.
作者：杨一威；徐月晋；缪吉昌；周凌宏；肖中举 刊期： 2012年第10期
目的 观察不同强度直线偏振光近红外线(超激光)照射诱导软骨细胞增殖效果,探讨超激光照射对兔软骨细胞增殖的影响.方法 采用输出功率为0％(0 mW)、20％(360 mW)、40％(720 mW)、60％( 1080 mW)、80％( 1440 mW)和100％( 1800 mW)的超激光对原代培养的兔关节软骨细胞进行5 min/d连续5d的照射,然后采用CCK-8法检测细胞活力.结果 超激光强度60％组D450值为1.88±0.11,80％组D450值为1.99±0.05,分别与对照组D450值0.95±0.38比较均有显著性差异(P＜0.05)；与对照组D450值比较,超激光强度20％、40％及100％组D450值虽有增高但无显著性差异(P＞0.05).与对照组相比,超激光照射能诱导软骨细胞活力增加,20％ ～80％四组细胞活力增加的比率分别为(48.75±15.4)％、(67.02±29.61)％、(97.93±11.57)％和(108.52±5.81)％,但随着照射强度增加至100％时,细胞活力增加的比率下降,比率为(62.84±31.12)％.结论 直线偏振光近红外线照射对软骨细胞有促增殖作用,直线偏振光近红外线照射对细胞的增殖作用具有强度依赖性,照射强度为80％(1440mW)软骨细胞活力增加效果好.
作者：李海洋；王小平；贺牡丹；李雅兰 刊期： 2012年第10期
目的 建立基于CTA影像数据的个体化颅内动脉瘤的流固耦合力学模型.方法 用MIMICS软件读取1例患者颅内动脉瘤影像CTA影像DICOM数据,进行三维实体重建.应用ANSYS+CFX软件进行流固耦合模型的数值仿真.分析了模型的敏感性,并与刚性模型进行了比较.结果 建立了个体化颅内动脉瘤血流动力学流固耦合模型,直观地模拟动脉瘤壁剪切力以及瘤壁变形的变化过程,可以输岀压力、剪切力、范-米斯氏应力和壁变形程度等结果.小杨氏模量可以导致壁较大的变形,壁厚则变形程度小.与刚性模型比较,相对于壁剪切力和血流速度,压力变化不大.结论 流固耦合模型比刚性模型更接近真实情况,模拟的结果有利于进行动脉瘤发生、生长及破裂的研究.
作者：王芙昱；许百男；孙正辉；刘磊；武琛；张小军 刊期： 2012年第10期
目的 了解综合性ICU医院感染病原菌分布和细菌对药物敏感性,为临床合理选用抗菌药物提供科学指导.方法 采用回顾性和前瞻性调查相结合的方法,搜集我院2009年1月～2011年12月综合ICU病房229例医院感染病人资料,并对其分离出的337株病原菌进行统计分析.结果 综合ICU病人获得性感染病原菌总体仍以革兰阴性杆菌(68.25％)为主.2009～2011年多重耐药鲍曼不动杆菌分离率分别为:39.13％、18.18％、15％,分离率明显下降(P＜0.05).多重耐药铜绿假单胞菌、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林菌株3年间分离率变化没有统计学意义(P＞0.05).综合ICU病人检出的革兰氏阴性杆菌对各种抗菌药物的敏感率总体有上升趋势.革兰氏阴性杆菌对碳青霉稀类抗菌素、替加环素、阿米卡星及哌拉西林/他唑巴坦的敏感性保持高.革兰氏阳性球菌总体对万古霉素、喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺、替加环素保持较好的敏感性,敏感率达100％.结论 临床医务人员应严格掌握抗生素使用原则,合理用药,并通过有效的监测及预防措施降低细菌的耐药率以及医院感染发生率.
作者：秦媛怡；陈雪梅；黄东健；魏立平 刊期： 2012年第10期
目的 探讨血管回声跟踪技术评价弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者股动脉内皮功能及弹性的诊断价值.方法 选择弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者34例及正常对照组30例,应用血管回声跟踪技术分别检测股总动脉内-中膜厚度(IMT)、僵硬度(β),压力应变弹性系数(Ep),顺应性(AC),脉搏波传导速度(PWVβ),增大指数(AI).结果 弥漫性毒性甲状腺胂伴甲亢患者股动脉β、Ep、PWVβ显著高于正常对照组(P＜0.05),AC显著低于对照组(P＜0.05),两组AI比较无显著性差异(P＞0.05)；股总动脉弹性参数β、Ep与FT3、FT4、TT3、TT4呈正相关性；PWVβ与FT3、FT4呈正相关性.结论 血管回声跟踪技术能够早期发现弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者外周动脉内皮功能改变,在评价血管弹性功能障碍方面能够提供较为准确的量化诊断依据,但检测中仍需注意影响其测值准确性的操作因素.
作者：魏炜；汪靖园；赵巧玲；杨锦茹 刊期： 2012年第10期
目的 从肺脾肾不同组织水通道蛋白变化研究中医“水液代谢理论”的实验基础.方法 通过2％腺嘌呤混悬液灌胃4周制备肾阳虚大鼠模型,并予肉苁蓉煎液进行干预6周,检测尿17羟皮质醇值含量、尿肌酐和尿渗透压,检测水通道蛋白1(AQP1)基因在肺、脾、肾的表达量的变化,及AQP1蛋白在各组织的表达情况.结果 腺嘌呤模型大鼠尿17羟皮质醇值含量较正常组降低,符合肾阳虚,同时尿肌酐和尿渗透压降低.AQP1基因在腺嘌呤模型大鼠脾、肾组织的表达下调,肉苁蓉干预组AQP1基因在肺、肾组织的表达较模型组显著上调.AQP1蛋白在腺嘌呤模型组肺脾肾各组织中表达均增加,经肉苁蓉干预的大鼠肺肾组织中AQP1蛋白表达减少.结论 肺、脾、肾均参与水液调节,AQP1是其分子基础之一,补益肾阳药物肉苁蓉有上调AQP1基因的作用,AQP1蛋白的表达还受到其他因子的调控.
作者：张昕贤；吴锋；林日阳；张新志；刘楠楠；李颉；何立群 刊期： 2012年第10期
目的 探讨心肌连接蛋白43形成的半通道是否参与模拟缺血/再灌注心肌细胞容量的调节.方法 C57BL/6小鼠心脏分离的心肌细胞分为对照组、模拟缺血/再灌注组和模拟缺血/再灌注组+辛醇(半通道阻滞剂),于再灌注60 min时采用Calcein荧光染色和激光共聚焦显微镜分层扫描进行心肌细胞容量的分析；并用台盼蓝染色进行心肌细胞存活率的计算.结果 (1)应用荧光染色和激光共聚焦显微镜行细胞容量测定具有稳定性和可重复性；(2)和对照组相比,模拟缺血/再灌注诱导心肌细胞水肿明显[(126±6)％vs 100％,P＜0.05].半通道阻滞剂辛醇减轻缺血/再灌注导致的细胞水肿明显减轻(113±6)％,P＜0.05；(3)与对照组相比,缺血/再灌注组心肌细胞存活率明显降低[(19±2)％vs (45±3)％,P＜0.01],而半通道阻滞剂辛醇明显降低了缺血/再灌注导致的心肌细胞的死亡(31±2)％,P＜0.01.结论 在离体的小鼠心肌细胞中,半通道阻滞剂辛醇减轻了缺血/再灌注诱导的心肌细胞的水肿,从而减轻缺血再灌注导致的心肌细胞的死亡.
作者：罗育坤；方军；范林；林朝贵；陈昭阳；陈良龙 刊期： 2012年第10期
目的 制备链亲和素(SA)标记的人粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白SA-hGM-CSF和hGM-CSF-SA,并鉴定其生物学活性.方法 构建原核表达质粒PET24a-6His-SA-L-hGM-CSF和PET24a-hGM-CSF-L-SA-6His,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用镍金属螯合(Ni-NTA)层析柱进行纯化,并对其进行复性.复性后蛋白用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析进一步纯化.MTT法检测融合蛋白对人红白血病细胞(TF-1)的增殖活性.流式细胞仪分析融合蛋白对生物素化的MB49细胞锚定修饰效率.结果 SA-hGM-CSF和hGM-CSF-SA两种融合蛋白在大肠杆菌中实现了高效表达,目标蛋白占菌体蛋白的20％以上,纯化后纯度达到96％以上.两种融合蛋白均具有双功能活性,即同时具有hGM-CSF的促进人红白血病细胞增殖的活性和SA介导的高效结合至表面生物素化的MB49细胞的功能(锚定修饰率大于99％).结论 研制的SA/hGM-CSF融合蛋白具有双重活性,可为研制hGM-CSF表面修饰的新型肿瘤细胞疫苗提供基础.
作者：白莉；胡志明；王菲；许晓玲；夏昶；金丽琴；李金龙；高基民 刊期： 2012年第10期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
