忽新刚;阮祥才;于霖;丁宁;余守章;廖禹林
目的 探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)在增生肥厚黄韧带退变过程中的表达和作用.方法 增生肥厚退变黄韧带标本来自11例退变性腰椎管狭窄症患者(LSS),平均年龄57.8岁.10例腰椎间盘突出症患者(LDH)的黄韧带标本设为正常对照组,平均年龄53.5岁.术前采用MRI的Tl轴位加权像,经关节突平面精确测量两组黄韧带厚度;免疫组织化学染色法观察PDGF-β和PDGF-BB在黄韧带组织中的定位表达;实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测两组黄韧带中PDGF-BB mRNA的表达;免疫印迹法检(Western Blot)测两组黄韧带中PDGF-BB的蛋白表达.结果 退变增生肥厚的黄韧带厚度(5.30±1.12)mm明显厚于对照组(2.80±1.53)mm(P<0.001).两组患者年龄无显著性差异(P>0.05).PDGF-β和PDGF-BB主要在增生肥厚黄韧带内呈阳性表达.退变增生肥厚黄韧带的PDGF-BB mRNA表达显著高于对照组(P=0.013).退变增乍肥厚黄韧带的PDGF-BB蛋门表达显著高于对照组(P=0.023).结论 PDGF-BB在增生肥厚黄韧带内的过度表达,表明它在腰椎黄韧带增生退变导致纤维化的过程中起重要作用.
作者:张宇;许学猛;吴少鹏;夏雄智;李参天;邓崇礼;陈建庭 刊期: 2011年第07期
目的 探讨核磁共振(MR)动态增强时间信号曲线(TIC)定量参数评价肝纤维化程度的价值.方法 患者及健康志愿者共36人行肝脏MR常规及动态增强扫描,依据肝纤维化程度分为正常组(n=9)、轻度纤维化(n=5)、中重度纤维化(n=7)及肝硬化(n=15)共4组.获取门静脉、肝、睥的TIC,评价峰高、TTP、信号上升大斜率(MSI)和信号下降大斜率(MSD)等TIC量化参数与肝纤维化程度的相关性,运用ROC曲线评价TIC斜率指标诊断肝纤维化程度的效力.结果 各ROI的TIC曲线的峰高、MSI、肝脾的MSD均与纤维化程度呈负相关关系(P<0.05,r为-0.446~0.800),TTP与之呈较为密切的正相关关系(P<0.05,r>0.5).ROC曲线分析显示:诊断轻度肝纤维时,各斜率指标曲线下面积(AUC)依次为0.747~0.783,其中脾MSD曲线下面积大;诊断中度以上纤维化(S≥3)时,AUC为0.728~4).877,由小到大对应的指标依次为动脉期肝MSI、门静脉MSI、门静脉期肝MSI、肝MSD、动脉期脾MSI、脾MSD;诊断肝硬化时,AUC为0.742~0.821,由小到大对应的指标依次为门静脉期肝MSI、肝MSD、动脉期肝MSI、门静脉MSl、动脉期脾MSI、脾MSD.结论 MR动态增强TIC能反映肝纤维化进程的血流动力学变化,是一种无创评价肝纤维化程度的功能影像学方法.
作者:李新瑜;熊伟;韩路军;张雪林;邱士军;李绍林 刊期: 2011年第07期
目的 探索用风湿性心脏病患者噬菌体表达文库构建和免疫筛选方法来研究风湿性心脏病的自身抗原候选分子.方法 提取风湿性瓣膜性心脏病患者心肌组织总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成长链cDNA,用噬菌体载体构建表达文库,用风湿热患者血清免疫筛选该库,对筛选获得的自身抗原基因进行鉴定、生物信息学分析、体外表达、Western blotting鉴定和免疫反应结合性分析.结果 成功构建了风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106pfu/ml,重组率为99%,81%外源片段大于1 kb.通过免疫筛选方法获得了自身抗原RHDAG1,该自身抗原与人类角蛋白18同源,能与活动性风湿热患者血清和风湿性心脏病患者血清结合,而与体检健康人血清无结合.结论 构建噬菌体展示文库方法可以有效地用于筛选和获得风湿性心脏病患者自身抗原;本研究提示自身抗原RHDAG1可成为风湿热和威风心病的候选分子标志物.
作者:孟锦绣;李运雄;朱平;李玲;卢聪;郑少忆;李广华;余细勇 刊期: 2011年第07期
目的 探讨一种有效防治剖官产低血压且对母婴有利的方法.方法 选择单胎足月择期行腰麻下剖宫产的初产妇40例,随机分为两组,分别给予静脉预注麻黄素和术前预充万汶防治腰麻后低血压.记录术中心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、1 min及5 min的Apgar评分.抽取脐动脉血进行血气分析.同时,取胎盘组织进行常规免疫组织化学染色,通过抗CD34标记血管内皮细胞显示血管的方法,进行胎盘绒毛间质内微血管体视学研究.结果 麻黄素组心率,低血压发生率和脐动脉血乳酸值明显高于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05),麻黄素组脐动脉血PH值明显低于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05).两组微血管长度密度差异无统计学意义(P>0.05),麻黄素组微血管体积密度明显小于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 剖官产腰麻前应用万汶预扩容能增加母体有效循环血容量,维持母体循环稳定.通过体视学分析,扩容有利于增加子宫胎盘血量,从而改善胎儿血供和氧供.
作者:帅兵;彭雪梅;李瑞满;李雅兰;胡东华 刊期: 2011年第07期
目的 研究ITGA9基因rs189897和rs2212020位点及其单体型与脑梗死的关系.方法 在脑梗死和正常对照样本中,利用PcR-测序方法对rs189897和rs2212020位点进行基因分型,分型结果经SHEsis软件进行单个位点以及两个位点构建的单体型与疾病关联性进行分析.结果 rs189897和rs2212020位点等位基因频率、等位基因型频率在脑梗死患者和正常对照人群巾的分布存在统计学差异(P<0.05),同时还发现其A-C单体型为脑梗死发病的保护因子,拥有该单体型的个体发生脑梗死的机率为不拥有该单体型个体的0.130倍.结论 ITGA9基因rs189897、rs2212020位点与脑梗死发病密切相关,其A-C单体型分子标志是脑梗死发生的保护因子.
作者:李湘民;李静;曾凤;易红 刊期: 2011年第07期
目的 从筋膜学角度观察同种异体移植脂肪源干细胞(ADSCs)对耐力训练大鼠体内某些血清生化指标活性及运动能力的影响.方法 40只Wistar雄性大鼠随机分成安静对照组(空白对照组)、游泳训练照组(模型组)、安静移植细胞组(实验对照组)和游泳移植细胞组(实验组).模型组和实验组进行力竭游泳训练.力竭游泳训练1周后,实验组与实验对照纽经尾静脉输入ADSCs.游泳训练结束后,记录各组大鼠游泳力竭的时间以及检测血清尿素(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、血乳酸(BLa)和血红蛋白(Hb)含量.结果 模犁组与空白对照组比较,Hb水平显著降低,血清BUN、LDH、BLa水平均显著升高(P<0.01),力竭时间显著延长(P<0.01);与模型组比较,实验组Hb显著提高(P<0.01),而BUN、LDH、BLa水平均明显降低(P<0.01),力竭时间有较大提高(P<0.01).结论 移植ADSCs可有效延缓了大鼠运动性疲劳的产生,提高了大鼠的运动能力.
作者:杨会营;陶晖;余美春;杨春;曲戎梅;曾文钦;段富华;余磊;戴景兴;原林 刊期: 2011年第07期
目的 对屋尘螨主要变应原(Der P 1)蛋白分子中与过敏病人血清特异性IgE相结合的表位序列的鉴定.进而获得基于串联表位的小分子低毒过敏原以作为新的免疫治疗剂.方法 采用全蛋白序列重叠扫描法对DerP 1蛋白进行全表位筛选,即合成了覆盖DerP 1全蛋白222个氨基酸的31段各含15个氨基酸的多肽,且相邻肽段间有8个氨基酸的重叠.并将这些肽段按点状同相多肽合成法依顺序合成于纤维膜上.再将该膜与由数份过敏血清组成的血清池孵育,经抗人IgE-HRP二抗结合及X光片显影后对阳性点进行灰度比对及分析.结果 经对X光片阳性点的比对及分析,我们确定出了DerP 1过敏原蛋白中的3个强阳性表位序列.它们是位于第85~99位的氨基酸序列(表位1,Epl),第106~120位的氨基酸序列(表位2,Ep2)及第190~204位的氨基酸序列(表位3,Ep3).结论 我们获得了Der P 1中3个15肽的线性IgE结合表位(B细胞表位)序列.证实了Der P 1分子中存在IgE结合的线性表位.为进一步构建T/B细胞串联表位的小分子低毒过敏原提供了物质基础.
作者:钟志美;郑传东;王方 刊期: 2011年第07期
目的 观察槲皮素对成年大鼠局灶性脑缺血后侧脑室室管膜下区(SVZ)细胞增殖的影响.方法 线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉阻塞模型,术后6 h腹腔注射槲皮素(50mg/kg,1次/3 d),术后4 h腹腔注射BrdU(50mg/kg,1次/d),分别于缺m第7、14、21天采用免疫荧光染色观察侧脑室SVZ BrdU阳性细胞数.结果 脑缺血第7天,缺血侧SVZ BrdU阳性细胞较假手术组明显增多,第14天达峰值,第21大减少(P<0.01).槲皮素组第7天时,缺血侧SVZ BrdU阳性细胞亦明显增多,并随着缺血时间延长明显增加;与缺血组比较,槲皮素组7、14和21 d缺血侧SVZ BrdU阳性细胞数均显著增加(P<0.01),至21 d仍保持高水平.结论 槲皮素可维持成年大鼠局灶性脑缺血后侧脑室SVZ的细胞增殖在较高水平.
作者:张兰兰;曹琼;胡子有;颜晓慧;吴炳义 刊期: 2011年第07期
目的 总结分析接受冠脉介入治疗的冠心病患者发生造影剂肾病(contrast induced nephropathy,CIN)的危险因素、临床预后及防治策略.方法 回顾总结1232例冠状动脉介入治疗中91例并发CIN患者的危险因素、心血管事件及防治策略.结果 术前伴随的慢性肾功能不全、糖尿病和大剂量使用造影剂与CIN的发生密切相关.CIN患者住院期间心源性死亡率,以及术后1年的心源性死亡率、心肌梗死发生率、心血管事件发生率均较非CIN组患者的明显升高.结论 慢性肾功能不全、糖尿病和造影剂剂是3个独立的CIN危险因素,而且GIN可以影响病人的预后.目前加强冠脉介入治疗嗣手术期的综合管理,特别是水化疗法,是目前防治CIN的重要策略.
作者:郑华;屠燕;马立勤 刊期: 2011年第07期
目的 寻找妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病的分子标记物,为筛查及防治该类疾病提供分子生物学基础.方法 收集妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病患者的静脉血清标本各4份,去除高丰度的免疫球蛋白和白蛋白.应用十二烷基磺酸钠聚内烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术将可溶性血清总蛋白分离.切取在不同样品中显示明显差异的蛋白条带,酶解后使用质谱技术对所得的差异蛋白进行鉴别.运用生物信息学分析差异蛋白的生物学功能.结果 将上述去除高丰度蛋白的标本进行3次重复的SDS-PAGE,确定了显示显著差异的蛋白条带.质谱分析结果表明这些差异性蛋白分别为:结合珠篮白、SMG8蛋白和凋亡诱导因子-1.结论 为建立妊娠期代谢性疾病的蛋白质数据库提供了基础性数据.鉴定了与该疾病显著相关的部分蛋白,为进一步预防该疾病、改善妊娠结局以及阐明该疾病的分子机制提供了可参考的实验依据.
作者:王硕石;胡水旺;钟梅 刊期: 2011年第07期
目的 探讨生长抑素类似物奥曲肽对人胃癌生长的抑制作用.方法 50例胃癌患者随机分为对照组25例,术前不用药物;奥曲肽组25例,术前奥曲肽100μg皮下注射,1次/d,共7d.术中切除标本送组织学研究.免疫组化法检测胃癌组织p53和Ras蛋白表达情况.结果 与对照组比较,奥曲肽组胃癌组织坏死差异有统计学意义(P<0.05),纤维组织增生明显(P<0.05),p53和Ras蛋白表达有统计学意义(P<0.05).结论 奥曲肽通过抑制人体内胃癌p53和Ras蛋白的表达,从而发挥抑制胃癌细胞生长的作用.
作者:田蕾;李舒 刊期: 2011年第07期
目的 研究大胡蜂窝乙醇抽提物(WCE)对60%酸性乙醇诱导的大鼠胃溃疡的保护性及其作用机制.方法 用WCE按照0、25、100和150mg/kg的剂量对Wistar大鼠连续灌胃8 d,然后用60%的酸性乙醇诱导胃溃疡,比较不同处理组大鼠胃粘膜的病变程度、髓过氧物酶活性和总抗氧化能力,同时分析WCE体外抗二苯基三硝基肼自由基的能力.结果 与0mg/ks WCE灌胄组相比,25、100和150 mg/kg WCE灌胃组的胃溃疡程度下降了44.2%~87.1%;胃粘膜髓过氧物酶活性下降了16.4%~56.6%,胃粘膜的总抗氧化能力分别增加0.5、1.47和1.83倍.此外,WCE体外自由基清除能力显著高于二丁基羟基甲苯.结论 通过降低胃粘膜自由基的破坏性和中性粒细胞的渗漏性,WCE能显著抑制60%酸性乙醇诱导的大鼠胃溃疡和溃疡形成过程中的氧化反应.
作者:徐学清;余乐;刘叔文 刊期: 2011年第07期
目的 研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白(3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin,HP-OVA)体外对抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的活性.方法 采用化学修饰的方法将3-羟基.邻苯二甲酸酐(HP)修饰卵清蛋白(OVA),合成酸酐修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞(vero 细胞)靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用.结果 酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml.结论 酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂.
作者:何丽丽;段江曼;裘佳寅;于飞;刘叔文;李琳 刊期: 2011年第07期
目的 评价多西紫杉醇、卡培他滨和顺铂(TXP)联合化疗方案对转移性鼻咽癌的疗效及其毒性.方法 我们对22名转移性鼻咽癌进行了回顾性研究.所有患者接受21 d为一周期的方案:第1天静脉滴注多西紫杉醇60 mg/m2、第1~14天口服卡培他滨1 250 mg/m2,第1~3天静脉滴注顺铂20 mg/m2.结果 在这些患者中,14(63%)例获得部分缓解,2(9%)例获得完全缓解,5(23%)病情稳定.该组患者中总有效率为72%,1年生存率为68%,无进展生存期和总生存期分别为8个月和14个月.主要毒付作用为骨髓抑制,7(32%)例患者经历3/4级粒细胞缺乏症,5(23%)例患者出现3/4级贫血;其他毒付反应均可耐受或可逆.结论 TXP方案是一个安全和有效的转移性鼻咽癌治疗方案,本研究结果与近期文献结果有可比性.
作者:陈斯泽;陈雪梅;丁颖;王希成;张帆;莫凯岚 刊期: 2011年第07期
目的 探讨辛伐他汀对肢体缺血再灌注(I/R)肺损伤大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响及其机制.方法 成年雄性SD大鼠48只,体质量250~300g,随机分为6组(n=8):假手术组(C组)、肢体缺血再灌注组(IR组)分别给予等容量的(1 ml)的蒸馏水、辛伐他汀1、5、10 mg/(kg·d)组(S1组、S5组、S10组)和辛伐他汀对照组(S组)分别于每日清晨将1、5、10、10 mg/(kg·d淬伐他汀溶于1 ml蒸馏水灌胃1次,连续3 d,IR组、S1组、S5组和S10组于后1次给药后2 h行肢体缺血再灌注.再灌注3 h末行血气分析,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿/干质量比(W/D)、多形核中性粒细胞(PMN)数目、MPO活性、NF-κB p65mRNA及ICAM-1蛋白的表达.结果 与C组比较,IR组肺组织病理损伤较重,PaO2降低,W/D、PMN计数和MPO活性升高(P<0.01);与IR组相比,S1组、S5组和S10组减轻了肺组织病理损伤,PaO2升高,W/D、PMN计数和MPO活性降低,NF-κB p65mRNA及ICAM-1蛋白表达下调(P<0.01).结论 辛伐他汀可减轻肢体I/R大鼠的肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB激活,从而减少ICAM-1介导的中性粒细胞浸润有关.
作者:孙晓峰;王俊科;杨军;赵宏 刊期: 2011年第07期
目的 观察融合蛋白CAC(HBcAg与β-淀粉样肽基因重组的原核表达产物)免疫对大鼠海马内注射聚集态β-淀粉样肽(Aβ)的作用.方法 用融合蛋白CAC免疫SD大鼠,通过ELISA方法检测其血清中的Aβ抗体的滴度.当滴度大于1:3000时,给大鼠海马CAl区注射聚集态Aβ1-40.2周后进行行为学测试,病理学检测.结果 融合蛋白免疫5次后,大鼠血清中Aβ体的滴度达到了1:3000.未经CAC免疫的大鼠,在海马内注射AB后,学习记忆能力显著减低,注射区可见细胞损伤和刚果红染色的淀粉样沉积,伴有大量的胶质细胞浸润.CAC免疫大鼠的学习记忆能力有明显改善,淀粉样沉积面积减少或几乎消失.结论 融合蛋白CAC免疫可抑制海马内注射Aβ的毒性作用,促进其降解和排出.
作者:冯改丰;胡海涛;靳辉;王唯析;钱亦华 刊期: 2011年第07期
目的 建立同时检测表达多个结直肠癌转移相关基因的PCR芯片,用于诊断结直肠癌转移和预测转移.方法 通过严格设计基因引物,探索各基因同时达到特异性扩增的PCR反廊条件;应用基因芯片筛选获得的29个结直肠癌转移相关基因,结合3个看家基因,建立同时检测32个基因的PCR芯片;应用该芯片检测不同转移潜能的结直肠癌细胞和临床直肠癌组织、癌旁正常粘膜.结果 成功构建同时检测32个基因的PCR芯片,各基因均获得特异性扩增;29个转移相关基因PCR芯片检测结果与基因芯片检测结果的吻合率为86%;PCR芯片检测伴有转移的结直肠原发癌与不伴有转移的结直肠癌组织,结果显示14个基因表达一致,15个基因表达有差异.结论 结肠癌转移PCR芯片结果可靠,可用于预测结直肠癌转移的研究.
作者:肖小琴;唐娜;刘超;王红霞;蒋强;邓永键;丁彦青 刊期: 2011年第07期
目的 研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性.方法 收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标本提取蛋白行MAP3K5的Western blot检测.结果 53例鼻咽癌EBER均阳性,49例miR-BART22阳性;30例鼻咽黏膜慢性炎EBER和miR-BART22均阴性.MAP3K5在53例鼻咽癌组织中50例为阴性,癌巢周围粘膜组织呈阳性表达,3例弱阳性(+)表达.30例鼻咽粘膜慢性炎中,25例强阳性表达(++~+++),3例弱附性(+)表达,2例阴性;鼻咽癌和鼻咽黏膜慢性炎MAP3K5差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot检测结果黏膜慢性炎MAP3K5蛋白表达值高于鼻咽癌(P=0.029).MAP3K5和miR-BART22表达呈负相关(P<0.001).结论 MAP3K5在鼻咽癌组织中表达水平低于黏膜上皮组织.MiR-BART22与之相反,在鼻咽癌中高表达,而黏膜慢性炎中缺乏.MAP3K5和miR-BART22在鼻咽癌中表达呈负相关.根据以上实验和相关文献,我们推测MAP3K5町能是EB病毒miR-BART22靶标基因,EB病毒miR-BART22通过抑制MAP3K5的表达,使相应磷酸化MAP3K5蛋白减少,进而下调MAPK通路下游基因蛋白的磷酸化,并行使对NPC细胞抑制凋亡、阻止分化并促进免疫逃逸等作用.
作者:江庆萍;刘少颜;何秀芳;彭娟;熊汉真;熊中堂;杨獄鑫 刊期: 2011年第07期
目的 分析葡萄糖耐量试验期间(OGTT)动态血糖值和静脉血糖值的一致性,评价在快速变化的血糖应激状态动态血糖监测系统的精确性.方法 对49例空腹血糖3.9~11.0 mmol/L的门诊志愿者,应用动态血糖监测系统(CGMS)进行连续3 d的血糖监测,并在第3天行OGTT,检测0、30、60、90、120min静脉血糖值,采用Pearson相关分析法、Clarke误差表格分析(EGA)分别评价整个OGTT期间及各血糖状态下CGMS的精确性.结果 CGMS测定值和静脉血糖值在整个OGTT期间、血糖稳定阶段、血糖急升阶段和血糖急降阶段时的r分别为0.928、0.901、0.924和0.902(P值均<0.001),EGA显示均有95%以上的结果落在A区和B区.结论 OGTT期间的CGMS测定值和静脉血糖值相关性良好,EGA结果在可接受范围内,CGMS可较精确性地反映OGTT期间快速血糖变化.
作者:陈志;沈洁;徐玲玲;符霞军;李际敏;马媛媛 刊期: 2011年第07期
目的 探讨肝癌中核基质结合区结合蛋白-1的表达及其临床意义.方法 用TRIZOL提取102例肝癌组织及对应的癌旁组织,并将其逆转录为cDNA.用实时荧光定量PCR方法检测肝细胞肝癌中SATBl mRNA的表达,并分析SATBl基因的表达程度与患者临床病理参数、术后复发与转移的关系.结果 肝细胞肝癌组织中SATBl的表达是癌旁组织的3.27倍(P<0.001),有统计学差异.癌组织中SATBl mRNA表达的高低与肝硬化、AFP、肿瘤大小、癌栓、病理分化、TNM分级、术后复发转移有关系(P<0.05).与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体、肿瘤的数目、包膜无关(P>0.05).SATBl mRNA显著高表达组、高表达组、低表达组的复发率分别为82.68%,0,0;而三组的一年累计生存率分别为0,52.63%,1 00%.结论 SATB1 mRNA的表达与肝癌的复发转移有关,SATB1有望成为肝癌复发与转移的-个新的预后指标.
作者:彭正奎;杨定华;李湘竑;黄毓;张国强;钟克波;毕民平;李光辉 刊期: 2011年第07期