李拴强;冯前进;陈武凡;林亚忠
目的 研究胶原类基因COL1A1、COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)及配对正常口腔黏膜组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔黏膜中胶原基因COL1A1、COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA的表达;所得数据采用SAS6.12软件包进行t检验.结果 RT-PCR检测结果表明,COL1A1 mRNA在OSCC中的表达较其对照粘膜表达上调2.78倍(P<0.001).COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA在OSCC中的表达较其对照黏膜分别上调1.07、1.15、1.27、1.16倍(P>0.05).结论 在OSCC癌变过程中,COL1A1 mRNA过表达,可能是OSCC的-个靶基因;COL1A1在OSCC分类诊断中有应用价值.
作者:吕晓智;陈万涛;张陈平 刊期: 2011年第07期
目的 研究盐酸右旋美托咪啶对呼吸机所致肺损伤大鼠肺部炎症损伤和细胞外信号调控蛋白激酶磷酸化的影响.方法 36只SPF级雄性SD大鼠随机均分成3组:常规潮气量通气组(C组,8 ml/kg,呼吸频率90次/min).大潮气量通气组(H组,20 ml/kg,呼吸频率50 次/min),大潮气量通气盐酸右旋美托咪啶处理组(D组,20 ml/kg,呼吸频率50 次/min),每组12只.各组通气时间均为4 h,呼吸末气道压力均为0.D组大鼠在机械通气的同时接受盐酸右旋美托咪啶溶液静脉泵入,泵入速度为0.5μg/(kg.h).实验结束处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液和肺组织标本,光镜观察肺病理改变,ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α,Western blotting检测各组肺组织中ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)水平.结果 与C组相比,H组和D组肺部有明显病理改变,且干湿重比、总蛋白、白细胞计数、髓过氧化物酶、TNF-α和P-ERK1/2等指标均显著高于C组.与H组相比,D组肺部病理改变明显减轻,ERK1/2磷酸化水平和其他各项指标均显著降低.结论 盐酸右旋美托咪啶静脉输注能显著减轻呼吸机所造成的肺损伤,减少肺部炎症因子的产生,并抑制ERK1/2激活.
作者:忽新刚;阮祥才;于霖;丁宁;余守章;廖禹林 刊期: 2011年第07期
目的 探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)用于造血干细胞动员对健康供者骨髓和外周血中骨髓来源的抑制细胞(MDSC)的影响和MDSC与移植物抗宿主疾病(GVHD)的关系.方法 对12例健康造血干细胞供者,在G-CSF动员前和动员后第5天分别获取骨髓、外周血及外周血干细胞采集物,用流式细胞术检测其中MDSC的含量变化,统计分析MDSC与GVHD的关系.结果 在正常生理状态下,健康供者外周血、骨髓中均能检测到MDSC,MDSC在外周血中占单个核细胞比例为(1.35±0.35)%,骨髓中为(2.44±1.11)%,骨髓中MDSC比外周血中高(P=0.015);G-CSF动员5 d后MDSC在外周血中占单个核细胞比例为(4.01±1.82)%,骨髓中为(4.38±2.19)%,动员后骨髓与外周血中MDSC比例相比无明显变化(P=0.083).动员后外周血中MDSC含量明显高于动员前(P=0.047),而动员前后骨髓MDSC细胞比例变化无统计学意义(P=0.761).采集物中MDSC细胞数量与GVHD发生率呈明显负相关关系(P=0.048).结论 健康人PB与BM中均能检测到MDSC,且骨髓中比外周血中要高;G-CSF能动员骨髓中MDSC到达外周血,使外周血中MDSC增高;G-CSF动员的外周血干细胞采集物中MDSC增加与造血干细胞移植后低GVHD发生率有关.
作者:凌奕文;刘启发;刘灿;吴秀丽;陈银葵;范志平;宣丽;张钰;江千里;赵婕;孙竞 刊期: 2011年第07期
目的 寻找妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病的分子标记物,为筛查及防治该类疾病提供分子生物学基础.方法 收集妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病患者的静脉血清标本各4份,去除高丰度的免疫球蛋白和白蛋白.应用十二烷基磺酸钠聚内烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术将可溶性血清总蛋白分离.切取在不同样品中显示明显差异的蛋白条带,酶解后使用质谱技术对所得的差异蛋白进行鉴别.运用生物信息学分析差异蛋白的生物学功能.结果 将上述去除高丰度蛋白的标本进行3次重复的SDS-PAGE,确定了显示显著差异的蛋白条带.质谱分析结果表明这些差异性蛋白分别为:结合珠篮白、SMG8蛋白和凋亡诱导因子-1.结论 为建立妊娠期代谢性疾病的蛋白质数据库提供了基础性数据.鉴定了与该疾病显著相关的部分蛋白,为进一步预防该疾病、改善妊娠结局以及阐明该疾病的分子机制提供了可参考的实验依据.
作者:王硕石;胡水旺;钟梅 刊期: 2011年第07期
目的 通过基因重组技术构建pcDNA3.0-RGC32重组质粒,并检测其对细胞骨架的影响.方法 扩增RGC32的全长并定向克隆到真核表达载体pcDNA3.0,获得重组质粒pcDNA3.0-RGC32,转染SW480细胞,采用G418筛选单克隆,Western blot检测转染前后SW480细胞中RGC32的表达水平,并制作转染前后SW480细胞骨架标本,并采用划痕实验观察细胞的迁移能力.结果 pcDNA3.0-RGC32真核表达载体构建成功,转染重组载体后细胞中RGC32的表达馈明显增多.转染重组质粒前,SW480细胞骨架中微丝纤维束少而短、极性不明显;转染重组载体后的细胞微丝纤维束数量增多,变长,有了明显的极性,并且可见细胞膜向前伸出丝状结构的伪足或者是片状结构的伪足,细胞骨架发生了重组,并且过表达后细胞的迁移能力增强.结论 通过过表达RGC32,促进细胞骨架重组,有利于细胞运动,推测细胞骨架重组是RGC32促进肿瘤转移的重要机制.
作者:田杰;徐川;杨敏慧;李祖国 刊期: 2011年第07期
目的 探讨八探针间期荧光原位杂交技术(FISH)在检测急性髓系白血病(AML)常见细胞遗传学异常中的价值.方法 采用八探针FISH系统.即以针对AML1/ETO融合基因、PML-RARct融合基因、CBFβ/MYHll融合基因、MLL基因、P53基因、Del(5q)、-7/Del(7q)、Del(20q)八种DNA探针对40例AML患者细胞遗传学异常进行检测,并与常规G显带核型分析技术相比较.结果 40例AML中,共22例多探针FISH检出了细胞遗传学改变,总阳性率为57.50%,包括:AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、MLL基因断裂重排、Del(5q)、-7/Del(7q)、P53基因缺失、8号染色体三体7种细胞遗传学异常.而常规G显带核型分析技术(CCG)对于相对应的遗传学异常仅检出8例,另检出3例八探针FISH不能检出的异常,总阳性率为27.50%.结论 FISH八探针诊断技术较常规G显带核型分析技术具有省时、准确、高效等优点,可作为急性髓系白血病临床诊断的-个重要手段.
作者:许露露;刘晓力;杜庆锋;宋兰林;曹睿;许娜;张进芳;黄彬涛;骆许静 刊期: 2011年第07期
目的 建立同时检测表达多个结直肠癌转移相关基因的PCR芯片,用于诊断结直肠癌转移和预测转移.方法 通过严格设计基因引物,探索各基因同时达到特异性扩增的PCR反廊条件;应用基因芯片筛选获得的29个结直肠癌转移相关基因,结合3个看家基因,建立同时检测32个基因的PCR芯片;应用该芯片检测不同转移潜能的结直肠癌细胞和临床直肠癌组织、癌旁正常粘膜.结果 成功构建同时检测32个基因的PCR芯片,各基因均获得特异性扩增;29个转移相关基因PCR芯片检测结果与基因芯片检测结果的吻合率为86%;PCR芯片检测伴有转移的结直肠原发癌与不伴有转移的结直肠癌组织,结果显示14个基因表达一致,15个基因表达有差异.结论 结肠癌转移PCR芯片结果可靠,可用于预测结直肠癌转移的研究.
作者:肖小琴;唐娜;刘超;王红霞;蒋强;邓永键;丁彦青 刊期: 2011年第07期
目的 探讨25羟维生素D3对人正常气道上皮细胞通透性及ZO-1表达的影响.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE为研究对象,MTT法分别检测不同浓度25羟维生素D,对细胞活力的影响;实验分组为:对照组,不同浓度25羟维生素D,处理组.各处理因素作用细胞总时间为24 h.跨上皮电阻测量仪测量标准化单细胞层跨上皮电阻(TER),比较各组TER差别.进一步用实时定量PCR观测各处理组紧密连接蛋白ZO-1 mRNA表达的变化.结果 与对照组相比,25羟维生素D,处理组TER(P<0.05)显著增高,但各浓度的25羟维牛素D3对ZO-1表达无明显影响(P>0.05).结论 25羟维生素D3可以使气道上皮通透性减低,但这种效应并非通过上调气道上皮ZO-1表达实现的.
作者:周晓婷;赵海金;蔡绍曦 刊期: 2011年第07期
目的 探讨不稳定性心绞痛(unstable angina pcetoris,UAP)患者血清生长分化因子15(GDF-15)与TIMI危险评分的相关性.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测97例UA患者与30例健康体检者血清GDF-15的表达水平.采用TIMI危险评分方法将UA患者分为3组,比较各组间GDF-15表达水平差异.分析GDF-15与TIMI危险评分的相关性.结果 UA患者血清GDF-15的表达水平显著高于健康体检者,差异有统计学意义(P<0.01);不同TIMI危险评分分组之间血清GDF-15表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.01);血清GDF-15表达水平与TIMI危险评分之间存在相关关系.结论 血清GDF-15的表达水平可以作为UA患者危险分层评估指标.
作者:邓明尧;吴国平;冯旭霞;罗江宾 刊期: 2011年第07期
目的 观察评价调强或三维适形放疗联合多两他赛与顺铂治疗局部中晚期食管癌的疗效及不良反应.方法 局部中晚期的60例食管癌患者随机分为两组:A:30例调强放疗联合TP(多西他赛及顺铂)方案化疗组,B:30例三维适形放疗联合TP(多西他赛及顺铂)方案化疗组.放射剂量为64 Gy/30次/6周.结果 近期疗效,总有效率(CR+PR)调强化疗组的90%好于适形放疗组的80%,但两组比较差异没有统计学意义(P>0.05).1、2、3年生存率分别为调强化疗组86.7%、70.0%、66.7%及适形化疗组的70.0%、63.3%、63.3%,两组比较差异没有统计学意义(P>0.05).比较两组肺V20、V30,调强化疗组有优势(P<0.05),两组急性放射性食管炎比较差异不大,无统计学意义(P>0.05).结论 调强放疗联合TP(多西他赛及顺铂)方案化疗治疗局部中晚期食管癌在目前是一种较有效的方法.
作者:林晓丹;石兴源;周同冲;张伟军 刊期: 2011年第07期
目的 总结分析接受冠脉介入治疗的冠心病患者发生造影剂肾病(contrast induced nephropathy,CIN)的危险因素、临床预后及防治策略.方法 回顾总结1232例冠状动脉介入治疗中91例并发CIN患者的危险因素、心血管事件及防治策略.结果 术前伴随的慢性肾功能不全、糖尿病和大剂量使用造影剂与CIN的发生密切相关.CIN患者住院期间心源性死亡率,以及术后1年的心源性死亡率、心肌梗死发生率、心血管事件发生率均较非CIN组患者的明显升高.结论 慢性肾功能不全、糖尿病和造影剂剂是3个独立的CIN危险因素,而且GIN可以影响病人的预后.目前加强冠脉介入治疗嗣手术期的综合管理,特别是水化疗法,是目前防治CIN的重要策略.
作者:郑华;屠燕;马立勤 刊期: 2011年第07期
目的 探讨肝癌中核基质结合区结合蛋白-1的表达及其临床意义.方法 用TRIZOL提取102例肝癌组织及对应的癌旁组织,并将其逆转录为cDNA.用实时荧光定量PCR方法检测肝细胞肝癌中SATBl mRNA的表达,并分析SATBl基因的表达程度与患者临床病理参数、术后复发与转移的关系.结果 肝细胞肝癌组织中SATBl的表达是癌旁组织的3.27倍(P<0.001),有统计学差异.癌组织中SATBl mRNA表达的高低与肝硬化、AFP、肿瘤大小、癌栓、病理分化、TNM分级、术后复发转移有关系(P<0.05).与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体、肿瘤的数目、包膜无关(P>0.05).SATBl mRNA显著高表达组、高表达组、低表达组的复发率分别为82.68%,0,0;而三组的一年累计生存率分别为0,52.63%,1 00%.结论 SATB1 mRNA的表达与肝癌的复发转移有关,SATB1有望成为肝癌复发与转移的-个新的预后指标.
作者:彭正奎;杨定华;李湘竑;黄毓;张国强;钟克波;毕民平;李光辉 刊期: 2011年第07期
目的 研究复方甘草酸苷对系统性红斑狼疮(SLE)的治疗作用机制及其对SLE器官损害的远期疗效.方法 将2008~2010年住院及门诊的SLE患者68例,随机分为复方甘草酸苷治疗组34例(A组)和单纯西药治疗组34例(B组);正常健康组21例(C组),用流式细胞仪检测SLE患者治疗前后和正常对照者的外周血CD4+CD25+T细胞阳性率,评定SLE损伤指数.结果 A、B两组治疗前CD4+CD25+T细胞阳性率与C组比较,有显著性差异(P<0.05),治疗后A、B两组阳性率均有明显升高,两组之间比较有显著性差异(P<0.05);治疗后A组与与C组比较,无显著性差异(P>0.05),B组与C组比较,有显著性差异(P<0.05);SLE损伤指数积分显示A组比较稳定,B组较治疗前有明显增加.结论 复方甘草酸苷对SLE患者的CD4+CD25+T有明显升高作用,并对SLE的器官损害有明显的保护与修复作用.
作者:李毓阳;戴永江;邓斌;粱雄安;谢志杰;陈海富 刊期: 2011年第07期
目的 研究ITGA9基因rs189897和rs2212020位点及其单体型与脑梗死的关系.方法 在脑梗死和正常对照样本中,利用PcR-测序方法对rs189897和rs2212020位点进行基因分型,分型结果经SHEsis软件进行单个位点以及两个位点构建的单体型与疾病关联性进行分析.结果 rs189897和rs2212020位点等位基因频率、等位基因型频率在脑梗死患者和正常对照人群巾的分布存在统计学差异(P<0.05),同时还发现其A-C单体型为脑梗死发病的保护因子,拥有该单体型的个体发生脑梗死的机率为不拥有该单体型个体的0.130倍.结论 ITGA9基因rs189897、rs2212020位点与脑梗死发病密切相关,其A-C单体型分子标志是脑梗死发生的保护因子.
作者:李湘民;李静;曾凤;易红 刊期: 2011年第07期
目的 对屋尘螨主要变应原(Der P 1)蛋白分子中与过敏病人血清特异性IgE相结合的表位序列的鉴定.进而获得基于串联表位的小分子低毒过敏原以作为新的免疫治疗剂.方法 采用全蛋白序列重叠扫描法对DerP 1蛋白进行全表位筛选,即合成了覆盖DerP 1全蛋白222个氨基酸的31段各含15个氨基酸的多肽,且相邻肽段间有8个氨基酸的重叠.并将这些肽段按点状同相多肽合成法依顺序合成于纤维膜上.再将该膜与由数份过敏血清组成的血清池孵育,经抗人IgE-HRP二抗结合及X光片显影后对阳性点进行灰度比对及分析.结果 经对X光片阳性点的比对及分析,我们确定出了DerP 1过敏原蛋白中的3个强阳性表位序列.它们是位于第85~99位的氨基酸序列(表位1,Epl),第106~120位的氨基酸序列(表位2,Ep2)及第190~204位的氨基酸序列(表位3,Ep3).结论 我们获得了Der P 1中3个15肽的线性IgE结合表位(B细胞表位)序列.证实了Der P 1分子中存在IgE结合的线性表位.为进一步构建T/B细胞串联表位的小分子低毒过敏原提供了物质基础.
作者:钟志美;郑传东;王方 刊期: 2011年第07期
为实现脑膜瘤核磁共振(MR)图像的精确分割,本文提出了一种新的基于图割的交互式图像分割算法.该方法首先提取高维图像特征,然后利用加权KNN(K-Nearest Neighbor)分类器估计待分类像素属于肿瘤与背景区域的概率,并构造新的能量函数;后采用图割优化方法对能量函数优化求解.对脑膜瘤MR图像的分割实验表明,本方法较基于灰度信息的图割方法在精度上有明显提高.
作者:李拴强;冯前进;陈武凡;林亚忠 刊期: 2011年第07期
目的 本研究旨在探讨中、重度精神发育迟滞患者在手术室外进行外周血单个核细胞移植术时,对气道采用不同管理方法的伞麻效果比较.方法 选择拟进行外周血单个核细胞移植术的神经外科中、重度精神发育迟滞患者30人,采用全身麻醉,根据对患者气道管理方式不同,随机分为3组:不插管静脉麻醉组(MAC组,10例,保留患者自主呼吸,静脉应用丙泊酚麻醉),喉罩置入组(LMA组,10例,常规全麻诱导,置入喉罩)和气管内捕管组(ETT组,10例,常规全麻诱导,气管内插管).记录3组患者在手术过程中的心率、血压、脉搏血氧饱和度、治疗操作时间、患者苏醒时间、体动呛咳等不良反应,及麻醉后5min、1 h、麻醉结束时和结束后1 h的动脉血气分析.结果 ①MAC组与LMA、ETT组相比:丙泊酚用量[g/(kg·min)]有显著差异(分别为66.07±5.41;35.83±5.80;34.61±3.68,P<0.05);患者发生体动、呛咳反应次数(次)有显著差异(9.90±3.07;2.51±1.50;0.82±0.93,P<0.05);苏醒时间(min)有显著差异(16.82±7.60;4.31±1.32;3.73±1.33,P<0.05);②血气分析结果:3组患者麻醉后5 min和结束后1 h的PH、PaCO2、HCO3无显著差异;MAC组麻醉后1 h及麻醉结束前的血气分析结果与其他两组相比较,PH降低,PaCO2升高,且具有统计学显著差异(P<0.05).结论 对于手术室外精神发育迟滞患者的麻醉应用气管内插管全麻,与不插管镇静组和喉罩置人组相比,循环更加稳定,体动反应明显减少,苏醒更加完善,是更安全的手术室外麻醉方法.
作者:李萌萌;张庆红;刘瑛辉;岳丽;刘芝慧;郝建华 刊期: 2011年第07期
目的 探讨一种有效防治剖官产低血压且对母婴有利的方法.方法 选择单胎足月择期行腰麻下剖宫产的初产妇40例,随机分为两组,分别给予静脉预注麻黄素和术前预充万汶防治腰麻后低血压.记录术中心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、1 min及5 min的Apgar评分.抽取脐动脉血进行血气分析.同时,取胎盘组织进行常规免疫组织化学染色,通过抗CD34标记血管内皮细胞显示血管的方法,进行胎盘绒毛间质内微血管体视学研究.结果 麻黄素组心率,低血压发生率和脐动脉血乳酸值明显高于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05),麻黄素组脐动脉血PH值明显低于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05).两组微血管长度密度差异无统计学意义(P>0.05),麻黄素组微血管体积密度明显小于万汶组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 剖官产腰麻前应用万汶预扩容能增加母体有效循环血容量,维持母体循环稳定.通过体视学分析,扩容有利于增加子宫胎盘血量,从而改善胎儿血供和氧供.
作者:帅兵;彭雪梅;李瑞满;李雅兰;胡东华 刊期: 2011年第07期
目的 研究大胡蜂窝乙醇抽提物(WCE)对60%酸性乙醇诱导的大鼠胃溃疡的保护性及其作用机制.方法 用WCE按照0、25、100和150mg/kg的剂量对Wistar大鼠连续灌胃8 d,然后用60%的酸性乙醇诱导胃溃疡,比较不同处理组大鼠胃粘膜的病变程度、髓过氧物酶活性和总抗氧化能力,同时分析WCE体外抗二苯基三硝基肼自由基的能力.结果 与0mg/ks WCE灌胄组相比,25、100和150 mg/kg WCE灌胃组的胃溃疡程度下降了44.2%~87.1%;胃粘膜髓过氧物酶活性下降了16.4%~56.6%,胃粘膜的总抗氧化能力分别增加0.5、1.47和1.83倍.此外,WCE体外自由基清除能力显著高于二丁基羟基甲苯.结论 通过降低胃粘膜自由基的破坏性和中性粒细胞的渗漏性,WCE能显著抑制60%酸性乙醇诱导的大鼠胃溃疡和溃疡形成过程中的氧化反应.
作者:徐学清;余乐;刘叔文 刊期: 2011年第07期
目的 利用基因工程方法克隆SD大鼠Atohl基因CDS,构建大鼠核转录因子Atohl的真核表达载体并在真核细胞中表达.方法 从SD大鼠结肠粘膜提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增Atohl基因CDS区序列并TA克隆至PMD-19T载体中.测序鉴定后将Atohl基因连接于含有EGFP和内部核糖体转入位点(internal ribosome entrysite,IRES)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,对重组质粒进行酶切鉴定和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至293T细胞,荧光显微镜、PT-PCR和Western blot检测其在293T细胞中的表达.结果 扩增得到大鼠Atohl CDS区长1056 bp,编码351个氨基酸,与GeneBank公布的参考序列对比,有两处碱基发生突变,但克隆序列编码的氨基酸序列与参考序列完全一致,两处碱基应为单核苷酸多态性(SNP),突变为无义突变,不影响蛋白表达.双酶切和测序结果证明Atohl已正确地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染293T细胞48 h后,荧光显微镜下观察到荧光蛋白的表达,PT-PCR和Western blot证实Atohl 的mRNA和蛋白能在293T细胞中正确表达.结论 成功构建了真核表达载体pAtohl-IRES2-EGFP,并在293T细胞中成功表达,为进一步研究Atohl的功能、作用机制及感音神经性耳聋的基因治疗奠定了基础.
作者:郑国玺;祝康;朱珠;侯瑾;韦俊荣;许珉 刊期: 2011年第07期