刘胜初；张毅；黄建斌；张剑伟
目的 构建以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒载体,并对其进行鉴定.方法 以pEGFP-N1质粒为模板,PCR法扩增获得EGFP基因片段,并将其亚克隆入PGL3-promoter质粒骨架,得到以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒pEGFP-enhancer.人工合成不同拷贝的缺氧反应元件(HRE)增强子序列,插入到pEGFP-enhancer多克隆位点获得重组质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HR,以脂质体Lipofectamine 2000转染Hela细胞,常氧与缺氧处理后以荧光显微镜及流式细胞仪观察EGFP荧光表达.结果 构建的不同拷贝HRE的增强子鉴定质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HRE转染Hela细胞后,常氧处理绿色荧光表达无差异,缺氧处理后随HRE拷贝数增加绿色荧光表达强度增加.结论 成功构建了增强子表达质粒pEGFP-enhancer,通过EGFP的表达强度可以反应增强子活性.
作者：石秦东；张蓬勃；康前雁；陈新林；田玉梅；刘建新；刘勇 刊期： 2007年第12期
目的 检测醛固酮作用后早期(6 h)及远期(1月)豚鼠耳蜗水通道及离子通道蛋白基因与蛋白质的表达改变情况.方法 使用RT-PCR方法检测醛固酮腹腔注射后6 h豚鼠耳蜗中Na-KATP酶β1、β3亚单位及钠离子通道蛋白α亚单位(ENaCα Subunit)基因表达的改变情况;使用免疫组织化学染色的方法检测醛固酮作用后1月耳蜗水通道蛋白1(AQP1)蛋白的表达情况.结果 醛固酮作用后早期,在豚鼠耳蜗中Na-KATP酶β1、β3亚单位的表达情况无明显改变,钠离子通道蛋白α亚单位则出现明显上调(P＜0.05);远期则出现AQP1表达的下调(P＜0.05).结论 醛固酮在豚鼠耳蜗中可能通过基因组作用方式发挥作用,并且醛固酮引起膜迷路积水可能是由于其对离子浓度的改变所引起的.
作者：李琦；黄德亮 刊期： 2007年第12期
目的 探讨全程围套式与常规微血管减压术治疗面肌痉挛的疗效和显微操作技术.方法 回顾性分析两种微血管减压方式治疗65例面肌痉挛患者的术中情况、显微操作技术及结果.按手术方式不同分a组30例,b组35例.按起病时年龄分为c组＜40岁27例,d组＞40岁38例.结果 术中a、b两组均发现面神经受压迫有4种模式:单纯接触型,压迫型,黏连包绕型,无明确责任血管型;责任血管包括动脉、静脉、混合性,血管袢;c组术中多见蛛网膜增厚,d组多见血管的构筑改变而致血管解剖移位;a组总有效率80%,复发率13.3%.b组总有效率97.1%,复发率2.9%;并发症随访1年以上未恢复者a组:耳鸣、听力下降10%,共济失调6.7%,面瘫10%;b组:耳鸣、听力下降2.9%,面瘫2.9%.结论 全程围套式减压术治疗面肌痉挛更安全、有效;全程解剖分离面神经自进出脑干区域(root entry/exit zone,REZ)至内听道口,识别责任血管和可疑被压迫部位,置入Teflon棉对面神脑池段全程围套式包裹,避免损伤颅神经和细小穿支血管是影响疗效和减少复发的关键.
作者：漆松涛；朱蔚林；张喜安 刊期： 2007年第12期
目的 探讨皮肤软组织扩张术修复大面积头皮软组织缺损的手术方法和治疗效果.方法 采用一期置入扩张器行皮肤扩张术,注水充分扩张后,二期合理设计扩张皮瓣转移修复大面积头皮缺损的方法,治疗大面积头皮缺损23例,其中伴有颅骨缺损5例.各种原因引起头皮缺损范围8 cm×6 cm～20 cm×18 cm,颅骨缺损范围4 cm×5 cm～11 cm×9 cm.根据头皮缺损位置、形状置入1～3个扩张器行皮肤扩张,注射壶内置,注水扩张时间5～12周,扩张皮瓣的范围8 cm×8cm～23 cm×20 cm.5例伴有颅骨缺损病例在扩张皮瓣转移修复术时清除失活或浮动的骨碎片3例,咬除颅骨缺损周边患颅骨骨髓炎病骨2例,3～6月后行颅骨修补术.结果 23例大面积头皮软组织缺损均完全修复.5例伴有颅骨缺损病例后期行颅骨修补术成功,无感染,皮瓣坏死等并发症发生.本组出现并发症4例:皮瓣远段表皮坏死2例,经换药治疗后延期愈合;扩张器外露1例,取出扩张器,另一头皮切口再置入,头皮扩张成功;切口裂开1例,抽出扩张器已注入的水,分层严密缝合头皮后消失.术后随访6月～1年头发生长良好,疤痕隐蔽,外观满意.结论 皮肤软组织扩张术是一种修复大面积头皮软组织缺损的理想的手术方法,治疗效果满意.对伴有颅骨缺损病例在头皮软组织缺损修复后再行颅骨修补术成功率高.
作者：刘胜初；张毅；黄建斌；张剑伟 刊期： 2007年第12期
目的 研究早期目标指导治疗(EGDT)对多器官功能障碍综合征(MODS)发病率、严重度及死亡率的影响.方法 采取前瞻性、随机、对照研究方法,将休克早期、有发展为MODS倾向的患者随机分为EGDT组(给予EGDT)和对照组(给予传统经验治疗).记录两组患者入ICU时急性生理和慢性健康评分(APACHEⅡ)、血乳酸浓度、序贯性器官衰竭评分(SOFA),第2、4天血乳酸浓度,住院期间高SOFA评分,同时计算SOFA评分差值,器官衰竭数目,并统计ICU死亡率.结果 EGDT组MODS发病率明显低于对照组(P=0.002).EGDT组MODS患者的第2、4天血乳酸浓度、住院期间高SOFA评分,SOFA评分差值、器官衰竭数目明显低于对照组(P=0.045,0.016,0.009,0.010,0.002).EGDT组MODS患者死亡率明显低于对照组(P=0.007).EGDT组中严重感染与非严重感染伴发MODS患者死亡率均明显低于对照组(P=0.047,0.044).结论 EGDT可以减少MODS发病率,减轻MODS严重度,以及不仅可以降低严重感染伴发MODS患者死亡率,同时也可以降低非严重感染伴发MODS患者死亡率.
作者：陈仲清；金英慧；陈辉；付卫军；杨翃；王瑞婷 刊期： 2007年第12期
目的 研究人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化来源的心肌样细胞中代表性微小RNA(miRNAs)的表达.方法 利用FITC-偶联的CD29、CD34和CD11b抗体在流式细胞仪上检测分离的hMSCs的抗原表型.分别用5-氮胞苷(5-aza)和乳鼠心肌非接触共培养法诱导传至3代的hMSCs分化为心肌样细胞.用免疫化学法检测hMSCs分化来源的心肌样细胞中心肌特异的α-肌节辅肌动蛋白和心肌肌钙蛋白(cTnI)的表达.利用逆转录PCR和DNA测序鉴定5个代表性的心脏特异的初级微小RNA(pri-miRNAs)的表达.结果 hMSC标志分子CD29表达率为98.87%,而造血细胞标志分子CD34和CD11b的表达率只是5%和0.4%.免疫化学分析显示,分别经5-aza和乳鼠心肌非接触共培养诱导的hMSC均可表达α-肌节辅肌动蛋白和cTnI,而在未分化的hMSCs中无表达.miRNA-143,-181可在5-aza诱导的hMSCs中表达,miRNA-143,-181,-206,-208可在乳鼠心肌非接触共培养的hMSCs中表达,而两种诱导方法均未能诱导miRNA-1-2在hMSCs中表达.结论 利用5-aza和乳鼠心肌非接触共培养法诱导hMSCs分化的心肌样细胞中可以表达不同的心脏特异的pri-miRNAs.
作者：单志新；林秋雄；余细勇；邓春玉；李晓红；张绪超；刘晓颖；符永恒 刊期： 2007年第12期
目的 研究siRNA介导的NF-κB P65沉默诱导肝癌细胞凋亡相关机制.方法 实验以肝癌SMMC7721细胞株为材料,分为空白对照(Con)、脂质体对照(LP)以及siRNA干扰实验(siRNA)3组.以体外转录法合成dsRNA,并用脂质体转染SMMC7721细胞株;Western blotting检测NF-κB P65表达水平,MTT检测细胞增殖情况,Annexin V-PI法检测细胞凋亡,免疫组化检测Bcl-2和Bax表达.结果 与Con和LP组相比,siRNA具有抑制SMMC772l细胞NF-κB P65表达的作用,NF-κB P65表达抑制率分别达到64.74%和34.52%.siRNA明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,晚期凋亡细胞分别是Con组和LP组的8倍和7倍.siRNA引起Bcl-2表达下调,而Bax表达上调.结论 siRNA可以有效抑制NF-κBP65蛋白表达,并通过调节Bcl-2和Bax诱导SMMC7721细胞的凋亡.
作者：黄辰；姚嘉宜；李宗芳；刘利英；倪磊；宋土生 刊期： 2007年第12期
目的 探讨HCV核心蛋白与(HCBP1)HCV核心蛋白的相互作用蛋白在真核细胞内的相互作用.构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与HCBP1融合蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位.方法 PCR分别扩增含HCV核心及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEMT载体,经测序正确后,分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48 h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平.将HCBP1的cDNA片段克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,转染COS-7细胞,以Western blot和荧光显微镜分析融合蛋白的表达及其细胞定位.结果 CAT-ELISA检测显示pM-核心蛋白与pVP16-HCBP1实验孔吸光度值高于其他阴性对照,但低于阳性对照组.成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,Western blot证实融合蛋白在转染细胞中的表达,荧光显微镜示HCBP1-EGFP融合蛋白分布于细胞浆,而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变.结论 成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达.哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1确有一定的相互作用.
作者：陈天艳；刘敏；陈云茹；蔺淑梅；叶峰；张曦；刘锦锋；赵英仁；张树林 刊期： 2007年第12期
目的 探讨大剂量5-FU致肠黏膜严重损伤时肠上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其意义.方法 成年C57BL/6J小鼠40只,分为对照组(n=8)和实验组(n=32).对照组给予腹腔注射PBS,实验组给予腹腔注射大剂量5-FU(150 mg/kg.d,连续五d),分别于处理后第1、3、5天,剖杀小鼠取小肠,常规HE染色,免疫组化检测PCNA的表达.结果 与对照组比较,腹腔注射大剂量5-FU后,小鼠肠黏膜遭受严重破坏,黏膜萎缩,绒毛、隐窝结构消失;免疫组化结果显示PCNA表达增加,PCNA指数显著增高(P＜0.01).结论 腹腔注射大剂量5-FU后,肠黏膜细胞中表达PCNA的肠上皮细胞比例增加,可能与肠黏膜损伤后修复有密切的关系.
作者：罗育其；吴承堂；闻英；廖康雄；张军花 刊期： 2007年第12期
目的 探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)基因重排情况.方法 排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28～32周9例、33～36周12例、37～42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增其IgVH基因、6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色.结果 各个胎龄VH1～VH7各家族均有多个重排条带表达,同一个VH家族重排基因的平均中分子量在各个胎龄组间差异无显著性.结论 27～42周新生儿IgVH基因VH1～VH7家族重排均具有多样性;对同一个VH家族来说,28～42周各胎龄组IgVH基因重排无显著性差异.
作者：毛晓健；肖昕；熊爱华；钱新华 刊期： 2007年第12期
目的 探讨扩散张量成像(DTI)在抑郁症疗效观察中的价值.方法 18例抑郁症患者和13例健康对照组行常规MRI和DTI扫描,DTI确定选定层面额叶白质的各向异性值(FA),对抑郁症患者给予选择性5-羟色胺抑制剂氟西汀治疗8周.采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、临床总体评定量表(CGI)评定临床疗效.结果 氟西汀的治疗总有效率为67%,显效率为56%,无效率为33%,治疗无效患者额叶白质纤维束FA值较低,与治疗有效者和健康对照组相比差异有显著性.结论 DTI能显示抑郁症患者额叶白质纤维束细微结构的异常,这种异常提示其治疗疗效欠佳.
作者：夏军；雷益；徐化剑；冯伟；伍晓六；刘小林 刊期： 2007年第12期
目的 探讨红外线及磁场联合作用对兔膝关节骨性关节炎软骨损伤的治疗效果.方法 采用管型石膏伸直位固定右后肢的方法将24只健康雄性新西兰成年白兔复制出膝骨关节炎模型.6周后将24只兔子全部解除石膏固定,并随机分为4组进行实验处理,即模型组、红外线治疗组(红外组)、磁疗组及红外线和磁场联合治疗组(联合组).分别于治疗开始后1、2、3周处死白兔,每组每周处死2只,观察软骨的大体改变,并切取其造模肢体股骨内髁及胫骨内侧平台关节面软骨行组织病理学(HE染色、免疫组化及原位杂交等)检测,光镜所见依据Mankin's评分标准评分,并作统计学处理.结果 联合组的软骨病变程度(包括软骨面的损伤及软骨细胞的增生、紊乱)有显著减轻,联合治疗比单因子治疗有显著性差异(P＜0.05),两个单因子治疗组之间没有显著差异(P＞0.1).结论 联合应用红外线和磁场能有效减轻骨关节炎的软骨破坏,并可缩短病程,提高疗效,起到相互协同作用.
作者：孙嘉利；范建中；宋桂植；谭晓明；彭楠 刊期： 2007年第12期
目的 探讨短期胰岛素泵治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响及其氧化应激机制.方法 应用胰岛素泵治疗初诊2型糖尿病患者2周,分析比较治疗前后空腹血糖、餐后2 h血糖、胰岛素分泌指数(Homaβ)、胰岛素抵抗指数(HomaIR)、血MDA和SOD的变化.结果 短期胰岛素泵治疗后,空腹血糖、餐后2 h血糖均较治疗前明显下降(P＜0.01);Homaβ较治疗前明显升高(P＜0.01),而HomaIR较治疗前显著下降(P＜0.05);血MDA水平较治疗前显著下降(P＜0.01),而血SOD水平较治疗前明显升高(P＜0.01).结论 短期胰岛素泵强化治疗可显著改善初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能,可能是由于降低氧化应激对胰岛β细胞功能的损害.
作者：赵庆斌；王惠芳；孙超峰；马爱群；崔长琮 刊期： 2007年第12期
目的 探讨男方乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响.方法 以男方HBsAg阳性而女方HBsAg阴性的不孕症夫妻102对为研究组;双方均HBsAg阴性的不孕症夫妻204对为对照组,比较两组的累积胚胎评分(CES)、受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率、早期流产率、晚期流产率、分娩率和新生儿畸形率.结果 102例男方HBsAg阳性组与204例男方HBsAg阴性组的累积胚胎评分(52.8±18.7对55.4±16.9)、受精率(66.9%对66.1%)、卵裂率(97.6%对97.2%)、优质胚胎率(34.0%对37.1%)、种植率(40.9%对34.6%)、临床妊娠率(56.9%对50%)、早期流产率(6.9%对5.9%)、晚期流产率(8.6%对4.9%)、分娩率(40.2%对43.6%)、新生儿畸形率(0对0),两组间无统计学差异(P＞0.05).结论 男方慢性HBV感染不影响IVF-ET治疗的结局.
作者：赵二勇；陈士岭；孙玲；尹敏娜；熊夏思；宋娟；宋亚男；周元平 刊期： 2007年第12期
目的 评价高危急性心肌梗死患者行急诊介入治疗术时常规主动脉内球囊反搏术(IABP)的可行性及其疗效.方法 41例高危急性心肌梗死行急诊介入并主动脉内球囊反搏术治疗的患者,为治疗组(A组),将同期行急诊介入治疗但没有行主动脉内球囊反搏术治疗的高危心肌梗死患者配对入选38例设为对照组(B组).比较两组术后30 d内左室功能改善情况以及心肌缺血事件和心脏主要不良事件等的发生率.结果 A组患者术后30 d内左室功能较B组明显改善(P＜0.05),心肌缺血事件的发生率A组较B组少(P＜0.05),两组在死亡率、再次心肌梗死发生率和再次血运重建率等方面差别也有统计学意义(P＜0.05).结论 对高危急性心肌梗死患者做紧急介入治疗术前常规进行IABP可以有效改善患者左室功能和心脏主要不良事件的发生率,但这一结果仍需大规模临床试验验证.
作者：陈军；杨希立；周昭仑；李健民；谭海斌 刊期： 2007年第12期
目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合补气活血汤药治疗子宫肌瘤的临床疗效.方法 将82例子宫肌瘤患者随机分为中西医结合组(结合组)和西医对照组(对照组),结合组皮下注射GnRH-a和口服补气活血汤药,对照组仅皮下注射GnRH-a,均连续使用3～6个月.对两组患者的有效率、肌瘤大小、血红蛋白、血球压积、月经情况及随访结果进行比较.结果 结合组显效率、总有效率分别为58.54%和90.24%,明显高于对照组的36.59%和73.17%(P＜0.05);结合组肌瘤缩小比例、贫血缓解状况、月经改善情况等指标均优于对照组(P＜0.05或0.01).结论 GnRH-a联合补气活血汤药治疗子宫肌瘤疗效显著,值得在临床推广应用.
作者：刘秀敏；夏阳 刊期： 2007年第12期
目的 探讨不同剂量氯胺酮对内毒素(LPS)诱导大鼠肺损伤的影响和作用机理.方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组,LPS组(5 mg/kg),低剂量氯胺酮治疗组(5 mg/kg),高剂量氯胺酮治疗组(10 mg/kg),每组12只.建立内毒素诱导的大鼠急性肺损伤模型,于注射LPS后4 h处死大鼠,测肺湿/干重比,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数比、蛋白浓度,测肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、NO水平,RT-PCR测肺组织中iNOS mRNA表达,Western-blot测肺组织中NF-κB蛋白表达.结果 LPS组大鼠肺湿/干重比、BALF中性粒细胞计数比、蛋白浓度均明显增加(P＜0.01),肺组织中TNF-α、IL-8、NO水平显著性升高(P＜0.01),同时肺组织中iNOS mRNA和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达均增加.而氯胺酮治疗组的各项指标均较LPS组减轻,大剂量组作用更明显.结论 氯胺酮通过抑制NF-κB表达,减少炎症性细胞因子的产生,从而对内毒素(LPS)诱导的大鼠肺损伤有一定保护作用.
作者：王旭东；卢雅立；赖仁纯；李艳萍；黄婉；徐湄 刊期： 2007年第12期
1临床资料1.1病例情况病例1,男性,32岁,因咳嗽、咳痰、声嘶2周伴纳差于2006年9月6日入院,入院时查体:37.8℃、咽红、两肺呼吸音出粗,可闻及少许哮鸣音,辅助检查:WBC 20.91×109/L,肝功能、肾功能、尿常规均未见异常,电解质K 3.17 mmol/L、Na 136.70 mmol/L、Cl101.30 mmol/L、CO2 CP 23.30 mmol/L,纤支镜检查刷检物病理示:见曲菌菌丝及孢子,胸片示:双肺炎,为排除合并真菌感染,临床诊断:肺曲菌病.
作者：邵咏红；孔耀中；肖观清 刊期： 2007年第12期
目的 探讨64层螺旋CT在冠状动脉旁路移植术后诊断桥血管及自体冠状动脉的临床价值.方法 对术后2周～8年58例共140条桥血管(动脉桥43条,静脉桥97条)进行64层CT检查,以冠状动脉造影作为金标准,评价显著狭窄(管径狭窄＞50%)的桥血管及＞1.5 mm管径的所有自体冠状动脉节段.结果 140条桥血管中,38条闭塞,102条开通,CT全部诊断正确.102条开通的桥血管中,18条存在显著性狭窄,CT诊断敏感性100%,特异性95.2%.CT图像能够满足诊断的自体冠状动脉节段占90%.在可评价的冠状动脉节段中,以节段为单位诊断自体冠状动脉显著性狭窄的敏感性84%(87/103)、特异性74%(384/518).临床正确诊断率为91%(53/58).结论 64层螺旋CT可准确诊断桥血管及自体冠状动脉的显著狭窄,是评价桥血管移植术后的一种无创、可靠的检查方法.
作者：黄美萍；余丹青；梁长虹；刘辉；郑君惠 刊期： 2007年第12期
目的 探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义.方法 观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子Ⅶ等指标.血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子Ⅶ(FⅦ)促凝活性测定采用一期凝固法,FⅦa水平测定采用重组可溶性组织因子法.结果 与对照组相比,急性心肌梗死患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原均显著增加(P均＜0.05),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P＞0.05),但FⅦa显著增加(P＜0.05);急性脑梗死患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均＜0.05),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P均＜0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa显著增加(P均＜0.05).两病例组相比,急性心肌梗死组TF活性、抗原升高更为显著(P均＜0.05);急性心肌梗死组TFPI活性、抗原增加,而急性脑梗死组均降低,差异具有显著性意义(P均＜0.05);FⅦ:C在急性脑梗死组显著升高(P＜0.05),而FⅦa两组差异并无显著性(P＞0.05).结论 急性心肌梗死和急性脑梗死患者均存在组织因子途径的启动,血栓形成风险增加,测定上述指标对了解疾病发展趋势具有辅助作用.
作者：熊石龙；王前；郑磊；李俊玲；文志斌；贺石林 刊期： 2007年第12期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
