侯军；薛武军；田小辉；庞新路；藤焱；冯新顺
目的探讨骨髓干细胞移植对假肥大型肌营养不良症(DMD)模型鼠-mdx鼠膈肌的治疗效果.方法取雄性SD大鼠骨髓干细胞经尾静脉植入放疗处理后的8周龄雌性mdx鼠(n=18),于移植后4、8、12周各取6只mdx鼠的膈肌行HE染色、抗肌萎缩蛋白(dystrophin)免疫荧光检测以及dystrophin mRNA的RT-PCR分析,同时用正常C57鼠及放疗而未移植的mdx鼠作为对照,另进行PCR反应检测实验鼠膈肌内Sry(Y染色体的性别决定区)基因.结果移植后mdx鼠膈肌间质内炎性细胞浸润较放疗而未移植mdx鼠有所减少;移植后核中心移位纤维比例[移植后4、8、12周分别为(15.58±0.91)%、(12.50±1.87)%、(10.17%±1.17)%]较未移植mdx鼠(19.5±1.87)%显著减少.移植后dystrophin免疫荧光阳性细胞比例[移植后4、8、12周分别为(1.00±0.32)%、(6.00±1.05)%、(11.92±1.11%)]较未移植mdx鼠(0.17±0.41)%显著增加.RT-PCR结果显示C57鼠膈肌的dystrophinmRNA相对含量(0.63±0.04)高;而未移植mdx鼠的膈肌中未检测到dystrophinmRNA;移植后的mdx鼠膈肌中mRNA的表达水平(移植后4、8、12周分别为0.19±0.05、0.26±0.06、0.36±0.04)随时间推移逐渐增高;移植后各时间点mdx鼠膈肌Sry基因均为阳性.结论骨髓干细胞系统移植mdx鼠可以恢复部分膈肌的dystrophin表达,改善膈肌的病理,骨髓干细胞移植有希望成为全身治疗DMD的有效方法.
作者：张雅妮；张成；于美娟；王淑辉；李美山；黄慧；熊符；冯善伟；柳太云；卢锡林 刊期： 2006年第01期
目的建立热射病合并内毒素血症大鼠的动物模型,为进一步探讨重度热射病的发病机制奠定基础.方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌脂多糖组(L组)、高温细菌脂多糖组(HL组).持续监测动物肛温、心率、平均动脉压、呼吸频率的动态变化,观察致伤0、40、80、120min的外周血白细胞计数、肺病理改变.结果(1)HL组动物肛温上升到(43.04±0.11)℃,心率加快到(660±42)次/min,呼吸频率加快到(150±11)次/min,平均动脉压下降到(49.0±3.5)mmHg;其中动物肛温、心率、呼吸频率、平均动脉压与L组之间存在显著性差异,心率、平均动脉压与H组之间存在显著性差异;(2)L组、HL组白细胞计数显著下降而H组白细胞计数显著上升,L组、HL组白细胞计数与H组之间存在显著性差异;(3)HL组动物肺组织出现急性微血管损伤改变.结论本研究较好地模拟了临床热射病合并感染发展为重度热射病的过程,是重度热射病多器官损伤肺启动机制研究较好的模型.
作者：林晓静；邹飞；李亚洁；王斌；贺文静；赵志荣；朱顺芳 刊期： 2006年第01期
目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2(PLA2)同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响.方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度.用电喷雾质谱仪测定PLA2同源物分子量.体外培养Hep3B细胞,以139μg/ml PLA2同源物处理12 h,应用基因芯片检测基因表达的改变.结果从蛇毒粗毒中分离纯化出一种新的PLA2同源物,纯度为97.2%,相对分子质量为13 900.139μg/mlPLA2同源物处理Hep3B细胞12 h后,19个基因表达下调,20个基因表达上调.表达改变的基因按功能分主要为以下6类:细胞周期控制和DAN损伤修复类、细胞调亡和衰老类信号转导分子和转录因子、细胞黏附类、血管生成类以及肿瘤细胞入侵和转移类.结论PLA2同源物作用于Hep3B细胞后,可影响细胞多种基因的表达,表达改变的基因主要参与肿瘤细胞的生长和转移.本研究为进一步深入研究PLA2对肿瘤细胞的作用机制提供线索和依据.
作者：马安德；吴少瑜；张嘉杰；李志琴；徐伟；文晓芸；余乐；吴曙光 刊期： 2006年第01期
背景和目的双链RNA特异性地降解相应序列的mRNA,导致转录后水平的基因沉默.肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关.本研究旨在探讨自行设计的LRP特异性siRNA能否发挥特异性降解LRPmR-NA、抑制蛋白质表达的作用.方法构建LRP真核表达载体pcDNA3.0/LRP.以pcDNA3.0/LRP、pEGFP-C1、二者的特异性siRNA分别组和,转染K562细胞.以RT-PCR方法和流式细胞术检测LRPmRNA和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测GFP的表达的变化.结果K562细胞转染pcDNA3.0/LRP后,LRP mRNA水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30%;LRP特异性siRNA与pcDNA3.0/LRP共同转染K562细胞,LRP mRNA和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;LRP特异性siRNA与pEGFP-C1共同转染K562细胞,GFP的表达与pEGFP-C1单独转染无差异;GFP特异性siRNA与pcDNA3.0共同转染K562细胞,LRP mRNA水平和蛋白质表达与pcDNA3.0/LRP单独转染无差异.结论LRP特异性siRNA在K562细胞中能够特异性地降解LRP mRNA、抑制其蛋白质表达.该研究将为利用siRNA逆转LRP引起的白血病细胞MDR奠定理论基础.
作者：李宁；钱新华；王志远 刊期： 2006年第01期
目的比较口服水杨酸柳氮磺胺嘧啶(SASP)与合用珍珠粉、黄连素混合液(以下简称珍黄液)保留灌肠治疗活动期溃疡性结肠炎(AUC)的疗效.方法64例AUC患者,按确诊先后随机分为治疗组33例,口服SASP,每次2 g,3次/d,珍黄灌肠液保留灌肠,1次/d.对照组31例,口服SASP,每次2 g,3次/d,疗程4周.第5周复查肠镜并根据临床症状、肠镜表现、病理活检综合评价疗效.结果总有效率:治疗组93.5%,对照组48.1%(P＜0.01).结论珍黄液保留灌肠,能明显提高AUC的治疗疗效.
作者：吴一平；袁瑜；吴礼浩；蔡洁毅 刊期： 2006年第01期
目的观察头电针对于Hoehn-Yahr分级1.5～3.0级的帕金森病患者的临床疗效.方法将30例患者随机分为治疗组15例,在接受美多巴等常规西药治疗的同时,利用头电针针刺患肢对侧顶颞前斜线(MS6)、额旁3线(MS4),顶旁1线(MS8)、顶旁2线(MS9)、枕下旁线(MS14),双侧病变针双侧,深度达到帽状腱膜;对照组15例,口服美多巴,按照病人常规剂量服药分级.利用Webster量表和UPDRS运动部分对疗效进行评分.结果治疗组和对照组患者在震颤、强直、运动障碍等方面均有明显改善(P＜0.05);Webster评分示两组之间疗效差异无显著性意义(P＞0.05),但对于运动症状的改善治疗组优于对照组(P＜0.05).结论头电治疗帕金森病疗效肯定,尤其在运动症状的改善方面优于对照组,且无副作用,为治疗帕金森病的安全有效的辅助方法.
作者：姜雪梅；黄泳；卓鹰；高彦平 刊期： 2006年第01期
目的探讨凋亡调控基因Fas、FasL在大鼠急性胰腺炎中的表达及其与腺泡细胞凋亡的关系.方法通过胰胆管内逆行注射不同浓度的牛磺胆酸钠,建立不同严重程度的急性胰腺炎模型,用RT-PCR、免疫组化法检测胰腺组织Fas、FasLmRNA及蛋白的表达,原位末端标记法检测各组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡.结果在正常的胰腺腺泡细胞中即存在着Fas、FasL mRNA及蛋白的表达,且呈现共区域化特点,凋亡细胞极少.在炎症程度较轻的胰腺组织,Fas和FasLmRNA的表达水平显著提高,腺泡细胞凋亡指数亦明显提高,随胰腺炎症程度的加重,Fas和FasLmRNA的表达逐渐下降,腺泡细胞凋亡指数亦逐渐下降.结论Fas/FasL系统可能参与了正常胰腺组织的细胞更新和自稳;是介导急性胰腺炎时腺泡细胞凋亡的一个重要途径.
作者：李震东；马清涌；徐军；李明 刊期： 2006年第01期
目的探讨人体血清中常见食物过敏原特异性免疫球蛋白G(sIgG)抗体与过敏性皮肤病的关系.方法选择确诊过敏性皮肤病患者263例,其中70例检测血清特异性IgE(sIgE)抗体,53例过敏原皮试.健康对照30例.使用全自动过敏原检测仪应用酶联免疫法,检测血清中sIgG、sIgE的抗体水平,结果在263例过敏性皮肤病的病人中14项食物体外血清sIgG检验235例出现阳性结果,阳性率占89.4%.针对阳性患者进行跟踪调查,有197例病人根据试验结果改变了饮食习惯,其中有95例在20 d内症状得到明显改善,33例病人症状改善并不明显,有69例虽然症状有所改善但并不确定是由于改变饮食习惯引起的.结论使用全自动过敏原检测仪应用ELISA方法测定血清中食物sIgG抗体水平,特异性强、灵敏度高,与速发型IgE检测、变应原皮试互为补充,有助于全面了解患者的过敏状态.
作者：王学艳；杨雪飞；张明；何欢；马瑞琴 刊期： 2006年第01期
目的观察寡聚脱氧核苷酸(ODN)对THP-1细胞NF-κB核转位及细胞核内结合活性的抑制作用.方法用脂质体将寡聚脱氧核苷酸转入细胞后,以细菌脂多糖(LPS)刺激30min,分别通过免疫细胞化学、电泳迁移率分析(EMSA)和RT-PCR检测细胞NF-κB的核移位和细胞核内NF-κB结合活性.结果免疫细胞化学显示转入ODN后以LPS刺激,NF-κB表达仍位于细胞浆内,EMSA显示ODN可明显抑制细胞核内结合活性,RT-PCR显示ODN能够明显抑制NF-κB相关炎性因子TNF-αmRNA的合成.结论ODN能有效抑制THP-1细胞NF-κB的核移位和细胞核内NF-κB结合活性,从而抑制相关炎性基因的启动和转录.
作者：崔忠林；周杰 刊期： 2006年第01期
目的探讨中晚期胰头癌姑息性手术的术式选择.方法对1995年1月至2003年6月期间收治的142例中晚期胰头癌患者的临床资料进行回顾性分析.结果单纯胆囊空肠吻合术30内死亡率为14.2%,术后黄疸或胆管炎复发率为61.9%,生存期为7.1月;肝(胆)总管空肠吻合术死亡率为5.7%,黄疸和胆管炎复发率仅为6.8%,生存期10.3月,但31.8%的病人术后半年内出现十二指肠梗阻;胆肠吻合加胃空肠吻合术生存期比前两组均高(13.9月),术后无出现十二指肠梗阻.结论胰头癌姑息性手术术式应尽量选择Roux-en-Y式的肝(胆)总管空肠吻合术,同时应作预防性胃空肠吻合术.
作者：刘宇斌；黄亮；冼志勇；郭文龙；简志祥；刘子贤 刊期： 2006年第01期
目的报道动脉化静脉皮瓣在修复手部软组织缺损中的临床应用.方法选取前臂远端及足背、趾蹼处静脉皮瓣用于修复手指及手背皮肤软组织缺损52例.结果其中50例皮瓣存活.其余2例皮瓣周缘皮肤0.5 cm宽坏死,约3周脱痂后,创面愈合.结论用动脉化静脉皮瓣修复手指及手背软组织缺损是一种比较适宜的术式选择.
作者：谢广中；李敬矿；陆晓强；王光耀；黄潮桐 刊期： 2006年第01期
目的体外分离培养狗的骨髓基质细胞(BMSCs),诱导其向成骨细胞分化,初步鉴定其成骨潜能和生物学特性.方法抽取毕格犬髂骨骨髓体外分离培养获得BMSCs,DMEM、新生牛血清培养基进行原代培养,部分传代细胞以含10mmol/L地塞米松、50μg/ml抗坏血酸和10 mmol/L β-甘油磷酸钠的矿化培养液诱导其向成骨细胞增殖分化.倒置相差显微镜进行细胞形态学和细胞生长增殖观察,Von Kossa法染色检测体外矿化结节形成,细胞碱性磷酸酶染色检测BMSCs的成骨活性.结果体外分离培养的BMSCs经条件培养基诱导后表现出明显的成骨活性,体外矿化(骨样)结节的VonKossa染色阳性;传代BMSCs碱性磷酸酶染色阳性.结论体外分离培养的BMSCs中含有骨源性前体细胞,传代细胞具有较强的成骨潜能.
作者：涂小丽；刘宏伟；李才良；任肖华 刊期： 2006年第01期
目的研究HPV16 E5蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16 E5蛋白原核和真核表达质粒进行构建、表达和鉴定.方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16 E5基因,经BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切的pET32a(+)载体,转染JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选.经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting检测目标蛋白表达情况.将BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切pET32(+)/E5质粒后取得的E5全基因片段转入pcDNA3.1(+)空质粒,构建pcDNA3.1(+)/E5真核表达质粒并对NIH3T3细胞进行转染,后用G418进行稳定表达株的筛选,并采用RT-PCR鉴定细胞内HPV16E5基因表达情况.结果成功构建了原核表达质粒pET32/E5,在1 mmol/LIPTG、28℃诱导条件下BL21(DE3)菌体中HPV16 E5-TRX融合蛋白占菌体总蛋白的10%左右.真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E5在成功转染NIH3T3细胞后于250μg/ml G418浓度时筛选21d得到了E5基因稳定表达株,RT-PCR产物测序得到了HPV16 E5基因全序列.结论成功构建了pET32/E5原核和pcDNA3.1(+)/E5真核表达质粒,HPV16E5蛋白在大肠杆菌和NIH3T3细胞中的稳定表达,这些结果为进一步深入研究HPV16 E5蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用奠定了坚实基础.
作者：施桥发；魏晓丽；李虹；王保宁；张卫东；蒋忠华；曹康；李明远 刊期： 2006年第01期
目的探讨海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸微囊在胰岛细胞冷冻保存过程中的作用.方法将分离纯化后的大鼠胰岛细胞分为微囊化组和游离组.经冷冻保存1月后在RPMI 1640中培养过夜,分别测定两组的胰岛细胞回收率、胰岛细胞直径并进行胰岛素刺激释放试验.结果微囊组胰岛细胞回收率为98.2%±1.4%,较游离组71.6%±2.9%显著提高(P＜0.05).在高糖(16.7mmol/L)刺激下,微囊组胰岛素分泌量较游离组高(22.6±1.8mU/L vs 11.7±1.5mU/L,P＜0.05).在含有茶碱的高糖溶液中,微囊组的刺激指数为游离组的3倍.结论海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸微囊可显著提高胰岛细胞冷冻保存后的回收率,并改善胰岛细胞的功能.
作者：侯军；薛武军；田小辉；庞新路；藤焱；冯新顺 刊期： 2006年第01期
目的观察胸腺肽α1对气管切开的危重病人肺部感染的治疗作用.方法将被研究的42例病人随机分成2组,即治疗组与对照组,对照组常规治疗加安慰剂,治疗组常规治疗加胸腺肽α1,疗程为7 d.结果治疗组肺部感染率、二重感染率、混合感染率明显低于对照组;而且白细胞、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子、白细胞介素6下降程度亦比对照组显著,二者比较,均有显著差异(P＜0.01).结论胸腺肽α1对气管切开的危重病人肺部感染有防治作用,而且可降低白细胞、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子、白细胞介素6等炎症因子水平,提高患者的免疫力,改善患者的预后.
作者：黄登鹏；杨鸣；彭卫平；陈小设；陈仲清 刊期： 2006年第01期
目的评价颈动脉支架植入安全性和有效性.方法前瞻性观察70位中国人所接受的76次颈动脉内膜旋切术(CEA),对CAS的安全性及有效性做初步探讨.入选者均属高危患者,包括不稳定型心绞痛、同侧CEA史、对侧颈动脉狭窄、颈动脉放疗后狭窄及其他严重的合并症.患者于术前、术后及半年后随访时均接受独立的神经专科检查;于远期随访时复查脑血管造影.结果手术成功率为100%;术前平均狭窄程度达(82±18)%,术后狭窄程度下降至(5±10)%.所有患者共发生3次小卒中(5.7%),均无大卒中事件;住院期间及术后30 d内均无心肌梗死及死亡事件.平均随访期达(20±12)月;2例患者发生无症状颈动脉再狭窄;2例患者发生非Q波型心肌梗死;两例患者因非神经源性因素死亡;3例患者发生小卒中;远期随访未发现大卒中.结论在中国人群中,经皮颈动脉支架植入术是安全可行的,它的远期再狭窄率亦低.
作者：王挹青；何世华；王焱；郑剑涛；江宏飞；陈炳煌 刊期： 2006年第01期
目的观察新型合成三肽[Arg(NO3)-Lys(OCH3)-Arg(NO3)]对巨噬细胞株(RAW264.7)左旋-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响.方法培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5 mmol/L)加入脂多糖(LPS,1μg/L)随机分为3组(每组n=6),分别加入双蒸水、三肽(1×10-4mol/L)、NG甲基-L-精氨酸(L-NMMA,1×10 -4 mol/L),对照组只含L-Arg(n=6),作用24 h后,检测亚硝酸盐(NO2-)、3H-L-Arg转运量;培养的巨噬细胞[培养液中含L-Arg(0～2 mmol/L)]加入LPS(1μ/L)24 h后,检测NO2-;培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5mmol/L)加入LPS(1μg/L)后分别加三肽[(0～10)×10-4mol/L]24 h后,检测NO2-、3H-L-Arg转运量.结果LPS刺激细胞产生NO的量和L-Arg率转运分别为非刺激组的50倍和2.7倍,三肽(1×10-4mol/L)即可明显降低NO的生成及抑制L-Arg的转运(分别降低71%、67%),较L-NMMA(1×10.mol/L)作用要强(P＜0.05);NO的生成依赖于细胞外L-Arg,并成浓度依赖性,其米氏常数(Km):(0.162±0.015)mmol/L、大转运速率(Vmax):(91.2±2.3)μmol/(24 h·106cells);三肽成浓度依赖性的降低细胞L-Arg转运和NO的生成,半数有效抑制剂量(EC50)分别为0.21×10-4mol/L、1.27×10-4mol/L.结论LPS作用于巨噬细胞引起L-Arg转运增加;三肽通过抑制细胞L-Arg转运及与L-Arg竞争性结合一氧化氮合酶作用位点,影响NO的生成.
作者：王辉清；吴赛珠；阮云军；程宇宁；孙飞；容志毅；银孟卓 刊期： 2006年第01期
目的采用LuxS缺失突变株模型对B型链球菌中数量感应相关分子LuxS的功能及与其相关的自诱导因子-2数量感应通路进行研究,以探索其毒力调控机制.方法采用RT-PCR法、菌落印迹分析、生长曲线测定、cAMP因子测定等方法对该缺失突变菌株的表型特性进行了研究.后应用哈氏弧菌作为报告菌株,通过生物发光测定法分析了突变株对B型链球菌诱导报告菌株中的生物发光活性的影响.结果发现此缺失突变可导致B型链球菌中scpB基因表达的上调;与野生株相比,突变株的生物发光诱导活性比野生株降低了大约两倍.结论本研究结果证实了LuxS在GBS中AI-2数量感应通路中的重要性,并为GBS中毒力调控机制的进一步研究提供了新的线索.
作者：欧阳谦；马文丽；刘翠华；石嵘；郑文岭 刊期： 2006年第01期
目的检测112例冠心病患者ABCA1基因全部编码区的单核苷酸多态性(SNP).方法通过聚合酶链反应-单链构象多态性分析结合银染后胶回收、DNA测序和限制性内切酶酶切分析方法检测112例明确冠心病诊断患者的AB-CA1基因全部编码区50个外显子的SNP.结果我国冠心病病人群中存在着国内外均已报道的R219K和M883I两个位点SNP的改变,并在外显子7中发现了国内外均未见报道的A1092G新碱基位点的改变,并导致氨基酸改变为M233V,通过108例正常人限制性内切酶酶切分析方法证实其为SNP.结论我国冠心病病人群中不仅存在着已报道的R219K、M883I位点SNP,并首次发现存在新的M233V位点SNP.新SNP位点M233V型ABCA1基因可能增加冠心病的危险性,其功能学研究需进一步流行病学调查证实.
作者：王琦光；郭志刚；赖文岩；查政；刘亚洋；刘凌 刊期： 2006年第01期
目的测定9种药材中有机氯农药的残留量.方法以正已烷/丙酮(8/2)混合溶剂,在Florisil固相萃取柱上净化提取,采用毛细管气相色谱柱分离样品和电子捕获检测器进行检测.结果11种农药能较好地分离,峰面积与其浓度均具有良好线性,两个水平的加样回收率分别为79.9%～89.0%和86.3%～104.8%,相对标准偏差为1.8%～7.1%,检测限为2g/kg;广藿香和三七中有机氯农药残留超过国家标准.结论所建GC-EC'D法能满足药材中有机氯农药残留量的检测,药典应制订药材中农药残留量的标准.
作者：杨雪梅；钟怀宁；严佚琛；易容；徐江平 刊期： 2006年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
