学术投稿

L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的表达

欧妍;牛小麟;任付先;张颖;凌凤东

关键词:L型钙通道α1c亚单位, 免疫荧光, 免疫印迹
摘要:目的研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况.方法制备成年大鼠心脏冰冻切片,结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸.采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达,用共聚焦显微镜观察其表达部位,通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析.结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状,主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构,其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室,房室结和结后延伸之间无显著性差异(P>0.05),其余两两相比均有显著差异(P<0.05),其中右心房、右心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸(P<0.01).各部位在相对分子质量200 000左右可见一特异性蛋白条带.对蛋白条带进行灰度值分析,结果与免疫荧光相一致.结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛,在不同部位表达量不同,在工作肌组织的表达量明显高于传导组织,提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 高效液相色谱法制备连翘酯苷对照品

    目的研究从中药材连翘中分离制备连翘酯苷对照品的高效液相色谱方法.方法连翘药材经水提醇沉淀后,经聚酰胺柱层析得粗提物,粗提物用RP-HPLC法分离制备连翘酯苷单体.结果分离制备的连翘酯苷纯度可达98%.结论该方法上样量大,操作简单,提取物纯度高,可用于连翘酯苷对照品的大量制备.

    作者:吴昭晖;谭晓梅;罗佳波;贺丰 刊期: 2005年第11期

  • 活性氧促使L6成肌细胞的分化

    目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响.方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平.结果在较短的处理时间内(1 h),低浓度的活性氧(50 μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12 h后,50和150 μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化.结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子.

    作者:邱小忠;余磊;廖华;张黎声;秦建强;杨俊;欧阳钧 刊期: 2005年第11期

  • 立体定向放射外科治疗脑转移瘤预后因素分析

    目的评价立体定向放射外科(SRS)治疗脑转移瘤的效果及预后因素.方法回顾性分析1994~2002年在巴黎Tenon医院放疗科行SRS(X线刀)治疗的脑转移患者102例,包括单发者78例,多发者24例,102例患者共有转移灶131个,转移灶大直径≤ 4 cm.其中18位患者同时接受全脑放疗(WBRT),93例患者120个转移灶有影像学随访.计算患者的生存期及局控率,并对潜在预后因素分别进行单因素和多因素分析.结果总体局控率和1年局控率分别为91.7%和85.3%,102例患者的中位生存期为11个月.单因素分析表明只有转移灶体积是影响局控率的预后因素;KPS>70、年龄≤ 60、无颅外其他器官转移以及SRS前行全脑照射是影响生存期的预后因素.多因素分析表明仅KPS评分为生存独立预后因素.结论SRS是脑转移的有效治疗方式,多种因素影响其预后.

    作者:徐本华;韩露;林少俊;Touboul E 刊期: 2005年第11期

  • L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的表达

    目的研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况.方法制备成年大鼠心脏冰冻切片,结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸.采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达,用共聚焦显微镜观察其表达部位,通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析.结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状,主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构,其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室,房室结和结后延伸之间无显著性差异(P>0.05),其余两两相比均有显著差异(P<0.05),其中右心房、右心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸(P<0.01).各部位在相对分子质量200 000左右可见一特异性蛋白条带.对蛋白条带进行灰度值分析,结果与免疫荧光相一致.结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛,在不同部位表达量不同,在工作肌组织的表达量明显高于传导组织,提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.

    作者:欧妍;牛小麟;任付先;张颖;凌凤东 刊期: 2005年第11期

  • 血钙水平与肾癌肿瘤大小、分期的相关性分析

    目的分析肾细胞癌患者血钙水平和肿瘤大小与分期的相关性,从而进一步发现与病情相关的规律和了解病情.方法按照血钙水平将肿瘤大小/分期相应地分3组,即降低、正常和升高各3组.利用SPSSl0.0软件,对3组不同的肿瘤大小/分期病例进行差异性分析和相关性研究.结果3组不同的肿瘤大小差异性分析(Kruskal-wallis H)显示,x2=4.768,df=2,P=0.092;Spearman相关分析显示相关系数为-0.166,p=0.029.3组不同的肿瘤分期差异性分析(Kruskal-WallisH)显示,x2=4.277,df=2,P=0.118;Spearman相关系数为-0.157,P=0.039.结论3组不同的肿瘤大小之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤大小间存在负相关;3组不同的肿瘤分期之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤分期间存在负相关.

    作者:白寒;郑少斌;吴京;刘德忠 刊期: 2005年第11期

  • 常用剂量苯那普利和缬沙坦联合治疗充血性心力衰竭的临床观察

    目的探讨苯那普利、缬沙坦治疗充血性心力衰竭的疗效.方法203例充血性心力衰竭患者在应用洋地黄、利尿剂、β受体阻滞剂治疗的基础上,随机分为A组(n=70):口服苯那普利20 mg/d;B组(n=70):口服苯那普利10 mg+缬沙坦80 mg/d;C组(n=65):口服缬沙坦80 mg/d.治疗前、后分别进行心功能(NYHA分级)评估及行超声心动图检查.结果治疗3月后,B组有效率略优于A组(P>0.05),但均优于C组(P<0.05).左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左心室射血分数均有显著改善(P<0.01).左室舒张末期内径、左室收缩末期内径及心功能改善总有效率B组比A组略优(P>0.05),但两组较C组显著(P<0.05).不良反应发生率B、C组均低于A组(P<0.05).结论常用剂量的缬沙坦与苯那普利联合治疗充血性心力衰竭优于单用苯那普利或单用缬沙坦.

    作者:叶健烽;刘冬生 刊期: 2005年第11期

  • 负载BMP的新型组织工程骨的构建及骨缺损修复实验

    目的探讨以聚乳乙醇酸(poly-(D,L-lactide-co-glycolide),PLGA)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨髓基质干细胞(BMSCs)构建成新型组织工程骨并观察其在动物体内的成骨能力.方法制作新西兰大白兔右桡骨中段15mm骨缺损实验模型,随机分为实验组、对照组和空白组,实验组植入同时负载5 mg BMP及1×106个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、对照组植入负载1×106个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、空白组仅植入PLGA.术后对动物进行大体观察、摄X线片观察各组不同时相骨缺损修复情况、比较不同时相的骨缺损区X线阻射密度、并于术后第4、8、12周取出骨缺损区标本进行大体观察和组织学切片观察,图像分析骨小梁的生成数量.结果实验组在12周内骨缺损完全修复,且同时期内新生骨的数量和质量显著优于对照组,空白材料组骨缺损主要由纤维结缔组织填充.结论利用含BMP的PLGA支架与BMSCs复合构建的新型组织工程骨具有良好的骨缺损修复能力.

    作者:胡稷杰;金丹;全大萍;钟世镇;陈炅昊;魏宽海;赵洁;裴国献 刊期: 2005年第11期

  • 缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定

    目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株.方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记.以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85.以EAggEC O42为出发菌株,构建缺失irp8~irp5约24 kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85.结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因.PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株.结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础.

    作者:胡静;俞守义;阚飙;刘志华 刊期: 2005年第11期

  • 全反式视黄酸对新生大鼠纹状体神经干细胞向神经元样细胞分化的作用

    目的观察全反式视黄酸(atRA)体外对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用及其可能的分子机制.方法分离培养新生大鼠纹状体NSCs;以免疫组织化学染色观察不同浓度atRA对NSCs分化的影响;RT-PCR分析视黄酸受体表达情况.结果atRA诱导NSCs向神经元方向分化,其作用在一定范围内呈剂量依赖性,诱导剂量以1.0 μmol/L较为适宜.NSCs的RARβ基因的表达对atRA存在剂量依赖性和时间依赖性.结论atRA诱导NSCs向神经元方向分化,此作用与atRA上调细胞的RARβ基因转录水平有关.

    作者:邓红;邹飞;罗海吉 刊期: 2005年第11期

  • 双重滤过血浆成分分离法用于ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植

    目的观察双重滤过血浆成分分离法在ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植中的疗效.方法采用双重滤过血浆成分分离法去除体内血型抗体,预防5例ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植并发溶血反应和纯红再障.结果受者一次性双重滤过后,全部患者血型抗体均≦1:16,输注血型主要不合骨髓过程中仅1例发生轻度短暂急性溶血反应,无一例发生迟发性溶血反应和纯红再障,全部植入成功.结论双重滤过血浆成分分离法可有效预防ABO血型主要不合骨髓移植并发溶血反应和纯红再障.

    作者:黄韬;孙竞;刘俊;刘启发;孟凡义 刊期: 2005年第11期

  • 一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes真核表达质粒的构建及功能

    目的构建一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes的真核表达质粒,并对这种免疫毒素的功能进行初步研究.方法通过RT-PCR的方法,从小鼠肝脏中获得Rantes基因;将Rantes基因插入到含有DT390片段的真核质粒SRα中,构建成重组质粒;重组质粒转入大肠杆菌JM109,筛选出含有正确插入片段的克隆;限制性内切酶酶切图谱分析重组质粒,并进行DNA序列分析;用脂质体介导法转染NIH3T3细胞,免疫荧光检测重组质粒的表达情况;MTT法测定DT390-Rantes的表达活性.结果经过酶切分析及DNA测序证实,Rantes基因正确插入到真核表达质粒SRα中,并在NIH3T3细胞中表达;MTT法证实,重组免疫毒素DT390-Rantes能在体外杀伤活化的T细胞.结论成功地构建了一种新型重组免疫毒素真核表达质粒DT390-Rantes-SRα,该质粒可在真核细胞中瞬时表达,其转染上清对活化的T细胞具有杀伤作用.

    作者:贾怡;李虹;陈文捷;吕梅励;李明远;蒋忠华;张林 刊期: 2005年第11期

  • 抗人ζ珠蛋白链不同表位单克隆抗体的制备和鉴定

    目的制备和鉴定抗ζ珠蛋白链单克隆抗体.方法用纯化的重组ζ珠蛋白链免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1细胞融合制备杂交瘤,经重组的ζ珠蛋白链筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得3株杂交瘤细胞1A12、3H9及4D11,其分泌单抗的亚型分别为IgG2a、IgGl和IgG1;双抗体夹心ELISA结果证明3株单抗均可结合重组的及东南亚(--SEA)缺失型地中海贫血基因携带者血中的ζ珠蛋白链,且其中1A12和3H9识别的位点为不同表位.这三株抗体将为筛选地中海贫血基因携带者的免疫检测提供有力工具.

    作者:唐磊;朱平;罗琛;徐湘民;富宁 刊期: 2005年第11期

  • 关于编辑出版医学论著书稿征集函

    作者: 刊期: 2005年第11期

  • 经皮左锁骨下动脉导管药盒系统置入术+药物灌注治疗糖尿病足1例报道

    糖尿病足是导致糖尿病患者截肢、降低生活质量、甚至危及生命的重要原因.血管病变是糖尿病足发病的重要原因之一,患者的下肢动脉严重狭窄甚至闭塞,临床上往往较难处理.我们采用经皮锁骨下动脉导管药盒系统(PCS)置入术+药物灌注治疗糖尿病足1例,收效明显,报道如下.

    作者:关美萍;沈洁;李晨钟;谢翠华;薛耀明 刊期: 2005年第11期

  • 非小细胞肺癌脑转移低分割放疗疗效分析

    目的评价非小细胞肺癌脑转移放射治疗中全脑照射的作用,分析生存预后因素.方法对93例非小细胞肺癌脑转移患者进行放射治疗,其中68例先行全脑照射(全脑照射组),然后行局部三维适形低分割放疗;25例只行三维适形低分割放疗(低分割组).用Kaplan-meier法统计生存率及局部控制率,以Cox比例风险模型分析影响患者生存的预后因素.结果全脑照射组中位生存时间14个月,1、2年生存率分别为50%、27%;低分割组中位生存时间12个月,1、2年生存率分别为45%、15%;两组无显著差异性(log-rank,P=0.502).全脑照射组与低分割组1年颅脑局部控制率分别为90%、70%,两组有显著差异(P=0.028).多因素分析提示颅外活动性病灶(P=0.002)、KPS评分(P=0.034)是影响生存的独立预后因素.结论非小细胞肺癌脑转移三维适形放疗联合全脑照射无生存得益,而有助于提高局部控制率.

    作者:邱幸生;陈龙华;陈永清 刊期: 2005年第11期

  • 无肝素冠状动脉造影术1400例临床分析

    目的评价无肝素冠状动脉造影术的可行性及安全性.方法总结分析1400例经股动脉行无肝素冠状动脉造影术的患者的临床资料并与354例普通肝素冠状动脉造影术患者进行对照.结果99.3%的病例行选择性冠脉造影成功,手术时间(从穿刺动脉到造影结束)8min~1 h,平均(17.9±11.3)min.冠心病阳性率为72.2%,多支血管病变占49.8%.皮下血肿的发生率为1.8%,假性动脉瘤和动静脉瘘发生率为0.07%,腹膜后血肿、急性心肌梗死、脑卒中及其他体循环栓塞事件发生率为0.结论无肝素冠状动脉造影术不仅安全且具有外周血管并发症少、痛苦小、住院时间短等优点.

    作者:王挹青;王焱;蔡彬妮;郑剑涛;刘文辉;陈水龙;董俊泽;何世华;温红梅;肖彩滨 刊期: 2005年第11期

  • 针刺百会、水沟、神门穴对血管性痴呆患者豆状核葡萄糖代谢的影响

    目的观察针刺后百会、水沟、神门血管性痴呆(VD)患者豆状核葡萄糖代谢的变化,探讨该穴组对豆状核功能的影响.方法将10例VD病人随机均分为2组.对照组治以针对偏瘫的常规穴位(手足三阳经为主),治疗组加用百会、水沟、神门.治疗前后所有病人均接受正电子发射型计算机断层显像(PET)检测葡萄糖代谢水平.以VD患者双侧豆状核为感兴趣区,检测其治疗前后葡萄糖代谢水平并进行比较.结果治疗组健脑豆状核葡萄糖代谢有显著提高;对照组双侧豆状核葡萄糖代谢均无明显变化.结论针刺百会、水沟、神门治疗VD的机制与其提高豆状核葡萄糖代谢有关.

    作者:黄泳;陈静;赖新生;唐安戊;李东江 刊期: 2005年第11期

  • 七种常见MBL基因单倍型标准质粒的构建

    目的构建7种常见的MBL基因单倍型标准质粒.方法以已确认MBL基因单倍型及基因型的DNA样本为模板,利用SSP-PCR技术扩增出包含MBL基因启动子区及第一外显子的单倍型片段并将其克隆入T载体;用定点突变技术分别将其第一外显子52和57位密码相应的碱基突变;采用PCR和测序进行鉴定.结果以单倍型及基因型已确认的DNA样本为模板,采用SSP-PCR和分子克隆技术获得单倍型HYPA、LXPA、LYQA、LYPA和LYPB重组质粒;以单倍型HYPA及LYQA重组质粒为模板,采用定点突变技术获得单倍型HYPD及LYQC标准质粒.结论构建成功常见的7种MBL基因单倍型标准质粒,为采用SSP-PCR、Real-time PCR等技术分析MBL基因相应的SNP及其单倍型与基因型提供了标准对照.

    作者:余新沛;陈月;张丽芸;卢晓;陈政良 刊期: 2005年第11期

  • 肾移植术后新尿路梗阻的临床处理(附16例报告)

    目的探讨肾移植术后新尿路梗阻的诊断及处理对策.方法回顾总结1983-2004年我院485例肾移植病人中的16例移植后新尿路梗阻患者,其中移植肾输尿管结石5例,采用输尿管镜下气压弹道碎石术;输尿管膀胱吻合口狭窄6例,3例开放手术,3例经皮移植肾穿刺高压气囊扩张后放置双J管;移植肾肾盂输尿管连接部狭窄梗阻2例,采用输尿管镜下气囊扩张,放置记忆合金支架;输尿管排斥全程坏死1例,采用带血管蒂回肠段代移植坏死输尿管;移植肾周感染、输尿管末段坏死2例,采用移植肾近端新鲜存活输尿管与自体输尿管端侧吻合.结果16例肾移植术后新尿路梗阻患者中1例开放手术大出血切除移植肾.其余各例患者经腔镜处理及开放手术均成功挽救移植肾功能.再次手术后随访0.5~3年,血肌酐90~150 μmol/L,B超未见移植肾扩张积水加重.结论新上尿路梗阻是肾移植术后常见亦是较为棘手的外科并发症,处理宜遵循先腔内后开放的思路针对引起梗阻的具体原因部位采用相应的术式.

    作者:聂海波;何恢绪;李逊;邓志雄;朱云松;胡卫列;吕军;邱晓佛;张小明 刊期: 2005年第11期

  • 白假丝酵母ERG11基因突变分析

    目的探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系.方法选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11基因序列进行PCR扩增,PCR产物直接DNA序列测定,后应用BLAST和ClustalW软件对测序结果进行比较.结果13株白假丝酵母菌的ERG11基因序列(以已知序列第1个ATG起始密码的A作为第1个记数单位)共有21个位点发生突变,其中17个同义突变位点和4个错义突变位点;在第348 bp位点和第383 bp位点,耐药菌株和药物敏感株均可发生D116E和K128T变异;在靶酶活性中心血色素结合区和疏水端螺旋区的对应基因片段,耐药株在第1309 bp位点可致V437I变化;在第1320 bp位点耐药菌株发生碱基突变,形成A、C基因杂合子,有可能导致N440K变化.结论(1)ERG11基因的D116E和K128T位点变异可能与白假丝酵母菌耐药无关;(2)ERG11基因的V437I和N440K位点的改变,可能与耐药形成有关.

    作者:王应斌;王宏;郭辉玉;赵永忠;罗深秋 刊期: 2005年第11期

南方医科大学学报杂志

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