芮勇宇；阚飙；高守一；刘延清；祁国明
目的探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系.方法选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11基因序列进行PCR扩增,PCR产物直接DNA序列测定,后应用BLAST和ClustalW软件对测序结果进行比较.结果13株白假丝酵母菌的ERG11基因序列(以已知序列第1个ATG起始密码的A作为第1个记数单位)共有21个位点发生突变,其中17个同义突变位点和4个错义突变位点;在第348 bp位点和第383 bp位点,耐药菌株和药物敏感株均可发生D116E和K128T变异;在靶酶活性中心血色素结合区和疏水端螺旋区的对应基因片段,耐药株在第1309 bp位点可致V437I变化;在第1320 bp位点耐药菌株发生碱基突变,形成A、C基因杂合子,有可能导致N440K变化.结论(1)ERG11基因的D116E和K128T位点变异可能与白假丝酵母菌耐药无关;(2)ERG11基因的V437I和N440K位点的改变,可能与耐药形成有关.
作者：王应斌；王宏；郭辉玉；赵永忠；罗深秋 刊期： 2005年第11期
目的分析肾细胞癌患者血钙水平和肿瘤大小与分期的相关性,从而进一步发现与病情相关的规律和了解病情.方法按照血钙水平将肿瘤大小/分期相应地分3组,即降低、正常和升高各3组.利用SPSSl0.0软件,对3组不同的肿瘤大小/分期病例进行差异性分析和相关性研究.结果3组不同的肿瘤大小差异性分析(Kruskal-wallis H)显示,x2=4.768,df=2,P=0.092;Spearman相关分析显示相关系数为-0.166,p=0.029.3组不同的肿瘤分期差异性分析(Kruskal-WallisH)显示,x2=4.277,df=2,P=0.118;Spearman相关系数为-0.157,P=0.039.结论3组不同的肿瘤大小之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤大小间存在负相关;3组不同的肿瘤分期之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤分期间存在负相关.
作者：白寒；郑少斌；吴京；刘德忠 刊期： 2005年第11期
目的研究从中药材连翘中分离制备连翘酯苷对照品的高效液相色谱方法.方法连翘药材经水提醇沉淀后,经聚酰胺柱层析得粗提物,粗提物用RP-HPLC法分离制备连翘酯苷单体.结果分离制备的连翘酯苷纯度可达98%.结论该方法上样量大,操作简单,提取物纯度高,可用于连翘酯苷对照品的大量制备.
作者：吴昭晖；谭晓梅；罗佳波；贺丰 刊期： 2005年第11期
目的探讨风湿病合并肿瘤的发病规律和临床特点.方法总结26例风湿病伴发肿瘤的发病、诊治经过及转归.结果26例风湿病患者合并肿瘤的种类呈多样性.12例在风湿病的活动期发现,呈晚期表现,14例在例行系统检查中发现,临床可出现风湿病难以解释的症状和体征,8例患者肿瘤酶学检查阳性.结论风湿病患者肿瘤的发病率明显高于正常人群,因疾病本身表现的多样性,肿瘤的初期症状常常被掩盖,二者之间的发病机制尚不清,部分患者可能有风湿病与肿瘤的交叉抗原反应,酶学检查对肿瘤的诊断价值不大,长期应用免疫抑制剂应注意其本身的致癌性.
作者：刘布骏；顾菲 刊期： 2005年第11期
目的观察干扰素α对慢性乙型肝炎(乙肝)患者肝组织纤维化程度的影响.方法选取病理诊断为S3～S4期的16例乙肝患者,干扰素治疗期前后3次进行肝组织炎症程度及纤维化程度病理分析,免疫组化检测肝组织TGF-β1蛋白、Fas及HBcAg抗原,TUNEL方法观察肝细胞凋亡情况.同期检测血清肝纤维化指标及肝功能.结果在S3～S4期,患者Fas、TGF-β1显著表达,肝细胞的DNA损伤严重.干扰素α治疗3个月后Fas抗原、TGF-β1表达程度显著下降(P＜0.05);细胞凋亡程度减轻(P＜0.05);肝组织HBcAg表达程度无显著改变;连续6～9个月治疗后,肝组织炎症及纤维化程度逐渐改善(P＜0.05),血清肝纤维化指标及肝功能水平与治疗前差异显著.结论干扰素α能显著改善S3～S4期患者肝细胞凋亡和肝组织纤维化程度,但需持续治疗.
作者：于宏；曹治宸；耿建英；贺占国；王政民；孙小云；王中华 刊期： 2005年第11期
吸食毒品海洛因引起脑部损害已受到人们的关注,近年来国内也已陆续报道[1,2],现将我们诊断的3例报道如下,并结合临床和文献进行分析,进一步认识吸食海洛因引起的中毒性脑病(THE)的临床表现以及磁共振成像的特征.
作者：徐毅；谷洪 刊期： 2005年第11期
目的探讨高血压患者生存质量(QOL).方法采用世界卫生组织QOL(WHOQOL)-100量表,对319例高血压患者和正常对照人群进行生存质量测量,比较病例组与对照组的生存质量差异.结果高血压患者生存质量在身体机能、心理状况、独立能力、社会关系、生活环境、个人信仰各领域及QOL-100总评分方面皆显著低于正常对照组人群(P＜0.01);调整了其他疾病的混杂作用后,除个人信仰领域外,高血压患者其他各领域及QOL-100总评分方面仍皆低于对照组(P＜0.01).Hotelling T2检验及多元方差分析显示,高血压患者与对照组人群的生存质量从6个领域综合来看,具有显著性差异(P＜0.01).结论在有效降压的同时,积极改善患者的生存质量是临床抗高血压治疗的基本目标.
作者：陈英；王声涌；池桂波；喻侠华；洪城；李安荣 刊期： 2005年第11期
目的比较短期化疗前后兔腹主动脉顺应性的变化,了解化疗药物对血管力学特性的影响.方法将15只新西兰兔随机等分为5组,其中4组接受1周期化疗(卡铂100mg/m2,第1、3、5天;异环磷酰胺1 500mg/m2,第1、3、5天;足叶乙甙100 mg/m2,第1～3天),另1组为对照组.分别测量各组兔腹主动脉比顺应性(化疗组分为化疗后第2、7、14、21天进行观察).结果短期化疗前后兔腹主动脉顺应性显著变化,化疗后第14天下降明显,而第21天则基本恢复.结论短期化疗能够降低兔腹主动脉比顺应性,降低的程度与化疗后时间相关,并具有可逆行性.
作者：沈策；刘皓；左强；张军一；杨金星 刊期： 2005年第11期
目的观察全反式视黄酸(atRA)体外对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用及其可能的分子机制.方法分离培养新生大鼠纹状体NSCs;以免疫组织化学染色观察不同浓度atRA对NSCs分化的影响;RT-PCR分析视黄酸受体表达情况.结果atRA诱导NSCs向神经元方向分化,其作用在一定范围内呈剂量依赖性,诱导剂量以1.0 μmol/L较为适宜.NSCs的RARβ基因的表达对atRA存在剂量依赖性和时间依赖性.结论atRA诱导NSCs向神经元方向分化,此作用与atRA上调细胞的RARβ基因转录水平有关.
作者：邓红；邹飞；罗海吉 刊期： 2005年第11期
目的探讨棘突截骨椎管成形椎弓根钉内固定术在治疗矢状位脊柱畸形较轻型退行性脊柱侧弯并腰椎管狭窄的临床效果.方法我院1999～2003年经手术治疗合并腰椎管狭窄的中老年退行性脊柱侧弯44例,其中单节段狭窄25例、双节段19例.男18例,女26例,年龄47～72岁,平均63岁.采用后正中纵切口,包含融合节段上下各一椎体,行单侧椎板开窗减压7例、单节段全椎板切除18例、双节段全椎板切除19例,将减压节段的棘突从基底截取,去除一面皮质行单面皮质保留横行覆盖骨窗,如骨窗较大可取相邻节段的棘突,再行椎板Moe融合矫形内固定(Isola 17例、Diapason 27例).术后进行Oswestry疗效评分与影像学观察.结果随访1～4年,平均3年,术后1年随访33例,优良率93.9%;术后2年随访27例,优良率为88.9%.术后2年CT扫描未见椎管内疤痕形成,椎管直径明显增加;覆盖的棘突融合时间3～6个月,平均4个月,融合率为92.6%.2例固定节段上一椎体压缩性骨折,其中1例椎弓根钉松动;1例椎弓根钉断裂无症状,骨窗已融合;1例伤口延迟愈合.无复发性椎管狭窄、腰椎滑脱及脊柱失代偿、假关节等并发症.结论棘突截骨椎管成形内固定术,能在减压固定的基础上减少椎管内疤痕形成,防止腰椎管狭窄复发;提高覆盖骨融合率并缩短融合时间,近中期效果好.是矢状位脊柱畸形较轻型退行性脊柱侧弯并腰椎管狭窄症满意的治疗方法.
作者：曾明；赵新建；张毅；黄星球；蔡春水 刊期： 2005年第11期
目的探讨苯那普利、缬沙坦治疗充血性心力衰竭的疗效.方法203例充血性心力衰竭患者在应用洋地黄、利尿剂、β受体阻滞剂治疗的基础上,随机分为A组(n=70):口服苯那普利20 mg/d;B组(n=70):口服苯那普利10 mg+缬沙坦80 mg/d;C组(n=65):口服缬沙坦80 mg/d.治疗前、后分别进行心功能(NYHA分级)评估及行超声心动图检查.结果治疗3月后,B组有效率略优于A组(P＞0.05),但均优于C组(P＜0.05).左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左心室射血分数均有显著改善(P＜0.01).左室舒张末期内径、左室收缩末期内径及心功能改善总有效率B组比A组略优(P＞0.05),但两组较C组显著(P＜0.05).不良反应发生率B、C组均低于A组(P＜0.05).结论常用剂量的缬沙坦与苯那普利联合治疗充血性心力衰竭优于单用苯那普利或单用缬沙坦.
作者：叶健烽；刘冬生 刊期： 2005年第11期
目的观察碳离子局部照射对荷瘤小鼠存活时间和血常规的影响.方法将30只荷瘤小鼠随机均分为3组(0、1、24Gy组),用碳离子单次局部照射小鼠右后肢,分别在第0、7、14天计数外周血白细胞和血小板数,并记录小鼠生存时间.结果各组动物存活时间无显著性差异.照射后白细胞数都逐步升高,但与对照组(0 Gy组)相比无显著性差异;除24Gy组第14天时血小板数显著升高外(P=0.032,F=4.062),照射后各组血小板数无明显变化.结论碳离子局部照射小鼠右后肢对动物存活天数和血常规无显著影响.
作者：丁小凡；陈龙华；李文建；李德杏 刊期： 2005年第11期
目的构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α的两种突变体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1αt-564Ala-803Ala,并检测它们在人肺微血管内皮细胞(HMVECs)中的表达.方法用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1α的HIF-1α第564位脯氨酸(Pro)密码子CCC突变为丙氨酸(Ala)密码子GCC,构建成单个突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala.在第一次突变的基础上,仍然用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1αt-564A1a的HIF-1α-564Ala第803位天冬酰胺(Asn)密码子ATT突变为丙氨酸(Ala)密码子GCT,构建成双个点突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala.将3种HIF-1α表达载体用脂质体法分别转入HMVECs,以RT-PCR、免疫荧光法和Western blotting法分别对转染细胞进行表达分析.结果测序证实,定点突变成功,构建成重组真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala;3种载体均能表达相应的蛋白和mRNA,但转化突变HIF-1α表达载体的细胞蛋白量比空白细胞和转化无突变HIF-1α载体的细胞显著增加.结论成功构建能够在HMVECs中表达的单个和双个点突变的HIF-1α基因的真核表达载体.
作者：傅锐斌；吴平生；宋云峰；邱建；戴铁英；李建华；修建成 刊期： 2005年第11期
作者： 刊期： 2005年第11期
目的研究KBV200多药耐药细胞蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨PKC的表达上调与肿瘤多药耐药的关系.方法KBV200细胞分对照组和佛波酯(PMA)组,PMA组应用200 nmol/L的PMA预孵育细胞,而对照组不用.32P掺入法测定多药耐药KBV200细胞株的PKC活性,通过Western blotting检测PKC各亚型表达和亚细胞分布.用MTT法检测细胞耐药性.结果PMA预孵育可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性,降低浆组分PKC活性(p＜0.01).PMA预孵育使膜组分PKCα表达增加,浆组分PKCα表达降低,膜组分PKCβ无明显变化,浆组分PKCβ的表达稍增强.PMA可升高长春新碱、阿霉素对KBV200细胞的IC50值(P＜0.01).结论PMA使KBV200细胞耐药性增加,可能与PKC表达上调有关.
作者：袁亚维；孙爱民；李传刚 刊期： 2005年第11期
目的对霍乱弧菌JS94484株CTXEVCψ和nct-CTXnewψ基因组变异区进行序列分析.方法采用聚合酶链反应、基因测序及序列分析.结果JS94484株CTXEVCψ基因组的ig1、rstR、ig2和ctxAB基因与EVC标准株N16961的高度同源.JS94484株nct-CTXnewψ基因组的ig1、rstR和ig2基因,与目前发现的3种类型的同源性均较低,趋异性均较高.CTXEVCψ和nct-CTXnewψ基因组zot基因末端约60 bp的基因序列差别较大,推测的氨基酸序列差别也较大.JS94484株的tcpA基因序列与EVC标准株N16961的完全一致.结论霍乱弧菌nct-CTXnewψ基因组的ig1、rstR和ig2基因为新类型,基因功能有待于进一步研究.
作者：芮勇宇；阚飙；高守一；刘延清；祁国明 刊期： 2005年第11期
目的探讨胆红素氧化酶中配位氨基酸对保持酶活性的重要性和酶促反应的动力学,并评价胆红素氧化酶突变体能否作为一种更好的高胆红素血症的诊断试剂.方法胆红素氧化酶突变体I402G和C457S通过聚合酶链反应获得,并经氨基酸序列测定加以证实.钌搀杂的突变体C457S通过变异体与钌配合物的直接反应得到.研究了重组胆红素氧化酶及其变异体的光谱学性质,以及重组胆红素氧化酶和变异体I402G的酶促反应的动力学.结果变异体I402G和C457S被成功的表达和纯化.变异体I402G表现出较低的活性(1.67 U/mg),C457S则完全失去了活性(0 U/mg),但是钌搀杂的突变体C457S表现出较高的活性(5.50和6.42 U/mg).光谱学实验结果表明I402G突变体在较低的pH时第一类铜呈+1价态,即还原态;突变体C457S中失去第一类铜,使得突变体无法保持完整的活性中心,从而失去了酶活性.酶促反应的动力学实验显示重组胆红素氧化酶和变异体I402G动力学参数kcot分别为235.8 min-1和6.9 min-1,说明重组胆红素氧化酶具有很高的催化能力.结论配位的氨基酸对保持重组胆红素氧化酶及其变异体活性中心的完整性和酶活性具有重要的意义.重组胆红素氧化酶远比突变体I402G和C457S的活性高,说明突变体I402G和C457S不适合作为诊断试剂.钌搀杂有助于在突变体C457S中形成新的完整的活性中心,从而产生酶活性.
作者：张雷；张晓；罗智颖 刊期： 2005年第11期
目的探讨补体成分3(C3)在迟发型超敏反应(DTH)中的作用.方法用卵白蛋白(OVA)诱导C3基因敲除(C3-/-)和野生型(C3+/+)小鼠足垫部位的DTH,测量足垫厚度的变化,并对反应部位组织进行HE和免疫组化染色检测.分离小鼠脾脏T淋巴细胞,用巨噬细胞作为抗原提呈细胞,在体外分别用丝裂原和特异性抗原刺激,用3H-TdR掺入法评价T淋巴细胞的增殖活性.结果OVA诱导足垫DTH后,C3-/-小鼠足垫厚度和局部浸润单个核细胞的数量都显著低于C3+/+小鼠的,其中浸润的单个核细胞主要为CD4+T淋巴细胞.2种小鼠的T淋巴细胞对丝裂原刺激的反应相似,而已致敏C3-/-小鼠脾脏T细胞对特异性抗原再次刺激后的增殖反应显著低于C3+/+小鼠.结论C3缺陷明显影响DTH应答,提示C3在DTH中起了重要作用.
作者：裘毅刚；陈月；张丽芸；陈政良 刊期： 2005年第11期
目的构建一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes的真核表达质粒,并对这种免疫毒素的功能进行初步研究.方法通过RT-PCR的方法,从小鼠肝脏中获得Rantes基因;将Rantes基因插入到含有DT390片段的真核质粒SRα中,构建成重组质粒;重组质粒转入大肠杆菌JM109,筛选出含有正确插入片段的克隆;限制性内切酶酶切图谱分析重组质粒,并进行DNA序列分析;用脂质体介导法转染NIH3T3细胞,免疫荧光检测重组质粒的表达情况;MTT法测定DT390-Rantes的表达活性.结果经过酶切分析及DNA测序证实,Rantes基因正确插入到真核表达质粒SRα中,并在NIH3T3细胞中表达;MTT法证实,重组免疫毒素DT390-Rantes能在体外杀伤活化的T细胞.结论成功地构建了一种新型重组免疫毒素真核表达质粒DT390-Rantes-SRα,该质粒可在真核细胞中瞬时表达,其转染上清对活化的T细胞具有杀伤作用.
作者：贾怡；李虹；陈文捷；吕梅励；李明远；蒋忠华；张林 刊期： 2005年第11期
目的探讨以聚乳乙醇酸(poly-(D,L-lactide-co-glycolide),PLGA)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨髓基质干细胞(BMSCs)构建成新型组织工程骨并观察其在动物体内的成骨能力.方法制作新西兰大白兔右桡骨中段15mm骨缺损实验模型,随机分为实验组、对照组和空白组,实验组植入同时负载5 mg BMP及1×106个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、对照组植入负载1×106个已向成骨细胞诱导的BMSCs的PLGA、空白组仅植入PLGA.术后对动物进行大体观察、摄X线片观察各组不同时相骨缺损修复情况、比较不同时相的骨缺损区X线阻射密度、并于术后第4、8、12周取出骨缺损区标本进行大体观察和组织学切片观察,图像分析骨小梁的生成数量.结果实验组在12周内骨缺损完全修复,且同时期内新生骨的数量和质量显著优于对照组,空白材料组骨缺损主要由纤维结缔组织填充.结论利用含BMP的PLGA支架与BMSCs复合构建的新型组织工程骨具有良好的骨缺损修复能力.
作者：胡稷杰；金丹；全大萍；钟世镇；陈炅昊；魏宽海；赵洁；裴国献 刊期： 2005年第11期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
