余新沛;陈月;张丽芸;卢晓;陈政良
目的探讨广东省医学期刊的网络化发展的现状及趋势.方法对国内外几种著名医学科技期刊数据库系统以及网络通用搜索引擎进行检索,调查分析了广东省医学期刊的网站建设情况,并对广东省生物医学核心期刊网站建设情况进行了电话咨询与核实.结果我省印刷版医学期刊实现网络化主要通过3种途径来完成,即利用主办单位网站或权威性科技网站以及建立独立网站.结论近几年我省网上医学期刊有了较大发展,通过中国期刊网,万方数据资源系统均可提供全文检索.不过,网络出版一般晚于纸版印刷,且独立网站建设尚未形成规模.其中<第一军医大学学报>、<癌症>被IM收录并完成了与PubMed之间的全文链接,其网络版摘要先于印刷版.
作者:段咏慧;王征爱 刊期: 2005年第11期
目的探讨补体成分3(C3)在迟发型超敏反应(DTH)中的作用.方法用卵白蛋白(OVA)诱导C3基因敲除(C3-/-)和野生型(C3+/+)小鼠足垫部位的DTH,测量足垫厚度的变化,并对反应部位组织进行HE和免疫组化染色检测.分离小鼠脾脏T淋巴细胞,用巨噬细胞作为抗原提呈细胞,在体外分别用丝裂原和特异性抗原刺激,用3H-TdR掺入法评价T淋巴细胞的增殖活性.结果OVA诱导足垫DTH后,C3-/-小鼠足垫厚度和局部浸润单个核细胞的数量都显著低于C3+/+小鼠的,其中浸润的单个核细胞主要为CD4+T淋巴细胞.2种小鼠的T淋巴细胞对丝裂原刺激的反应相似,而已致敏C3-/-小鼠脾脏T细胞对特异性抗原再次刺激后的增殖反应显著低于C3+/+小鼠.结论C3缺陷明显影响DTH应答,提示C3在DTH中起了重要作用.
作者:裘毅刚;陈月;张丽芸;陈政良 刊期: 2005年第11期
目的构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α的两种突变体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1αt-564Ala-803Ala,并检测它们在人肺微血管内皮细胞(HMVECs)中的表达.方法用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1α的HIF-1α第564位脯氨酸(Pro)密码子CCC突变为丙氨酸(Ala)密码子GCC,构建成单个突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala.在第一次突变的基础上,仍然用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1αt-564A1a的HIF-1α-564Ala第803位天冬酰胺(Asn)密码子ATT突变为丙氨酸(Ala)密码子GCT,构建成双个点突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala.将3种HIF-1α表达载体用脂质体法分别转入HMVECs,以RT-PCR、免疫荧光法和Western blotting法分别对转染细胞进行表达分析.结果测序证实,定点突变成功,构建成重组真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala;3种载体均能表达相应的蛋白和mRNA,但转化突变HIF-1α表达载体的细胞蛋白量比空白细胞和转化无突变HIF-1α载体的细胞显著增加.结论成功构建能够在HMVECs中表达的单个和双个点突变的HIF-1α基因的真核表达载体.
作者:傅锐斌;吴平生;宋云峰;邱建;戴铁英;李建华;修建成 刊期: 2005年第11期
吸食毒品海洛因引起脑部损害已受到人们的关注,近年来国内也已陆续报道[1,2],现将我们诊断的3例报道如下,并结合临床和文献进行分析,进一步认识吸食海洛因引起的中毒性脑病(THE)的临床表现以及磁共振成像的特征.
作者:徐毅;谷洪 刊期: 2005年第11期
目的研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况.方法制备成年大鼠心脏冰冻切片,结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸.采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达,用共聚焦显微镜观察其表达部位,通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析.结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状,主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构,其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室,房室结和结后延伸之间无显著性差异(P>0.05),其余两两相比均有显著差异(P<0.05),其中右心房、右心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸(P<0.01).各部位在相对分子质量200 000左右可见一特异性蛋白条带.对蛋白条带进行灰度值分析,结果与免疫荧光相一致.结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛,在不同部位表达量不同,在工作肌组织的表达量明显高于传导组织,提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.
作者:欧妍;牛小麟;任付先;张颖;凌凤东 刊期: 2005年第11期
目的评价立体定向放射外科(SRS)治疗脑转移瘤的效果及预后因素.方法回顾性分析1994~2002年在巴黎Tenon医院放疗科行SRS(X线刀)治疗的脑转移患者102例,包括单发者78例,多发者24例,102例患者共有转移灶131个,转移灶大直径≤ 4 cm.其中18位患者同时接受全脑放疗(WBRT),93例患者120个转移灶有影像学随访.计算患者的生存期及局控率,并对潜在预后因素分别进行单因素和多因素分析.结果总体局控率和1年局控率分别为91.7%和85.3%,102例患者的中位生存期为11个月.单因素分析表明只有转移灶体积是影响局控率的预后因素;KPS>70、年龄≤ 60、无颅外其他器官转移以及SRS前行全脑照射是影响生存期的预后因素.多因素分析表明仅KPS评分为生存独立预后因素.结论SRS是脑转移的有效治疗方式,多种因素影响其预后.
作者:徐本华;韩露;林少俊;Touboul E 刊期: 2005年第11期
目的研究溶血磷脂酸(LPA)受体在人卵巢癌细胞系中基因和蛋白的表达及意义.方法采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学链霉菌抗生物素蛋白·过氧化物酶连接(SP)法和Western blotting检测LPA1、LPA2和LPA3mRNA以及LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系3AO·SKOV3·OVCAR3中的表达水平.结果(1)RT-PCR结果显示,LPA1、LPA2和LPA3 mRNA在人卵巢癌细胞系中均有不同程度的表达;(2)免疫细胞化学和Western blotting结果显示,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系中均有表达.结论LPA1、LPA2和LPA3在人卵巢癌细胞系中广泛表达,LPA2和LPA3可能参与了卵巢癌的发生发展过程.
作者:汪萍;吴小华;陈文雪;单保恩;郭清 刊期: 2005年第11期
目的观察组织蛋白酶B(cathepsin B,CB)和L(cathepsin L,CL)在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达,探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用.方法研究组包括:正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜10例和葡萄胎15例.应用免疫组织化学法检测C B和C L的表达.结果CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞.CB在正常分泌期内膜、正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10%(1/10)、83.3%(25/30)、32.0%(8/25);CL则分别为0、63.3%(19/30)、32.0%(8/25);CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05).CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10.0%(3/30)、0、66.7%(10/15);CL则分别为26.7%(8/30)、4.0%(1/25)、80.0%(12/15).CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05).结论CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用.
作者:王安明;陈士岭;邢福祺 刊期: 2005年第11期
目前,室管膜下瘤的组织学起源仍不明确,但很可能来源于室管膜下层的胶质细胞.此类肿瘤呈膨胀性生长,是生长缓慢、非侵袭性的一种低级别胶质瘤,有症状者非常少见,至今国内外文献报道的有症状病例仅百余例.本文报道了我科收治的2例颅内室管膜下瘤患者的临床特点、影像学特点、和手术治疗效果.
作者:张喜安;漆松涛;彭玉平;杨磊 刊期: 2005年第11期
目的制备和鉴定抗ζ珠蛋白链单克隆抗体.方法用纯化的重组ζ珠蛋白链免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1细胞融合制备杂交瘤,经重组的ζ珠蛋白链筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得3株杂交瘤细胞1A12、3H9及4D11,其分泌单抗的亚型分别为IgG2a、IgGl和IgG1;双抗体夹心ELISA结果证明3株单抗均可结合重组的及东南亚(--SEA)缺失型地中海贫血基因携带者血中的ζ珠蛋白链,且其中1A12和3H9识别的位点为不同表位.这三株抗体将为筛选地中海贫血基因携带者的免疫检测提供有力工具.
作者:唐磊;朱平;罗琛;徐湘民;富宁 刊期: 2005年第11期
目的构建一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes的真核表达质粒,并对这种免疫毒素的功能进行初步研究.方法通过RT-PCR的方法,从小鼠肝脏中获得Rantes基因;将Rantes基因插入到含有DT390片段的真核质粒SRα中,构建成重组质粒;重组质粒转入大肠杆菌JM109,筛选出含有正确插入片段的克隆;限制性内切酶酶切图谱分析重组质粒,并进行DNA序列分析;用脂质体介导法转染NIH3T3细胞,免疫荧光检测重组质粒的表达情况;MTT法测定DT390-Rantes的表达活性.结果经过酶切分析及DNA测序证实,Rantes基因正确插入到真核表达质粒SRα中,并在NIH3T3细胞中表达;MTT法证实,重组免疫毒素DT390-Rantes能在体外杀伤活化的T细胞.结论成功地构建了一种新型重组免疫毒素真核表达质粒DT390-Rantes-SRα,该质粒可在真核细胞中瞬时表达,其转染上清对活化的T细胞具有杀伤作用.
作者:贾怡;李虹;陈文捷;吕梅励;李明远;蒋忠华;张林 刊期: 2005年第11期
目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响.方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平.结果在较短的处理时间内(1 h),低浓度的活性氧(50 μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12 h后,50和150 μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化.结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子.
作者:邱小忠;余磊;廖华;张黎声;秦建强;杨俊;欧阳钧 刊期: 2005年第11期
目的观察全反式视黄酸(atRA)体外对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用及其可能的分子机制.方法分离培养新生大鼠纹状体NSCs;以免疫组织化学染色观察不同浓度atRA对NSCs分化的影响;RT-PCR分析视黄酸受体表达情况.结果atRA诱导NSCs向神经元方向分化,其作用在一定范围内呈剂量依赖性,诱导剂量以1.0 μmol/L较为适宜.NSCs的RARβ基因的表达对atRA存在剂量依赖性和时间依赖性.结论atRA诱导NSCs向神经元方向分化,此作用与atRA上调细胞的RARβ基因转录水平有关.
作者:邓红;邹飞;罗海吉 刊期: 2005年第11期
目的研究KBV200多药耐药细胞蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨PKC的表达上调与肿瘤多药耐药的关系.方法KBV200细胞分对照组和佛波酯(PMA)组,PMA组应用200 nmol/L的PMA预孵育细胞,而对照组不用.32P掺入法测定多药耐药KBV200细胞株的PKC活性,通过Western blotting检测PKC各亚型表达和亚细胞分布.用MTT法检测细胞耐药性.结果PMA预孵育可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性,降低浆组分PKC活性(p<0.01).PMA预孵育使膜组分PKCα表达增加,浆组分PKCα表达降低,膜组分PKCβ无明显变化,浆组分PKCβ的表达稍增强.PMA可升高长春新碱、阿霉素对KBV200细胞的IC50值(P<0.01).结论PMA使KBV200细胞耐药性增加,可能与PKC表达上调有关.
作者:袁亚维;孙爱民;李传刚 刊期: 2005年第11期
目的探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系.方法选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11基因序列进行PCR扩增,PCR产物直接DNA序列测定,后应用BLAST和ClustalW软件对测序结果进行比较.结果13株白假丝酵母菌的ERG11基因序列(以已知序列第1个ATG起始密码的A作为第1个记数单位)共有21个位点发生突变,其中17个同义突变位点和4个错义突变位点;在第348 bp位点和第383 bp位点,耐药菌株和药物敏感株均可发生D116E和K128T变异;在靶酶活性中心血色素结合区和疏水端螺旋区的对应基因片段,耐药株在第1309 bp位点可致V437I变化;在第1320 bp位点耐药菌株发生碱基突变,形成A、C基因杂合子,有可能导致N440K变化.结论(1)ERG11基因的D116E和K128T位点变异可能与白假丝酵母菌耐药无关;(2)ERG11基因的V437I和N440K位点的改变,可能与耐药形成有关.
作者:王应斌;王宏;郭辉玉;赵永忠;罗深秋 刊期: 2005年第11期
目的探讨棘突截骨椎管成形椎弓根钉内固定术在治疗矢状位脊柱畸形较轻型退行性脊柱侧弯并腰椎管狭窄的临床效果.方法我院1999~2003年经手术治疗合并腰椎管狭窄的中老年退行性脊柱侧弯44例,其中单节段狭窄25例、双节段19例.男18例,女26例,年龄47~72岁,平均63岁.采用后正中纵切口,包含融合节段上下各一椎体,行单侧椎板开窗减压7例、单节段全椎板切除18例、双节段全椎板切除19例,将减压节段的棘突从基底截取,去除一面皮质行单面皮质保留横行覆盖骨窗,如骨窗较大可取相邻节段的棘突,再行椎板Moe融合矫形内固定(Isola 17例、Diapason 27例).术后进行Oswestry疗效评分与影像学观察.结果随访1~4年,平均3年,术后1年随访33例,优良率93.9%;术后2年随访27例,优良率为88.9%.术后2年CT扫描未见椎管内疤痕形成,椎管直径明显增加;覆盖的棘突融合时间3~6个月,平均4个月,融合率为92.6%.2例固定节段上一椎体压缩性骨折,其中1例椎弓根钉松动;1例椎弓根钉断裂无症状,骨窗已融合;1例伤口延迟愈合.无复发性椎管狭窄、腰椎滑脱及脊柱失代偿、假关节等并发症.结论棘突截骨椎管成形内固定术,能在减压固定的基础上减少椎管内疤痕形成,防止腰椎管狭窄复发;提高覆盖骨融合率并缩短融合时间,近中期效果好.是矢状位脊柱畸形较轻型退行性脊柱侧弯并腰椎管狭窄症满意的治疗方法.
作者:曾明;赵新建;张毅;黄星球;蔡春水 刊期: 2005年第11期
目的探讨胆红素氧化酶中配位氨基酸对保持酶活性的重要性和酶促反应的动力学,并评价胆红素氧化酶突变体能否作为一种更好的高胆红素血症的诊断试剂.方法胆红素氧化酶突变体I402G和C457S通过聚合酶链反应获得,并经氨基酸序列测定加以证实.钌搀杂的突变体C457S通过变异体与钌配合物的直接反应得到.研究了重组胆红素氧化酶及其变异体的光谱学性质,以及重组胆红素氧化酶和变异体I402G的酶促反应的动力学.结果变异体I402G和C457S被成功的表达和纯化.变异体I402G表现出较低的活性(1.67 U/mg),C457S则完全失去了活性(0 U/mg),但是钌搀杂的突变体C457S表现出较高的活性(5.50和6.42 U/mg).光谱学实验结果表明I402G突变体在较低的pH时第一类铜呈+1价态,即还原态;突变体C457S中失去第一类铜,使得突变体无法保持完整的活性中心,从而失去了酶活性.酶促反应的动力学实验显示重组胆红素氧化酶和变异体I402G动力学参数kcot分别为235.8 min-1和6.9 min-1,说明重组胆红素氧化酶具有很高的催化能力.结论配位的氨基酸对保持重组胆红素氧化酶及其变异体活性中心的完整性和酶活性具有重要的意义.重组胆红素氧化酶远比突变体I402G和C457S的活性高,说明突变体I402G和C457S不适合作为诊断试剂.钌搀杂有助于在突变体C457S中形成新的完整的活性中心,从而产生酶活性.
作者:张雷;张晓;罗智颖 刊期: 2005年第11期
目的探讨风湿病合并肿瘤的发病规律和临床特点.方法总结26例风湿病伴发肿瘤的发病、诊治经过及转归.结果26例风湿病患者合并肿瘤的种类呈多样性.12例在风湿病的活动期发现,呈晚期表现,14例在例行系统检查中发现,临床可出现风湿病难以解释的症状和体征,8例患者肿瘤酶学检查阳性.结论风湿病患者肿瘤的发病率明显高于正常人群,因疾病本身表现的多样性,肿瘤的初期症状常常被掩盖,二者之间的发病机制尚不清,部分患者可能有风湿病与肿瘤的交叉抗原反应,酶学检查对肿瘤的诊断价值不大,长期应用免疫抑制剂应注意其本身的致癌性.
作者:刘布骏;顾菲 刊期: 2005年第11期
目的构建7种常见的MBL基因单倍型标准质粒.方法以已确认MBL基因单倍型及基因型的DNA样本为模板,利用SSP-PCR技术扩增出包含MBL基因启动子区及第一外显子的单倍型片段并将其克隆入T载体;用定点突变技术分别将其第一外显子52和57位密码相应的碱基突变;采用PCR和测序进行鉴定.结果以单倍型及基因型已确认的DNA样本为模板,采用SSP-PCR和分子克隆技术获得单倍型HYPA、LXPA、LYQA、LYPA和LYPB重组质粒;以单倍型HYPA及LYQA重组质粒为模板,采用定点突变技术获得单倍型HYPD及LYQC标准质粒.结论构建成功常见的7种MBL基因单倍型标准质粒,为采用SSP-PCR、Real-time PCR等技术分析MBL基因相应的SNP及其单倍型与基因型提供了标准对照.
作者:余新沛;陈月;张丽芸;卢晓;陈政良 刊期: 2005年第11期
目的分析肾细胞癌患者血钙水平和肿瘤大小与分期的相关性,从而进一步发现与病情相关的规律和了解病情.方法按照血钙水平将肿瘤大小/分期相应地分3组,即降低、正常和升高各3组.利用SPSSl0.0软件,对3组不同的肿瘤大小/分期病例进行差异性分析和相关性研究.结果3组不同的肿瘤大小差异性分析(Kruskal-wallis H)显示,x2=4.768,df=2,P=0.092;Spearman相关分析显示相关系数为-0.166,p=0.029.3组不同的肿瘤分期差异性分析(Kruskal-WallisH)显示,x2=4.277,df=2,P=0.118;Spearman相关系数为-0.157,P=0.039.结论3组不同的肿瘤大小之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤大小间存在负相关;3组不同的肿瘤分期之间差异性无统计学意义,血钙水平与肿瘤分期间存在负相关.
作者:白寒;郑少斌;吴京;刘德忠 刊期: 2005年第11期