袁亚维;孙爱民;李传刚
目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响.方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平.结果在较短的处理时间内(1 h),低浓度的活性氧(50 μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12 h后,50和150 μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化.结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子.
作者:邱小忠;余磊;廖华;张黎声;秦建强;杨俊;欧阳钧 刊期: 2005年第11期
目前,室管膜下瘤的组织学起源仍不明确,但很可能来源于室管膜下层的胶质细胞.此类肿瘤呈膨胀性生长,是生长缓慢、非侵袭性的一种低级别胶质瘤,有症状者非常少见,至今国内外文献报道的有症状病例仅百余例.本文报道了我科收治的2例颅内室管膜下瘤患者的临床特点、影像学特点、和手术治疗效果.
作者:张喜安;漆松涛;彭玉平;杨磊 刊期: 2005年第11期
目的评价非小细胞肺癌脑转移放射治疗中全脑照射的作用,分析生存预后因素.方法对93例非小细胞肺癌脑转移患者进行放射治疗,其中68例先行全脑照射(全脑照射组),然后行局部三维适形低分割放疗;25例只行三维适形低分割放疗(低分割组).用Kaplan-meier法统计生存率及局部控制率,以Cox比例风险模型分析影响患者生存的预后因素.结果全脑照射组中位生存时间14个月,1、2年生存率分别为50%、27%;低分割组中位生存时间12个月,1、2年生存率分别为45%、15%;两组无显著差异性(log-rank,P=0.502).全脑照射组与低分割组1年颅脑局部控制率分别为90%、70%,两组有显著差异(P=0.028).多因素分析提示颅外活动性病灶(P=0.002)、KPS评分(P=0.034)是影响生存的独立预后因素.结论非小细胞肺癌脑转移三维适形放疗联合全脑照射无生存得益,而有助于提高局部控制率.
作者:邱幸生;陈龙华;陈永清 刊期: 2005年第11期
吸食毒品海洛因引起脑部损害已受到人们的关注,近年来国内也已陆续报道[1,2],现将我们诊断的3例报道如下,并结合临床和文献进行分析,进一步认识吸食海洛因引起的中毒性脑病(THE)的临床表现以及磁共振成像的特征.
作者:徐毅;谷洪 刊期: 2005年第11期
目的探讨高血压患者生存质量(QOL).方法采用世界卫生组织QOL(WHOQOL)-100量表,对319例高血压患者和正常对照人群进行生存质量测量,比较病例组与对照组的生存质量差异.结果高血压患者生存质量在身体机能、心理状况、独立能力、社会关系、生活环境、个人信仰各领域及QOL-100总评分方面皆显著低于正常对照组人群(P<0.01);调整了其他疾病的混杂作用后,除个人信仰领域外,高血压患者其他各领域及QOL-100总评分方面仍皆低于对照组(P<0.01).Hotelling T2检验及多元方差分析显示,高血压患者与对照组人群的生存质量从6个领域综合来看,具有显著性差异(P<0.01).结论在有效降压的同时,积极改善患者的生存质量是临床抗高血压治疗的基本目标.
作者:陈英;王声涌;池桂波;喻侠华;洪城;李安荣 刊期: 2005年第11期
目的构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α的两种突变体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1αt-564Ala-803Ala,并检测它们在人肺微血管内皮细胞(HMVECs)中的表达.方法用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1α的HIF-1α第564位脯氨酸(Pro)密码子CCC突变为丙氨酸(Ala)密码子GCC,构建成单个突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala.在第一次突变的基础上,仍然用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1αt-564A1a的HIF-1α-564Ala第803位天冬酰胺(Asn)密码子ATT突变为丙氨酸(Ala)密码子GCT,构建成双个点突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala.将3种HIF-1α表达载体用脂质体法分别转入HMVECs,以RT-PCR、免疫荧光法和Western blotting法分别对转染细胞进行表达分析.结果测序证实,定点突变成功,构建成重组真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala;3种载体均能表达相应的蛋白和mRNA,但转化突变HIF-1α表达载体的细胞蛋白量比空白细胞和转化无突变HIF-1α载体的细胞显著增加.结论成功构建能够在HMVECs中表达的单个和双个点突变的HIF-1α基因的真核表达载体.
作者:傅锐斌;吴平生;宋云峰;邱建;戴铁英;李建华;修建成 刊期: 2005年第11期
目的观察双重滤过血浆成分分离法在ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植中的疗效.方法采用双重滤过血浆成分分离法去除体内血型抗体,预防5例ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植并发溶血反应和纯红再障.结果受者一次性双重滤过后,全部患者血型抗体均≦1:16,输注血型主要不合骨髓过程中仅1例发生轻度短暂急性溶血反应,无一例发生迟发性溶血反应和纯红再障,全部植入成功.结论双重滤过血浆成分分离法可有效预防ABO血型主要不合骨髓移植并发溶血反应和纯红再障.
作者:黄韬;孙竞;刘俊;刘启发;孟凡义 刊期: 2005年第11期
目的构建一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes的真核表达质粒,并对这种免疫毒素的功能进行初步研究.方法通过RT-PCR的方法,从小鼠肝脏中获得Rantes基因;将Rantes基因插入到含有DT390片段的真核质粒SRα中,构建成重组质粒;重组质粒转入大肠杆菌JM109,筛选出含有正确插入片段的克隆;限制性内切酶酶切图谱分析重组质粒,并进行DNA序列分析;用脂质体介导法转染NIH3T3细胞,免疫荧光检测重组质粒的表达情况;MTT法测定DT390-Rantes的表达活性.结果经过酶切分析及DNA测序证实,Rantes基因正确插入到真核表达质粒SRα中,并在NIH3T3细胞中表达;MTT法证实,重组免疫毒素DT390-Rantes能在体外杀伤活化的T细胞.结论成功地构建了一种新型重组免疫毒素真核表达质粒DT390-Rantes-SRα,该质粒可在真核细胞中瞬时表达,其转染上清对活化的T细胞具有杀伤作用.
作者:贾怡;李虹;陈文捷;吕梅励;李明远;蒋忠华;张林 刊期: 2005年第11期
目的研究KBV200多药耐药细胞蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨PKC的表达上调与肿瘤多药耐药的关系.方法KBV200细胞分对照组和佛波酯(PMA)组,PMA组应用200 nmol/L的PMA预孵育细胞,而对照组不用.32P掺入法测定多药耐药KBV200细胞株的PKC活性,通过Western blotting检测PKC各亚型表达和亚细胞分布.用MTT法检测细胞耐药性.结果PMA预孵育可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性,降低浆组分PKC活性(p<0.01).PMA预孵育使膜组分PKCα表达增加,浆组分PKCα表达降低,膜组分PKCβ无明显变化,浆组分PKCβ的表达稍增强.PMA可升高长春新碱、阿霉素对KBV200细胞的IC50值(P<0.01).结论PMA使KBV200细胞耐药性增加,可能与PKC表达上调有关.
作者:袁亚维;孙爱民;李传刚 刊期: 2005年第11期
目的评价立体定向放射外科(SRS)治疗脑转移瘤的效果及预后因素.方法回顾性分析1994~2002年在巴黎Tenon医院放疗科行SRS(X线刀)治疗的脑转移患者102例,包括单发者78例,多发者24例,102例患者共有转移灶131个,转移灶大直径≤ 4 cm.其中18位患者同时接受全脑放疗(WBRT),93例患者120个转移灶有影像学随访.计算患者的生存期及局控率,并对潜在预后因素分别进行单因素和多因素分析.结果总体局控率和1年局控率分别为91.7%和85.3%,102例患者的中位生存期为11个月.单因素分析表明只有转移灶体积是影响局控率的预后因素;KPS>70、年龄≤ 60、无颅外其他器官转移以及SRS前行全脑照射是影响生存期的预后因素.多因素分析表明仅KPS评分为生存独立预后因素.结论SRS是脑转移的有效治疗方式,多种因素影响其预后.
作者:徐本华;韩露;林少俊;Touboul E 刊期: 2005年第11期
目的制备和鉴定抗ζ珠蛋白链单克隆抗体.方法用纯化的重组ζ珠蛋白链免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1细胞融合制备杂交瘤,经重组的ζ珠蛋白链筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得3株杂交瘤细胞1A12、3H9及4D11,其分泌单抗的亚型分别为IgG2a、IgGl和IgG1;双抗体夹心ELISA结果证明3株单抗均可结合重组的及东南亚(--SEA)缺失型地中海贫血基因携带者血中的ζ珠蛋白链,且其中1A12和3H9识别的位点为不同表位.这三株抗体将为筛选地中海贫血基因携带者的免疫检测提供有力工具.
作者:唐磊;朱平;罗琛;徐湘民;富宁 刊期: 2005年第11期
目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株.方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记.以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85.以EAggEC O42为出发菌株,构建缺失irp8~irp5约24 kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85.结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因.PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株.结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础.
作者:胡静;俞守义;阚飙;刘志华 刊期: 2005年第11期
目的观察针刺后百会、水沟、神门血管性痴呆(VD)患者豆状核葡萄糖代谢的变化,探讨该穴组对豆状核功能的影响.方法将10例VD病人随机均分为2组.对照组治以针对偏瘫的常规穴位(手足三阳经为主),治疗组加用百会、水沟、神门.治疗前后所有病人均接受正电子发射型计算机断层显像(PET)检测葡萄糖代谢水平.以VD患者双侧豆状核为感兴趣区,检测其治疗前后葡萄糖代谢水平并进行比较.结果治疗组健脑豆状核葡萄糖代谢有显著提高;对照组双侧豆状核葡萄糖代谢均无明显变化.结论针刺百会、水沟、神门治疗VD的机制与其提高豆状核葡萄糖代谢有关.
作者:黄泳;陈静;赖新生;唐安戊;李东江 刊期: 2005年第11期
目的探讨补体成分3(C3)在迟发型超敏反应(DTH)中的作用.方法用卵白蛋白(OVA)诱导C3基因敲除(C3-/-)和野生型(C3+/+)小鼠足垫部位的DTH,测量足垫厚度的变化,并对反应部位组织进行HE和免疫组化染色检测.分离小鼠脾脏T淋巴细胞,用巨噬细胞作为抗原提呈细胞,在体外分别用丝裂原和特异性抗原刺激,用3H-TdR掺入法评价T淋巴细胞的增殖活性.结果OVA诱导足垫DTH后,C3-/-小鼠足垫厚度和局部浸润单个核细胞的数量都显著低于C3+/+小鼠的,其中浸润的单个核细胞主要为CD4+T淋巴细胞.2种小鼠的T淋巴细胞对丝裂原刺激的反应相似,而已致敏C3-/-小鼠脾脏T细胞对特异性抗原再次刺激后的增殖反应显著低于C3+/+小鼠.结论C3缺陷明显影响DTH应答,提示C3在DTH中起了重要作用.
作者:裘毅刚;陈月;张丽芸;陈政良 刊期: 2005年第11期
目的研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况.方法制备成年大鼠心脏冰冻切片,结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸.采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达,用共聚焦显微镜观察其表达部位,通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析.结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状,主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构,其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室,房室结和结后延伸之间无显著性差异(P>0.05),其余两两相比均有显著差异(P<0.05),其中右心房、右心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸(P<0.01).各部位在相对分子质量200 000左右可见一特异性蛋白条带.对蛋白条带进行灰度值分析,结果与免疫荧光相一致.结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛,在不同部位表达量不同,在工作肌组织的表达量明显高于传导组织,提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.
作者:欧妍;牛小麟;任付先;张颖;凌凤东 刊期: 2005年第11期
目的观察干扰素α对慢性乙型肝炎(乙肝)患者肝组织纤维化程度的影响.方法选取病理诊断为S3~S4期的16例乙肝患者,干扰素治疗期前后3次进行肝组织炎症程度及纤维化程度病理分析,免疫组化检测肝组织TGF-β1蛋白、Fas及HBcAg抗原,TUNEL方法观察肝细胞凋亡情况.同期检测血清肝纤维化指标及肝功能.结果在S3~S4期,患者Fas、TGF-β1显著表达,肝细胞的DNA损伤严重.干扰素α治疗3个月后Fas抗原、TGF-β1表达程度显著下降(P<0.05);细胞凋亡程度减轻(P<0.05);肝组织HBcAg表达程度无显著改变;连续6~9个月治疗后,肝组织炎症及纤维化程度逐渐改善(P<0.05),血清肝纤维化指标及肝功能水平与治疗前差异显著.结论干扰素α能显著改善S3~S4期患者肝细胞凋亡和肝组织纤维化程度,但需持续治疗.
作者:于宏;曹治宸;耿建英;贺占国;王政民;孙小云;王中华 刊期: 2005年第11期
目的构建7种常见的MBL基因单倍型标准质粒.方法以已确认MBL基因单倍型及基因型的DNA样本为模板,利用SSP-PCR技术扩增出包含MBL基因启动子区及第一外显子的单倍型片段并将其克隆入T载体;用定点突变技术分别将其第一外显子52和57位密码相应的碱基突变;采用PCR和测序进行鉴定.结果以单倍型及基因型已确认的DNA样本为模板,采用SSP-PCR和分子克隆技术获得单倍型HYPA、LXPA、LYQA、LYPA和LYPB重组质粒;以单倍型HYPA及LYQA重组质粒为模板,采用定点突变技术获得单倍型HYPD及LYQC标准质粒.结论构建成功常见的7种MBL基因单倍型标准质粒,为采用SSP-PCR、Real-time PCR等技术分析MBL基因相应的SNP及其单倍型与基因型提供了标准对照.
作者:余新沛;陈月;张丽芸;卢晓;陈政良 刊期: 2005年第11期
目的比较短期化疗前后兔腹主动脉顺应性的变化,了解化疗药物对血管力学特性的影响.方法将15只新西兰兔随机等分为5组,其中4组接受1周期化疗(卡铂100mg/m2,第1、3、5天;异环磷酰胺1 500mg/m2,第1、3、5天;足叶乙甙100 mg/m2,第1~3天),另1组为对照组.分别测量各组兔腹主动脉比顺应性(化疗组分为化疗后第2、7、14、21天进行观察).结果短期化疗前后兔腹主动脉顺应性显著变化,化疗后第14天下降明显,而第21天则基本恢复.结论短期化疗能够降低兔腹主动脉比顺应性,降低的程度与化疗后时间相关,并具有可逆行性.
作者:沈策;刘皓;左强;张军一;杨金星 刊期: 2005年第11期
糖尿病足是导致糖尿病患者截肢、降低生活质量、甚至危及生命的重要原因.血管病变是糖尿病足发病的重要原因之一,患者的下肢动脉严重狭窄甚至闭塞,临床上往往较难处理.我们采用经皮锁骨下动脉导管药盒系统(PCS)置入术+药物灌注治疗糖尿病足1例,收效明显,报道如下.
作者:关美萍;沈洁;李晨钟;谢翠华;薛耀明 刊期: 2005年第11期
目的研究溶血磷脂酸(LPA)受体在人卵巢癌细胞系中基因和蛋白的表达及意义.方法采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学链霉菌抗生物素蛋白·过氧化物酶连接(SP)法和Western blotting检测LPA1、LPA2和LPA3mRNA以及LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系3AO·SKOV3·OVCAR3中的表达水平.结果(1)RT-PCR结果显示,LPA1、LPA2和LPA3 mRNA在人卵巢癌细胞系中均有不同程度的表达;(2)免疫细胞化学和Western blotting结果显示,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系中均有表达.结论LPA1、LPA2和LPA3在人卵巢癌细胞系中广泛表达,LPA2和LPA3可能参与了卵巢癌的发生发展过程.
作者:汪萍;吴小华;陈文雪;单保恩;郭清 刊期: 2005年第11期