学术投稿

Plunc序列启动子转基因小鼠模型的建立

杨玉芳;丁彦青;张玲;梁莉

关键词:鼻咽肿瘤, plunc启动子, 小鼠, 转基因
摘要:目的利用携带有鼻咽组织相对特异性启动子plunc构建的载体建立转基因动物模型.方法将plunc-EGFP质粒用Xho Ⅰ酶切线性化,胶回收线性化片段,稀释浓度4μg/ml.采用显微注射法将外源基因注射人小鼠受精卵细胞内.结果产13只小鼠.PCR检测基因整合,其中阳性12只,阳性率92.30%;Southern blot检测阳性3只,阳性率23%.结论鼻咽组织相对特异性启动子plunc可有效地将外源基因整合人小鼠体内.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血的临床应用

    目的回顾性分析经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血的疗效和安全性.方法鼻咽颌面部大出血42例,均经股动脉插管入颈内动脉造影.根据造影情况和临床出血部位,应用明胶海绵颗粒、PVA颗粒和弹簧圈等栓塞材料,分别行颈外动脉、颌内动脉、面动脉、枕动脉、蝶腭动脉、咽升动脉栓塞.结果42例患者均成功完成栓塞,一次栓塞止血成功率100%.随访3~12月,无复发,未出现严重并发症.结论经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血是一种安全、有效的治疗方法.

    作者:商健彪;李彦豪;陈勇;何晓峰;曾庆乐;王江云 刊期: 2004年第02期

  • 口服霍乱疫苗O139 rBS-WC后肠道菌群的改变

    目的观察国产冻干O139 rBS-WC口服霍乱疫苗对健康受试者肠道菌群的影响.方法利用直接快速涂片法分别于服苗前、服苗后2周末、服苗后3个月末收集受试者的粪便,检查粪便的细菌分布特点.结果共检查了458份粪便标本,服苗后细菌总数、G+b、G+c、G-c呈下降趋势,而G-b呈显著的增高趋势;口服疫苗后各免疫组之间及与安慰剂组比较,以G+b及G-c变化明显,其中0、14、28 d各服1粒O139 rBS-WC疫苗的免疫组与其他各组间的差异较大;各免疫组在不同采样时间,肠道菌群值有不同的改变,以G-b表现明显.不同性别的受试者在服苗后,G+b、G-b、G-c占总菌群数比值的改变有统计差异.结论冻干口服O139霍乱rBS-WC疫苗对受试者的肠道菌群有一定的影响.

    作者:吴辉绪;陈清;李建栋;黄秀芬 刊期: 2004年第02期

  • 运动试验结合动态血压监测对老年高血压的预测价值

    目的活动平板运动试验检出运动高血压,并结合24h动态血压监测(ABPM),探讨其在老年高血压中的预测价值.方法采用修正Bruce方案行症状限制性次极量运动试验,共检出45例老年运动高血压患者,并行ABPM.结果45例老年患者静息血压均在正常范围,运动峰值血压高达(211.98±9.37)mmHg/(101.50±12.86)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),其中ABMP符合高血压诊断标准的有14例;与ABMP正常者相比,前者ABMP各项参数均显著高于后者(P<0.001).结论平板运动试验结合动态血压监测有助于早期发现老年高血压.

    作者:张新霞;许香广;吴剑胜;邝碧娟;程硕韬;黄建平;胡雪松 刊期: 2004年第02期

  • 腹部大器官联合移植的临床研究

    目的探讨腹部大器官联合移植治疗腹部多器官功能衰竭的效果.方法2例Ⅰ型糖尿病并发尿毒症患者施行改良式胰液肠腔引流胰、十二指肠及肾一期联合移植,1例高龄酒精性肝硬化终末期并慢性肾功能不全尿毒症患者施行一期肝肾联合移植,1例慢性乙型病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝细胞癌合并胰岛素依赖型糖尿病患者施行同期原位肝-异位胰十二指肠联合移植,观察其临床疗效.结果2例胰肾联合移植患者术后第5天肾功能恢复正常,术后第10天停用胰岛素,2例均分别于术后20、22d出现消化道出血,经止血治疗后痊愈;肝肾联合移植患者术后第3天移植肝肾功能正常,术后第10天移植肝发生急性排斥反应,抗排斥治疗后逆转;肝胰联合移植患者术后第5天停用胰岛素,移植肝功能恢复正常.4例患者分别随访29、26、9、6月,移植物功能均正常.结论腹部大器官联合移植是腹部多器官功能衰竭的有效治疗方法,肝胰联合移植可减少胰腺的排斥反应,促进移植肝功能恢复.

    作者:于立新;刘小友;徐健;邓文锋;叶桂荣;付绍杰;杜传福;马俊杰 刊期: 2004年第02期

  • Plunc序列启动子转基因小鼠模型的建立

    目的利用携带有鼻咽组织相对特异性启动子plunc构建的载体建立转基因动物模型.方法将plunc-EGFP质粒用Xho Ⅰ酶切线性化,胶回收线性化片段,稀释浓度4μg/ml.采用显微注射法将外源基因注射人小鼠受精卵细胞内.结果产13只小鼠.PCR检测基因整合,其中阳性12只,阳性率92.30%;Southern blot检测阳性3只,阳性率23%.结论鼻咽组织相对特异性启动子plunc可有效地将外源基因整合人小鼠体内.

    作者:杨玉芳;丁彦青;张玲;梁莉 刊期: 2004年第02期

  • 国际肿瘤分类编码质量的相关研究

    目的探讨提高国际疾病分类(ICD)中原发恶性肿瘤编码质量的方法及其可行性和必要性.方法分析26 922例肿瘤诊断中肿瘤部位编码(C码)与肿瘤形态学编码(M码)的编配情况,发现错误,找出原因.结果在检索结果中,有5 329例错误的C码与M码的编配,占全部编码的19.79%,成因复杂.结论现行的编码操作方式有待改进,且在目前的技术条件下,完全有可能找到更科学的ICD肿瘤编码的计算机录入方式.

    作者:李蕊;郝珍;刘克新 刊期: 2004年第02期

  • 基于模糊聚类优化的序列图像快速分形压缩

    针对传统序列图像分形压缩算法编码时间过长的问题,提出了一种基于模糊聚类优化(OFC)的快速算法,它是一种基于单帧的序列图像帧间分形压缩算法.首先使用LBG(Linde-Buzo-Gray)方法对序列图像组成的搜索空间样本集进行初始化,然后将OFC方法应用于对样本集的软分类,匹配时通过用类内搜索取代全局搜索,将分形编码过程聚焦在有效的局部范围内,从而减少了匹配次数,降低编码时间.由于OFC算法是一种软分类方法,样本集类别数的确定即终聚类方案是取样本集所有可能的分割中对应于目标函数小者的分割,所以它不但是基于全局优的聚类方法,避免了基于局部优LBG算法中的某些误判,而且有效抑制了传统硬分类方法中类别数需预先指定的人为干扰因素,使恢复图像的质量能够得到更有效保证.相同运算环境下的仿真实验结果说明,在不影响信噪比和压缩比的前提下,与传统序列图像分形压缩算法相比,OFC算法编码速度可提高约5倍,证明了本算法的优越性.

    作者:梁斌;袁静;冯前进;陈武凡 刊期: 2004年第02期

  • 后尿道狭窄治疗体会(13例报告)

    目的提高外伤性后尿道狭窄的治疗效果.方法对13例后尿道狭窄病人的治疗进行总结,重点分析典型病例.结果13例不同程度后尿道狭窄病人经冷刀或电刀内切开、开放手术等治疗,效果满意.结论正确的早期处理、选择合适的手术方法、预防术后感染和术后恰当的尿道扩张是治疗后尿道狭窄的关键.

    作者:姜耀东;郑少斌;谭万龙;陈彤 刊期: 2004年第02期

  • 大鼠肝肠缺血再灌注对远隔器官损伤作用的实验研究

    目的通过动物实验观察肝肠缺血再灌注对远隔器官的损伤作用.方法健康雄性Wistar大鼠75只,分全肝缺血、肠缺血及肝肠联合缺血3组,分阻断前、阻断末(45 min)、再灌注后0.5、2、6 h共5个时间点,分别活杀5只大鼠取材,测定血浆及组织匀浆中丙二醛和超氧化物歧化酶水平,并观察血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶等指标的变化.结果肝肠缺血再灌注后,各组血浆及肺、心、肾、胰组织中丙二醛及超氧化物歧化酶水平均发生显著变化,血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶混合性同工酶水平均呈上升趋势.结论肝肠联合缺血再灌注早期可引起机体其他脏器严重损伤:在相同热缺血时间内,肠缺血可能比肝脏缺血引起更大的其他重要脏器损伤.

    作者:杨进城;王志伟;李朝龙;林建华;刘兴国;季锡清 刊期: 2004年第02期

  • 成年大鼠纹状体神经干细胞的体外培养及分化

    目的探讨成年大鼠纹状体神经干细胞多向分化的可能性.方法分离成年大鼠纹状体神经干细胞,单克隆连续传代培养并诱导分化,将分化产物进行免疫细胞化学染色及RT-PCR检测分析.结果无血清单克隆培养时期可见大量的细胞团出现,以血清诱导分化后出现多种细胞类型,免疫细胞染色发现分化细胞中有Nestin阳性、NSE阳性、GFAP阳性细胞,RT-PCR法分析mRNA水平有脑因子-1、γ-氨基丁酸α-受体γ-亚单位、酪氨酸羟化酶及色氨酸羟化酶等基因的表达.结论成年大鼠纹状体内分离出的干细胞样细胞具有自我增殖和多向分化潜能.

    作者:王彦惠;刘亚杰;卢洪流;刘振华;姜晓丹;徐如祥;周振军;邹雨汐;陈一招 刊期: 2004年第02期

  • 利多卡因对脑肿瘤患者麻醉诱导时脑氧供需平衡和血液动力学的影响

    目的研究全麻诱导中利多卡因对幕上肿瘤患者气管插管时脑氧供需平衡、能量代谢和血液动力学的影响.方法将24例幕上肿瘤患者随机分为利多卡因组(A组,n=12)和空白对照组(B组,n=12).在麻醉诱导前和气管插管即刻采取颈内静脉球部静脉血和桡动脉血,进行血气分析、乳酸和血糖测定.结果A、B两组气管插管时较插管前脑氧摄取率、静动脉乳酸含量差下降;颈内静脉球部氧饱和度、动脉氧饱和度、动脉氧分压、颈内静脉球部氧分压、颈内静脉球部氧含量升高.组间比较血气指标在插管时-诱导前的变化仅颈内静脉球部氧分压有统计学意义.诱导期间A组血液动力学变化小于B组.结论(1)利多卡因对幕上肿瘤患者麻醉诱导时脑氧供需平衡的变化无明显影响:(2)利多卡因能有效抑制脑肿瘤患者诱导时气管插管时血液动力学反应.

    作者:李申一;徐世元;叶小平;许睿;余楠;许平;侯景利 刊期: 2004年第02期

  • 痘苗病毒寡核苷酸检测芯片的设计及研制

    目的对痘苗病毒进行寡核苷酸检测芯片的初步研究,为建立寡核苷酸芯片检测该类病毒提供初步研究依据.方法根据痘苗病毒特异基因设计寡核苷酸探针,人工合成探针后制备寡核苷酸芯片.在病毒感染的不同阶段提取病毒样品DNA及阴性样品DNA,采用限制性显示技术标记,标记样品与芯片杂交后,用Agilent芯片扫描仪检测杂交结果.结果芯片与病毒样品杂交有较强的杂交信号,而与阴性样品杂交除阳性探针外均无信号.结论病毒样品与阴性样品杂交信号区别明显,在病毒感染的各个时段也都有明显的杂交信号,反映了寡核苷酸芯片具有较高的特异性和灵敏度.

    作者:王艳;马文丽;毛向明;吴清华;李凌;王洪敏;肖维威;郑文岭 刊期: 2004年第02期

  • 吲哚美辛抑制结肠癌移植瘤生长和微血管形成的实验研究

    目的研究非甾体抗炎药吲哚美辛对人结肠癌HCT116移植瘤生长和微血管形成的影响.方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机分组:治疗组喂服吲哚美辛(3mg·kg-1·d-1),对照组给予相应体积溶剂(0.2%二甲亚砜-生理盐水溶液).4周后处死动物,采用免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)及肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,鼠抗人CD34标记微血管.结果治疗组与对照组皮下移植瘤体积分别为(458.89±32.07)mm3和(828.21±31.59)mm3(P<0.05),治疗组肿瘤生长受到明显抑制;瘤组织中MVD分别为19.50±5.32和37.40±4.93(P<0.001),VEGF的表达强度分别为1.19±0.17和1.90±0.48(P<0.01),MVD与VEGF变化呈正相关(r1=0.714,P<0.05).实验结束时未见明显毒性反应.结论吲哚美辛能通过抑制肿瘤微血管形成发挥抗瘤作用,其机制可能与抑制VEGF的表达有关.

    作者:王红梅;张桂英 刊期: 2004年第02期

  • 聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球的制备与表征

    目的制备聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)磁性纳米球.方法乳化聚合法制备磁性纳米球的悬浮液,光子相关光谱仪和透射电镜测定磁性纳米球的粒径及其分布;紫外分光光度法测定磁性纳米球中Fe含量.结果获得了水溶性正癸酸稳定的Fe3O4磁流体的粒径及其分布,以及载体浓度与稳定剂浓度对磁性纳米球粒径及其分布的影响.结论首次在pH=6.3~6.4条件下用乳化聚合法制备了PBCA磁性纳米球的稳定悬浮液.

    作者:任非;陈建海;姜耀东;陈志良 刊期: 2004年第02期

  • 血液净化对慢性肾功能衰竭患者全段甲状旁腺激素的影响

    目的研究血液灌流和/或血液透析对慢性肾功能衰竭(CRF)患者全段甲状旁腺激素(iPTH)的影响.方法用放射免疫测定法检测40例规律血液透析患者治疗前后iPTH水平.结果血液灌流和/或血液透析后iPTH水平均降低,但血液灌流组降低幅度大于血液透析组(P=0.031).结论血液灌流加血液透析能比单纯血液透析更有效地降低CRF患者iPTH水平.

    作者:刘俊;刘志强;陶惠琴 刊期: 2004年第02期

  • 高温高湿环境下猫颅脑火器伤后细菌生长特点

    目的研究高温高湿环境下猫颅脑火器伤后创面及周围组织细菌生长特点.方法杂种猫23只随机分为常温枪伤对照组(伤后立即取材,A组)、常温枪伤组(伤后6 h取材,B组)、高温高湿枪伤组(伤后6 h取材,C组)和空白对照组(D组),分别取创面及周围组织进行细菌培养并计数.结果A、B、C组其创面组织、伤道壁5 mm内组织、伤道壁5~10mm内组织细菌含量无统计学差异(P>0.05),各组内随着离伤道距离的增加细菌含量减少(P<0.01).3组创面组织、伤道壁5mm内组织细菌含量与D组比较差异显著(P<0.01).结论高温高湿环境对颅脑火器伤6 h内的细菌生长情况无显著影响,颅脑火器伤后6 h内细菌繁殖未进入高速增长期,进行清创仍是安全的.

    作者:郭燕舞;朱红胜;徐如祥 刊期: 2004年第02期

  • 赛尼哌结合抗胸腺细胞球蛋白免疫诱导在心脏移植中应用的临床经验(附8例报告)

    目的总结本组8例心脏移植受者应用免疫诱导方案治疗的临床经验.方法8例终末期扩张型心肌病患者接受同种异体原位心脏移植术,免疫诱导采用术前12 h内及术后第14天2剂赛尼哌1.0 mg/kg(抗白介素-2受体抗体)结合术后前5 d 5剂抗胸腺细胞球蛋白(ATG)100 mg/d的方法,免疫抑制维持治疗采用环孢素A(或他克莫司)+骁悉(或硫唑嘌呤)+泼尼松三联方案.结果全组无死亡,移植后早期心内膜心肌活检无明显急性排斥反应,无移植物功能不全,无明显急性肾功能不全;3例发生机会性感染,1例远期发生急性排斥反应.结论心脏移植围术期采用2剂赛尼哌结合5剂ATG进行免疫诱导治疗方案能有效预防移植心脏急性排斥反应和减少器官功能损害,但可能增加感染的发生率.

    作者:黄雪珊;陈道中;陈良万;李增棋;廖崇先 刊期: 2004年第02期

  • 降落式PCR和SSCP检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体γ基因重排

    目的以降落式PCR和单链构型多态性(SSCP)方法检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体(TCR)γ基因重排,探讨其在淋巴细胞白血病诊断中的价值.方法盐析法提取淋巴细胞白血病患者外周血白细胞DNA,TCR-γ基因重排通用引物和降落式PCR扩增基因重排.分别采用琼脂糖凝胶电泳、SSCP和DNA直接测序方法检测PCR扩增产物.阳性细胞系DNA模板与反应增生性淋巴组织DNA按不同比例混合后扩增,检测降落式PCR的灵敏度.结果琼脂糖电泳中,18例T淋巴细胞白血病中有15例、4例B淋巴细胞白血病中有2例为阳性,阳性标本经SSCP进一步分析,呈不连续条带.DNA直接测序证实扩增产物为TCR-γ基因重排.阳性对照模板占1%以上时可得到阳性扩增结果.结论TCR-γ基因重排通用引物结合降落式PCR可有效扩增T淋巴细胞白血病基因重排,可用于T淋巴细胞白血病的辅助诊断.

    作者:韩西群;齐宗利;贺莉;陆地;赵彤 刊期: 2004年第02期

  • 影响致敏患者移植肾存活的危险因素分析

    目的探讨影响致敏患者移植肾存活的危险因素,识别引起移植物失功的高危患者,以提高致敏患者移植肾长期存活率.方法选择102例行肾移植术的致敏患者进行回顾性研究,用Kaplan-Meier计算1、3、5年移植肾存活率,用log-rank进行单因素分析和Cox模型多因素回归分析,计算相对危险度.结果102例致敏患者随访期间移植肾失功16例,其中死亡7例,术后1年内死亡5例,术后2及3年带肾死亡各1例.死亡原因肺部感染5例、心血管疾病2例,失访3例.1、3、5年人存活率为95%、93%和93%,1、3、5年肾存活率为90%、85%和75%,移植肾半生存期为8.9年.单因素及多因素分析表明受者年龄、移植次数、PRA水平、术后PRA水平升高、HLA相配程度、移植肾功能恢复正常时间、移植肾功能延迟恢复、急性排斥反应、血肌酐水平、感染等10个因素对移植肾的存活产生重要或非常重要影响.结论通过控制影响移植肾存活的危险因素,致敏患者移植肾存活同样能取得满意效果.

    作者:黄先恩;夏穗生;李留洋;范礼佩;李民;赵明 刊期: 2004年第02期

  • 异体手移植术后ATG治疗过程中T淋巴细胞亚群的监测(附3例报告)

    目的探讨异体手移植中使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)治疗时T淋巴细胞亚群监测对于指导药物用量、减少并发症和减少治疗费用的意义.方法通过流式细胞仪测定我院完成的3例异体手移植患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD28、CD4/CD8)的变化.结果使用ATG治疗期间CD3、CD4、CD8均明显下降,3例患者无明显差异;ATG治疗后外周血中淋巴细胞长期持续改变.结论通过T淋巴细胞亚群的监测了解患者应用ATG后免疫状态,有利于调整ATG用量,预防并发症的发生.

    作者:相大勇;裴国献;裘宇容;顾立强;朱立军;王刚 刊期: 2004年第02期

南方医科大学学报杂志

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主管:广东省教育厅

主办:南方医科大学